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腹部推拿对UC模型大鼠背根神经节PLC/IP3R/Ca2+信号通路及AKT、p-AKT蛋白表达的影响
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作者 江煜 方佳钰 +2 位作者 陈水金 林志刚 陈进城 《中医康复》 2024年第6期31-34,39,共5页
目的:观察腹部推拿干预溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠后,对大鼠背根神经节PLC/IP3R/Ca^(2+)信号通路及AKT、p-AKT蛋白表达的影响,从而探讨腹部推拿对溃疡性结肠炎内脏高敏感的作用机制。方法:将36只SPF级大鼠分成空白组、模型组、推拿组、... 目的:观察腹部推拿干预溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠后,对大鼠背根神经节PLC/IP3R/Ca^(2+)信号通路及AKT、p-AKT蛋白表达的影响,从而探讨腹部推拿对溃疡性结肠炎内脏高敏感的作用机制。方法:将36只SPF级大鼠分成空白组、模型组、推拿组、美沙拉嗪组4组,除空白组自由饮用蒸馏水外,其余各组采用自由饮5%葡聚糖硫酸钠溶液(DSS)的方法制备大鼠UC模型。造模第2日起推拿组采用腹部推拿进行干预,美沙拉嗪组进行美沙拉嗪溶液进行灌胃,空白组、模型组仅俯卧位束缚固定于固定器中。干预15日后,采用邻-甲酚酞络合铜比色法检测背根神经节(DRG)细胞钙离子浓度;ELISA法检测DRG组织中磷脂酶C(PLC)、肌醇1,4,5-三磷酸(IP3)、肌醇1,4,5-三磷酸受体(IP3R)的表达,WesternBlot检测DRG组织中蛋白激酶B(AKT)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)蛋白表达。结果:与模型组比较,推拿组大鼠DRG细胞Ca^(2+)浓度和DRG组织中IP3、IP3R含量呈降低趋势,其中DRG细胞Ca^(2+)浓度有显著差异(P<0.01),其他指标的组间差异无统计学意义(P>0.05);推拿组DRG组织中PLC含量及AKT、p-AKT蛋白表达呈增加趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论:腹部推拿抑制UC内脏高敏感性,其作用机制可能与抑制PLC-IP3R-Ca^(2+)信号通路和促进UC大鼠背根神经节AKT激活有关。 展开更多
关键词 腹部推拿 溃疡性结肠炎 背根神经节 内脏高敏感 PLC/IP3R/Ca2+ akt p-akt
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Akt、p-Akt及Slug在三阴性乳腺癌中的表达及意义 被引量:1
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作者 王士娜 唐玮 +4 位作者 金丹 张君杰 孙洁 程新宇 王翠芳 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2019年第6期519-524,共6页
目的检测Akt、p-Akt和Slug蛋白在三阴性乳腺癌及癌旁组织中的表达,分析三者与三阴性乳腺癌临床病理指标间的关系。方法应用免疫组织化学方法检测Akt、p-Akt和Slug蛋白在60例三阴性乳腺癌及癌旁组织中的表达。结果Akt、p-Akt及Slug蛋白... 目的检测Akt、p-Akt和Slug蛋白在三阴性乳腺癌及癌旁组织中的表达,分析三者与三阴性乳腺癌临床病理指标间的关系。方法应用免疫组织化学方法检测Akt、p-Akt和Slug蛋白在60例三阴性乳腺癌及癌旁组织中的表达。结果Akt、p-Akt及Slug蛋白在三阴性乳腺癌中的阳性表达率分别为76.67%、41.67%和56.67%,癌旁组织中Akt的表达率为6.67%,而p-Akt和Slug的表达率均为0;三阴性乳腺癌中Akt、p-Akt与Slug的表达与年龄及肿瘤组织学分级有关,年龄≤50岁患者的表达水平高于年龄>50岁患者;组织学分级越高,Akt、p-Akt与Slug的表达率越高。Akt、Slug与肿瘤大小有关,肿瘤越大,Akt、Slug的表达率越高。p-Akt的表达与有无淋巴结转移有关,有淋巴结转移组p-Akt的阳性率高于无淋巴结转移组;Slug与Akt、p-Akt在三阴性乳腺癌中呈正相关。结论在三阴性乳腺癌中,Akt、p-Akt和Slug蛋白均表达,三者的表达可能与三阴性乳腺癌的不良预后有密切关系,Slug与Akt、p-Akt在三阴性乳腺癌中呈正相关。它们可能通过EMT促进侵袭,转移和化疗耐药性。 展开更多
关键词 akt p-akt SLUG 三阴性乳腺癌 乳腺癌 上皮间质转化 靶向治疗
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薄型子宫内膜PI3K、AKT、p-AKT的表达研究 被引量:3
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作者 肖水秀 乐爱文 +5 位作者 单莉莉 黎雪茹 戴晓云 肖天慧 卓蓉 王中海 《河北医药》 CAS 2016年第3期348-351,共4页
