来源于Alicyclobacillus sp.A4葡萄糖异构酶的克隆表达及转化应用研究

葡萄糖异构酶在体外可以将D-葡萄糖异构化为D-果糖,是商业制备高果糖浆的关键酶。本研究从嗜热菌Alicyclobacillus sp.A4中克隆了葡萄糖异构酶(A4GI)基因,并在大肠杆菌BL21中成功进行了表达。利用His-tag蛋白纯化磁珠对粗酶液进行纯化,并对已纯化的重组A4GI进行详细的酶学性质及转化率的测定。结果表明:A4GI的最适温度和pH分别为65℃和p H 7.5,该酶在p H 6.0-11.0之间很稳定,在pH 6.0-11.0缓冲液中37℃处理1 h后,剩余酶活99%以上。最适反应条件下,重组酶对D-葡萄糖的Km与Vmax值为99.8 mM与3.75μmol/min/mg。在不同浓度的葡萄糖转化实验中,A4GI的转化率在一定底物浓度范围内随底物浓度增加呈现升高的趋势,在底物葡萄糖浓度为3 M时达到52.7%的最高转化率,因此可以实现在高浓度葡萄糖下进行高效转化,降低后期浓缩的生产成本,具有较好的工业应用潜力。

脂环酸芽孢杆菌Alicyclobacillus sp. A15木聚糖酶基因xynA15的克隆表达及性质研究

从云南保山市的一眼温泉中分离到一株嗜热嗜酸菌,脂环酸芽孢杆菌Alicyclobacillus sp. A15。通过同源克隆和TAIL-PCR方法,从该菌株中克隆得到一个木聚糖酶基因xynA15,全长990 bp,编码329个氨基酸和一个终止密码子。将xynA15基因克隆到原核表达载体pET-22b（＋）上,并转化至BL21（DE3）,经过IPTG诱导,其表达产物具有木聚糖酶的活性。对其酶学性质研究发现,XynA15的最适温度为50℃,最适pH为7.0,不仅在较广的温度范围（35℃-60℃）内具有较高的酶活,而且在50℃具有较好的热稳定性。

SP教学法在中医学专业水平技能培训的应用

研究国内外标准化病人(SP)相关文献,发现将其用于医学临床技能培训,更有利于解决理论与实践脱节、规避伦理及缓解师资不足等带来的问题,给学生公平、客观的评价。文章以山西中医药大学2018级实习生和规培生以及医院工作人员为SP招募对象,以2019级中医专业学生为培训对象,研究SP教学法在临床技能培训中的利弊,发现其在招募、筛选、培训及投入培训中存在一些困难,并提出一些意见和建议,以促进SP的长远发展,从而提升中医学专业水平的技能培训,提高实践教学质量。

果汁中脂环酸芽孢杆菌(Alicyclobacillus spp.)的危害及其控制

脂环酸芽孢杆菌(Alicyclobacillus spp.)对果汁风味影响较大,成为果汁的主要安全性指标备受国际社会关注。本文系统分析了脂环酸芽孢杆菌的代谢产物及其对果汁的危害、污染果汁的途径及安全性问题,提出:①通过原料选择、清洗、膜过滤和高温灭菌能较有效控制果汁中脂环酸芽孢杆菌;②ClO2、乳酸链球菌素、促肠活动素等被研究证实均对脂环酸芽孢杆菌有很好的杀灭作用,但还未应用于工业化生产;③辐照杀菌、脉冲电场、超声波杀菌等非热杀菌技术亟待研究开发,在果汁中脂环酸芽孢杆菌的控制应用方面前景广阔。

