Alcalase 2.4L碱性内切蛋白酶改性大豆蛋白的工艺研究

以大豆分离蛋白为研究对象,采用碱性内切蛋白酶Alcalase 2.4L作为水解大豆分离蛋白的酶制剂,探讨碱性内切蛋白酶Alcalase 2.4L对大豆分离蛋白的影响。本实验以水解度和蛋白质分散性指数为评价指标,确定了Alcalase 2.4L酶解大豆分离蛋白的最佳酶解反应条件:加酶量0.0048 AU/g、pH值为7.4、底物浓度11%、反应温度65℃、酶解时间50min。该条件下大豆分离蛋白的分散性得到显著改善,蛋白质分散指数PDI值达到92.8%。

Alcalase碱性蛋白酶酶解蚕豆蛋白的研究

蚕豆经去皮、粉碎、除淀粉后,得到蚕豆粗蛋白。采用Alcalase碱性蛋白酶酶解蚕豆蛋白制备蚕豆蛋白水解物。通过单因素试验,调查了pH、底物质量分数、酶用量(E∶S)和酶解温度等因素对Alcalase碱性蛋白酶酶解蚕豆蛋白效果的影响。通过正交试验设计,确定Alcalase碱性蛋白酶酶解蚕豆蛋白适宜的工艺参数:酶解温度60℃,底物质量分数3%,酶用量(E∶S)8%,pH 9.0,此条件下,蚕豆蛋白水解度(DH)达最大,为21.67%。该结果与Alcalase碱性蛋白酶水解大豆蛋白、绿豆蛋白和小麦蛋白等适宜条件参数接近。

Alcalase碱性蛋白酶酶解绿豆分离蛋白制备小分子肽的工艺研究

以绿豆为原料,用Alcalase碱性蛋白酶酶解绿豆分离蛋白制备小分子多肽。采用单因素及多因素试验方法优化酶解条件,考察酶解过程中绿豆分离蛋白预处理、料液比、酶解温度、加酶量、酶解时间等对小肽得率的影响,测定水解产物的功能特性,并用液质联用技术(LC-MS)考察酶解得到的小肽的分子量分布范围。结果表明:绿豆分离蛋白预处理条件为95℃处理20min,酶解最佳条件为:65℃、pH8.5、底物浓度9%、加酶量6000U/g、酶解240min,水解度可达35.86%。经液质联用(HPLC-MS)分析证明水解产物的分子量集中在1000u以下,绿豆分离蛋白各功能特性得到很好地改善,表明该酶对绿豆分离蛋白水解效果良好,完全能达到制备多肽的水解度要求。

花生分离蛋白碱性蛋白酶Alcalase水解物具有血管紧张素转化酶抑制活性(英文)

分别以碱性蛋白酶Alcalase和中性蛋白酶Neutrase对花生分离蛋白进行水解,制备花生分离蛋白水解物,并测定不同水解时间所得产物对血管紧张素转化酶(ACE)的抑制活性。未水解的花生分离蛋白没有ACE抑制活性,用中性蛋白酶Neutrase水解所得的水解物显示弱ACE抑制活性。然而,碱性蛋白酶Alcalase水解物具有很强的ACE抑制活性,水解0.5h时水解物活性最高,其半抑制浓度为(IC50)0.56mg/ml。本研究表明,当用碱性蛋白酶Alcalase水解时,花生分离蛋白是生产ACE抑制肽的良好蛋白质来源,花生分离蛋白碱性蛋白酶Alcalase水解物可作为具有降压功能的功能食品添料。

Alcalase碱性蛋白酶水解大豆分离蛋白的研究

试验研究了以Alcalase碱性蛋白酶水解大豆分离蛋白制备大豆肽的工艺,分析了温度、pH值、底物浓度、酶与底物浓度比和时间对酶水解的影响。通过均匀设计和统计分析建立了酶水解的数学模型,并以此模型得到了Alcalase碱性蛋白酶水解大豆分离蛋白的最佳水解工艺。工艺参数为温度60℃、pH8 0、底物浓度8 38%、酶与底物浓度比4 5%、水解时间150min,水解度0 220221。

Alcalase碱性蛋白酶酶解蛋清制备抗氧化活性肽

研究Alcalase碱性蛋白酶酶解鸡蛋蛋清制备小分子活性肽。确定酶解的最佳工艺是:酶解pH值为9.0,酶解温度为70℃,底物浓度[S]为4.5%,酶加入量[E]/[S]为6%。水解时间4h,水解度达到33%。采用化学发光法研究蛋清肽混合物的抗氧化性,结果表明,不同浓度和水解度的蛋清肽混合物均具有清除活性氧和抗脂质氧化的能力。随着蛋清肽混合物浓度增大,清除能力增大,抗氧化性增大。不同水解度的蛋清肽混合物,其清除活性氧和抗脂质氧化能力稍有不同,但区别不大。用葡聚糖凝胶SephadexG-15测定水解物分子量分布,结果表明水解产物中的主要成分是分子量集中在1300u的寡肽。