目的研究磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)、蛋白激酶(AKT)、p-AKT在薄型子宫内膜组织中的表达情况,探索PI3K/AKT信号通路在薄型子宫内膜中作用。方法收集2013年8月至2015年1月妇科子宫内膜40份,正常内膜组20份,薄型内膜组20份。采用RT-PCR检测P... 目的研究磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)、蛋白激酶(AKT)、p-AKT在薄型子宫内膜组织中的表达情况,探索PI3K/AKT信号通路在薄型子宫内膜中作用。方法收集2013年8月至2015年1月妇科子宫内膜40份,正常内膜组20份,薄型内膜组20份。采用RT-PCR检测PI3K、AKT mRNA表达,免疫组化S-P法PI3K、AKT、p-AKT蛋白质表达。结果 PI3K及AKT mRNA和蛋白质表达在薄型内膜组明显降低,2组差异有统计学意义(P<0.05)。pAKT蛋白质表达在薄型子宫内膜组明显降低,2组对比差异有统计学意义(P<0.05)。PI3K、AKT及p-AKT蛋白质表达水平呈正相关(r值分别为0.708、0.651、0.650、0.632、0.611、0.623,P<0.05)。结论薄型子宫内膜组织增殖期PI3K、AKT及p-AKT表达下降,其发生及发展可能与PI3K/AKT信号通路有关。 展开更多
关键词 薄型子宫内膜 PI3K akt p-akt
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水蛭素对博莱霉素致特发性肺间质纤维化大鼠肺组织中AKT、p-AKT蛋白表达的影响 被引量:8
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作者 张景容 谢海彬 +4 位作者 沈明霞 王海霞 高绒霞 马玉坤 李红 《中医临床研究》 2019年第11期5-9,共5页
目的:本文以水蛭素为研究药物,通过Western blot法测定蛋白激酶B(AKT)、p-AKT蛋白在肺中的表达,分析水蛭素对特发性肺间质纤维化(Idiopathic Pulmonary Fibrosis,IPF)的干预效果及作用机制,为水蛭素的临床运用奠定基础,并拓宽IPF的治疗... 目的:本文以水蛭素为研究药物,通过Western blot法测定蛋白激酶B(AKT)、p-AKT蛋白在肺中的表达,分析水蛭素对特发性肺间质纤维化(Idiopathic Pulmonary Fibrosis,IPF)的干预效果及作用机制,为水蛭素的临床运用奠定基础,并拓宽IPF的治疗途径。方法:选取SPF级Wistar大鼠180只,随机选18只为空白组(K组),剩余大鼠统一造模(气管内注射博莱霉素),选取108只造模成功大鼠,随机分为模型组(M组)、激素组(J组)、低剂量组(D组)、高剂量组(G组)、中剂量组(Z组)、中剂量联合激素组(ZJ组),每组18只,初次给药为造模后第2天,在给药的第7d、14d、28d分批处死取材,检测AKT、p-AKT蛋白的表达。结果:AKT蛋白表达量:K组在各时间点AKT蛋白表达量均最低,M组在7d、28d含量明显高于J组(P<0.01);7d时G组低于J组(P<0.01),14、28d时G、ZJ组均低于J组(P<0.01);7d、28d时D、Z组高于J组(P<0.01)。p-AKT蛋白表达量:各时间点K组最低,M组最高;J组低于M组(P<0.01);ZJ组低于J组(P<0.01);7d、14d时G组低于J组(P<0.01);28d时G组高于J组,但P>0.05。结论:IPF发病过程中,PI3K/AKT信号通路中AKT、p-AKT蛋白表达明显升高,说明该信号通路与IPF发病过程有明显相关性;水蛭素能降低AKT、p-AKT蛋白的表达量,减缓IPF病程发展;水蛭素极有可能通过PI3K/AKT通路作用于IPF。 展开更多
关键词 水蛭素 特发性肺间质纤维化 akt p-akt
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莪术醇对SGC-7901细胞Akt、P-Akt及BAD表达水平影响的初步研究 被引量:9
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作者 徐立春 王耀霞 陈海燕 《医学研究杂志》 2011年第12期44-47,共4页
目的初步研究莪术醇对SGC-7901部分蛋白信号的影响,探讨Akt、P-Akt和BAD表达水平的变化。方法设不同浓度的莪术醇组和对照组,用MTT法、AnnexinV-PI双染、Western blotting法等检测方法,观察莪术醇对SGC-7901细胞增殖活性、细胞凋亡以及... 目的初步研究莪术醇对SGC-7901部分蛋白信号的影响,探讨Akt、P-Akt和BAD表达水平的变化。方法设不同浓度的莪术醇组和对照组,用MTT法、AnnexinV-PI双染、Western blotting法等检测方法,观察莪术醇对SGC-7901细胞增殖活性、细胞凋亡以及Akt、P-Akt、BAD蛋白的表达水平的影响。结果适当浓度的莪术醇能抑制SGC-7901细胞增殖、诱导SGC7901细胞发生凋亡、抑制磷酸化Akt以及增强BAD蛋白表达,其呈明显浓度依赖性。实验结果表明,莪术醇对总Akt蛋白表达没有明显影响。结论莪术醇能够明显抑制SGC-7901细胞的增殖并诱导其凋亡,其抗肿瘤效应与下调PI3K/Akt信号转导通路蛋白表达以及上调其下游的BAD有相关性。 展开更多
关键词 莪术醇 SGC7-901 增殖与凋亡 akt表达 p-akt BAD表达
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基于PI3K/Akt信号通路探讨胃复春对胃癌前病变大鼠的干预作用
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作者 张红兴 周晓明 +4 位作者 曹刚 王峰 刘金狄 刘镓毓 李素英 《世界中西医结合杂志》 2024年第4期689-693,共5页
