AlkB同源蛋白5去除前mRNA加工因子6的mRNA甲基化修饰调控肝细胞癌的细胞增殖

目的探讨AlkB同源蛋白5(AlkBhomolog5,ALKBH5)在肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)的细胞增殖中的作用。方法通过癌症基因组图谱数据库分析ALKBH5和前mRNA加工因子6(pre-mRNA processing factor 6,PRPF6)在HCC组织中的表达水平。采用实时荧光定量聚合酶链反应和蛋白质印迹法检测ALKBH5和PRPF6在HCC细胞系(Huh7和Hep3B)中的mRNA和蛋白表达水平。荧光原位杂交确定ALKBH5和PRPF6在HCC细胞系(Huh7和Hep3B)中的亚细胞定位。在免疫沉淀复合物中检测PRPF6的N6-甲基腺苷甲基化水平。通过过表达和敲低基因表达的方法,将Huh7细胞和Hep3B细胞分别进行转染,分组为sh-NC组(阴性对照转染细胞)、sh-ALKBH5实验组(ALKBH5干扰序列转染细胞)、sh-ALKBH5+ex-PRPF6实验组(ALKBH5干扰序列转染+PRPF6 pcDNA 3.1过表达质粒转染细胞),并采用CCK-8和染色增殖试验检测各组细胞的增殖情况。裸鼠异种移植瘤实验验证ALKBH5和PRPF6在体内的生物学功能。蛋白质印迹法检测各组细胞中AKT/mTOR通路相关蛋白的表达水平。结果HCC细胞中ALKBH5的表达上调,可以去除PRPF6的甲基化修饰。体外和体内实验结果显示,ALKBH5可通过调节PRPF6的表达参与HCC细胞的恶性增殖。此外,敲低ALKBH5会抑制丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(serine-threonine kinase,AKT)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)的磷酸化,而PRPF6的过表达则有助于AKT和mTOR的磷酸化。结论ALKBH5能促进HCC细胞的增殖,相关机制是通过ALKBH5/PRPF6/AKT/mTOR轴实现的。

慢性束缚应激对小鼠海马N6-甲基腺苷及相关酶表达的影响

目的探讨慢性束缚应激对小鼠海马N6-甲基腺苷(m6A)及相关酶表达影响。方法将20只C57BL/6J雄鼠随机分成对照(control)组、慢性束缚应激模型(CRS)组;给予CRS组小鼠3周慢性束缚应激建立小鼠焦虑模型,采用旷场实验和高架十字迷宫实验检测各组小鼠焦虑样行为变化;采用免疫组织化学法和m6A RNA甲基化检测试剂盒检测小鼠海马m6A的表达变化;采用Western blotting和Real-time PCR方法分析海马m6A相关酶表达变化。结果1.小鼠焦虑相关行为学检测结果显示,与control组相比,CRS组小鼠在旷场内框停留时间明显下降(P<0.01);高架十字迷宫开放臂探索时间减少(P<0.0001);2.m6A RNA甲基化检测试剂盒检测结果显示,与control组相比,CRS组小鼠海马m6A含量明显减少(P<0.05);免疫组化结果显示,与control组相比,CRS组小鼠海马m6A阳性产物明显减少(P<0.001);3.PCR结果显示,与control组相比,CRS组小鼠海马去甲基化酶间变性淋巴瘤激酯B(AlkB)同源蛋白5(ALKBH5)(P<0.001)、脂肪和肥胖相关蛋白(FTO)表达显著上调(P<0.05);甲基化酶Wilms肿瘤蛋白1相关蛋白(WTAP)(P<0.05)表达显著下调;m6A甲基化结合蛋白YTH结构域家族蛋白3(YTHDF3)(P<0.05)和YTH结构域蛋白2(YTHDC2)(P<0.01)表达显著上调。Western blotting结果显示,与control组相比,CRS组小鼠海马去甲基化酶ALKBH5(P<0.05)、FTO(P<0.05)表达显著上调;甲基化酶WTAP(P<0.01)表达显著下调;m6A甲基化结合蛋白YTHDF3(P<0.01)和YTHDC2(P<0.05)表达显著上调。结论在慢性束缚应激所致小鼠焦虑与海马m6A表达下调有关,其机制可能与m6A甲基化酶WTAP表达下调或去甲基化酶ALKBH5和FTO表达上调相关。