Alcalase碱性蛋白酶对大豆分离蛋白水解作用的研究

研究了Alcalase碱性蛋白酶对大豆分离蛋白的水解效果,并研究了pH、温度、酶用量、底物质量分数、水解时间对该酶水解效果的影响。通过正交实验和极差分析可确定最佳工艺条件为:温度58℃,pH8.0,底物质量分数5.0%,酶用量10.0%(E:S),水解时间300min。

Alcalase碱性蛋白酶水解棉籽蛋白动力学研究

采用pH-stat法对Alcalase碱性蛋白酶水解棉籽蛋白的动力学特性进行了研究,确定了Alcalase碱性蛋白酶水解棉籽蛋白的最佳反应条件:温度60℃、pH8.0、酶与底物比750 U/g、底物质量分数5%,水解300 min后水解度可以达到12.43%;动力学参数:Km=6.013 3 mol/L、vmax=9.549 3×10-3mol/(min.L)。

Alcalase碱性蛋白酶对中华稻蝗蛋白水解条件的研究

本试验采用Alcalase碱性蛋白酶对中华稻蝗蛋白进行水解,研究其蛋白酶解条件和酶解物的抗氧化性(用抑制邻苯三酚自氧化率来表示)。结果表明,实验室最佳酶解条件为:底物浓度1%,pH值8.0,温度55℃,水解时间4 h,加酶量(V/V,%)为10%。在此条件下其酶解物具有明显的抗氧化活性,对邻苯三酚自氧化的抑制率可达40%,水解度为51%。

碱性蛋白酶Alcalase水解WGP制备ISWGPH的研究

本文采用pH-stat法测定WGP的水解度。正交实验确定了Alcalase水解WGP的最佳工艺条件为：T＝50℃；pH＝8．5[S]＝10％；[E／S]＝24AU／kg蛋白质；t＝300min。将WGP水解物的pH调到4．0（WGP的等电点），离心分离后上清液，经活性碳处理和干燥后得到了等电点可溶性WGP水解物──ISWGPH。

纳米磁性壳聚糖微球固定化Alcalase碱性蛋白酶的制备及酶学性质研究

以自制磁性壳聚糖微球作固定化酶载体,考察给酶量、pH、戊二醛浓度和交联时间对固定酶酶活和酶活回收率的影响,并研究固定化酶的酶学性质及其微观结构。结果表明:给酶量112 000 u/g载体,pH 8.5,戊二醛体积分数8%,交联时间11 h条件下酶活达最高(86 779±119.26)u/g,酶活回收率达(77.48±0.11)%。固定化酶和游离酶最适pH分别为11和10.5,最适温度皆为60℃,且固定酶pH和温度稳定性明显高于游离酶;重复使用5次固定酶酶活保持(80.89±0.20)%;由米氏常数可知固定酶具有更强的底物亲和力;电镜显示Fe3O4磁核和磁性壳聚糖微球皆为表面光滑球形的纳米粒子,高比表面积能提供更多酶结合位点;红外光谱证明Fe3O4已被壳聚糖包埋,振动样品磁强计检测固定化酶具有良好磁响应性。

碱性内切蛋白酶水解大豆蛋白的研究

以大豆分离蛋白为底物 ,通过单因素分析、正交试验以及对水解蛋白曲线分析 ,确定了Al calase碱性内切蛋白酶水解大豆蛋白的最佳水解条件 :底物质量浓度为 60 g/L ,pH值为 7.5,水解温度为 60℃ ,酶 底物比为 4.0mL/kg ,反应时间为 1 0h。

Alcalase蛋白酶水解玉米皮蛋白的研究

以Ａｌｃａｌａｓｅ碱性蛋白酶对玉米皮进行水解，制取玉米蛋白水解液．结果，该酶水解的最佳工艺条件为：在浓度５％的玉米皮中加２．６７％酶制剂，ｐＨ７．５，５５℃反应１ｈ．该工艺条件下制得的蛋白水解液中，蛋白质溶出率为８９．３％．水解度为９．０％．

