高山麝病原性阿尔伯蒂埃希氏杆菌(Escherichia albertii)的发现(英文)

麝是古北界的特有种和我国一级保护动物,具有相当重要的经济价值和物种保护价值.幼麝的高死亡率,特别是由腹泻或肠炎所引起的死亡已经严重地影响着中国养麝业的发展.从甘肃兴隆山养麝场死于消化道疾病的高山麝(Mos-chus chrysogaster)的肠道内容物中分离出了病原性的肠杆菌.基于形态学、生理生化特征及16SrRNA基因序列的种系遗传学综合分析鉴定其为阿尔伯蒂埃希氏杆菌(Escherichia albertii).对该菌进行抗生素敏感性检测,结果表明,其对不同的抗生素有不同的敏感性,这可能是麝长期经受少数几种固定的抗生素(如青霉素、四环素)治疗,细菌产生抗性而使抗生素失效所致.建议麝场定期对肠杆菌进行分离、鉴定,选用具有针对性的菌株制作菌苗,配以敏感的药物、中草药添加剂和良好的卫生措施,以控制埃希氏杆菌疾病的发生.

基于AlbertII的Agent设计与实现

随着软件复杂性的提高和规模的扩大,需求工程的重要性已经被广泛认识。而随着网络的快速发展,计算机的协作工作方式使Agent概念大量应用于需求工程。该文研究了基于AlbertII的Agent设计的实现,并讨论了它与分布式人工智能中Agent的不同。最后将此方法应用在一个仓库管理系统中。

四川自贡地区健康人群中艾伯特埃希菌的分离鉴定

目的了解长期从事鸡鸭等家禽养殖及屠宰人员等健康人群艾伯特埃希菌的携带情况。方法收集家禽养殖、屠宰人群及其他健康人粪便,经EC肉汤增菌后PCR检测eae基因,阳性样品接种麦康凯琼脂,挑选不发酵乳糖菌落,通过16SrDNA序列分析和多位点序列分型(MLST)对菌株进行鉴定。分离株进行紧密粘附素亚型和cdtB亚型分析,并通过脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析与动物来源艾伯特埃希菌菌株间的相关性。结果从189份从事鸡鸭宰杀人员的粪便中,分离到2株艾伯特埃希菌,从58份其他健康人群粪便中分离到1株菌,而138份家禽养殖场人员粪便中未分离到菌株。3株菌株的紧密粘附素亚型分别为sigma,iota 2,nu,cdtB亚型均为Ⅱ/Ⅲ/Ⅴ亚型。PFGE显示三株菌之间的带型相似性小于80%,并且与鸡鸭等来源的艾伯特埃希菌带型不同。结论从事鸡鸭屠宰等健康人员中存在一定程度的艾伯特埃希菌携带率,但其与家禽携带艾伯特埃希菌的关系,仍需进一步研究。

不同试剂解除天山野生蔷薇种子休眠的效果

为野生蔷薇的训化繁育提供参考,以天山野生的腺齿蔷薇(Rosa albertii Regel)、密刺蔷薇(Rosa spinosissima L.)和宽刺蔷薇(Rosa platyacantha Schrenk)的种子为材料,低温层积后采用高锰酸钾(KMnO_4,浓度0.1%、0.2%和0.3%)、硫酸铜(CuSO_4,浓度0.1%、0.2%%和0.3%)和萘乙酸(NAA,浓度50mg/L、100mg/L和150mg/L)3种试剂不同浓度浸泡处理后进行培养,50d后种子无发芽时统计发芽率。结果表明:3种试剂几乎没有打破腺齿蔷薇的休眠,可打破密刺蔷薇和宽刺蔷薇的休眠,宽刺蔷薇的发芽率高于密刺蔷薇,高锰酸钾和硫酸铜处理效果优于萘乙酸,其中以KMnO_4处理密刺蔷薇、宽刺蔷薇的效果最好,0.2%KMnO_4处理密刺蔷薇的发芽率最高,为26.7%;0.2%和0.3%KMnO_4处理宽刺蔷薇的发芽率最高,均为33.3%。