目的 观察胃复春对胃癌前病变(Precancerous lesions of gastric cancer,PLGC)大鼠的干预作用。方法 选取健康SPF级雄性Wistar大鼠30只,按随机数字表法分为胃复春组、模型组、对照组,每组各10只,胃复春组给予胃复春灌胃,模型组及对照组... 目的 观察胃复春对胃癌前病变(Precancerous lesions of gastric cancer,PLGC)大鼠的干预作用。方法 选取健康SPF级雄性Wistar大鼠30只,按随机数字表法分为胃复春组、模型组、对照组,每组各10只,胃复春组给予胃复春灌胃,模型组及对照组给予生理盐水灌胃,1次/d,共灌胃16周。造模成功后,立即处死所有大鼠,按照组别取胃黏膜组织,进行病理组织学观察。其余组织应用RT-PCR法、Western Blot法检测Akt、p-Akt、NF-κB、COX-2的表达情况。结果 胃复春可以有效的改善PLGC大鼠模型的一般状态、宏观表征等,还可逆转大鼠胃黏膜的病理学状态,从而降低PLGC的发生率;与对照组比较,模型组大鼠胃黏膜组织Akt、p-Akt、NF-κB、COX-2蛋白表达水平均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,胃复春组Akt、p-Akt、NF-κB、COX-2蛋白水平均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,模型组大鼠胃黏膜组织Akt、p-Akt、NF-κB、COX-2 mRNA表达水平均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,胃复春组大鼠胃黏膜组织Akt、p-Akt、NF-κB、COX-2 mRNA表达水平均明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 胃复春可通过抑制Akt、p-Akt、NF-κB、COX-2增殖,调控PI3K/Akt信号通路的异常活化,进一步阻断PLGC的发生与发展。 展开更多
关键词 胃癌前病变 胃复春 akt p-akt NF-κB COX-2
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补肾活血中药对大鼠慢性高眼压模型视网膜神经节细胞PI3K/Akt信号转导通路p-Akt表达的影响 被引量:11
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作者 汪伟 李翔 +4 位作者 王桃 柯欣怡 刘红佶 贾正品 牟琳 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2015年第9期816-820,共5页
目的观察补肾活血中药对大鼠慢性高眼压(elevated intraocular pressure,EIOP)模型视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGC)PI3K/Akt信号转导通路p-Akt表达的影响。方法 30只SD大鼠随机分成3组:对照组、模型组和给药组,模型组和... 目的观察补肾活血中药对大鼠慢性高眼压(elevated intraocular pressure,EIOP)模型视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGC)PI3K/Akt信号转导通路p-Akt表达的影响。方法 30只SD大鼠随机分成3组:对照组、模型组和给药组,模型组和给药组建立EIOP模型。给药组造模后每天予复方丹参片和杞菊地黄丸的混悬液灌胃,每天1次,连续8周,对照组、模型组每天予生理盐水灌胃。记录造模前、造模后即刻、造模后8周的眼压;光镜下观察各组视网膜厚度和RGC数量,电镜下观察视网膜超微结构,免疫组织化学法检测视网膜内p-Akt的表达。结果造模后8周眼压与造模后即刻相比,给药组有降低趋势,差异有统计学意义(P<0.01)。造模后8周,给药组与模型组RGC数量均低于对照组,差异均有统计学意义(均为P<0.05);对照组视网膜厚度与给药组相比,差异无统计学意义(P>0.05),而对照组与模型组相比,差异有统计学意义(P<0.01);给药组RGC数量及视网膜厚度均高于模型组,差异均有统计学意义(均为P<0.01)。电镜下RGC超微结构显示,模型组损伤明显,给药组较模型组有所改善。视网膜p-Akt表达免疫组织化学结果分析显示,给药组p-Akt阳性染色总面积、平均光密度、积分光密度值与模型组相比,差异均有统计学意义(均为P<0.01),给药组黑度(139.97±11.79)虽高于模型组(137.95±6.13),但差异无统计学意义(P>0.05)。结论补肾活血中药用于SD大鼠慢性EIOP模型,能降低眼压,提高RGC数量及改善超微结构,增加视网膜厚度,上调PI3K/Akt信号转导通路中pAkt的表达。 展开更多
关键词 补肾活血中药 视网膜神经节细胞 PI3K/akt信号通路 p-akt 青光眼 大鼠慢性高眼压模型
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甲基莲心碱联合伊马替尼对慢性粒细胞白血病原代细胞Akt/p-Akt蛋白表达的影响 被引量:2
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作者 何思润 胡敏 +1 位作者 秦群 杨瑞 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第30期37-39,共3页