CGRP通过ALKBH5/m6A抑制自噬促进缺氧/复氧心肌细胞增殖

目的探讨CGRP通过ALKBH5/m6A调控自噬对缺氧/复氧心肌细胞增殖和凋亡的影响。方法将心肌细胞H9c2随机分为Control组(H9c2细胞正常培养基培养)、H/R组(制备缺氧/复氧H9c2细胞损伤模型组)、CGRP组(缺氧/复氧模型前加入1×10^(-1)mol/L的CGRP作用20 min)和CGRP+sh-ALKBH5组(将sh-ALKBH5转染至H9c2细胞中,培养24 h后加入1×10^(-1)mol/L CGRP作用20 min,后制备缺氧/复氧模型)。采用CCK-8和EdU染色检测H9c2细胞活力;流式细胞仪检测细胞凋亡率;检测心肌细胞中乳酸脱氢酶(LDH)活性;Dot blot检测m6A甲基化水平;蛋白质印迹法和RT-PCR检测细胞中ALKBH5、Beclin-1、p62、LC3Ⅱ、LC3Ι蛋白和m RNA表达。结果与Control组比较,H/R组细胞存活率[(46.27±4.09)%]、EdU阳性细胞率[(3.89±0.87)%]明显降低,细胞凋亡率[(13.62±1.27)%]、LDH浓度(276.32±25.14)、m6A相对表达量(2.46±0.18)明显增加(P<0.05);与H/R组比较,CGRP组细胞存活率[(87.31±6.24)%]、EdU阳性细胞率[(40.71±2.53)%]均明显增加,细胞凋亡率[(3.17±0.82)%]、LDH浓度(78.24±7.19)、m6A相对表达量(1.42±0.13)明显降低(P<0.05);CGRP+sh-ALKBH5组细胞存活率[(61.04±5.48)%]、EdU阳性细胞率[(8.76±1.24)%]均明显低于CGRP组,细胞凋亡率[(10.19±0.95)%]、LDH浓度(229.06±22.43)、m6A相对表达量(2.09±0.15)明显高于CGRP组(P<0.05)。与Control组比较,H/R组细胞中ALKBH5(0.34±0.03)、p62蛋白(0.32±0.04)和mRNA表达(0.21±0.04)明显降低,Beclin-1蛋白(0.97±0.13)及mRNA表达(2.14±0.17)和LC3Ⅱ/LC3Ι比值(0.64±0.08)明显升高(P<0.05);与H/R组比较,CGRP组细胞中ALKBH5(0.78±0.09)、p62蛋白(0.71±0.08)和m RNA(0.87±0.08)表达明显增加,Beclin-1蛋白(0.41±0.06)及mRNA表达(1.26±0.12)和LC3Ⅱ/LC3Ι比值(0.23±0.03)明显降低(P<0.05);与CGRP组比较,CGRP+sh-ALKBH5组细胞中ALKBH5(0.50±0.07)、p62蛋白(0.40±0.05)和mRNA表达(0.30±0.05)明显降低,Beclin-1蛋白(0.86±0.10)及mRNA表达(1.95±0.14)和LC3Ⅱ/LC3Ι比值(0.58±0.06)明显升高(P<0.05)。结论CGRP可能通过促进m6A去甲基酶ALKBH5的表达来发挥作用,抑制心肌细胞在缺氧/复氧条件下的自噬和凋亡,从而提高心肌细胞的存活率。

N^(6)-甲基腺嘌呤去甲基化酶抑制剂研究进展

N^(6)-甲基腺嘌呤(N6-methyladenine,m^(6)A)修饰作为信使RNA中广泛存在的一种甲基化修饰,它的动态变化在生命活动和疾病的发生发展中发挥着重要的作用。近年来研究发现,通过改变靶基因的m6A修饰水平可以调控肿瘤的进展,因此,通过小分子靶向干预m^(6)A去甲基化酶可作为抗肿瘤的新策略。本文重点讨论了m^(6)A去甲基化酶,包括脂肪含量与肥胖相关蛋白(fat mass and obesity-associated protein,FTO)和AlkB同源蛋白5(AlkB homlog5,ALKBH5)的作用方式以及它们在肿瘤中发挥的生物学功能,并总结了m^(6)A去甲基化酶小分子抑制剂的研究进展。