西天山野生忍冬和蔷薇种子萌发特性研究

研究种子休眠原因,明确解除休眠的适宜方法及层积处理的最佳时间,为忍冬和蔷薇的种苗产业化和推广应用奠定基础。以西天山野果林小叶忍冬、鞑靼忍冬、疏花蔷薇和腺齿蔷薇当年生的种子为试验材料,研究其种子形态特征、吸水特性,以及种皮、低温层积和不同质量浓度GA3处理对种子休眠与萌发特性的影响。结果发现,低温层积60d,小叶忍冬和鞑靼忍冬种子的休眠基本能被解除,发芽率分别高达84.8%和82.5%;而疏花蔷薇和腺齿蔷薇种子的发芽率分别只有3.0%和7.5%,低温层积100d的发芽率也分别只有35.0%和51.3%,种子休眠没有被解除。进一步对2种蔷薇种子采用打磨种皮处理,低温层积60d种子发芽率分别高达45.5%和47.3%,低温层积80d发芽率分别为60.7%和65.7%,种子休眠基本被解除。鞑靼忍冬种子发芽率在GA3300mg/L处理时最高,为91.1%(低温层积60d)。3种质量浓度GA3处理的疏花蔷薇和腺齿蔷薇打磨种皮种子发芽率均高于清水对照。GA3100mg/L处理时,腺齿蔷薇种子发芽率最高,为57.4%(低温层积100d),打磨种皮的种子发芽率高达71.3%;GA3200mg/L处理的小叶忍冬和疏花蔷薇种子发芽率最高,分别为85.6%(低温层积60d)和42.4%(低温层积100d),打磨种皮的疏花蔷薇种子发芽率高达64.2%(低温层积80d)。

天山瓦韦总黄酮成分的含量测定

目的:对天山瓦韦总黄酮成分进行含量测定。方法:以芦丁为标样,用分光光度法测定不同溶剂和不同时间条件下的总黄酮含量。结果:天山瓦韦中黄酮类化合物提取的最佳条件为:75%的乙醇,抽提3.5h,总黄酮含量为3.20%。

大果蔷薇嫩枝扦插繁殖技术研究

为提高大果蔷薇嫩枝扦插成活率,以河沙为基质,选用GGR、IBA、ABT、IAA、NAA5种激素,设500、1 000、2 000g·L^(-1)3个浓度梯度,对大果蔷薇半木质化插穗进行15s速蘸处理后扦插,对生根率、生根数量和生根长度进行了计分析。结果表明:大果蔷薇嫩枝扦插繁殖最佳激素及浓度组合为1 000g·L^(-1)的GGR药液、15s速蘸,其成活率可达95.6%。

2023年浙江省杭州市一起由艾伯特埃希菌引起的学校聚集性疫情流行病学及病原学特征分析

目的了解2023年2月浙江省杭州市某学校发生的一起聚集性腹泻疫情的流行病学及病原学特征。方法对该起聚集性疫情开展流行病学调查,并采集腹泻患者肛拭子、食品留样及环境样品进行病原体快速筛查和分离鉴定,对分离的病原菌进行药敏试验和全基因组测序分析。结果本次聚集性疫情共造成22人出现腹泻、腹痛、呕吐等胃肠道症状。从6例腹泻患者肛拭子中分离到eae基因阳性菌株,经进一步鉴定确证为艾伯特埃希菌。6株菌对26种抗生素均敏感,核心基因组的多位点序列分型进化分析显示6株菌单独聚为一簇,且菌株间核心基因组的单核苷酸多态性差异仅在0~1 bp之间。结论这起学校聚集性腹泻疫情是由艾伯特埃希菌引起,为中国首次报道由艾伯特埃希菌引起的聚集性疫情。

16SrDNA序列在艾伯特埃希菌鉴定中的应用

目的通过16S rRNA基因序列分析快速鉴定艾伯特埃希菌。方法以30株疑似艾伯特埃希菌为材料,使用通用引物扩增其16S rRNA基因并进行测序。获得的序列与艾伯特埃希菌型菌株LMG 20976,基因组测序菌株KF1、NBRC107761、TW07627以及其他密切相关的细菌种(大肠埃希菌、赫曼埃希菌、费格森埃希菌、志贺菌和Shimwellia blattae)的16S rRNA基因序列进行比较,并使用N-J法构建进化树来分析其相关性。结果 30株疑似艾伯特埃希菌的16S rRNA基因序列与艾伯特埃希菌参考菌株的序列相似性最高,并与其聚类为一簇,为艾伯特埃希菌。结论 16S rRNA基因测序分析可用于艾伯特埃希菌的快速鉴定。