目的探讨甲基莲心碱(Nef)联合伊马替尼(IM)对慢性粒细胞白血病(CML)原代细胞Akt/p-Akt表达的影响。方法采用Western blot法分别检测Akt/p-Akt蛋白的表达水平。结果 Nef(4μmol)、IM(1μmol)单药组与Nef(4μmol)+IM(1μmol)联合用药组,对... 目的探讨甲基莲心碱(Nef)联合伊马替尼(IM)对慢性粒细胞白血病(CML)原代细胞Akt/p-Akt表达的影响。方法采用Western blot法分别检测Akt/p-Akt蛋白的表达水平。结果 Nef(4μmol)、IM(1μmol)单药组与Nef(4μmol)+IM(1μmol)联合用药组,对CML原代细胞Akt蛋白的表达均无影响(P>0.05),而p-Akt蛋白表达均降低,且联合用药组较单药组蛋白表达更低(P<0.05)。结论 Nef联合伊马替尼能够降低CML原代细胞p-Akt蛋白表达,可能是甲基莲心碱增强伊马替尼对CML原代细胞敏感性的机制之一。 展开更多
关键词 甲基莲心碱 慢性粒细胞白血病原代细胞 p-akt akt
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同型半胱氨酸对葡萄糖代谢和骨骼肌p-Akt(Ser-473)的影响 被引量:5
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作者 柴雁菁 顾玉 +3 位作者 魏云芳 贺铭 王昕 李树德 《昆明医科大学学报》 CAS 2013年第1期15-18,共4页
目的在高同型半胱氨酸血症中,探讨同型半胱氨酸对葡萄糖代谢和骨骼肌组织PI3K/Akt胰岛素信号通路中p-Akt(Ser-473)的影响,揭示同型半胱氨酸诱导葡萄糖代谢异常的机理.方法 40只小鼠随机分为空腹正常对照组、空腹高同型半胱氨酸血症组、... 目的在高同型半胱氨酸血症中,探讨同型半胱氨酸对葡萄糖代谢和骨骼肌组织PI3K/Akt胰岛素信号通路中p-Akt(Ser-473)的影响,揭示同型半胱氨酸诱导葡萄糖代谢异常的机理.方法 40只小鼠随机分为空腹正常对照组、空腹高同型半胱氨酸血症组、进食正常对照组和进食高同型半胱氨酸血症组,每组10只;空腹高同型半胱氨酸血症组和进食高同型半胱氨酸血症组用含1.5%的甲硫氨酸饮水3个月.3个月后,各组取血分别测定同型半胱氨酸、葡萄糖、胰岛素,计算胰岛素敏感指数;利用Western blot检测p-Akt(Ser-473)的改变.结果空腹高同型半胱氨酸血症组与空腹正常对照组、进食高同型半胱氨酸血症组与进食正常对照组比较葡萄糖和胰岛素增加(P<0.05),胰岛素敏感指数降低(P<0.05),p-Akt(Ser-473)蛋白下调(P<0.05),Akt无明显变化.结论同型半胱氨酸可诱导葡萄糖代谢异常,这可能与骨骼肌组织PI3K/Akt胰岛素信号通路的p-Akt(Ser-473)降低有关. 展开更多
关键词 高同型半胱氨酸血症 同型半胱氨酸 p-akt(Ser-473) PI3K akt胰岛素信号通路
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生物素化微细纤维肽结合IGF-Ⅰ对兔心肌细胞Akt蛋白表达及磷酸化的影响 被引量:2
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作者 胡云华 肖祖克 《江西医药》 CAS 2018年第1期44-46,共3页
目的探讨生物素化微细纤维肽结合IGF-Ⅰ后对兔心肌细胞Akt蛋白表达及磷酸化的影响。方法体外培养胎兔心肌细胞,分别以生物素化微细纤维肽结合的IGF-Ⅰ和未结合的IGF-Ⅰ诱导Akt磷酸化,检测Akt、p-Akt蛋白表达,肌钙蛋白表达。结果与未结的... 目的探讨生物素化微细纤维肽结合IGF-Ⅰ后对兔心肌细胞Akt蛋白表达及磷酸化的影响。方法体外培养胎兔心肌细胞,分别以生物素化微细纤维肽结合的IGF-Ⅰ和未结合的IGF-Ⅰ诱导Akt磷酸化,检测Akt、p-Akt蛋白表达,肌钙蛋白表达。结果与未结的IGF-Ⅰ相比,生物素化微细纤维肽结合的IGF-Ⅰ心肌细胞Akt、p-Akt、肌钙蛋白表达水平均显著升高(P<0.05)。结论生物素化微细纤维肽结合的IGF-Ⅰ不但保留了IGF-Ⅰ的生物蛋白活性,并且能加强和延长其作用,增强Akt、p-Akt、肌钙蛋白表达,增加蛋白质合成。 展开更多
关键词 生物素化微细纤维肽 磷酸化 IGF-Ⅰ akt、p-akt 肌钙蛋白
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小分子药物TD-198946促进大鼠骨髓间充质干细胞的成骨分化
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作者 杨超 罗宗平 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第13期2648-2654,共7页
背景:小分子药物TD-198946是一种能诱导干细胞形成软骨的高效软骨生成剂,但目前尚不清楚其对成骨分化的作用。目的:探讨小分子药物TD-198946促进大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的效果及其作用机制。方法:提取SD大鼠骨髓间充质干细胞,利用... 背景:小分子药物TD-198946是一种能诱导干细胞形成软骨的高效软骨生成剂,但目前尚不清楚其对成骨分化的作用。目的:探讨小分子药物TD-198946促进大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的效果及其作用机制。