播种期对夏天无(Corydalis decumbens)块茎生长及主要药效成分的影响

研究不同播种期对夏天无块茎生长及主药效成分的影响,旨在为改良夏天无栽培技术提供理论依据。结果表明:(1)随着夏天无播种期的推迟,其出苗和新块茎形成时间相应推迟,但播种期对其地上部枯萎时间无影响;另外,播种早的材料能够开花,而播种晚的材料不能开花。(2)在3月下旬,不同播种期夏天无块茎生长均呈迅速上升的趋势,而从4月5日起,10月23日和11月4日2个时期播种的块茎其生长量呈现下降趋势,11月14日和11月25日两播种期播种的块茎生长呈现继续缓慢上升趋势;另外,开花前块茎生长迅速,开花后则块茎生长量下降,在花期对夏天无进行摘花处理可显著增加块茎产量。(3)不同播种时间对夏天无主药效成分原阿片碱和延胡索乙素含量的影响差异不显著。试验表明,夏天无在10月下旬至11月上旬播种为宜。

基于UPLC特征图谱和含量测定的不同产地筋骨草质量评价

目的:建立筋骨草超高效液相色谱法(UPLC)特征图谱和其中哈巴苷、乙酰哈巴苷的含量测定方法。方法:采用Waters BEH C18色谱柱(150 mm×2.1 mm,1.7μm),以乙腈-甲醇(4∶1)为流动相A、0.2%磷酸水溶液为流动相B,梯度洗脱,流速为0.30 mL·min^(-1),柱温为30℃,检测波长为202 nm,进样量为2μL,建立筋骨草特征图谱,测定其中哈巴苷、乙酰哈巴苷的含量。结果:17批筋骨草特征图谱有10个共有峰,指认了其中4个成分分别为哈巴苷、乙酰哈巴苷、木犀草素-7-二葡萄糖苷酸、芹菜素-7-二葡萄糖苷酸;17批筋骨草中哈巴苷质量分数为0.33%~0.95%,乙酰哈巴苷质量分数为0.47%~1.93%。结论:建立的UPLC特征图谱和哈巴苷、乙酰哈巴苷含量测定方法可为筋骨草质量评价提供参考。

筋骨草的化学成分研究

目的研究筋骨草A jug a d ecum bens的化学成分。方法采用硅胶柱色谱对筋骨草的甲醇提取浸膏进行分离纯化,得到5个单体,并通过光谱分析鉴定了其结构。结果这5个单体分别被鉴定为1-辛烯-O-α-L-吡喃阿拉伯糖-(1-6)-O-[β-D-吡喃葡萄糖-(1-2)]-β-D-吡喃葡萄糖(Ⅰ)、正丁基-β-D-吡喃果糖苷(Ⅱ)、6,7-二羟基-香豆素(Ⅲ)、5,7-二羟基-4′-甲氧基黄酮(Ⅳ)和谷甾醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅴ)。结论5个化合物均为首次从该植物中分离得到。

HPLC测定筋骨草中乙酰哈巴苷的含量

目的：建立筋骨草中乙酰哈巴苷的含量测定方法。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱：Phenomenex Luna C18（4．6mm×250mm，5μm）；流动相乙腈-水（15：85）；流速1．0mL·min^-1，检测波长197nm。结果：乙酰哈巴苷含量测定的线性范围为0．6-3．6μm（r=0．9993）。平均加样回收率为99．1％，RSD为2．5％。结论：不同产地的筋骨草中乙酰哈巴苷的含量为0．40％。6．39％；本法简便，灵敏准确，可用于筋骨草的质量控制。

白毛夏枯草鲜汁治疗烫伤的实验研究

目的 观察白毛夏枯草鲜汁对大鼠实验性烫伤模型的治疗作用。方法 SD雄性大鼠背部脱毛后浸入 85℃恒温水浴中15s,使之造成深Ⅱ度烫伤 ,烫伤部位外涂不同浓度的白毛夏枯草鲜汁 ,同时设烫伤宁阳性对照 ,每隔 5d用硫酸纸描绘烫伤面积 ,以硫酸纸重量为指标比较各组烫伤面积大小以及各时段的愈合情况 ,连续 2 5d。结果 从d10开始 ,白毛夏枯草大、中剂量组的皮肤烫伤面积的图纸重量明显轻于模型对照组 (P <0 .0 5 ) ;病理切片结果显示白毛夏枯草各剂量组愈合程度明显好于模型对照组。

