阿苯达唑纳米脂质体冻干粉的制备及性质考察

目的:制备阿苯达唑纳米脂质体冻干粉并对其性质进行考察。方法:利用冷冻干燥法制备阿苯达唑纳米脂质体冻干粉,以粒径、包封率联合外观、再分散性为指标,采用单因素试验联合正交试验筛选冻干处方工艺。考察冻干前、后脂质体的形态学变化、粒径、Zeta电位、水分含量、4℃下12个月的稳定性。结果:采用外加冻干保护剂的总量为10%,其中葡萄糖-海藻糖-甘露醇配比为1.0∶1.0∶3.0,以速冻的方式,于-35℃冰箱预冻18 h,冷冻干燥48 h获得冻干粉。与冻干前比较,冻干后脂质体形态未发生明显变化,可见清晰的磷脂双分子层膜结构;冻干前、后脂质体的粒径分别为(208.63±1.04)、(223.04±2.02)nm,Zeta电位分别为(-15.6±0.04)、(-19.4±0.06)m V,包封率分别为(94.62±0.49)%、(91.10±0.46)%(n=3);与脂质体比较,脂质体冻干粉在4℃下12个月较稳定。结论:成功制得阿苯达唑纳米脂质体冻干粉,其稳定性优于阿苯达唑纳米脂质体,冻干工艺可行。

高效液相色谱-串联质谱测定奶粉中3种苯并咪唑类药物残留

建立了高效液相色谱-串联质谱测定全脂和脱脂奶粉中奥芬达唑,阿苯达唑和芬苯达唑3种苯并咪唑类杀虫剂残留的方法。通过比较不同溶液的提取效率,最终选择含1%乙酸的甲醇作为提取溶液,正己烷和阳离子固相萃取两步净化,有效去除奶粉基质中的抑制干扰物。以乙腈和含0.5mmol/L醋酸铵及0.1%甲酸的水溶液为流动相,C18作为分析色谱柱,采用梯度洗脱方式进行液相色谱分离。脱脂奶粉和全脂奶粉3个添加水平的回收率范围为70.0%～85.8%,相对标准偏差均小于7.5%,在2～100μg/L浓度范围内,线性相关系数大于0.997 3,方法检测限为10μg/kg,能满足现有各国残留限量要求。

阿苯达唑纳米微粉在大鼠体内的药动学研究

目的：研究阿苯达唑（ABZ）纳米化后在大鼠体内的药动学变化,为ABZ纳米制剂的进一步研发奠定基础。方法：将16只大鼠随机分为ABZ原料药组（ABZ原料药混悬液）与ABZ纳米微粉组（ABZ纳米微粉混悬液）,每组8只,ig给药,剂量为63 mg/kg。各组大鼠于给药0.5、1、2、4、8、12、24、36、48、72 h后眼眶采血0.20.3 ml,以甲苯咪唑为内标,采用反相高效液相色谱法（RPHPLC）测定各时间点药物血药浓度,并采用3p97药动学软件拟合药动学参数。结果：ABZ原料及纳米微粉在大鼠体内的药动学符合二室模型,ABZ原料药组、ABZ纳米微粉组大鼠的cmax分别为（3.20±1.41）、（6.11±0.74）μg/ml,tmax分别为（3.42±0.91）、（3.15±0.27）h,t1/2分别为（7.53±1.20）、（6.26±0.85）h,AUC0-72h分别为（49.90±15.50）、（78.36±8.78）μg·h/ml,AUC0-∞分别为（52.30±10.10）、（80.27±8.26）μg·h/ml。与ABZ原料药组比较,ABZ纳米微粉组大鼠的cmax、AUC0-72h、AUC0-∞均显著升高（P〈0.05）。结论：ABZ纳米化后在一定程度上提高了药物的吸收速率,增加了药物的吸收,提高了ABZ的口服生物利用度。