CBL+PBL联合SP教学法在神经外科研究生培养中的探索

目的探索案例教学法(case-based learning,CBL)及基于问题的教学法(problem-based learning,PBL)联合标准化病人(standardized patient,SP)教学法在神经外科研究生培养中的应用效果。方法 选取2020年8月—2022年8月昆明医科大学第一附属医院神经外科专业3个年级研究生共60名,按入科顺序分为传统教学组、CBL+PBL组及CBL+PBL+SP组,每组20名。进行3个月的入科培训后对学生的综合考核成绩、临床技能、病历质量、SP评价及自我感知能力进行评价。结果 CBL+PBL组、CBL+PBL+SP组课后的基本理论、病例分析成绩均优于传统教学组,差异有统计学意义(P <0.05)。CBL+PBL+SP组的查体、腰穿及影像资料判读均优于其他2组,差异有统计学意义(P<0.05)。CBL+PBL组与CBL+PBL+SP组的病历书写成绩均优于传统教学组,差异有统计学意义(P <0.05)。CBL+PBL组与CBL+PBL+SP组的SP综合评价成绩、学生满意度、技能和知识吸收能力、医患沟通技巧、学习动机、理解力、师生互动、课程所花时间、课后考试、临床思维能力、自学能力、团队合作能力及完成课题能力均优于传统教学组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 CBL+PBL联合SP教学法在提高研究生临床操作技能、医患沟通技巧、知识理解及吸收能力等方面具有一定优势,是一种更有效的研究生培养方法。

PTED治疗LDH后IL-10、IL-8及SP水平变化及其与神经功能恢复的关系

目的探讨经皮椎间孔镜椎间盘切除术(PTED)治疗腰椎间盘突出症(LDH)后白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-8(IL-8)及P物质(SP)水平的变化及其与神经功能恢复的关系。方法选取2022年1月至2024年1月保定市第一中心医院收治的131例LDH患者,按照不同治疗术式分为对照组[传统开窗减压髓核摘除术(ODD),n=65)]、试验组(PTED,n=66),比较两组围手术期指标、术前、术后3个月腰椎活动功能(腰椎前屈、后伸、左侧屈、右侧屈活动度)、疼痛程度[视觉模拟评分法评分(VAS)]、脊柱功能[腰椎Oswestry功能障碍指数(ODI)]、腰背肌生物力学性能[腰背屈伸比(F/E)、伸展平均功率(AP)、峰力矩(PT)]、实验室指标(IL-10、IL-8及SP水平)及并发症发生率。结果试验组手术、住院、下床时间、切口长度短于对照组,术中出血量少于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组术后3个月腰椎前屈、后伸、左侧屈、右侧屈活动度均升高,且试验组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组术后3个月VAS、ODI评分均下降,且试验组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组术后3个月的AP、PT均升高,且试验组高于对照组,两组术后3个月的F/E均降低,且试验组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组术后3 d的IL-10、IL-8及SP水平均降低,且试验组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。试验组并发症总发生率(7.57%)明显比对照组并发症总发生率(20.00%)低,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析显示:PTED治疗腰椎间盘突出症后IL-8及SP水平与ODI评分呈正相关关系,IL-10水平与ODI评分呈负相关关系(P<0.05)。结论相较于ODD,PTED治疗LDH疗效更佳,可有效促进患者神经功能恢复,降低血清IL-10、IL-8、SP水平。

双波长激光联合生物陶瓷材料iRoot SP辅助磨牙根管治疗效果分析

目的:探讨双波长激光联合生物陶瓷材料iRoot SP辅助磨牙根管治疗的效果。方法:选择2020年1月—2023年6月收治的104例磨牙根管治疗患者,按照随机数字表法分为对照组与试验组,每组52例。对照组采用iRoot SP糊剂进行根管充填,试验组以双波长激光(Nd:YAG和Er:YAG)联合iRoot SP糊剂进行治疗。比较2组总有效率、疼痛程度及并发症,观察治疗前、治疗后6周及12周的血清白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素17(IL-17)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、出血指数(bleeding index,BI)、牙周探诊深度(depth of periodontal probing,PD)和临床附着水平(clinical attachment level,CAL)。采用SPSS 22.0软件包对数据进行统计学分析。结果:试验组总有效率显著高于对照组,根管填充后疼痛程度显著低于对照组(P<0.05);试验组治疗后6、12周的IL-6、IL-17、TNF-α、BI、PD和CAL显著低于对照组(P<0.05)。结论:双波长激光联合生物陶瓷材料iRoot SP辅助磨牙根管治疗效果较为理想,有利于减轻牙周炎症和疼痛程度。