4种中药体外抗结核分枝杆菌H_(37) RV的研究

目的研究中药夏枯草、积雪草、筋骨草和青蒿素的体外抗结核分枝杆菌H37RV的活性。方法采用改良罗氏固体培养基试管培养法进行活性检测。结果夏枯草醇提物抗结核效果明显;积雪草苷片、筋骨草及青蒿素均无效。结论夏枯草醇提物抗结核菌效果优于水提物;积雪草醇提物有微弱抑制结核杆菌活性,但其有效成分可能不是积雪草苷;青蒿素及二氢青蒿素无抑制结核分枝杆菌的活性。

筋骨草和茯苓配伍合用抑制乳腺癌细胞侵袭转移作用及初步机制研究

目的研究筋骨草和茯苓联合用药对高转移性乳腺癌MDA-MB-231(三阴型乳腺癌)和SK-BR-3(HER-2过表达乳腺癌)细胞侵袭转移的作用及分子机制。方法以筋骨草有效部位——总环烯醚萜类化合物和茯苓有效部位——三萜类化合物为研究对象。采用细胞黏附实验、细胞划痕和Transwell侵袭实验检测细胞黏附、运动和侵袭能力。Western blot法检测上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transitions,EMT)相关蛋白和MAPK通路蛋白表达。结果筋骨草和茯苓合用对MDA-MB-231和SK-BR-3细胞的黏附、迁移和侵袭能力有明显的抑制作用,配伍比例为10∶1时具有较好的协同效应。两药合用还可逆转乳腺癌细胞EMT,主要表现在上皮性标志物β-catenin、E-cadherin、ZO-1表达增加,间质性标志物Vimentin表达降低。进一步研究发现,两药合用明显降低p-ERK1/2、p-JNK和p-p38的蛋白表达。结论筋骨草和茯苓合用能有效地抑制高转移性乳腺癌MDA-MB-231和SK-BR-3细胞的侵袭和转移,作用机制可能与其调控MAPK通路,逆转肿瘤细胞EMT有关。

HPLC测定白毛夏枯草中木犀草素的含量

目的:采用HPLC法测定白毛夏枯草中木犀草素的含量。方法:采用ZOBAX SB-C_(18)(150mm×4.6mm,5μm)色谱柱,以甲醇-0.8%磷酸溶液(45:55)作为流动相,流速为0.8ml·min^(-1),柱温:30℃,检测波长为350nm。结果:木犀草素在1.06～10.60μg·ml^(-1)范围内线性关系良好(r=0.999 8),平均加样回收率为98.31%,RSD为1.33%。结论:本方法简便准确,重复性好,可用于白毛夏枯草中木犀草素的含量测定。

正交实验优选白毛夏枯草中木犀草素的提取工艺

目的用正交实验优选白毛夏枯中木犀草素的最佳提取工艺。方法用高效液相色谱法测定白毛夏枯草中木犀草素的含量;采用正交试验法,考察乙醇浓度、溶剂用量、提取次数、提取时间对白毛夏枯草中木犀草素提取量的影响。结果白毛夏枯草中木犀草素的最佳提取工艺为10倍量的60%乙醇回流提取3次,每次0.5h。结论该工艺稳定,重复性好,可以为白毛夏枯草的进一步研究提供依据。

筋骨草水煎液对急性肺炎的保护作用研究

目的:研究筋骨草水煎液对小鼠急性肺炎的保护作用及机制。方法:用LPS吸入法建立急性肺炎模型,设空白对照组、模型组、筋骨草水煎液组和地塞米松组。观察小鼠肺组织病理,测定肺指数、肺湿/干比,采用酶联免疫吸附试验法检测肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1β的含量。结果:筋骨草组与模型组比较减轻了急性肺炎小鼠肺组织病变,数据由SPSS 13.0软件分析,小鼠肺指数、肺湿干比明显降低,差异显著(P<0.05),降低肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1β的含量,差异显著(P<0.05)。结论:筋骨草水煎液有一定的抗炎作用,可以缓解小鼠急性肺炎症状,其机制可能与降低TNF-α、IL-1β的含量有关。

筋骨草初提物调血脂作用研究

目的研究筋骨草初提液对小鼠的调血脂作用。方法建立高血脂小鼠模型,用不同提取方法、不同给药方法和给药时间长短进行试验。结果水提法与醇提法调血脂效果差异不大,拌料法给药比灌胃法调血脂效果好,给药时间长短影响调血脂效果。结论筋骨草初提物具有调血脂作用。

