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基于榛子过敏原2S albumin基因的实时荧光聚合酶链式反应检测方法开发
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作者 孙秀艳 杨莉莉 +3 位作者 张晓波 郑秋月 胡冰 曹际娟 《食品安全质量检测学报》 CAS 北大核心 2023年第18期32-39,共8页
目的开发一种基于2Salbumin基因的实时荧光聚合酶链式反应检测方法(real-timefluorescent polymerase chain reaction,qPCR)用于检测食品中的榛子成分。方法从美国国家生物技术信息中心数据库中检索并选取具有高特异性的榛子2S albumin... 目的开发一种基于2Salbumin基因的实时荧光聚合酶链式反应检测方法(real-timefluorescent polymerase chain reaction,qPCR)用于检测食品中的榛子成分。方法从美国国家生物技术信息中心数据库中检索并选取具有高特异性的榛子2S albumin基因序列的DNA片段进行引物探针设计,建立一种新的用于检测微量榛子成分的实时荧光PCR方法,并对建立的方法的特异性、扩增效率、检出限和稳健性进行验证。结果本方法对检测目标呈现出高特异性,与其余12种非目标样品无交叉反应。扩增效率为99.42%,相关系数r2为0.9941,两者均符合实时荧光PCR方法验证指南要求。该方法检出限(limit of detection,LOD)为每个反应5拷贝(2.5copies/μL),可检测出食品中含有的微量榛子成分。使用正交实验设计评估该方法具有很好的稳健性(P=0.07),可转移到其他实验室及常规分析中使用。结论基于2S albumin基因组分的qPCR检测方法可用于识别食品中潜在的榛子成分,对于预防榛子过敏及开发减敏脱敏榛子食品研究具有很好的技术支撑。 展开更多
关键词 榛子过敏原 实时荧光聚合酶链式反应 2S albumin基因 检出限
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诱导化疗时外周血原始细胞清除时间和初诊时白蛋白水平与急性髓系白血病患者基因突变及预后之间的关系
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作者 张瑞婷 阎斌 +2 位作者 李祖燕 孙金敏 姚锦 《昆明医科大学学报》 CAS 2024年第8期117-124,共8页
目的 探讨诱导化疗时外周血原始细胞清除(PBBC)时间和初诊时白蛋白(ALB)水平与急性髓系白血病(AML)患者基因突变及预后之间的关系。方法 收集昆明医科大学第二附属医院2017年1月至2023年5月初诊的175例AML患者的临床资料进行回顾性分析... 目的 探讨诱导化疗时外周血原始细胞清除(PBBC)时间和初诊时白蛋白(ALB)水平与急性髓系白血病(AML)患者基因突变及预后之间的关系。方法 收集昆明医科大学第二附属医院2017年1月至2023年5月初诊的175例AML患者的临床资料进行回顾性分析,采用ROC曲线确定PBBC的最佳临界值为6.5 d,PBBC≤6.5 d划分为外周血原始细胞清除短时间组(EBC),PBBC> 6.5 d分为外周血原始细胞清除长时间组(DBC);以PBBC和初诊时ALB建立简易预后模型,可以将患者划分为a、b、c 3组,a组(PBBC≤6.5 d、ALB>34.45 g/L,无危险因素),b组(PBBC> 6.5 d、ALB> 34.45 g/L或PBBC≤6.5 d、ALB≤34.45 g/L,1个危险因素),c组(PBBC> 6.5 d、ALB≤34.45 g/L,2个危险因素),对3组患者各基因突变情况及OS进行比较;采用t检验和卡方检验或秩和检验评估各种参数的差异性,Kaplan-Meier法进行生存分析。结果 对影响预后的因素进行COX回归分析显示PBBC和ALB是影响预后的独立因素,差异存在统计学意义(P <0.05);对abc 3组的OS进行组间比较发现,3组中位OS分别为未达到、1.86 a和0.93 a(a组vs b组,P <0.001;a组vs c组,P <0.001;b组vs c组,P=0.001),差异具有统计学意义,得出无危险因素组的OS和PFS均优于1~2个危险因素者。发现3组间CEBPA双突变和NPM1基因突变无统计学意义(P> 0.05),但C-KIT基因突变有统计学意义(P <0.05)。结论 PBBC和ALB是AML患者预后的独立危险因素,以PBBC和ALB组成的简易预后模型可以为精准化、个体化诱导化疗方案的选择提供依据,为判断初诊AML患者的基因突变及预后提供参考。 展开更多