方法:提取SD大鼠骨髓间充质干细胞,利用CCK-8法评估不同浓度TD-198946对骨髓间充质干细胞增殖的影响,确定TD-198946的最佳使用浓度;然后加入最适浓度TD-198946和成骨分化培养基对骨髓间充质干细胞进行成骨诱导;成骨诱导第3天用qRT-PCR检测碱性磷酸酶、Runt相关转录因子2、骨桥蛋白、骨钙蛋白、Ⅰ型胶原基因表达;成骨诱导第7天进行碱性磷酸酶染色,Western blot检测Runt相关转录因子2、Ⅰ型胶原、AKT、p-AKT、PI3K、p-PI3K蛋白表达;成骨诱导第21天进行茜素红染色。结果与结论:①CCK-8实验结果显示,100 nmol/L TD-198946能促进骨髓间充质干细胞增殖;②碱性磷酸酶染色及茜素红染色结果显示,TD-198946能促进大鼠骨髓间充质干细胞的成骨分化;③qRT-PCR结果显示,TD-198946可促进成骨相关基因碱性磷酸酶、Runt相关转录因子2、骨桥蛋白、骨钙蛋白、Ⅰ型胶原的表达;④Western blot结果显示,TD-198946可促进Runt相关转录因子2、Ⅰ型胶原以及p-PI3K、p-AKT蛋白表达。结果表明,小分子药物TD-198946可能通过激活PI3K/AKT信号通路,诱导大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 TD-198946 成骨分化 PI3K/akt信号通路 akt p-akt
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Akt和NF-κB在子宫腺肌病中的表达及其意义 被引量:4
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作者 刘姝 张辉 +2 位作者 赵兴波 李明江 李继俊 《现代妇产科进展》 CSCD 北大核心 2009年第7期499-503,共5页
目的:研究Akt和NF-κB在子宫腺肌病病灶中的表达,探讨其在子宫腺肌病发生发展中的意义。方法:采用免疫组化SP法检测子宫腺肌病病灶(30例)、在位内膜(27例)、正常子宫内膜(20例)标本中Akt、P-Akt及NF-κB蛋白的表达并进行比较。结果:Akt... 目的:研究Akt和NF-κB在子宫腺肌病病灶中的表达,探讨其在子宫腺肌病发生发展中的意义。方法:采用免疫组化SP法检测子宫腺肌病病灶(30例)、在位内膜(27例)、正常子宫内膜(20例)标本中Akt、P-Akt及NF-κB蛋白的表达并进行比较。结果:Akt、P-Akt蛋白在子宫腺肌病异位内膜的腺上皮细胞中的表达强度显著高于在位内膜(P<0.05)和正常子宫内膜(P<0.01),其在位内膜腺上皮细胞中的表达强度显著高于正常子宫内膜(P<0.01);间质细胞中Akt、P-Akt蛋白的表达,异位和在位内膜明显高于正常内膜,异位内膜和在位内膜中两者的表达无显著性差异。NF-κB蛋白表达于胞核和胞浆中,在腺上皮细胞中的表达,异位内膜显著高于在位内膜,在位内膜显著高于正常子宫内膜(P<0.05);间质细胞中,NF-κB蛋白的表达各组间无显著性差异。NF-κB与P-Akt在子宫腺肌病病灶、在位子宫内膜和正常子宫内膜中的表达呈正相关(r=0.626,P<0.01)。结论:NF-κB与Akt在子宫腺肌病病灶中呈高表达,其可能参与子宫腺肌病的发生与发展过程。 展开更多
关键词 信号传导 akt p-akt 核因子-ΚB 子宫腺肌病 子宫内膜异位症
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紫草素通过PI3K/Akt通路促进人乳腺癌MCF-7细胞自噬 被引量:51
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作者 陈菊英 刘朝纯 +3 位作者 曾智 黄文东 杨永飞 朱邦豪 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期194-198,共5页
目的研究紫草素(Shikonin)对人乳腺癌MCF-7细胞自噬的影响及其作用机制。方法 CCK-8法检测紫草素处理人乳腺癌MCF-7细胞24、48 h细胞的存活率,Western blot方法检测紫草素处理24 h和48 h时LC3、p62、PI3K、Akt、p-PI3K、p-Akt蛋白水平... 目的研究紫草素(Shikonin)对人乳腺癌MCF-7细胞自噬的影响及其作用机制。方法 CCK-8法检测紫草素处理人乳腺癌MCF-7细胞24、48 h细胞的存活率,Western blot方法检测紫草素处理24 h和48 h时LC3、p62、PI3K、Akt、p-PI3K、p-Akt蛋白水平。结果 1μmol.L-1紫草素处理细胞48 h以及2.5、5μmol.L-1紫草素处理MCF-7细胞24 h和48 h时,MCF-7细胞的活力受到明显抑制,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值增加,p62表达减少,总PI3K、Akt、p-PI3K、p-Akt均减少。结论紫草素促进乳腺癌MCF-7细胞自噬,其作用机制可能与PI3K/Akt通路受到抑制有关。 展开更多
关键词 紫草素 MCF-7细胞 自噬 LC3 P62 PI3K akt p-PI3K p-akt
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环孢素A对肝细胞中磷酸化AKT蛋白表达的影响 被引量:2
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作者 杨柳 刘晓军 +3 位作者 王宏宇 曹永 马永华 徐春 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第6期18-22,共5页