牙体牙髓病根管治疗应用iRoot SP冷侧法的效果

目的探讨牙体牙髓病根管治疗应用iRoot SP冷侧法的效果。方法筛选2018-06至2020-06在解放军总医院京南医疗区就诊的牙体牙髓病患者100例,随机分为对照组和试验组,每组50例,均进行根管治疗,其中对照组充填根管采用热牙胶垂直加压法,试验组采用iRoot SP冷侧法。比较两组根管充填效果、临床总有效率、疼痛视觉模拟评分(VAS)及咀嚼功能。结果两组治疗后根管充填效果和临床总有效率比较,差异无统计学意义(P>0.05);试验组治疗后1周[(4.13±0.79)vs.(5.11±0.98)]及1个月[(2.45±0.37)vs.(3.11±0.67)]VAS评分低于对照组,治疗后咬合力[(131.25±11.21)lbs vs.(120.34±14.09)lbs]及咀嚼效率[(90.12±4.13)%vs.(78.98±7.45)%]均优于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论根管治疗牙体牙髓病中应用iRoot SP冷侧法的充填效果和疗效与热牙胶垂直加压法基本相同,但iRoot SP冷侧法在减轻患者疼痛,改善咀嚼功能方面更具优势。

基于针灸推拿专升本专业教学特点探讨PBL联合SP教学法在针灸临床学的应用

随着我国中医学的迅速发展,对高等医学的教育要求越来越高,各大高校也逐步认识到教学方法改革创新的必要性,我国的医学教育已经逐步将重点放到对学生职业素质和职业能力的培养之上。针灸推拿专升本专业学生学情分析有别于其他全日制本科生,生源的特殊性决定了其教学过程应有别于其他专业学生。针对针灸推拿专升本专业学生开设针灸临床学这门综合性和临床实践性较强的专业课程,用问题式学习(PBL)教学法提出问题,培养学生自主学习能力,并结合相关的学情分析,提高学生的学习主观能动性、培养学生的临床综合应用能力,以期培养真正的实用型人才;同时联合标准化病人(SP)教学法模拟问题,培养学生实际临证思辨能力,进而加强学生理论与临床的衔接能力,增强学生的针灸综合临证思辨能力及医患沟通能力等。

SPS烧结双主相Sm_(2)Co_(17)-Ce_(2)Co_(17)复合永磁体的微观组织

研究了放电等离子烧结(SPS)工艺和退火温度对双主相Sm_(2)Co_(17)-Ce_(2)Co_(17)复合永磁体微观组织的影响。结果表明:制备双主相Sm_(2)Co_(17)-Ce_(2)Co_(17)复合永磁体的最佳SPS工艺为:烧结温度750℃、压强64 MPa、烧结时间10 min,这样有利于减少稀土元素之间的扩散。退火可使烧结后磁体中存在的非晶相晶化。退火温度越高,双主相磁体中的稀土元素之间越容易相互扩散,Ce原子易扩散到Sm_(2)Co_(17)相中取代Sm原子,而Sm原子扩散到Ce_(2)Co_(17)相中取代Ce原子的机会就相对较少些,且在Sm_(2)Co_(17)相与Ce_(2)Co_(17)相的边界处形成一个过渡的富稀土区。