核糖体18S rRNA m^(6)A甲基转移酶METTL5的研究进展

N^(6)-甲基腺嘌呤(N^(6)-methyladenosine,m^(6)A)即在腺苷酸的第6位氮原子处发生甲基化,是真核生物核糖核酸(ribonucleic acid,RNA)普遍的表观遗传修饰之一,存在于多种类型的RNA分子上,参与生物发生、稳定性调节、半衰期控制和前体信使RNA(messenger RNA,mRNA)剪接、输出及翻译等诸多关键细胞过程。m^(6)A甲基化修饰是一种动态可逆的过程,涉及到甲基化、去甲基化和甲基化修饰位点的识别,分别由m^(6)A甲基转移酶、m^(6)A去甲基化酶和m^(6)A甲基化阅读蛋白介导[1-3]。

m^(6)A去甲基化酶在胃癌发生发展中的作用机制研究进展

胃癌是消化系统最常见的恶性肿瘤之一,多数患者发现时已处于晚期,预后不佳。外科手术及化学治疗(化疗仍是目前胃癌的主要治疗方式。N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m^(6)A)是近年来肿瘤研究的热点。m^(6)A作为真核生物中最常见的RNA修饰形式,可以调控RNA循环的各个阶段,包括RNA剪接、加工、降解和翻译等,从而调控RNA的表达和功能,在细胞分化、发育和代谢等各个环节中发挥关键作用。m^(6)A去甲基化酶可去除RNA上的甲基基团,确保m^(6)A甲基化是一个动态的可逆的过程。作为m^(6)A甲基化过程的关键酶,m^(6)A去甲基化酶——脂肪和肥胖相关蛋白(fat mass and obesity-associated protein,FTO)、AlkB同系物5(AlkB homolog 5,ALKBH5)、ALKBH3的失调能通过多种机制调控胃癌的演进过程,与胃癌的发生发展密切相关。m^(6)A去甲基化酶通过调节信号通路,改变胃癌细胞的增殖和侵袭能力,影响胃癌对化疗药物的耐药性,参与调控胃癌的免疫应答及线粒体代谢,从而影响胃癌细胞的生长,有望成为一个全新的治疗靶点。该文综述了m^(6)A去甲基化酶参与胃癌发生发展的分子机制,以及其表达和功能与胃癌生物学特性的关系,旨在为胃癌的早期诊断和靶向治疗提供新的研究思路。

烷基化修复蛋白B同源物5调控果蝇Zeste基因增强子人类同源物2对K562/阿霉素细胞耐药的影响

目的探讨烷基化修复蛋白B同源物5(ALKBH5)对K562/阿霉素(ADM)细胞耐药的影响及其作用机制。方法以人白血病细胞系K562和ADM抗性细胞K562/ADM细胞为研究对象,利用Lipofectamine;2000将K562/ADM细胞分为对照组、si-NC组、si-ALKBH5-1组、si-ALKBH5-2组、空载体组(转染pcDNA3.1)、ALKBH5-WT组(转染pcDNA3.1-ALKBH5-WT)、ALKBH5-MUT组(转染pcDNA3.1-ALKBH5-MUT)、si-ALKBH5-2+空载体组、si-ALKBH5-2+pcDNA3.1-EZH2组。采用比色法检测细胞中N6-甲基腺苷(m6A)含量;采用CCK-8法检测细胞的半数抑制浓度(IC_(50));采用荧光光度计法检测ADM外排;采用Western blot检测细胞中ALKBH5、果蝇Zeste基因增强子人类同源物2(EZH2)、P糖蛋白(P-gp)、多药耐药基因1(MDR1)的蛋白表达;采用RNA免疫共沉淀(RIP)实验验证ALKBH5与EZH2 mRNA的相互作用;采用甲基化RNA免疫共沉淀(MeRIP)检测EZH2 m6A水平。结果与K562细胞比较,K562/ADM细胞对ADM的耐药性及细胞中ALKBH5蛋白表达水平升高,m6A含量降低,差异有统计学意义(P<0.01);沉默ALKBH5可增加K562/ADM细胞中m6A含量,过表达野生型ALKBH5可减少m6A含量,而过表达突变型ALKBH5(H204A)对m6A含量无明显影响。与对照组、si-NC组比较,si-ALKBH5-1组、si-ALKBH5-2组细胞在450 nm处的光密度值(OD_(450nm)值)、P-gp、MDR1蛋白表达水平降低,细胞内荧光强度升高,差异有统计学意义(P<0.05)。在K562/ADM细胞中,ALKBH5蛋白能与EZH2 mRNA相互作用;沉默ALKBH5可上调K562/ADM细胞中EZH2 m6A水平,下调EZH2蛋白表达水平,过表达野生型ALKBH5则呈相反趋势;EZH2过表达逆转了沉默ALKBH5对K562/ADM细胞活力及耐药性的影响。结论沉默ALKBH5通过促进EZH2的甲基化来下调EZH2的表达,进而降低K562/ADM的耐药性。