目的观察环孢素A(cyclosporin A,Cs A)对肝细胞磷酸化AKT(phosphorylated AKT,P-AKT)表达的影响,探讨Cs A导致胰岛素抵抗的机制。方法本研究分两部分:(1)体外研究:用不同浓度Cs A(0.1μmol/L、1μmol/L、5μmol/L)作用于人肝细胞(HL770... 目的观察环孢素A(cyclosporin A,Cs A)对肝细胞磷酸化AKT(phosphorylated AKT,P-AKT)表达的影响,探讨Cs A导致胰岛素抵抗的机制。方法本研究分两部分:(1)体外研究:用不同浓度Cs A(0.1μmol/L、1μmol/L、5μmol/L)作用于人肝细胞(HL7702细胞)48 h,用Western blot方法检测P-AKT蛋白的表达水平。(2)体内研究(动物实验):建立环孢素A诱发的大鼠糖尿病模型,用免疫组化方法分析P-AKT蛋白在糖尿病大鼠肝细胞中的表达水平。结果 (1)各浓度(0.1μmol/L、1μmol/L、5μmol/L)Cs A组与对照组相比,HL7702肝细胞中的PAKT蛋白的表达呈现逐渐下降趋势,差异有统计学意义(P<0.05、P<0.01、P<0.01)。(2)环孢素A引起大鼠血糖升高,在服用环孢素A的第5个月,大鼠平均血糖为9.28 mmol/L,说明环孢素A诱导的糖尿病大鼠模型建立成功,糖尿病大鼠肝细胞中P-AKT蛋白的表达明显低于服药前和正常对照组(P<0.05)。结论服用治疗剂量的环孢素A导致大鼠血糖升高,环孢素A抑制大鼠肝细胞中P-AKT的表达,环孢素A抑制人肝细胞HL7702中P-AKT的表达,提示影响PI3K/AKT信号通路可能是环孢素A导致胰岛素抵抗的机制之一。 展开更多
关键词 环孢素A 胰岛素抵抗 移植后糖尿病 akt p-akt
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淋巴细胞微粒刺激AKT/Foxo1阻滞气道上皮细胞周期的研究 被引量:8
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作者 焦燕 邱倩 +2 位作者 杨再兴 但小苹 熊玮 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第24期2498-2502,共5页
目的研究淋巴细胞微粒(lymphocyte microparticles,LMPs)作用于气道上皮细胞引起周期阻滞在G1期的机制通路。方法将人类正常气道上皮细胞培养到对数生长期时,20μg/ml的LMPs按照不同的时间0、4、8、16、20、24 h刺激气道上皮细胞,用RT-... 目的研究淋巴细胞微粒(lymphocyte microparticles,LMPs)作用于气道上皮细胞引起周期阻滞在G1期的机制通路。方法将人类正常气道上皮细胞培养到对数生长期时,20μg/ml的LMPs按照不同的时间0、4、8、16、20、24 h刺激气道上皮细胞,用RT-PCR方法检测P21、P27在mRNA水平的表达情况。20μg/ml的LMPs按照不同的时间0、4、8、16、24 h刺激气道上皮细胞,用Western blot方法检测P21、P27、Foxo1、p-Foxo1、AKT、p-AKT的蛋白表达情况。用免疫细胞化学技术检测Foxo1的核定位情况。结果与0 h对比,20μg/ml的LMPs作用于气道上皮细胞能使P21、P27的mRNA、蛋白水平显著升高(P<0.01),Foxo1蛋白水平无明显变化(P>0.05),p-Foxo1的蛋白水平表达减弱(P<0.01),AKT蛋白水平无明显变化(P>0.05),p-AKT蛋白水平表达减弱(P<0.01)。结论 LMPs作用于气道上皮细胞上调P21、P27蛋白的表达引起周期阻滞G1期,可能是通过AKT/Foxo1信号通路调节。 展开更多
关键词 细胞周期阻滞 淋巴细胞微粒 FOXO1 akt P21 P27 p-Foxo1 p-akt
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卵巢上皮性癌组织中miR-145与PI3K/AKT信号通路相关性的研究 被引量:3
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作者 钟丽 安云婷 喻金梅 《江西医药》 CAS 2013年第5期388-391,共4页
目的研究miR-145、Akt和p-Akt蛋白在卵巢上皮性癌组织中的表达及其相互关系。方法采用RT-PCR和Western blot检测miR-145、AKT和P-AKT蛋白在卵巢组织中的表达水平,分析miR-145、Akt和p-Akt蛋白三者的相关关系。结果(1)miR-145在正常卵巢... 目的研究miR-145、Akt和p-Akt蛋白在卵巢上皮性癌组织中的表达及其相互关系。方法采用RT-PCR和Western blot检测miR-145、AKT和P-AKT蛋白在卵巢组织中的表达水平,分析miR-145、Akt和p-Akt蛋白三者的相关关系。结果(1)miR-145在正常卵巢、良、恶性上皮性卵巢肿瘤组织中的表达逐渐降低,差异有统计学意义(P<0.05);在卵巢上皮性癌中的表达水平与FIGO分期和病理类型无关(P>0.05)。(2)p-Akt在正常卵巢、良、恶性上皮性卵巢肿瘤组织中的表达逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.05),在卵巢上皮性癌中的表达水平与FIGO分期有关(P<0.05),而与病理类型无关(P>0.05)。(3)miR-145与p-Akt的表达水平在卵巢组织中表达呈负相关(r=-0.492,P=0.001)。结论 miR-145与PI3K/AKT信号通路的活化可能在卵巢上皮性癌的发生及发展中起重要作用,并且二者呈负相关。 展开更多
关键词 akt p-akt MIR-145 卵巢上皮性癌
