Al-(L-丙氨酸)胰岛素晶体学研究

应用微量过饱和静置法在含柠檬酸钠和氯化钠的晶体生长体系中得到适合X射线衍射分析用的Al—(L—丙氯酸)胰岛素单晶体.晶体属于三方晶系,空间群为R_3,晶体衍射分辨率可达1.8A以上.晶胞参数:a_H=80.89A,b_H=80.89A,c_H=37.64(?),α=β=90°,γ=120°.每个结晶学不对称单位含有两上Al—(L—丙氨酸)胰岛素分子.

STUDIES ON THE CRYSTAL STRUCTURE OF Al-(D-TRYPTOPHAN) INSULIN

We have determined the crystal structure of Al-(D-Trp) insulin and discovered that it belongs to the trigonal system with space group R3. The parameters of the unit cell are a=b=78.6, c=50.0. A set of data for half a sphere reciprocal space to a spacing of 2.2 were collected. The model was adjusted and refined by using a step-by-step approach and a stereochemically-restrained least squares program, assisted by manual revision based on the difference Fourier maps, to a final R-factor of 0.218. The main and side chains of both Al-D-Trp residues in the asymmetric unit are well ordered. The packing of Al-(D-Trp) insulin in the unit cell, the conformational differences with other insulin structures and its structure and function relationship bave also been discussed.

1．9A分辨率Al－（L－丙氨酸）胰岛素晶体结构研究

使用Ｘ－ＰＬＯＲ及立体化学制约最小二乘精化技术，并结合差值Ｆｏｕｒｉｅｒ图人工分析，测定了１．９ 分辨率Ａｌ修饰丙氨酸胰岛素的晶体结构，晶体空间群为Ｒ３，晶胞参数：ａ＝ｂ＝８０．８９，ｃ＝３７．６４。精化后的结构模型最终偏离因子Ｒ＝０．１８５，同理想键长和键角的均方根偏差分别为０．０１８和３．５°，独立区内二个分子的Ａ链Ｎ端Ａｌ－丙氨酸残基清晰可见。

2．5分辨率单斜Al－（L－丙氨酸）胰岛素晶体结构研究

空间群为Ｐ２１的Ａ１－（Ｌ－丙氨酸）胰岛素晶胞内，一个不对称单位含有一个六聚体，应用差值Ｆｏｕｒｉｅｒ技术，立体化学制最小二来技术和Ｘ—ＰＬＯＲ程序并辅以电子密度图的人工拟合，解析了分辨率ＡＩ—（Ｌ－丙氨酸）胰岛素（Ａｌ－Ｌ－ＡｌａⅠ）的晶体结构。最终Ｒ因子为２０．６％，与标准键长与键角的均方根偏差分别为和４．１９°，从电子密度图与模型的拟合来看，六聚体中每条Ａ链的Ａｌ位置替换的Ｌ—Ａｌａ清晰可见，每条Ｂ链Ｎ端Ｂ１—Ｂ８伏段都为α螺旋构象，形成了Ｂ１—Ｂ１９的连续α螺旋段。

单斜Al－（L－丙氨酸）胰岛素初步晶体学研究

用微量气相扩散方法在含酚的柠檬酸缓冲体系中，得到了可供Ｘ射线晶体学分析用的Ａｌ－（Ｌ－丙氨酸）胰岛素晶体，晶体衍射能力为２．５Ａ。经Ｘ射线衍射分析确定，该晶体属于单斜晶系，空间群为Ｐ２_１，晶胞参数：ａ＝６１．５Ａ，ｂ＝６２．２Ａ，ｃ＝４８．３Ａ，α＝γ＝９０．０°，β＝１１０．９°。晶胞中每个结晶学不对称单位含有一个Ａｌ－（Ｌ－丙氨酸）胰岛素六聚体。