自贡地区艾伯特埃希菌的筛查及菌株特征分析

目的 了解自贡地区人群、动物源性食品、家禽及鸟类携带艾伯特埃希菌情况及菌株特征.方法 采集市售牛肉、羊肉、猪肉、鸡肉、鸭肉、鸭肠及鸡肠,不同鸟类粪便及腹泻患者和密切接触人群粪便,经EC肉汤增菌后,PCR检测eae基因,阳性增菌液接种麦康凯琼脂,挑取不发酵乳糖、eae阳性菌落进一步通过16S rDNA测序及多位点序列分型分析（MLST）,确定为艾伯特埃希菌,并对菌株进行eae、cdtB多态性分析及脉冲场凝胶电泳（PFGE）分型分析.结果 本研究共鉴定51株艾伯特埃希菌（19株来源于鸭肠及其内容物、18株来源于鸡肠及其内容物、3株来源于腹泻患者粪便、3株来源于密切接触人群粪便、1株来源于白鹭粪便、3株来源于鸡肉、2株来源于鸭肉、1株来源于猪肉、1株来源于羊肉）.eae分为6种亚型,分别为sigma、rho、iota2、epsilon3,nu及N5,而51株艾伯特埃希菌均具有Ⅱ/Ⅲ/ⅤcdtB亚型,其中3株菌同时具有Ⅰ/ⅣcdtB亚型.51株分离株共分为40种PFGE带型,呈多态性分布.结论 首次在中国腹泻患者、密切接触人群、野生白鹭、家禽和动物源性食品中证实了艾伯特埃希菌的存在,对进一步深入开展艾伯特埃希菌病原学、流行病学研究具有重要实际意义.

艾伯特埃希菌快速鉴定方法比较研究

目的评价目前用于快速鉴定艾伯特埃希菌方法的特异性。方法利用51株艾伯特埃希菌及其他对照菌株,分别评价基于clpX、lysP和mdh基因的三重聚合酶链式反应(PCR);基于EA0134基因的单重PCR;基于EACBF2103-EACBF2104基因的巢式PCR。结果 51株艾伯特埃希菌三重PCR均为阳性,鉴定吻合率为100%;巢式PCR两轮结果均为阳性,鉴定吻合率为100%,对照组第1轮PCR结果全部为阴性,但第2轮出现非特异条带。51株中49株EA0134基因为阳性,鉴定吻合率为96.08%,对照菌株中伤寒沙门菌和肠出血性大肠埃希菌O157∶H7扩增出大小类似的片段。结论 EA0134基因在一些菌株中缺失,会造成漏判,同时在部分肠道菌株中存在非特异性扩增,会造成误判。三重PCR和巢式PCR的第1轮扩增均具有高特异性,可作为目前艾伯特埃希菌分离株的PCR快速鉴定方法,为艾伯特埃希菌相关的临床诊断和突发公共卫生事件处置,提供准确快速的诊断依据。

海口不同农贸市场艾伯特埃希菌带染状况研究

目的了解海口市农贸市场家禽中艾伯特埃希菌的带染情况,为艾伯特埃希菌检测方法的有效性和可行性提供证据。方法采集海口市不同农贸市场市售鸡肠、鸭肠内容物经EC肉汤增菌后,PCR对其进行eae基因检测,阳性增菌液接种麦康凯琼脂,挑取eae阳性、不发酵乳糖菌落进行艾伯特埃希菌筛查后经三重PCR(clpX、lysP和mdh)及多位点序列分型(MLST)鉴定。结果本研究共采集了221份样品(鸡肠及其内容物133份,鸭肠及其内容物88份),从221份鸡肠、鸭肠内容物中检出11株疑似艾伯特埃希菌,经eae基因检测、生化鉴定、MLST聚类分析,结果表明该11株菌均为不发酵乳糖、木糖,无动力,eae基因和三重PCR为阳性,MLST聚类分析与艾伯特埃希菌标准菌株具有高度亲缘性,均鉴定为艾伯特埃希菌。结论海口市地区不同农贸市场家禽中艾伯特埃希菌存在不同程度的带染,且艾伯特埃希菌检测技术有效可行,具有推广应用价值。