技术性贸易壁垒对我国农产品的出口影响分析——以SPS措施为例

入世23年以来,我国农产品出口规模持续扩大、出口品类日益丰富、出口结构日益完善。SPS措施因其设置和实施的隐蔽性及灵活性,被许多国家用来降低风险和防止其他国家农产品流入本国市场。我国对SPS措施认知尚浅,在农产品的检验检疫标准和品质上与发达国家存在差距,使得我国农产品在全球贸易竞争中处于不利地位。本研究采用2002—2022年我国向主要贸易伙伴国的农产品出口数据,实证评估SPS措施对我国农产品出口的影响。结果表明,虽然SPS措施在短期内会抑制我国农产品出口,但从长远看,SPS措施能倒逼农产品企业提高质量标准,有利于推动我国农产品出口贸易,并且这种正向作用是逐步深化的。基于此,为更好地推动我国农产品出口,政府需建立完善的SPS措施风险警示制度和严密的农产品质量安全规范体系,协助企业开拓新兴市场;行业协会需发挥监督指导作用,参与国际标准制定;农业企业应开展技术创新和品牌建设,获取国际认证。

iRoot SP单尖法根管充填对牙体牙髓病患者的疗效及对疼痛、炎症反应的影响

目的 探讨iRoot SP单尖法根管充填对牙体牙髓病患者的疗效及对疼痛、炎症反应的影响。方法 选取106例牙体牙髓病患者,随机均分为常规组和观察组。常规组采用AHplus根充糊剂填充治疗,观察组采用iRoot SP单尖法根管充填治疗,两组均治疗3个月。比较两组患者根管填充时间、恢复时间、临床疗效、疼痛、炎症反应白细胞介素-6(IL-6)、高敏C反应蛋白(hs-CRP)水平、并发症发生率。结果 观察组患者根管填充时间、恢复时间短于常规组(P<0.05)。观察组总有效率高于常规组(P<0.05)。术后,两组患者IL-6与hs-CRP水平较术前均上升,且观察组低于常规组(P<0.05),观察组疼痛感低于常规组(P<0.05)。观察组并发症发生率低于常规组(P<0.05)。结论 iRoot SP单尖法根管充填治疗牙体牙髓病,能够缩短患者填充时间、恢复时间,提高疗效,降低炎症反应,缓解患者的疼痛感,降低并发症发生率,具有一定的推广价值。

SPS监管差异对中国果蔬类农产品出口贸易的影响——基于农药最大残留限量标准视角

利用2022年中国对157个国家(地区)出口50种果蔬类农产品贸易数据,采用Heckman两阶段模型,基于农药最大残留限量(MRLs)视角,实证分析SPS监管差异对中国果蔬类农产品出口贸易的影响。结果表明:SPS监管差异抑制中国果蔬类农产品出口的二元边际,即贸易成本效应大于竞争优势效应,贸易成本效应抑制扩展边际和集约边际,而竞争优势效应仅促进集约边际;SPS监管差异对中国向发达国家出口以及对蔬菜农产品出口的抑制作用更大;杀菌剂监管差异对集约边际和扩展边际均具有抑制作用,而杀虫剂监管差异仅抑制集约边际。据此,提出对标国际高标准SPS措施、帮助中小型企业克服技术难关、宣传食品安全理念等政策建议。

PBL教学法联合SP在心胸外科住院医师规范化培训中的应用

目的评价以问题为导向的学习(problem-based learning,PBL)与标准化病人(standardized patients,SP)联合教学法在心胸外科住院医师规范化培训教学中的应用效果。方法将2021年6月-2023年6月80名在南京医科大学第一附属医院心胸外科参加住院医师规范化培训的住院医师随机分成2组,试验组采用PBL教学法联合SP,对照组采用传统教学法,通过理论、技能考试及问卷调查评估教学效果。结果试验组出科技能考试为(80.23±0.92)分,总成绩为(80.48±0.54)分均高于对照组[出科技能考试(75.33±0.54)分及总成绩(78.23±0.43)分],差异有统计学意义(P<0.001)。对2组住培医师进行个人综合能力提高自我评定问卷调查,在提高自主学习能力、提高医患沟通能力、提高临床思维及提高自我学习兴趣选项中,试验组选择是的人数分别为34(85.00%)、31(77.50%)、31(77.50%)、34(85.00%),对照组选择是的人数分别为26(65.00%)、16(40.00%)、18(45.00%)、19(47.50%),试验组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论PBL教学法联合SP在心胸外科住院医师规范化培训教学中更有利于提高教学效果并赢得了学生的认可。