提高m^(6)A去甲基化酶FTO表达抑制鼻咽癌细胞增殖

目的探究N6-甲基腺嘌呤(m^(6)A)去甲基化酶人类脂肪和肥胖相关(FTO)蛋白在鼻咽癌(NPC)中的表达水平,以及过表达FTO对鼻咽癌体内外增殖的影响。方法用免疫组织化学检测鼻咽癌组织及癌旁组织中FTO蛋白的表达;筛选FTO的优势表达细胞株,构建过表达FTO细胞株,用软琼脂增殖实验验证;建立小鼠成瘤模型,测量肿瘤的生长速度。结果发现FTO在鼻咽癌组织中较癌旁组织低表达。FTO低表达促进了鼻咽癌细胞的增殖,而过表达FTO则可逆转这种作用。结论FTO抑制鼻咽癌细胞的增殖过程,可为寻找鼻咽癌的治疗靶点提供实验依据,FTO可能成为未来NPC的治疗靶点。

ALKBH5及其在肿瘤发生发展中作用的研究进展

ALKBH5(AlkB homolog 5)是m 6A去甲基转移酶蛋白,能去除RNA上的腺嘌呤(A)第6号位氮原子的甲基化。随着科技的进展,越来越多的研究表明,ALKBH5介导的m 6A去甲基化修饰在肿瘤的发生发展中起着重要作用。该文主要介绍了ALKBH5的结构,与其作为癌基因与抑癌基因在各种肿瘤发生发展中所起到的作用,以及ALKBH5表达及功能的调控,旨在为基础及临床医学中对m 6A修饰的研究提供新的研究思路和治疗靶点。

RNA去甲基化酶ALKBH5对生物学功能调控作用的研究进展

N^(6)-甲基腺嘌呤(N^(6)-methyladenosine, m^(6)A)是真核生物RNA最常见的一种转录后修饰,主要影响信使RNA(messenger RNA, mRNA)的可变剪接、翻译效率和稳定性等。研究发现,RNA去甲基化酶AlkB同源物5(human Alk B homolog 5, ALKBH5)是影响m;A修饰水平至关重要的酶,在精子形成、大脑发育,肿瘤发生等生命过程起着重要作用。现就ALKBH5的生物学功能调控作用进行综述,旨在为疾病的发生、发展机制和治疗寻找新方向。

m6A去甲基化酶ALKBH5对小鼠精原细胞功能的影响

目的探究N6-甲基腺嘌呤(m6A)去甲基化酶ALKBH5对小鼠精原细胞(GC-1)功能的影响。方法在GC-1细胞中敲除和过表达ALKBH5,LC-MS/MS检测敲除和过表达细胞的m6A含量,qPCR检测精子功能相关基因(CRISP2、DEFB1)表达水平。结果在GC-1细胞中成功敲除和过表达ALKBH5,ALKBH5敲除细胞m6A水平升高,CRISP2、DEFB1表达水平降低;ALKBH5过表达细胞m6A水平减低,CRISP2、DEFB1表达水平升高。结论ALKBH5促进m6A去甲基化,影响精子功能相关基因的表达,从而可能进一步影响精原细胞的功能。

m^(6)A去甲基化酶ALKBH5与肿瘤发生、发展的研究进展

N^(6)-甲基腺嘌呤(m^(6)A)修饰是指在腺苷酸6位的N原子上插入一个甲基取代基。m^(6)A修饰在甲基转移酶、去甲基化酶和解读器蛋白共同调控下完成,其修饰调控紊乱可影响基因的表达,进而通过调节肿瘤生物学过程(如增殖、迁移、侵袭、转移)在多种肿瘤中发挥重要作用。ALKB同系物5作为m^(6)A修饰中的一种重要去甲基化酶,在不同肿瘤中的表达水平、目标基因以及发挥的作用均不同,且其作用机制尚未明确,未来仍需进一步阐明其具体机制,进而为肿瘤的分子靶向治疗提供新线索。