阿苯达唑纳米微粉平衡溶解度和表观脂水分配系数的测定

目的 测定阿苯达唑纳米微粉在不同介质中的平衡溶解度以及表观脂水分配系数。方法 采用高效液相色谱法测定阿苯达唑的浓度,采用摇瓶法测定阿苯达唑纳米微粉在不同极性溶剂和不同p H缓冲液中的平衡溶解度及表观脂水分配系数。结果 不同极性溶剂中,阿苯达唑纳米微粉在甲醇中溶解度最大[（2564.28±38.73）μg/m L],在水中的溶解度最小[（125.25±1.45）μg/m L]。在pH=1.2-6.8缓冲液中,阿苯达唑纳米微粉溶解度从（551.33±19.00）μg/m L下降到（155.84±5.52）μg/m L;在pH=7.0-7.8缓冲液中,溶解度从（137.53±4.87）μg/m L上升到（168.94±5.63）μg/m L。纳米微粉的表观脂水分配系数在p H=1.2-2.0条件下lgP在0-2之间,pH=5.0-7.8条件下lgP在3-4之间。结论 本研究测定了阿苯达唑纳米微粉在不同介质中的平衡溶解度以及表观脂水分配系数,为预测该纳米微粉体内外吸收的改善奠定了基础。

阿苯达唑纳米微粉分散方法的研究

目的：建立适于生物安全性研究的阿苯达唑（ABZ）纳米微粉的最佳分散方法。方法：选择超纯水、RPMI 1640完全培养基、RPMI 1640培养液、磷酸盐缓冲液（PBS）、0.9%氯化钠溶液5种分散介质,在扫描电镜下观察ABZ纳米微粉粒子的分散形态,并检测其粒径,与基础值比较来确定分散介质;之后以普通超声、先普通超声再细胞破碎超声两种分散方式分别分散ABZ纳米微粉,以粒径为考察指标,与基础值比较筛选最佳分散方法;并在此基础上考察普通超声时间为5~60 min时的粒径变化趋势,以确定超声时间。结果：ABZ纳米微粉在5种分散介质中均发生了不同程度的聚合,与基础值比较粒径也普遍变大,但在PBS、0.9%氯化钠溶液和超纯水中聚合程度相对轻微,粒径增大幅度也较小,结合细胞对生长环境的特殊要求选择分散介质为PBS。采用先普通超声再细胞破碎超声的分散方式,ABZ纳米微粉粒径未见显著增大。超声5~45 min,随着超声时间的延长ABZ纳米微粉的粒径不断减小;超声45~60 min,随着超声时间的的延长ABZ纳米微粉的粒径反而有团聚增大的趋势,综合时间成本选择超声时间为30 min。验证试验ABZ纳米微粉的平均粒径为（387±3.6）nm,与基础值比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：本分散方法可有效抑制纳米微粉悬浮液的团聚,适用于ABZ纳米微粉的生物安全性研究。

HPLC-DAD法测定2种阿苯达唑伊维菌素制剂中非法添加非泼罗尼

建立了2种阿苯达唑伊维菌素制剂中非法添加非泼罗尼的HPLC-DAD检测方法。液相色谱条件为:采用C18(3.5μm,4.6×100 mm)色谱柱;以乙腈-水为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL/min;二极管阵列检测器检测,采集波长范围190~400 nm,记录色谱图波长为220 nm,柱温30℃,进样量10μL。通过液相色谱峰保留时间、峰纯度检查和光谱相似度检查对非法添加物进行确证。结果表明:非泼罗尼质量浓度在0.5~100.0 mg/L范围内与峰面积线性关系良好(r=0.999 92),在2种制剂中非泼罗尼的平均回收率分别在97.85%~99.26%(n=6)和97.47%~99.49%(n=6)之间,RSD均小于3%。本方法高效、简便、准确、可靠,适用于检测以上2种制剂中非法添加的非泼罗尼。