SP结合Workshop教学法在针灸实训课中的应用

目的研究标准化病人(Standardized patient,SP)结合工作坊(Workshop)教学法在针灸实训课中的应用效果,探索更高效的教学方法。方法选择安徽中医药大学第二临床医学院实习生40名,随机分为SP结合Workshop教学组、传统教学模式(Lecture-based learning,LBL)组,各20名。分别进行授课后,采用理论考试、操作考试及不记名教学效果问卷调查进行评价并统计。结果SP结合Workshop教学组理论考试和病案分析题成绩均显著高于LBL组、对教学效果的评价显著优于LBL组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论SP结合Workshop教学法能更好地提高学生针刺操作的能力和学习兴趣、促进师生交流并提高学生学习能力,是一种更加高效的教学方法,为针灸学科实训课教学了提供新思路、新方法,便于推广应用。

退火对SP-700合金板材组织、织构和力学性能各向异性的影响

通过光学显微镜(OM)、电子背散衍射(EBSD)及单向拉伸测试等方法,研究了退火温度对SP-700合金板材微观组织、织构和力学性能各向异性的影响。结果表明:随退火温度的升高,SP-700合金板材的晶粒等轴化程度提高;当退火温度为780℃时,退火织构类型基本不变;当退火温度为860℃时,初生α相向次生α相的转变形成了新的织构;经900℃退火后,组织类型转变为网篮组织,织构类型为棱锥织构和R型织构。α相的棱锥织构取向是造成原始板材力学性能各向异性的原因;晶内亚结构在变形初期对滑移系的阻碍作用影响了板材在不同方向上的室温强度;随退火温度的升高,晶内亚结构的消除和新的织构取向的产生导致力学性能各向异性增强。此外,晶粒形貌和相含量的差异也会导致各向异性的变化。原始板材的断裂机制均为韧性断裂,且不同方向的断口特征略有不同。

iRoot SP配合单尖法根管充填治疗逆行性牙髓炎的效果分析

目的分析iRoot SP配合单尖法根管充填治疗逆行性牙髓炎的效果。方法前瞻性研究,选取2022年1月至2023年5月在福建省立医院口腔科治疗的逆行性牙髓炎患者120例作为研究对象,按照随机数字表法分为对照组和观察组,各60例。对照组男35例、女25例,年龄(58.65±4.89)岁,病程(4.12±1.36)年,以iRoot SP配合冷侧方加压法根管充填;观察组男32例、女28例,年龄(59.34±5.27)岁,病程(4.51±1.49)年,以iRoot SP配合单尖法根管充填。对比两组疗效、充填效果、牙周指数[牙周探诊深度(PD)、探诊出血指数(BOP)、牙齿松动度(TM)、临床附着水平(CAL)]及龈沟液炎性因子水平[超敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)]。统计学方法采用t检验、χ^(2)检验。结果观察组治疗总有效率为96.67%(58/60),高于对照组的86.67%(52/60),差异有统计学意义(χ^(2)=3.927,P<0.05)。观察组填充良好率为96.67%(58/60),高于对照组的75.00%(45/60),差异有统计学意义(χ^(2)=11.582,P<0.05)。治疗前,两组患者PD、BOP、TM、CAL及hs-CRP、TNF-α、IL-1β水平比较,差异均无统计学意义(均P>0.05);治疗后,观察组PD、BOP、TM、CAL及hs-CRP、TNF-α、IL-1β水平均低于对照组[(1.97±0.23)mm比(2.76±0.26)mm、(0.84±0.19)分比(1.31±0.23)分、(0.12±0.05)mm比(0.27±0.08)mm、(0.94±0.37)mm比(2.10±0.42)mm、(0.78±0.06)mg/L比(1.03±0.09)mg/L、(0.48±0.09)mg/L比(1.01±0.10)mg/L、(56.68±2.34)ng/L比(63.16±2.57)ng/L],差异均有统计学意义(t=17.628、12.203、12.316、16.053、17.903、30.515、14.441,均P<0.05)。结论iRoot SP配合单尖法根管充填治疗逆行性牙髓炎,根管封闭效果较好,可改善患者牙周状态及龈沟液炎性因子水平,整体疗效显著。