艾伯特埃希菌PFGE分子分型及其数据库的建立

目的建立艾伯特埃希菌PFGE分子分型方法,分析不同来源艾伯特埃希菌间的同源关系,并建立其PFGE分型数据库。方法参考非O157大肠埃希菌PFGE分型方法,对从自贡、泸县地区分离的63株艾伯特埃希菌和1株艾伯特埃希菌参考菌株LMG20976进行PFGE分析,利用Bio Numerics 7.5软件分析PFGE图谱并建立数据库,并对分型结果与样本来源、类型、ST型、intimin亚型等进行关联性分析。结果 64株艾伯特埃希菌分型效果明显,被分为46种PFGE带型,分别命名为EASX01001~EASX01046,相似度为55%~100%,包含9种克隆群(≥2种带型形成克隆群),同种带型超过2株的带型共有8种。结论非O157大肠埃希菌PFGE分型方法适用于艾伯特埃希菌分型研究,比MLST技术具有更高的分辨能力,通过图谱分析发现艾伯特埃希菌具有遗传多样性的特点。同时,建立的数据库为深入了解艾伯特埃希菌的分子流行病学特征提供科学依据。

山西省内2株艾伯特埃希菌的分离与鉴定

目的:了解山西省家禽中艾伯特埃希菌的带菌情况。方法:采集山西省不同禽类定点屠宰场鸡肠内容物经EC肉汤增菌后,PCR对其进行eae基因检测,阳性增菌液接种麦康凯琼脂,挑取不发酵乳糖菌落进行三重PCR(clpX、lysP和mdh基因)、16S rRNA基因序列分析及多位点序列分型(Multiocus sequence typing,MLST)鉴定。结果:本研究共采集了250份样品,经eae基因检测、生化鉴定、三重PCR检测、16S rRNA及MLST聚类分析,确定2株不发酵乳糖、木糖,无动力,eae、clpX、lysP和mdh基因阳性的菌株为艾伯特埃希菌。进一步对该2株艾伯特埃希菌毒力基因分析发现,该菌株携带Ⅱ/Ⅲ/Ⅴ组亚型cdtB基因,但均不携带stx基因。结论:本研究表明山西省鸡类中存在艾伯特埃希菌带菌的情况。

艾伯特埃希菌多重PCR检测方法的建立

目的建立一种快速检测艾伯特埃希菌的多重PCR检测方法。方法根据lysP和EA0134基因建立多重PCR反应体系,并对引物浓度、反应时间及温度等反应条件进行优化,同时评价其灵敏性和特异性。运用该方法对实验室分离的63株艾伯特埃希菌菌株及增菌液和非艾伯特增菌液进行了检测。结果两对引物均能特异性扩增相应的基因,其灵敏性均为25 CFU/反应(500 CFU/ml)且非常特异。对本实验分离的艾伯特埃希菌增菌液和非艾伯特埃希菌增菌液的检测结果与之前传统方法的一致。结论本研究建立的多重PCR方法可用于艾伯特埃希菌的初步筛查和分离株的鉴定,为艾伯特埃希菌的快速鉴定和鉴别提供了一种新的检测方法。

四川荥经县艾伯特埃希菌的分离与鉴定

目的按照自贡市疾病预防控制中心编制的艾伯特埃希菌的检测程序,对四川荥经县采集的鸡肠样品中艾伯特埃希菌的携带情况进行检测,了解该地区家禽中艾伯特埃希菌的携带情况及菌株特征。方法采集荥经县农贸市场、棒棒鸡店铺、活鸡宰杀点的新鲜鸡肠样品163份,按照艾伯特埃希菌的检测程序对样品进行检测,鸡肠内容物经EC肉汤增菌后,PCR检测eae基因,eae阳性样品的增菌液接种于麦康凯琼脂,37℃,24h培养后挑取不发酵乳糖、eae阳性的疑似菌株,使用多重PCR检测及多位点序列分析(MLST)对疑似菌株进行鉴定。结果自贡市疾病预防控制中心编制的艾伯特埃希菌的检测程序可行有效,在荥经县共采集了新鲜的鸡肠样163份品,从3份样品中分离到3株疑似艾伯特埃希菌菌株,经多重PCR检测及多位点序列分析(MLST)鉴定,3株疑似菌株均为艾伯特埃希菌。本次采集的样品艾伯特埃希菌的检出率为1.84%(3/163)。结论四川荥经县地区鸡肠中存在艾伯特埃希菌,分离到的菌株丰富了艾伯特埃希菌生物学特征、流行病特征研究的菌株数据库。