关键词 急性髓系白血病 外周血原始细胞清除 白蛋白 基因突变 预后
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血清PCT/ALB、CRP/PA及ST2对尿毒症血液透析患者细菌感染的诊断价值
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作者 张涛 刘升凤 李杰 《分子诊断与治疗杂志》 2024年第11期2198-2201,2210,共5页
目的探讨血清降钙素原(PCT)/白蛋白(ALB)、C⁃反应蛋白(CRP)/前白蛋白(PA)及生长刺激表达基因2蛋白(ST2)对尿毒症血液透析(HD)患者细菌感染的诊断价值。方法选取2020年6月至2023年5月于南京市中心医院血液透析中心进行HD的尿毒症患者102... 目的探讨血清降钙素原(PCT)/白蛋白(ALB)、C⁃反应蛋白(CRP)/前白蛋白(PA)及生长刺激表达基因2蛋白(ST2)对尿毒症血液透析(HD)患者细菌感染的诊断价值。方法选取2020年6月至2023年5月于南京市中心医院血液透析中心进行HD的尿毒症患者102例,根据是否发生细菌感染分为感染组40例和非感染组62例,比较两组的血清PCT、ALB、CRP、PA、PCT/ALB、CRP/PA和ST2,并统计临床资料,并分析上述指标与尿毒症HD患者细菌感染的关系,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清PCT/ALB、CRP/PA、ST2及联合对尿毒症HD患者细菌感染的诊断价值。结果感染组的PCT和CRP高于非感染组,而ALB和PA低于非感染组,差异有统计学意义(P<0.05);感染组的PCT/ALB、CRP/PA及ST2水平高于非感染组,差异有统计学意义(P<0.05);PCT、CRP、PCT/ALB、CRP/PA、ST2、HD时长和WBC均为尿毒症HD患者合并细菌感染的危险因素,而ALB、PA和Ca是尿毒症HD患者合并细菌感染的保护因素(P<0.05);PCT/ALB、CRP/PA和ST2对尿毒症HD患者细菌感染进行诊断时,CRP/PA的曲线下面积(AUC)最高,为0.924,敏感度和特异度为81.82%和90.32%;PCT/ALB、ST2的AUC分别为0.900和0.798;联合后的AUC为0.986,敏感度和特异度为93.18%和95.16%。结论血清PCT/ALB、CRP/PA及ST2水平与尿毒症HD患者细菌感染关联密切,可作为诊断尿毒症HD患者是否发生细菌感染的有效指标,具有良好的临床价值。 展开更多
关键词 尿毒症血液透析 细菌感染 降钙素原/白蛋白 C⁃反应蛋白/前白蛋白 生长刺激表达基因2蛋白
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一个家族性异常白蛋白性高甲状腺素血症家系临床特点分析 被引量:1
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作者 赵琳琳 黄凤姣 +1 位作者 潘梦醒 赵艳艳 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2023年第5期718-723,共6页
目的:分析1个家族性异常白蛋白性高甲状腺素血症(FDH)家系的遗传学特点及甲状腺激素的实验室检测特点。方法:收集2021年3月就诊于郑州大学第一附属医院的1例男性FDH患者及其家庭成员的临床资料,采用高通量测序法检测先证者全部基因各外... 目的:分析1个家族性异常白蛋白性高甲状腺素血症(FDH)家系的遗传学特点及甲状腺激素的实验室检测特点。方法:收集2021年3月就诊于郑州大学第一附属医院的1例男性FDH患者及其家庭成员的临床资料,采用高通量测序法检测先证者全部基因各外显子的序列变异情况,采用Sanger测序法验证家系其他成员白蛋白(ALB)基因的变异情况。分别应用Roche、Beckman、Abbott 3种平台试剂盒检测该家系中FDH患者的FT 3、FT 4、TSH水平。结果:家系中共有4例患者。经基因检测均存在相同的ALB基因错义突变c.725G>A(p.R218H);先证者父亲及外祖母未患病,且未检测到该基因突变。4例FDH患者TT 4超出正常上限0.25~0.56倍,TT 3及rT 3均未超出正常范围。4例FDH患者Roche、Beckman、Abbott平台检测结果显示FT 3测定值超正常上限百分比分别为0.0%~6.9%、0.0%~11.4%、0.0%~7.8%,FT 4测定值超正常上限百分比分别为25.1%~39.4%、32.8%~92.8%、0.0%~11.3%。结论:R218H突变的FDH患者血清TT 4轻度升高,不同平台所测FT 4水平升高程度不同。 展开更多
