PBMCs中CPEB4、AKAP4、IRF4联合检测对早期非小细胞肺癌的诊断价值

目的探讨PBMCs中CPEB4、AKAP4、IRF4联合检测对早期非小细胞肺癌的诊断价值。方法纳入2017年10月至2019年10月我院收治的早期非小细胞肺癌患者100例为肿瘤组、肺部良性疾病患者100例为良性组、健康体检者100例为对照组。提取3组受试人员外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)后通过免疫印迹检测PBMCs中CPEB4、AKAP4、IRF4、GAPDH的表达量,并用Image J进行定量分析。用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)的AUC分析CPEB4、AKAP4、IRF4在早期非小细胞肺癌中的诊断意义。结果早期非小细胞肺癌患者血液PBMCs中CPEB4、AKAP4、IRF4的表达量均显著高于肺部良性疾病患者和健康体检者(P<0.05)。肿瘤组与良性组CPEB4、AKAP4、IRF4的灵敏度分别为93%、87%、91%,特异性分别为62%、87%、91%。肿瘤组与对照组CPEB4、AKAP4、IRF4的灵敏度分别为91%、90%、94%,特异性分别为91%、92%、94%。PBMCs中CPEB4、AKAP4、IRF4联合检测对早期非小细胞肺癌的诊断的的灵敏度为92.00%,特异性为91.50%,准确度为91.67%。结论PBMCs中CPEB4、AKAP4、IRF4的表达量检测可作为早期非小细胞肺癌的潜在标志。

Localization of AKAP4 and tubulin proteins in sperm with reduced motility

Aim： To perform screening, related to A-kinase anchoring proteins 4 （AKAP4） and tubulin proteins, in spermatozoa with absent or severely reduced motility in order to detect the status of the fibrous sheath and the axonemal structure. Methods： An immunocytochemical study of tubulin, used as a positive control, and AKAP4 was carded out to detect the presence and the distribution of these proteins in different sperm samples. The morphological characteristics of sperm were studied by transmission electron microscope （TEM） and the results were elaborated using a formula reported in previous studies. PCR was carried out on DNA extracted from peripheral blood lymphocytes to analyse partial sequences of the Akap4 and Akap3 genes. Results： Immunolabelling of tubulin and AKAP4 showed different patterns, which led us to divide the patients into groups. In group I, the absence of AKAP4 and tubulin was revealed, although these patients did not show alterations in the Akap4/Akap3 binding site. TEM evaluation highlighted that a high presence of necrosis was associated with total sperm immotility. In group Ⅱ, a regular AKAP4 and tubulin signal was present, although motility was reduced and TEM analysis revealed the presence of immaturity. In group Ⅲ, in which a weak AKAP4 label associated with normal tubulin staining and reduced motility was observed, a severe disorganization of the fibrous sheath was highlighted by TEM. Conclusion： While the role of AKAP4 in sperm motility is unclear, absent or weak AKAP4-1abelling seems to be associated with absent or weak sperm motility.

外层致密纤维在Akap4基因缺陷致小鼠精子尾部多种形态异常中的作用

目的:探讨外层致密纤维(outer dense fobres,ODF)在Akap4基因缺陷引起小鼠精子尾部多种形态异常中的作用。方法:通过基因编辑技术构建Akap4基因缺陷小鼠模型。实验分为2组:成年Akap4基因缺陷雄鼠为实验组(n=7),成年野生型雄鼠为对照组(n=7),比较2组小鼠的体重和睾丸重量;采用计算机辅助精液分析(computer aided sperm analysis,CASA)检测精子活动力,改良巴氏染色(modified pap staining)检测精子形态学,扫描及透射电镜观察精子超微结构,免疫荧光检测精子尾部蛋白表达及定位,睾丸切片HE及PAS染色检测睾丸生精功能,透射电镜观察曲精细管超微结构。结果:Akap4基因缺陷小鼠精子总活动力为8.81%,明显低于野生型小鼠(P<0.01),且无正常形态精子,尾部缩短与尾部卷曲比例达91.18%,明显高于野生型小鼠(P<0.01),睾丸重量、睾丸生精功能、精子数量2组比较差异无统计学意义(P>0.01);Akap4基因缺陷精子的纤维鞘纵柱缺失,横肋柱结构部分残留,主段的3和8号ODF排列紊乱,与ODF2蛋白定位结果相符;睾丸中精子纤维鞘发育障碍,无正常纤维鞘结构形成,但未见异常膨大的精子尾部。结论:Akap4基因缺陷使纤维鞘横肋发育不良,纵肋的缺失引起3和8号ODF分离,"9+2"微管结构紊乱,使主段管腔异常膨大,导致小鼠精子尾部多种形态异常。

PBMCs中CPEB4、AKAP4、IRF4联合检测对早期非小细胞肺癌的诊断价值

目的探讨PBMCs中CPEB4、AKAP4、IRF4联合检测对早期非小细胞肺癌的诊断价值。方法纳入2017年10月至2019年10月我院收治的早期非小细胞肺癌患者100例为肿瘤组.肺部良性疾病患者100例为良性组、健康体检者100例为对照组。提取3组受试人员外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)后通过免疫印迹检测PBMCs中CPEB4、AKAP4、IRF4、GAPDH的表达量,并用Image J进行定量分析。用受试者工作特征曲线(reeiver operating characteristic curve,ROC)的AUC分析CPEB4、AKAP4、IRF4在早期非小细胞肺癌中的诊断意义。结果早期非小细胞肺癌患者血液PBMCs中CPEB4.AKAP4、IRF4的表达量均显著高于肺部良性疾病患者和健康体检者(P<0.05)。肿瘤组与良性组CPEB4、AKAP4.IRF4的灵敏度分别为93%。87%、91%,特异性分别为62%、87%、91%。肿瘤组与对照组CPEB4、AKAP4、IF4的灵敏度分别为91%、90%、94%,特异性分别为91%、92%、94%。PBMCs中CPEB4、AKAP4、IRF4联合检测对早期非小细胞肺癌的诊断的的灵敏度为92.00%,特异性为91.50%,准确度为91.67%。结论PBMCs中CPEB4、AKAP4、IRF4的表达量检测可作为早期非小细胞肺癌的潜在标志。