mRNA N6⁃甲基腺苷甲基化在帕金森病患者血液中的变化

目的探究帕金森病(PD)患者血液中mRNAN6⁃甲基腺苷(m6A)甲基化水平以及相关的甲基转移酶[甲基转移酶样蛋白14(METTL14)]和去甲基化酶[脂肪与肥胖相关基因蛋白(FTO)、AlkB同源蛋白5(ALKBH5)]的变化情况。方法连续性收集2020年1月至2021年6月在该院神经内科门诊及住院就诊的PD患者(PD组,50例)以及健康对照人群(对照组,50例)。通过酶联免疫吸附测定(ELISA)、蛋白质印迹(WB)、实时定量PCR(QPCR)、m6A甲基化定量等实验,检测两组血浆及外周单个核细胞(PBMC)的METTL14、FTO、ALKBH5及m6A水平。结果与对照组比较,血浆中PD组的METTL14、FTO、ALKBH5蛋白水平较低,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,外周单个核细胞(PBMC)中PD组的METTL14、FTO、ALKBH5蛋白条带灰度值较低,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组比较,PBMC的mRNA中PD组的METTL14、FTO、ALKBH5表达水平较低,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,PBMC的mRNA中PD组的m6A水平较低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在PD患者血浆和PBMC中MET⁃TL14、FTO、ALKBH5和m6A甲基化水平均有不同程度的下降,表明mRNAm6A甲基化与PD的发生发展存在一定的联系。

m^(6)A甲基化修饰在肿瘤中作用的研究进展

RNA的表观遗传修饰在恶性肿瘤中发挥着重要的调控作用,因此受到人们的广泛关注。N6-甲基腺嘌呤是发生于腺苷N6位上的甲基化修饰,是真核细胞信使RNA上主要的表观遗传修饰。m^(6)A甲基化修饰由m^(6)A甲基转移酶催化,其核心组分包括METTL3、METTL14;由m^(6)A去甲基化酶去除,包括FTO、ALKBH5;并被m^(6)A甲基识别蛋白识别,包括YTHDF1-3、IGF2BP1-3等。m^(6)A甲基化修饰参与RNA代谢的各个阶段,包括:稳定、剪接、出核、翻译和降解等。m^(6)A相关调节蛋白能够通过多种机制调控肿瘤的发生发展:影响m^(6)A甲基化修饰水平,进而在肿瘤细胞增殖、侵袭转移及耐药等过程中发挥重要作用。目前为止,m^(6)A甲基化修饰在人类肿瘤中的作用机制尚未完全阐明。本文概述了m^(6)A修饰的基本功能,并重点介绍其在肿瘤中的作用机制,最后讨论针对肿瘤中m^(6)A修饰的治疗策略。

m^6 A RNA甲基化修饰异常在肿瘤中的作用

N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m6A)是真核生物信使RNA(messenger RNA,mRNA)含量最多的化学修饰之一。m6A修饰主要由m6A甲基转移酶(methyltransferase)催化,m6A去甲基酶(demethylase)去除,并由m6A结合蛋白(binding protein)识别。它广泛参与调控mRNA剪接、加工、翻译和降解等生命周期的各个阶段,且与肥胖和肿瘤等多种疾病及异常的生理功能相关。近年的研究发现,肿瘤中m6A相关蛋白质(METTL3/14、WTAP、FTO、ALKBH5、YTHDFs)的异常表达,引发m6A甲基化的失调,调控致癌基因和抑癌基因的表达参与肿瘤的发生与发展,并与患者预后不良密切相关。随着RNA免疫沉淀测序技术与高通量测序技术和液相色谱等检测技术的快速发展,有关m6A在肿瘤发生发展中的作用机制研究的进展迅猛,靶向m6A也成为肿瘤临床治疗的新方向。本文重点对m6A RNA甲基化相关因子在癌症发生发展中的作用及机制进行综述,总结m6A RNA甲基化检测技术的最新进展,梳理现有文献报道的脱甲基酶抑制剂大黄酸、甲氯芬那酸2(meclofenamic acid2,MA2)和右旋羟戊二酸(R-2-hydroxyglutarate,R-2HG)等在肿瘤靶向治疗中的运用,为以m6A RNA甲基化为切入点的肿瘤防治研究提供思路与理论参考。