关键词 家族性异常白蛋白性高甲状腺素血症 总甲状腺素 甲状腺功能正常 白蛋白基因
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Harnessing migraines for neural regeneration 被引量:4
5
作者 Jonathan M.Borkum 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2018年第4期609-615,共7页
The success of naturalistic or therapeutic neuroregeneration likely depends on an internal milieu that facilitates the survival,proliferation,migration,and differentiation of stem cells and their assimilation into neu... The success of naturalistic or therapeutic neuroregeneration likely depends on an internal milieu that facilitates the survival,proliferation,migration,and differentiation of stem cells and their assimilation into neural networks.Migraine attacks are an integrated sequence of physiological processes that may protect the brain from oxidative stress by releasing growth factors,suppressing apoptosis,stimulating neurogenesis,encouraging mitochondrial biogenesis,reducing the production of oxidants,and upregulating antioxidant defenses.Thus,the migraine attack may constitute a physiologic environment conducive to stem cells.In this paper,key components of migraine are reviewed – neurogenic inflammation with release of calcitonin gene-related peptide(CGRP) and substance P,plasma protein extravasation,platelet activation,release of serotonin by platelets and likely by the dorsal raphe nucleus,activation of endothelial nitric oxide synthase(e NOS),production of brain-derived neurotrophic factor(BDNF) and,in migraine aura,cortical spreading depression – along with their potential neurorestorative aspects.The possibility is considered of using these components to facilitate successful stem cell transplantation.Potential methods for doing so are discussed,including chemical stimulation of the TRPA1 ion channel,conjoint activation of a subset of migraine components,invasive and noninvasive deep brain stimulation of the dorsal raphe nucleus,transcranial focused ultrasound,and stimulation of the Zusanli(ST36) acupuncture point. 展开更多