鹰嘴豆蛋白Alcalase水解工艺及其体外抗氧化活性的研究

研究Alcalase蛋白酶水解鹰嘴豆蛋白的工艺、不同水解度鹰嘴豆蛋白水解产物的体外抗氧化能力以及分子量分布．在单因素基础上以水解度和还原能力为指标设计正交试验得到水解最佳条件为：温度50℃，[E]／[S]2％，pH值8．0，反应时间40min．以此水解条件进行试验测得水解度为15．04％，还原能力为0．270；水解度（DH）为15％时鹰嘴豆蛋白水解产物的还原能力、清除DPPH自由基、清除羟基自由基（·OH）和抑制超氧阴离子能力最高．从分子排阻色谱图中可以看到，随着水解度的提高，肽的分子量分布总体表现为大分子量肽逐渐减少，小分子量肽的含量逐渐增加．而具有最佳体外抗氧化活性的鹰嘴豆蛋白水解产物的分子量主要集中在300～1500Da之间．

小麦蛋白Alcalase水解物免疫活性肽的研究

实验研究了以Alcalase碱性蛋白酶水解小麦分离蛋白制备小麦肽的工艺,分析了温度、pH值、底物浓度、酶添加量和时间对酶水解的影响。通过正交实验得到了Alcalase水解小麦蛋白的最佳工艺,工艺参数为酶用量22.5μL/g,pH值9.5,温度60℃,底物浓度4%,反应时间100min,水解度18.63%。所得小麦肽混合物用离子交换树脂依据电荷进行初步分离获得4个组分。经过小鼠体外脾淋巴细胞增殖反应(MTT法)鉴定其免疫活性,结果表明pH8和pH10洗脱得到的组分对小鼠脾细胞增殖具有较强的刺激作用,组分中可能含有对小鼠体外淋巴细胞增殖具有刺激作用的活性肽。

响应面法优化碱性蛋白酶提取榛子油工艺

采用Alcalase碱性蛋白酶水酶法提取榛子油,以提油率为指标,对影响提油率的各个因素进行了研究,并用响应面法优化了提油工艺。F检验可以得到因素影响大小顺序为:酶解时间>加酶量>料液比>酶解温度>酶解pH。得到优化酶解条件为:加酶量1.6%,酶解温度51℃,酶解时间1.9 h,料液比1∶5.6,酶解pH 10。在优化酶解条件下,榛子提油率可达92.92%。同时测得榛子油的棕榈酸含量4.33%,油酸67.10%,亚油酸0.09%,亚麻酸0.09%,硬脂酸1.165%。

正交实验确定Alcalase水解大豆蛋白的最佳实验条件

采用枯草杆菌碱性蛋白酶Alcalase(标注酶活力2.4Au/g)作为水解酶对大豆蛋白进行水解,得到大豆多肽溶液。以大豆蛋白的水解度(DH)来表征大豆蛋白水解反应进行的程度。选择水解反应温度、pH值、酶浓度作为三个影响因素分别取三个水平,以水解度为指标进行三因素三水平正交实验。实验结果得到的最佳实验条件为底物浓度为8%,酶浓度(E/S)为3.6Au/100g底物,温度T60℃以及pH为8.0。

榛子仁蛋白酶解工艺的优化及酶解物抗氧化能力的研究

以东北毛榛子为原料,通过响应面法对Alcalase碱性蛋白酶水解榛子仁蛋白的条件进行优化并建立回归模型,得到最佳水解条件为:酶与底物比3720U/g、酶解温度50.6℃、酶解pH 8.4,此工艺条件下的水解度预测值为14.41%,水解度实测值为(14.38±0.06)%。抗氧化能力测定结果表明:榛子仁蛋白酶解物的总还原能力约为VC的70%,清除DPPH自由基的半数抑制质量浓度(IC50)值为0.7311mg/mL,是VC值的138倍。

微生物蛋白酶对大豆分离蛋白水解作用的研究

研究了五种蛋白酶对大豆分离蛋白的水解效果，筛选出效果最好的碱性蛋白酶Alcalase（液态）。并研究了pH值、温度、酶浓度、底物浓度、水解时间对该酶水解效果的影响。结果表明：最佳工艺条件为：温度55℃、pH值8．0、底物浓度2％、酶用量5％（E:S）、水解时间为4～6h。

蛋白酶对大豆蛋白和花生蛋白溶解性的影响

为了改善醇法大豆浓缩蛋白和花生粕的溶解性,利用Alcalase碱性蛋白酶和Validase FP concentrate蛋白酶对它们进行限制性水解。结果表明,利用Alcalase碱性蛋白酶水解醇法大豆浓缩蛋白的最佳水解条件为:温度50℃、pH8.0、水解时间3h,底物浓度为10%,酶浓度为0.5%(占底物),在此水解条件下醇法大豆浓缩蛋白的氮溶解性指数(NSI)由4.37%提高到60.34%,水解度为6.37%。利用Validase FP concentrate蛋白酶对花生粕进行水解时的最佳水解条件为:温度50℃、pH7.0、水解时间4h,底物浓度10%,酶浓度1%(占底物),在此水解条件下花生粕的氮溶解性指数(NSI)由42.40%提高到87.54%,水解度为12.90%。