几种恶性肿瘤患者血清中AKAP4水平的初步分析

目的初步评价血清中AKAP4的水平在肺癌、结直肠癌、乳腺癌临床诊断中的意义。方法收集2017年1月至2018年12月间西安交通大学第二附属医院和安康市中医医院的199例患者的临床资料和血清样本,包括:结直肠癌32例、乳腺癌29例、肺癌47例、肠道良性疾病27例、乳腺良性疾病24例、肺部良性病变40例,三组恶性肿瘤患者的检测结果分别与良性组检测结果作比较。采用ELISA试剂盒检测血清AKAP4,采用电化学发光免疫分析法检测血清CEA、CYFRA21-1、CA125、CA19-9、CA72-4、CA15-3的水平,并与AKAP4进行阳性率的比较。结果AKAP4检测值,结直肠癌组显著高于肠道良性疾病组(P<0.05),乳腺癌组显著高于乳腺良性疾病组(P<0.05)。结直肠癌患者AKAP4的阳性率为37.50%,与CEA、CA19-9和CA72-4的阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05),与肠道良性疾病组比较差异有统计学意义(P<0.05);乳腺癌患者AKAP4的阳性率55.17%,与CEA、CA125和CA15-3的阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05),与乳腺良性疾病组比较差异有统计学意义(P<0.05);肺癌组AKAP4检测的均值和阳性率(17.02%)与肺部良性病变组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论实验数据提示,血清AKAP4对结直肠癌和乳腺癌具有较高的灵敏度,用于二者的诊断有很大的参考价值,而对肺癌诊断无参考价值。

A激酶锚定蛋白4在结肠癌中的表达及临床意义

目的:探讨A激酶锚定蛋白4(AKAP4)在结肠癌组织中的表达以及与临床病理特征的关系。方法:收集结肠癌组织标本80例,正常结肠黏膜组织标本30例,采用免疫组织化学方法检测结肠癌组织及正常结肠黏膜中AKAP4的表达情况,并对其进行临床病理特征分析。结果:AKAP4在结肠癌中阳性表达率为76.3%,而在正常结肠黏膜中不表达,差异具有统计学意义(P<0.05)。AKAP4在结肠癌中的表达在不同性别、不同年龄、不同病理分化程度及是否淋巴结转移的患者中差异无统计学意义(均P>0.05),但在不同临床分期间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:AKAP4在结肠癌中过表达,并与肿瘤的临床分期相关,可能在结肠癌的发生过程中起到重要作用,有望成为结肠癌诊断治疗的新靶点。

猪性别鉴定双重PCR方法的建立

哺乳动物的后代性别选择往往引起社会的关注。在畜牧业养殖生产中,公母畜个体在生长速度及生产价值等方面存在差异,人们往往希望后代是雌性,以满足经济要求,因此早期性别鉴定技术十分关键。有性精液技术在后代性别选择方面具有较高的准确性和可重复性,但目前对含X、Y精子的鉴定方法尚不十分准确。为快速鉴别猪的性别,研究建立了一种可靠、准确、简便的猪DNA样品双重PCR性别鉴定的方法。首先从NCBI获得了猪X性染色体特异性遗传基因A激酶锚定蛋白4(AKAP4)和Y染色体特异性遗传基因性别决定基因(SRY)的序列,设计双重PCR引物,测试引物的特异性扩增产物;之后对双重PCR扩增条件进行升级优化以获得最佳的反应条件,确定了反应的灵敏度;最后对20个猪DNA样品进行了盲检,性别鉴定结果均正确,准确率高、灵敏度高。实验获得的双重PCR方法为今后猪生产中性别鉴定提供了基础数据。

低氧诱导蛋白与肿瘤发生发展的研究进展

低氧是大多数实体肿瘤的一个重要特征。它可以导致肿瘤向恶性方向发展,使肿瘤细胞具有更强的侵袭和转移能力,并对化学治疗和放射治疗产生抵抗。在这个过程之中,以低氧诱导因子(Hypoxia-inducible factors,HIFs)为代表的一系列低氧诱导蛋白起主要调控作用,它们通过影响下游多种信号通路调节肿瘤细胞增殖、迁移、侵袭、血管生成、免疫应答、放/化疗抗性来促进或抑制肿瘤发生发展。随着对低氧诱导蛋白的深入研究,发现尽管大多数情况下低氧会促进肿瘤发生发展,但同时也存在着一小部分低氧诱导蛋白具有抑制肿瘤进展的作用。因此,对低氧诱导蛋白的研究在抗肿瘤药物开发以及肿瘤治疗方法的选择上具有重要意义。文章对HIFs以及两种新发现的低氧诱导蛋白—孕酮诱导的蜕膜蛋白(Decidual protein induced by progesterone,DEPP)和蛋白激酶A锚定蛋白(A-kinase anchor protein 4,AKAP4)在肿瘤发展和治疗中的功能加以整理总结,希望能够推动以低氧蛋白为靶点的抗肿瘤治疗在临床的应用。