关键词 NEUROPROTECTION neurorestoration NEUROgeneSIS stem cells MIGRAINE transient receptor potential ankyrin-1 calcitonin gene-related peptide albumin acupuncture oxidative stress
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Proteomics of Wheat Endosperm:a Tool to Find Genes Involved in Kernel Composition and Quality
6
作者 G. Branlard E. Bancel I. Nadaud 《分子植物育种》 CAS CSCD 2007年第2期170-171,共2页
The composition of the wheat kernel is the result of the expression of thousands of genes translated in enzymes involved in all the biochemical pathways that are needed for endosperm cell functions and also for the ac-
关键词 小麦 胚乳 质量 核仁
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肾病合剂对阿霉素肾病大鼠肝组织白蛋白基因表达影响的实验研究 被引量:4
7
作者 李新民 马融 +1 位作者 鲁斌 李少川 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期280-282,共3页
目的 :探讨肾病合剂对阿霉素肾病大鼠肝组织白蛋白基因表达的作用。方法 :建立阿霉素肾病大鼠模型 ,采用Northern杂交及Dot blot定量分析 ,观察肝组织白蛋白mRNA的表达水平。结果 :肾病合剂组大鼠肝组织白蛋白mRNA表达均明显高于模型组... 目的 :探讨肾病合剂对阿霉素肾病大鼠肝组织白蛋白基因表达的作用。方法 :建立阿霉素肾病大鼠模型 ,采用Northern杂交及Dot blot定量分析 ,观察肝组织白蛋白mRNA的表达水平。结果 :肾病合剂组大鼠肝组织白蛋白mRNA表达均明显高于模型组及正常组 (P <0 0 5)。结论 :肾病合剂可上调阿霉素肾病大鼠肝组织白蛋白mRNA的表达水平 ,促进白蛋白合成。 展开更多
关键词 肾病合剂 肾病综合征 白蛋白 基因表达 中医药疗法
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大鼠白蛋白基因片段的克隆及其mRNA半定量检测方法的建立 被引量:2
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作者 王新颖 李维勤 +1 位作者 李宁 黎介寿 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第7期611-612,共2页
白蛋白mRNA已被证实是反映白蛋白合成变化的重要指标。实验探讨大鼠白蛋白基因片段的克隆及白蛋白mRNA半定量检测方法的建立。使用一步法逆转录聚合酶链反应扩增的白蛋白cDNA片断 ,连接入pGEM T载体中 ,经ABIPRISM 3 77型全自动核苷酸... 白蛋白mRNA已被证实是反映白蛋白合成变化的重要指标。实验探讨大鼠白蛋白基因片段的克隆及白蛋白mRNA半定量检测方法的建立。使用一步法逆转录聚合酶链反应扩增的白蛋白cDNA片断 ,连接入pGEM T载体中 ,经ABIPRISM 3 77型全自动核苷酸分析仪检测。同时用不同浓度的内毒素处理肝细胞后检测其白蛋白mRNA的表达。扩增的基因片段经DNA序列分析 ,证实其由40 1个碱基组成。同时发现 ,内毒素可以抑制白蛋白mRNA的表达 ,且抑制作用与内毒素的剂量相关。提示 。 展开更多
关键词 白蛋白 基因表达 克隆 逆转录聚合酶链反应
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中国水牛血清白蛋白多态性研究 被引量:5
9