HPLC-ELSD同时测定筋骨草药材中乙酰哈巴苷和哈巴苷含量

目的：建立高效液相色谱-蒸发光散射检测器法（HPLC-ELSD）同时测定筋骨草药材中乙酰哈巴苷和哈巴苷含量的方法,并对不同产地和批次的筋骨草药材进行测定。方法采用Dikma C18色谱柱（4.6 mm×150 mm,5μm）；流动相A为水,B为乙腈,梯度洗脱（0～6 min,5%B；6～11 min,5%～15%B；11～17 min,15%B）；洗脱流速1 mL/min；柱温30℃。蒸发光散射检测器漂移管温度103℃,以压缩空气为雾化气,气体流速1.6 L/min。结果乙酰哈巴苷在0.017～17.32μg、哈巴苷在0.003～1.62μg范围内呈良好线性关系,精密度和准确性良好。福建6个批号样品的乙酰哈巴苷和哈巴苷含量较高。结论乙酰哈巴苷和哈巴苷可作为监测筋骨草药材质量的指标性成分。

白毛夏枯草提取液抗肝癌体内外实验研究

目的 :观察白毛夏枯草提取物对肝癌细胞株HepG2的体外增殖抑制作用及对小鼠移植性肝癌H22实体瘤的体内抑制作用的影响。方法 (:1)肝癌细胞增殖抑制观察:采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测药物,观察不同浓度的白毛夏枯草水提液对肝癌细胞株HepG2的增殖抑制作用;(2)小鼠腹水瘤抑制作用观察:小鼠接种H22腹水瘤后,造成移植性小鼠肝癌模型。随机分为阴性对照组(NS组)、阳性对照组(5-FU组)、白毛夏枯草水提物大剂量组、白毛夏枯草水提物小剂量组,分别观察荷瘤小鼠的抑瘤率。结果 (:1)白毛夏枯草水提物对HepG2细胞有较强的抑制增殖作用,并呈一定的浓度依赖性。(2)白毛夏枯草水提物大剂量组、小剂量组对小鼠腹水瘤抑制率分别为37.84%、34.82%。结论 :白毛夏枯草对肝癌细胞和小鼠腹水瘤有较好的抑制作用。

夏枯草与白毛夏枯草的性状及组织显微鉴定

目的:针对"白毛夏枯草"常与"夏枯草"混用的情况,为了更安全、准确地使用两味药材,对夏枯草Pru-nella vulgaris Linn.与白毛夏枯草Ajuga decumbens Thunb.进行比较研究。方法:对两者的根、茎、叶、花和种子等5个部分进行性状鉴定及显微鉴定。结果:两者根的横切面和叶柄切面区别不明显,茎横切面在形状、维管束结构方面区别明显。两者种子切片最大的区别在于有无表面浅沟、沟缘特化的棕黄色毛状突起、果脐外V型厚角组织,还有是否厚壁细胞排列有凸起。两者花粉粒、叶表面气孔指数、栅表比、气孔类型及花冠筒的毛环和腺毛结构也有诸多区别。结论:上述特征可作为夏枯草和白毛夏枯草药材的鉴别依据。

反相高效液相色谱法同时测定不同产地夏天无药材中原阿片碱和延胡索乙素的含量

[目的]建立了反相高效液相色谱(RP-HPLC)法同时测定夏天无药材中原阿片碱与延胡索乙素含量的方法,并对不同产地夏天无药材中原阿片碱与延胡索乙素含量进行了考察。[方法]采用kromasilCl8色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);以乙腈-0.1%磷酸溶液(pH=6.5)为流动相连续梯度洗脱,流速1.0mL/min;检测波长280nm,柱温35℃。[结果]原阿片碱的回归方程为Y=823332.1X+9694.4,r=0.9997(n=5),线性范围为0.22～1.10μg;延胡索乙素回归方程为Y=1047499X-15305.6,r=0.9996(n=5),线性范围为0.174～0.870μg。样品的平均回收率分别为98.9%,99.7%,峰面积(RSD)分别为1.6%,1.8%(n=5)。[结论]此法简便、准确、快速,可用于药材中延胡索乙素与原阿片碱含量的测定,也可用于含这两种生物碱的药材的质量评价;两种生物碱含量在不同产地及来源夏天无药材中有较大差别。