四川泸县艾伯特埃希菌的分离与鉴定

目的利用艾伯特埃希菌检测技术调查泸县地区家禽中艾伯特埃希菌的带染情况。方法采集市售鸭肠及鸡肠,肠内容物经EC肉汤增菌后,PCR检测eae基因,阳性增菌液接种麦康凯琼脂,挑取不发酵乳糖、eae阳性菌落进一步通过16S rDNA测序及MLST分析,确认为艾伯特埃希菌。结果本研究从147份鸡肠及内容物中检出12株疑似艾伯特埃希菌,经16S rDNA测序、MLST聚类分析表明该12株菌与艾伯特埃希菌参考菌株具有高度亲缘性,可证实为艾伯特埃希菌。结论本研究证实了泸县地区家禽中存在艾伯特埃希菌,表明艾伯特埃希菌检测技术有效可行,具有推广应用价值;获得的菌株为进一步推广研究艾伯特埃希菌生物学特征、流行病学等提供资源。

艾伯特埃希菌病原学与流行病学研究进展

艾伯特埃希菌(Escherichia albertii)是一种新发人兽共患病病原体,可引起以感染性腹泻为主的胃肠道疾病。自发现和命名以来,艾伯特埃希菌已造成多起食源性胃肠炎暴发,并广泛存在于多种禽类、野生动物中。由于目前常规的鉴定系统不能有效鉴定艾伯特埃希菌,该菌在全球的流行情况可能被严重低估。禽类等是艾伯特埃希菌的重要储存宿主,但其在疾病传播中的作用尚不清楚。本文对艾伯特埃希菌的生理生化特性、基因组特征、分离检测方法,以及艾伯特埃希菌在宿主动物、食品媒介及人群中流行情况的研究进展进行了综述,并对艾伯特埃希菌的感染风险及进一步的研究重点进行了展望。

生于蔷薇果实上的葡萄孢属1新种和亚隔孢壳属1新记录种

从新疆伊犁哈萨克自治州的巩留县和霍城县采集到4种野生蔷薇果实的病害标本,采用常规组织分离法和单孢分离法获得2株Botrytis属真菌和3株Didymella属真菌。通过形态学特征并结合系统学分析手段明确了菌株的分类地位。结果表明:来源于宽刺蔷薇Rosa platyacantha果实的2个病害菌株为新种—宽刺蔷薇葡萄孢Botrytis roplatyacae R.Ma,L.J.Hou.,该种与卡罗来纳葡萄孢B.caroliniana和拟蚕豆葡萄孢B.fabiopsis亲缘关系较近,但其产生的菌核为黑色,不同于B.fabiopsis产生的灰色菌核,且分生孢子(2.58~3.90×1.48~1.94μm)明显小于B.caroliniana(7.3~14.7×5.7~9.1μm)。从腺齿蔷薇R.albertii、腺果蔷薇R.fedtschenkoana和弯刺蔷薇R.beggeriana果实病害上分离到的3个菌株均为蔷薇亚隔孢壳黑斑病菌Didymella aliena,该菌为中国新记录种且首次在蔷薇属植物上报道。

基于rpoB基因分析方法鉴定艾伯特埃希菌

目的探讨一种合理的方法对既往分离到的鉴定为致病性大肠杆菌(EPEC)的菌株进行重新鉴定,发现可能存在的艾伯特埃希菌。方法以2013-2017年上海市浦东地区腹泻监测中分离到的491株EPEC为分析对象,首先用基于表型的方法进行筛检,然后用聚合酶链式反应(PCR)检测毒力基因,并对可疑株rpoB基因进行扩增和测序,获得的序列在genbank数据库中进行匹配,以艾伯特埃希菌参考株以及其他密切相关的大肠埃希菌和志贺菌的rpoB基因序列作为参考序列,使用MEGA8.0的最邻接法构建进化树。结果经筛选,33株生化表型符合艾伯特埃希菌株中,10株clpX、lysP、mdh以及ctdB基因阳性,符合艾伯特埃希菌定义,其rpoB基因序列与艾伯特埃希菌参考菌株的序列高度相似,并与其聚类为一簇,与其他23株菌株以及志贺菌、大肠埃希菌等参考菌株有显著区别。结论表型鉴定方法结合rpoB基因测序分析可用于艾伯特埃希菌的准确鉴定。