作者 郑维明 赖松家 史荣仙 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 1995年第1期3-6,共4页
本研究采用淀粉凝胶电泳法首次对我国12个水牛类群共1058头水平血清白蛋白多态性进行了*检测。结果表明我国水平血清白蛋白多态性主要受*A1bA和AlbX两个等位基因控制,其基因频率分别为0.228和0.770,表... 本研究采用淀粉凝胶电泳法首次对我国12个水牛类群共1058头水平血清白蛋白多态性进行了*检测。结果表明我国水平血清白蛋白多态性主要受*A1bA和AlbX两个等位基因控制,其基因频率分别为0.228和0.770,表现为AA、AX和XX3种基因型。各*类群间基因频率差异不显著(P>0.05),遗传距离很*近,具有同源关系。同时在中国沼泽型水牛中发现,原*认为仅在在于江河型水平的AIbB基因,可能说明两型水牛在起源上有一定联系。 展开更多
关键词 中国 水牛 血清白蛋白 多态性 基因频率
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聚乙烯亚胺修饰的白蛋白微泡转染CHO细胞实验研究 被引量:1
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作者 党时鹏 王如兴 +4 位作者 张学光 张燕 王明元 郭冬萍 李肖蓉 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期626-631,共6页
目的:制作非病毒基因转移载体,提高白蛋白微泡转基因效率。方法:采用人体白蛋白、聚乙烯亚胺(PEI)和葡萄糖按一定的质量比混合后用超声振动仪声振20s制得PEI修饰的白蛋白微泡(PAMB),通过流式细胞仪检测绿色荧光蛋白(GFP)阳性细胞比率以... 目的:制作非病毒基因转移载体,提高白蛋白微泡转基因效率。方法:采用人体白蛋白、聚乙烯亚胺(PEI)和葡萄糖按一定的质量比混合后用超声振动仪声振20s制得PEI修饰的白蛋白微泡(PAMB),通过流式细胞仪检测绿色荧光蛋白(GFP)阳性细胞比率以比较PEI、PEI+白蛋白、PAMB和Lipofectamine2000的基因转移效率。结果:单纯PEI组、白蛋白+PEI组、PAMB组和Lipofectamine2000组的平均转基因效率分别为(13.75±4.88)%、(5.20±1.15)%、(49.17±6.75)%和(53.72±5.69)%。PAMB组明显高于单纯PEI组,而与商品化Lipofectamine2000组没有统计学差异。结论:经PEI修饰后的白蛋白微泡转基因效率明显提高,是一种有效的体外基因转移载体,本研究也可能为在体基因转移提供新的方法。 展开更多
关键词 PEI 白蛋白微泡 基因转移
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肝脏特异性表达载体Kbpala/Alb-ATP7B的构建及表达 被引量:3
11
作者 徐琳 梁秀龄 徐评议 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期1045-1048,共4页
目的:构建小鼠白蛋白启动子引导下携带野生及常见突变型Arg778Leu、His1069Gln的人ATP7BcD-NA的肝脏特异性表达载体Kbpala/Alb-ATP7B,并检测其表达情况。方法:定点突变法获取人群中常见的Arg778Leu及His1069Gln两种ATP7B突变体,定向克... 目的:构建小鼠白蛋白启动子引导下携带野生及常见突变型Arg778Leu、His1069Gln的人ATP7BcD-NA的肝脏特异性表达载体Kbpala/Alb-ATP7B,并检测其表达情况。方法:定点突变法获取人群中常见的Arg778Leu及His1069Gln两种ATP7B突变体,定向克隆将小鼠白蛋白启动子Alb序列及野生和突变的ATP7BcDNA依次亚克隆至转基因载体Kbpala上,得到可在肝脏特异性表达的正常及突变型人ATP7B的转基因载体Kbpala/Alb-ATP7B。将其短暂转染BRL细胞及BHK细胞,通过Western blotting检测其蛋白表达情况。结果:经酶切鉴定及定点测序证实,转基因载体Kbpala/Alb-ATP7B构建成功;Western blotting显示仅在肝脏细胞实现表达。结论:带有人类ATP7BcDNA的野生及常见致病突变型的转基因载体Kbpala/Alb-ATP7B构建成功并在肝脏细胞特异性表达。 展开更多
关键词 白蛋白类 启动子 肝豆状核变性 基因表达
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内含子中正筛选标记neo基因在转录中的剪切研究 被引量:1