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E-cadherin表达和AKT磷酸化水平与宫颈病变的相关性分析 被引量:5
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作者 田园 冯定庆 +3 位作者 伍娇娇 徐兵 孙多祥 胡卫平 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2014年第7期1007-1012,共6页
目的探讨E-cadherin的表达和AKT的磷酸化水平与宫颈病变程度的相关性。方法收集20例正常宫颈组织、30例宫颈上皮内瘤变(CIN)组织、50例宫颈鳞癌组织,采用荧光实时定量PCR和免疫组化方法分别检测组织中Ecadherin、β-catenin、p-AKT和Lor... 目的探讨E-cadherin的表达和AKT的磷酸化水平与宫颈病变程度的相关性。方法收集20例正常宫颈组织、30例宫颈上皮内瘤变(CIN)组织、50例宫颈鳞癌组织,采用荧光实时定量PCR和免疫组化方法分别检测组织中Ecadherin、β-catenin、p-AKT和Loricrin的mRNA及蛋白表达情况,分析E-cadherin表达和AKT磷酸化水平的相关性,及其与宫颈病变程度和宫颈鳞癌分化程度的相关性。结果免疫组化结果显示,随着宫颈病变的进展,E-cadherin、Loricrin的表达逐渐降低,甚至缺失(P<0.05);在正常宫颈上皮β-catenin表达于胞膜,随着宫颈病变的进展,逐渐由胞膜向胞质和胞核转移,且表达阳性率逐渐降低(P<0.05);上述指标定量PCR结果与免疫组化结果基本一致。p-AKT的表达则随病变进展而逐渐升高(P<0.05)。相关分析显示,Ecadherin的表达与宫颈病变的程度及鳞癌的分化程度呈负相关(rs=-0.688,-0.438;P<0.01),而与p-AKT的表达则呈正相关(rs=0.462,0.692;P<0.01);E-cadherin与p-AKT的表达呈负相关(rs=-0.828,P<0.01)。结论 Ecadherin的表达缺失与AKT磷酸化水平的增高与宫颈病变的发生发展密切相关;二者联合可用于监测宫颈病变的进展,指导临床治疗方案。 展开更多
关键词 E-CADHERIN β-catenin p-akt LORICRIN 宫颈上皮内瘤变 宫颈鳞癌
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PPAR-γ通过PI3K/Akt及NF-κB通路调控猪颈动脉支架植入术后的血管重构
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作者 郑波 杨源瑞 +3 位作者 周振华 吴虹辰 刘渠 陈康宁 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期888-892,共5页
目的观察过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(peroxisome proliferator activated receptors-γ,PPAR-γ)在猪颈动脉支架植入术后血管重构中的作用。方法将12只小型猪分为正常对照组(n=4)和介入手术组(n=8),介入手术组采用猪颈动脉支架植入... 目的观察过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(peroxisome proliferator activated receptors-γ,PPAR-γ)在猪颈动脉支架植入术后血管重构中的作用。方法将12只小型猪分为正常对照组(n=4)和介入手术组(n=8),介入手术组采用猪颈动脉支架植入建立动物模型,分为支架组(n=4)和罗格列酮(ROSI)组(n=4)。术后3个月,应用数字减影血管造影(digital subtraction angiography,DSA)技术及HE染色评估血管形态学变化,应用免疫组织化学方法检测p-Akt及NF-κB的表达变化,应用Western blot方法检测支架段血管PPAR-γ、Akt、p-Akt及NF-κB的表达变化。结果①猪颈动脉DSA和HE染色结果发现支架组血管狭窄较ROSI组明显(P<0.01)。②免疫组织化学染色结果发现支架组颈动脉血管p-Akt和NF-κB表达较正常对照组明显增加(P<0.01),ROSI组颈动脉血管p-Akt和NF-κB表达较支架组明显降低(P<0.01)。③Western blot检测结果显示:支架组PPAR-γ蛋白表达水平较正常对照组明显降低(P<0.01),NF-κB和p-Akt蛋白表达水平较正常对照组明显增加(P<0.05);ROSI组PPAR-γ蛋白表达水平较支架组明显增加(P<0.01),NF-κB和p-Akt蛋白表达水平较支架组明显降低(P<0.01);Akt在正常对照组、支架组和ROSI组中的蛋白表达量差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PPAR-γ可能通过调节PI3K/Akt及NF-κB的表达,从而改善支架植入术后的血管重构。 展开更多
关键词 过氧化物酶体增殖物激活受体-Γ akt p-akt NF-ΚB 血管重构
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AKT抑制剂对结肠癌细胞生物活性及β-catenin信号的影响 被引量:1
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作者 杜光红 余雪莲 +2 位作者 陈韵 张彤彤 蔡玉婷 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2022年第12期2978-2983,共6页
