IGF1/IGF-1R通过Akt/Bad通路促进肝癌进展

目的为了探索影响肝癌进展的新的分子机制。方法通过免疫荧光技术、免疫组织化学技术、Western blot技术检测肝癌细胞与正常肝细胞中IGF-1R的表达水平,并且通过克隆实验、JC-1实验检测IGF-1R对肝癌细胞的增殖、凋亡的影响,同时运用Western blot实验检测IGF-1R下游信号分子Akt/Bad的蛋白磷酸化水平。结果验证了IGF-1R在肝癌细胞上的表达水平明显升高,并且促进肝癌增殖、抑制凋亡。进一步研究发现IGF-1R上调Akt、Bad分子磷酸化水平影响肝癌进展。结论IGF-1R在肝癌细胞中呈明显上调表达,并且可能通过活化Akt/Bad通路促进肝癌进展。

基于网络药理学和体外实验探讨白藜芦醇治疗心力衰竭的分子机制

目的基于网络药理学和体外实验探讨白藜芦醇治疗心力衰竭的分子机制。方法利用TCMSP、SwissTarget、PharmMapper数据库收集白藜芦醇靶点,DisGeNET、GeneCards数据库收集心力衰竭靶点,得到白藜芦醇-心力衰竭交集靶点后进行STRING分析,导入Cytoscape后得到治疗心力衰竭的核心靶点,然后进行GO和KEGG分析,并进行分子对接。Western blot和RT-qPCR法检测细胞Akt1、Bad、Bcl-2、caspase-3蛋白和mRNA表达。结果共获得交集靶点144个,其中核心靶点排名前5的为Akt1、TP53、VEGFA、caspase-3和IL6,分子对接结合活性良好;通路富集显示白藜芦醇治疗心力衰竭可能是通过PI3K-Akt通路。与模型组比较,白藜芦醇组心肌细胞活性升高(P<0.05),75μmol/L白藜芦醇可降低心肌细胞Akt、Bad、caspase-3蛋白和mRNA表达(P<0.05),升高Bcl-2蛋白和mRNA表达(P<0.05)。结论白藜芦醇可能通过调节Akt/Bad/Bcl-2通路起到抗凋亡作用,从而改善心力衰竭的病理变化。

胰升血糖素样肽1对晚期氧化蛋白产物诱导的心肌细胞凋亡保护作用的研究

目的探讨胰升血糖素样肽1(GLP-1)对晚期氧化蛋白产物(AOPPs)诱导的心肌细胞凋亡的保护作用及机制。方法以H9C2心肌细胞为研究对象,用空白对照、RSA对照、AOPPs、GLP-1、AOPPs+GLP-1及AOPPs+GLP-1+LY294002分别干预细胞24 h。采用cck-8法检测细胞的增殖活力DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧的产生;Annexin V-FITC/PI双染色法检测细胞凋亡;Western blot检测细胞内p-Akt、p-Bad、Bcl-2、Bax、active-caspase-3蛋白的表达。结果 GLP-1抵抗AOPPs引起的细胞增殖活力下降[(1.409±0.099)vs(0.929±0.083),P<0.01],减少AOPPs诱导的活性氧簇产生[(47.817±0.878)%vs(25.413±2.597)%,P<0.01]及细胞凋亡[(15.773±3.130)%vs(9.715±0.757)%,P<0.05];GLP-1能恢复被AOPPs抑制的Akt及Bad的磷酸化,增加细胞抗凋亡蛋白Bcl-2、减少促凋亡蛋白Bax及凋亡执行子active-caspase-3的表达。结论 GLP-1通过PI3K/Akt/Bad信号通路改变促凋亡及抗凋亡蛋白间的平衡,保护AOPPs诱导的H9C2心肌细胞凋亡。

IGF-1对2,5-己二酮诱导的骨髓间充质干细胞凋亡的拮抗作用研究

目的研究胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对2,5-己二酮(HD)暴露所致的骨髓间充质干细胞(BMSCs)凋亡的拮抗作用及其机制。方法将BMSCs随机分成对照组(Control组)、IGF组、染毒组(HD组)和3个干预组(IGF+HD组),即用生理盐水、50 ng/L IGF-1、40 mmol/L HD及不同浓度IGF-1(50,75,100 ng/L)共同处理24 h。然后,通过TUNEL法检测BMSCs的凋亡,应用试剂盒测定caspase-3的活性,应用western blot技术检测Akt和Bad的蛋白表达及磷酸化水平。结果HD组BMSCs凋亡率及caspase-3活性显著高于Control组(P<0.05)。而经IGF-1干预后,上述指标显著低于HD组(P<0.05)。同时,HD组BMSCs的Akt和Bad蛋白磷酸化水平显著低于Control组(P<0.05)。而经IGF-1干预后,Akt和Bad的蛋白磷酸化水平显著高于HD组(P<0.05)。此外,各组间的Akt和Bad总蛋白的表达水平无统计学差异(P>0.05)。结论IGF-1可通过调控Akt/Bad信号通路的活性,拮抗HD诱导的BMSCs凋亡。