12
作者 孙世惠 周艳荣 +3 位作者 陈红星 林艳丽 黄培堂 邓继先 《生物技术通讯》 CAS 2006年第6期859-861,共3页
目的:研究插入内含子中的正筛选标记基因neo在转录中的剪切情况。方法:克隆了猪血清白蛋白基因5'端调控序列,以猪基因组DNA为模板,P10/P11为引物,PCR扩增猪血清白蛋白基因翻译终止密码子后2.9kb的3'端调控序列;以pEGFP-1为模板,... 目的:研究插入内含子中的正筛选标记基因neo在转录中的剪切情况。方法:克隆了猪血清白蛋白基因5'端调控序列,以猪基因组DNA为模板,P10/P11为引物,PCR扩增猪血清白蛋白基因翻译终止密码子后2.9kb的3'端调控序列;以pEGFP-1为模板,P400/P401为引物PCR扩增绿色荧光蛋白(EGFP)基因,插入猪血清白蛋白基因5'端调控区之后,在3'端调控序列的内含子中靠近N端的序列中插入正筛选标记基因neo,构建了表达EGFP的真核表达载体pEXp11。转染人肝癌细胞系HepG2,通过G418药物筛选获得稳定转染的抗药性细胞克隆。提取抗性细胞克隆基因组RNA并进行反转录,获得cDNA序列。结果:用引物D400/D401及分别位于neo基因和3'端调控序列上的一对引物D394/D357进行PCR检测,其中D394/D357并未扩增出目的条带。结论:插入内含子中的neo基因在转录过程中可随内含子一起被剪切。 展开更多
关键词 neo基因 猪血清白蛋白基因 RT-PCR
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原发性肝癌外周血白蛋白基因片段扩增的临床意义 被引量:2
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作者 朱云松 杨大明 +5 位作者 姚登福 孟宪镛 李玉明 钱俊波 王亚明 许利华 《南通大学学报(医学版)》 2008年第4期261-263,共3页
目的:探讨外周血白蛋白(Alb)基因在肝癌早期诊断和鉴别诊断中的临床价值。方法:以巢式聚合酶链反应(RT-PCR)扩增外周血中Alb的基因片段分析在原发性肝癌(HCC)、慢性肝病和非肝病患者外周血中血白蛋白基因表达。结果:67例肝癌患者外周血... 目的:探讨外周血白蛋白(Alb)基因在肝癌早期诊断和鉴别诊断中的临床价值。方法:以巢式聚合酶链反应(RT-PCR)扩增外周血中Alb的基因片段分析在原发性肝癌(HCC)、慢性肝病和非肝病患者外周血中血白蛋白基因表达。结果:67例肝癌患者外周血中Alb基因的检出率为59.7%,明显高于肝硬化、慢性肝炎和肝外肿瘤组患者(P<0.01),但与急性肝炎组无明显差别(P>0.05);在Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ期肝癌中,Alb基因片段阳性率分别为33.3%、36.8%和76.9%;肝内有无转移的肝癌组间存在明显差异(P<0.05),尤其在伴有肝外远处转移的肝癌中,Alb基因全数阳性(100.0%)。结论:分析外周血中Alb基因有助于肝癌的诊断、肝癌远处转移判别的监测。 展开更多
关键词 原发性肝癌 Alb基因 RT-巢式PCR
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白蛋白微泡促进报告基因在细胞表达的实验研究 被引量:1
14
作者 区文超 修建成 +4 位作者 赖文岩 曾平 周忠江 刘俭 刘伊丽 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期505-508,共4页
目的 :探讨白蛋白微泡作为非病毒载体在基因传输中的作用。方法 :6孔板培养脐静脉内皮细胞(EC)和血管平滑肌细胞 (VSMC) ,每孔加pcDNA3 1/His/LacZ质粒 2 0 μg ,加不同浓度微泡或不加微泡 ,超声条件为连续波 ,频率 2MHz,机械指数 1 8,... 目的 :探讨白蛋白微泡作为非病毒载体在基因传输中的作用。方法 :6孔板培养脐静脉内皮细胞(EC)和血管平滑肌细胞 (VSMC) ,每孔加pcDNA3 1/His/LacZ质粒 2 0 μg ,加不同浓度微泡或不加微泡 ,超声条件为连续波 ,频率 2MHz,机械指数 1 8,照射时间 1min ,4 8h后计算蓝染细胞百分率和 β -半乳糖苷酶活性。另以不同浓度微泡及超声照射时间处理细胞 ,测定细胞增殖情况。结果 :与单纯超声质粒组相比 ,含微泡组蓝染细胞率增加约 10- 15倍 (其中内皮细胞组 11 6倍 ,平滑肌细胞组 15 2倍 ) ,报告基因表达定量增加近 8倍。微泡浓度为 10 %时细胞转染效率最高。超声照射对细胞增殖无影响 ,微泡浓度为 5 0 %时有明显的细胞毒作用。结论 :白蛋白微泡在超声作用下能明显增加基因的传输效率 ,有可能成为一种安全有效的基因治疗的载体。 展开更多