一株新型高效聚磷菌Glutamicibacter sp.G2的分离鉴定及除磷特性

聚磷菌(Phosphorus accumulating bacteria,PAOs)在生物除磷系统(EBPR)的强化过程中发挥着重要作用。挖掘新型高效聚磷菌并优化其除磷工艺,对于废水生物除磷技术的发展具有重大意义。文章通过富集驯化、分离纯化,结合MOPS蓝白斑(10×)初筛、Albert异染颗粒复筛等方法从某污水处理厂污泥样品中筛选出一株高效聚磷细菌G2,将其鉴定为盐生谷氨酸杆菌(Glutamicibacter halophytocola),并通过单因素试验探究pH、温度、接种量、初始磷含量,以及水体中的阳离子浓度对菌株G2生长及除磷的影响。实验结果表明,该菌株在初始磷浓度为30 mg/L、pH为8.0、8.0%接种量、32℃的条件下发酵72 h后,磷去除率可达78.79%。同时,添加2.0%的Mg^(2+)可以将菌株G2在人工合成废水中的除磷率提高17.50%。文章所筛选出的盐生谷氨酸杆菌G2在人工合成废水中表现出了良好的除磷效果,有望为废水生物除磷技术提供优质菌种资源。

汽轮机末级叶片用SP-700钛合金气体渗氮层结构和性能的研究

采用真空气体渗氮工艺在不同温度下对SP-700钛合金表面进行了渗氮强化。利用扫描电子显微镜、光学显微镜、显微维氏硬度仪、往复摩擦磨损试验仪、白光干涉三维表面轮廓仪和电化学工作站,分别测试了强化层的表面和截面形貌、硬度、耐磨性能和电化学腐蚀性能;通过浸泡腐蚀方法测定了涂层在HF溶液中的腐蚀行为。结果表明:渗氮温度对SP-700钛合金的微观形貌影响较大,随着温度的升高,试样表面氮化物数量增加,氮化物层更加致密;高温渗氮试样的硬度较基体提高了约1.9倍,相对耐磨性可达51.34;所有试样在3.5%NaCl溶液中均能自发钝化,有较好的耐电化学腐蚀性能;渗氮试样在HF腐蚀液中表现更优,渗氮温度越高,试样的耐腐蚀性能越好。

基于免疫组化SP法检测AEG-1在不同分化程度和分期的卵巢癌患者中的阳性表达及病理特点

目的探讨基于免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结(SP)法检测星形胶质细胞上调基因-1(AEG-1)在不同分化程度和分期的卵巢癌患者中的阳性表达及病理特点。方法选取2018年10月至2023年1月哈尔滨医科大学附属第三医院收治的97例卵巢癌患者作为研究对象,所有患者均行手术切除治疗,并经过病理检查确诊。采用免疫组化SP法检测卵巢病变组织肿瘤中的AEG-1表达情况,分析AEG-1阳性表达情况、染色强度评分、病理特点。结果染色强度评分为(3.14±0.76)分。卵巢癌组织中AEG-1阳性表达率为83.51%,AEG-1阳性信号未出现在肿瘤周边正常卵巢组织。黏液性卵巢癌和卵巢浆液性囊腺癌患者卵巢癌组织中AEG-1阳性表达率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。卵巢癌患者国际妇产科联盟(FIGO)各分期、淋巴结有无转移的阳性表达比较,差异具有统计学意义(P<0.05);卵巢癌患者年龄、各分化程度阳性表达率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论AEG-1会促进卵巢癌的发生、发展,其可用于判断卵巢癌的恶性程度、疾病进展情况。