夏天无对坐骨神经损伤小鼠损伤区微环境的影响

目的研究夏天无Corydalis decumbens(Thunb.)Pers.对坐骨神经损伤小鼠损伤区微环境的影响。方法 30只小鼠随机均分为模型组、夏天无组、假手术组,Masson染色检测损伤区胶原纤维、炎性细胞、神经纤维分布,免疫荧光染色检测层黏连蛋白(LN)、施万细胞标记物S-100、小G蛋白Rac1表达及轴突再生情况,HE染色检测神经功能恢复情况。结果与模型组比较,夏天无组胶原纤维、炎性细胞减少,神经纤维有序,LN、Rac1、S-100表达,再生轴突数量,腓肠肌纤维横截面积和腓肠肌质量显著增加(P<0.05)。结论夏天无可通过减少胶原纤维生成和炎症细胞浸润,增加LN、Rac1、S-100表达,改善坐骨神经损伤小鼠损伤区微环境来促进轴突再生和神经功能恢复。

夏天无生物碱的高速逆流色谱分离纯化

采用pH-区带精制逆流色谱与常规高速逆流色谱相结合的方法快速分离纯化夏天无总生物碱。利用pH-区带精制逆流色谱对夏天无总生物碱进行分离,以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(5∶5∶2∶8,V/V,上相加5mmol/L三乙胺,下相加5mmol/LHCl)为溶剂系统,上样量3.0g,分离得到1个混合物和3个高纯度的生物碱单体:原阿片碱(375mg)、苏元胡碱甲(362mg)和比枯枯灵(246mg),其纯度分别为97.5%,95.6%和97.1%。所得混合物850mg经常规高速逆流色谱二次分离,以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(1∶0.8∶1.1∶1,V/V)为溶剂系统,得到比枯枯灵(105mg)和四氢巴马亭(470mg)单体,纯度分别为99.1%和99.7%。从该药材分得苏元胡碱甲,两种制备分离模式相结合,提高了夏天无生物碱的分离效率。

HPLC测定夏天无中原阿片碱和延胡索乙素含量

目的 :建立夏天无中原阿片碱和延胡索乙素的含量测定方法 ,为夏天无质量标准的研究提供科学依据。方法 :采用高效液相色谱法分离并测定了中药夏天无中原阿片碱和延胡索乙素的含量。色谱条件 :SupelcosilLC 18 DB柱 ,以甲醇 乙酸钠 /冰乙酸缓冲溶液 (75∶2 5 ,pH5 .0 )为流动相 ;检测波长 2 85nm。 4 86型紫外检测器检测。 结果 :此方法线性良好 ,平均加样回收率分别为 98.0 4 % ,99.6 3%。结论 :本方法精密度高 ,分离度良好 。

白毛夏枯草镇咳祛痰有效部位的初步筛选

目的初步筛选中药白毛夏枯草镇咳、祛痰作用的化学部位。方法分别用浓度为95%的乙醇和50%的乙醇回流提取白毛夏枯草,合并提取液,浓缩至浸膏,依次采用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取得到3个部位;采用浓氨水引咳法观察小鼠咳嗽次数、引咳潜伏期;气管酚红法观察小鼠气管段酚红排出比较白毛夏枯草3个部位的药理活性。结果乙酸乙酯提取物具有明显的镇咳作用,并使小鼠酚红排出量明显增加。结论白毛夏枯草中起镇咳、祛痰作用的有效部位集中在乙酸乙酯提取物部位。

不同激素和浓度对夏天无愈伤组织诱导的影响

以夏天无块茎、芽及叶柄作为外植体,采用不同激素浓度配比对夏天无进行愈伤组织诱导的研究,摸索夏天无组培快繁的条件。结果表明:(1)对夏天无块茎愈伤组织诱导效果较好的激素种类及浓度配比是1/2 MS+6-BA(2 mg/L)+NAA(1 mg/L);平均诱导率达59.38%,形成愈伤组织的时间约20 d,但后期愈伤组织未分化出芽。(2)对夏天无的芽进行愈伤组织诱导研究表明,效果较好的激素种类及浓度配比是1/2 MS+6-BA(3.5 mg/L)+NAA(0.1 mg/L);平均诱导率为100%,愈伤组织7 d左右形成,且后期大多分化出芽。(3)对夏天无叶柄愈伤组织诱导效果较好的激素种类及浓度配比是1/2 MS+6-BA(3 mg/L)+2,4-D(2 mg/L);平均诱导率仅为13.89%,且后期愈伤组织未能分化成芽。