关键词 白蛋白微泡 转染 基因
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长江流域水牛血清白蛋白多态性研究 被引量:1
15
作者 郑维明 赖松家 史荣仙 《四川农业大学学报》 CSCD 1993年第3期394-396,共3页
本研究采用淀粉凝胶电泳法对我国长江流域五个沼泽型类群的395头水牛型清白蛋白多态性进行了检测。结果表明:其白蛋白受Alj^A、Alj^B、Alb^X三个等显著基因控制,基因频率分别为0.218、0.004、0.778,ALb^X为优势基因。表现为AA、AX、BX、... 本研究采用淀粉凝胶电泳法对我国长江流域五个沼泽型类群的395头水牛型清白蛋白多态性进行了检测。结果表明:其白蛋白受Alj^A、Alj^B、Alb^X三个等显著基因控制,基因频率分别为0.218、0.004、0.778,ALb^X为优势基因。表现为AA、AX、BX、和XX四种类型,基因型频率分别为0.074,0.028、0.008和0.630,XX为优势基因型。各水牛类群的基因及基因型频率间无显著性差异(P>0.05),呈现较高一致性,具有同源关系。 展开更多
关键词 水牛 血清 清蛋白 多态性 基因型
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基于光纤式动态光散射的人血清白蛋白研究 被引量:2
16
作者 娄本浊 《激光生物学报》 CAS CSCD 2008年第6期792-795,共4页
人体尿液中血清白蛋白急剧增加会导致肾脏病发生几率增大,利用动态光散射技术(dynamic light scattering,DLS)研究人血清白蛋白有助于推动诊断肾脏病的早期发现。分析了人血清白蛋白的物理模型;利用单模光纤搭建了动态光散射实验系统,... 人体尿液中血清白蛋白急剧增加会导致肾脏病发生几率增大,利用动态光散射技术(dynamic light scattering,DLS)研究人血清白蛋白有助于推动诊断肾脏病的早期发现。分析了人血清白蛋白的物理模型;利用单模光纤搭建了动态光散射实验系统,并配制了实验所需的人血清白蛋白水溶液;最后使用该系统研究了人血清白蛋白分子的扩散系数在不同蛋白浓度和pH值条件下的扩散系数。实验和分析结果表明库仑力对蛋白质的扩散起主要作用,在等电位点下(pH=5.2)库仑力的影响消失,蛋白质的扩散系数最小;在等电位点测量出扩散系数随浓度的增加而线性减小;在浓度5 mg/mL~40 mg/mL内互扩散系数Dm=D0[1-(0.00194±0.00008)],D0=(6.74±0.01)×10-7cm2/s为外推至零浓度下23℃时蛋白质的扩散系数。这里C为蛋白质浓度,实验测得人血清白蛋白的半径为(3.44±0.01)nm。 展开更多
关键词 人血清白蛋白 动态光散射 单模光纤 粒径测量
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超声介导自制白蛋白微泡和声诺维对体外报告基因转染效率的比较研究 被引量:3
17
作者 史京萍 王建华 +4 位作者 李肖蓉 邵力正 张斌 卢春 吴文溪 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期379-382,共4页
目的:探讨超声介导微泡破裂法促进外源基因的安全转移的方法,为临床上肿瘤等疾病的基因治疗研究提供新的思路。方法:以绿色荧光蛋白基因为标记基因,以人大肠癌细胞株SW480为靶细胞,分别以自制白蛋白微泡和声诺维(SonoVue)微泡作为载体,... 目的:探讨超声介导微泡破裂法促进外源基因的安全转移的方法,为临床上肿瘤等疾病的基因治疗研究提供新的思路。方法:以绿色荧光蛋白基因为标记基因,以人大肠癌细胞株SW480为靶细胞,分别以自制白蛋白微泡和声诺维(SonoVue)微泡作为载体,通过超声介导微泡破裂法促进绿色荧光蛋白GFP基因在人大肠癌细胞株的定向转染,以激光共聚焦显微镜来定性和半定量观察GFP在靶细胞的表达情况,以椎虫蓝染色法检测超声作用于细胞的安全性。结果:当超声的强度为0.75W/cm2,作用时间为40s时,对细胞比较安全;自制白蛋白微泡和声诺维微泡的浓度为10%时,分别达到最佳的基因转染效率,两者无显著性差异,但后者的相对表达强度较高。结论:超声介导微泡破裂法促进外源基因的转移是一种比较安全而有效的基因转染方法。 展开更多