目的 分析丝氨酸/苏氨酸激酶(AKT)抑制剂对结肠癌细胞生物活性及β-catenin信号的影响。方法 取对数生长的5×10^(3)的SW480细胞,分别加入0.0、2.5、5.0、10.0μmol/L的MK2206干预24 h,采用显微镜观察SW480细胞形态;CCK-8检测存活率... 目的 分析丝氨酸/苏氨酸激酶(AKT)抑制剂对结肠癌细胞生物活性及β-catenin信号的影响。方法 取对数生长的5×10^(3)的SW480细胞,分别加入0.0、2.5、5.0、10.0μmol/L的MK2206干预24 h,采用显微镜观察SW480细胞形态;CCK-8检测存活率;克隆实验检测细胞克隆数目;采用Hoechst荧光染色检测凋亡率;分别采用Western印迹及聚合酶链反应(PCR)检测细胞中β-catenin、p-AKT蛋白及mRNA表达。结果 2.5、5.0、10.0μmol/L处理下的SW480细胞均与0.0μmol/L组相比差距较大(P<0.05),5.0μmol/L处理下的SW480存活率低于2.5μmol/L(P<0.05),10.0μmol/L处理下的SW480存活率最低,且具有时间剂量依赖性,2.5μmol/L组SW480细胞克隆数目显著低于0.0μmol/L组(t=3.080,P<0.05),5.0μmol/L组显著低于2.5μmol/L组(t=5.385,P<0.05),10.0μmol/L组显著低于5.0μmol/L组(t=13.96,P<0.05);2.5μmol/L组SW480细胞凋亡率显著高于0.0μmol/L组(t=13.220,P<0.05),5.0μmol/L细胞凋亡率显著高于2.5μmol/L组(t=6.029,P<0.05),10.0μmol/L组SW480细胞凋亡率显著高于5.0μmol/L组(t=8.402,P<0.05),2.5μmol/L组SW480细胞β-catenin和p-AKT蛋白水平显著低于0.0μmol/L组(t_(β-catenin)=3.184,t_(p-AKT)=3.060,均P<0.05),5.0μmol/L组β-catenin和p-AKT蛋白水平显著低于2.5μmol/L组(t_(β-catenin)=3.275,t_(p-AKT)=8.227,均P<0.05),10.0μmol/L组β-catenin和p-AKT蛋白水平显著低于5.0μmol/L组(t_(β-catenin)=5.039,t_(p-AKT)=5.477,P<0.05),2.5μmol/L组SW480细胞β-catenin和AKT mRNA均显著低于0.0μmol/L组(t_(β-catenin)=4.756,t_(p-AKT)=3.132,均P<0.05),5.0μmol/L组β-catenin和AKT mRNA显著低于2.5μmol/L组(t_(β-catenin)=8.227,t_(p-AKT)=3.811,P<0.05),10.0μmol/L组β-catenin和AKT mRNA均显著低于5.0μmol/L组(t_(β-catenin)=9.959,t_(p-AKT)=6.235,P<0.05)。结论 AKT抑制剂MK2206能够减少人结肠癌细胞株SW480生理活动,降低存活率,加快凋亡,能够显著抑制β-catenin、p-AKT活性,随着MK2206浓度增加而降低。 展开更多
关键词 结肠癌 akt抑制剂 MK2206 细胞形态 存活率 Β连环素 丝氨酸/苏氨酸激酶
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新生大鼠高氧动物模型肠道AKT的变化 被引量:1
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作者 王思 曹旭 刘冬妍 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期577-581,共5页
目的研究高氧对新生大鼠肠道AKT信号通路的影响。方法将新生大鼠分为高氧组和空气组,采用电镜观察2组大鼠肠组织结构的变化;应用免疫组化染色(SP法)和Western blot检测肠组织AKT和p-AKT蛋白的表达;应用实时PCR检测肠组织AKT mRNA的表达... 目的研究高氧对新生大鼠肠道AKT信号通路的影响。方法将新生大鼠分为高氧组和空气组,采用电镜观察2组大鼠肠组织结构的变化;应用免疫组化染色(SP法)和Western blot检测肠组织AKT和p-AKT蛋白的表达;应用实时PCR检测肠组织AKT mRNA的表达。结果电镜显示空气组肠黏膜形态完整;高氧组可见上皮表面绒毛有部分缺失,核形不规则,胞质内疑有凋亡小体。免疫组化结果显示,空气组AKT蛋白表达随生长发育逐渐增加;与空气组比较,高氧组AKT表达第7天升高,第10天反而下降(P<0.05)。空气组p-AKT蛋白表达亦随生长发育逐渐增加,与空气组比较高氧组p-AKT表达第7天明显升高(P<0.05),但第10天表达减少。Western blot结果显示,与空气组比较,高氧组AKT表达第7天显著升高(P<0.05),但第10天下降。p-AKT表达亦升高,但差异无统计学意义(P>0.05)。实时PCR结果显示,与空气组比较,高氧组AKT mRNA表达第5天和第7天显著升高(P<0.05),但在第10天表达下降(P<0.05)。结论高氧刺激使肠道黏膜细胞结构发生改变,肠道黏膜细胞可能通过AKT的磷酸化来对抗高氧刺激进而保护肠道黏膜。 展开更多
关键词 高氧 肠道 蛋白激酶B 磷酸化的蛋白激酶B
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