关键词 白蛋白微泡 超声造影剂 基因表达 绿色荧光蛋白
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扶正化瘀319方对肝细胞白蛋白生成的拆方配伍作用 被引量:3
18
作者 刘成海 王晓玲 +2 位作者 谭英姿 王臻楠 刘平 《中国中医基础医学杂志》 CAS CSCD 2001年第4期36-39,共4页
目的 :观察扶正化瘀 319方促进肝细胞白蛋白生成的机理及其拆方配伍意义。方法 :胶原酶灌流法分离大鼠肝细胞 ,原代培养。将扶正化瘀 319方拆分为扶正组、化瘀组、虫草组、丹参组、虫草加丹参组 ,灌胃大鼠 ,制备各组药物血清 ,并作用于... 目的 :观察扶正化瘀 319方促进肝细胞白蛋白生成的机理及其拆方配伍意义。方法 :胶原酶灌流法分离大鼠肝细胞 ,原代培养。将扶正化瘀 319方拆分为扶正组、化瘀组、虫草组、丹参组、虫草加丹参组 ,灌胃大鼠 ,制备各组药物血清 ,并作用于培养肝细胞。ELISA法测定培养上清白蛋白含量 。 展开更多
关键词 肝细胞 基因表达 白蛋白 扶正化瘀319方 中药
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肝脏特异性表达人遗传印记基因PEG10转基因载体的构建和鉴定 被引量:1
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作者 刘瑶 林菊生 +4 位作者 熊杰 谭锦泉 张强 常莹 任精华 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2008年第12期982-986,共5页
目的构建小鼠肝脏特异性表达人遗传印记基因PEG10的转基因载体pALB-PEG10-EGFP,为制备转基因小鼠做准备。方法RT-PCR扩增PEG10基因cDNA序列,克隆入T载体进行酶切、测序鉴定,后将其定向克隆至真核表达载体pALB-EGFP中ALB的下游,构建转基... 目的构建小鼠肝脏特异性表达人遗传印记基因PEG10的转基因载体pALB-PEG10-EGFP,为制备转基因小鼠做准备。方法RT-PCR扩增PEG10基因cDNA序列,克隆入T载体进行酶切、测序鉴定,后将其定向克隆至真核表达载体pALB-EGFP中ALB的下游,构建转基因载体pALB-PEG10-EGFP;在Lipofectamine介导下转染L02细胞,经G418抗性筛选,挑选阳性克隆并扩大培养;采用RT-PCR、Western blot、免疫细胞化学等方法分析PEG10在L02细胞中的表达和细胞内定位。结果酶切和测序结果表明pALB-PEG10-EGFP构建成功;稳定转染后的L02表达有PEG10的mRNA及蛋白,且主要定位于胞浆。结论重组体pALB-PEG10-EGFP的构建初步奠定了转基因小鼠制备的基础。 展开更多
关键词 遗传印记基因 PEG10 白蛋白启动子 转基因载体 鉴定
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人血清白蛋白基因的打靶研究
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作者 孙世惠 周艳荣 +3 位作者 陈红星 林艳丽 黄培堂 邓继先 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期223-228,共6页
为获得整合有人血清白蛋白(HSA)基因的猪胎儿成纤维细胞克隆,从猪基因组文库中杂交筛选得到猪血清白蛋白(PSA)基因全序列35kb并克隆了人血清白蛋白cDNA序列,扩增猪血清白蛋白基因5′调控序列7.2kb片段及第一内含子至第四内含子2.8kb的片... 为获得整合有人血清白蛋白(HSA)基因的猪胎儿成纤维细胞克隆,从猪基因组文库中杂交筛选得到猪血清白蛋白(PSA)基因全序列35kb并克隆了人血清白蛋白cDNA序列,扩增猪血清白蛋白基因5′调控序列7.2kb片段及第一内含子至第四内含子2.8kb的片段;构建了含有neo及tk正负筛选标记基因的人血清白蛋白基因打靶载体,并验证了neo基因的有效性。将线性化的打靶载体通过电击转染的方法整合到猪胎儿成纤维细胞基因组中,利用G418及GANC进行细胞克隆的抗药性筛选,PCR及Southern blot鉴定抗药性细胞克隆,最终获得3个发生同源重组的细胞克隆。这为下一步进行体细胞核移植制备生产人血清白蛋白转基因猪奠定了基础。 展开更多
关键词 基因克隆 基因打靶 人血清白蛋白基因
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