敲低m6A甲基转移酶WTAP对皮肤鳞癌细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响

目的通过敲低N6-甲基腺嘌呤(m6A)甲基转移酶Wilms肿瘤蛋白1相关蛋白(WTAP)在皮肤鳞癌(cSCC)细胞中的表达,探讨WTAP对cSCC细胞增殖,迁移和侵袭能力的影响。方法选取人cSCC细胞A431、SCL-1及正常人表皮角质形成细胞HaCaT,Western blotting法及qRT-PCR法分别检测各细胞中WTAP蛋白及mRNA表达。选取WTAP蛋白及mRNA表达最高的A431细胞转染WTAP敲低慢病毒shWTAP-1、shWTAP-2、shWTAP-3及阴性对照慢病毒shNC,使用qRT-PCR与Western blotting验证转染效率。选取敲低差异最显著的shWTAP-3转染细胞作为WTAP敲低组,shNC转染细胞作为对照组。采用比色法检测细胞m6A表达,CCK-8法及克隆形成实验检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力,细胞划痕实验检测细胞迁移能力。结果WTAP敲低组m6A表达低于对照组,各时点细胞OD值均低于对照组,克隆形成数少于对照组,穿膜细胞数、细胞迁移率低于对照组(P均<0.05)。结论敲低WTAP可抑制cSCC细胞的增殖、侵袭和迁移,该作用可能通过下调m6A表达来实现。

直肠癌组织中YTHDF2、lncRNA TUSC7表达与上皮间质转化的关系及预后意义

目的研究直肠癌组织中YTH结构域N6-甲基腺嘌呤RNA结合蛋白2(YTHDF2)、长链非编码RNA抑癌候选基因7(lncRNA TUSC7)表达与上皮间质转化(EMT)的关系及临床预后意义。方法选取该院自2018年5月至2020年5月诊治的98例直肠癌患者。采用实时荧光定量PCR检测直肠癌组织和癌旁组织中YTHDF2、lncRNA TUSC7表达及EMT相关指标β-连环素(β-catenin)、E-钙黏蛋白(E-cad)、N-钙黏蛋白(N-cad)mRNA的表达。采用Pearson法分析YTHDF2 mRNA、lncRNA TUSC7与EMT相关指标的相关性。采用Kaplan-Meier曲线分析YTHDF2、lncRNA TUSC7表达对直肠癌无瘤生存预后的影响。采用多因素COX回归分析直肠癌无瘤生存预后的影响因素。结果直肠癌组织中YTHDF2、β-catenin、N-cad mRNA相对表达水平高于癌旁组织,而lncRNA TUSC7、E-cad mRNA相对表达水平低于癌旁组织(均P<0.05)。直肠癌组织中YTHDF2 mRNA与β-catenin、N-cad mRNA表达呈正相关(均P<0.05),与E-cad mRNA表达呈负相关(均P<0.05);lncRNA TUSC7与β-catenin、N-cad mRNA表达呈负相关(均P<0.05),与E-cad mRNA表达呈正相关(均P<0.05)。直肠癌组织中YTHDF2 mRNA与lncRNA TUSC7表达呈负相关(P<0.05)。直肠癌组织中YTHDF2 mRNA、lncRNA TUSC7与TNM分期Ⅲ期、肿瘤分化程度及淋巴结转移有关(均P<0.05)。YTHDF2高、低表达组3年无瘤生存率分别为59.57%(28/47)、88.24%(45/51)。lncRNA TUSC7高、低表达组3年无瘤生存率分别为88.00%(44/50)、60.42%(29/48)。YTHDF2高表达组3年累积无瘤生存率低于YTHDF2低表达组(Log Rankχ^(2)=11.370,P=0.001)。lncRNA TUSC7高表达组3年累积无瘤生存率高于lncRNA TUSC7低表达组(Log Rankχ^(2)=11.880,P=0.001)。TNM分期Ⅲ期、低分化程度、合并淋巴结转移、YTHDF2高表达、lncRNA TUSC7低表达是直肠癌患者无瘤生存预后的独立危险因素(均P<0.05)。结论直肠癌组织中YTHDF2表达上调,lncRNA TUSC7表达下调,二者与不良临床病理特征及EMT有关,是新的评估直肠癌患者预后的标志物。

m6A修饰的LncRNA SLC7A11-AS1调控YAP1参与口腔鳞癌细胞侵袭迁移

目的探讨N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m6A)修饰的LncRNA SLC7A11-AS1调控YAP1参与口腔鳞癌(OSCC)细胞侵袭与迁移的作用机制。方法生物信息学工具预测METTL3/LncRNA SLC7A11-AS1/YAP1轴的作用关系,并借助RNA pull-down实验与RIP实验进行验证。检测细胞中m6A、METTL3、LncRNA SLC7A11-AS1、YAP1的表达水平。将细胞分为si-NC、si-SLC7A11-AS1、si-SLC7A11-AS1+pcDNA、si-SLC7A11-AS1+pcDNAYAP1组。借助划痕愈合实验与Transwell实验评估细胞迁移与侵袭能力。结果 OSCC细胞中LncRNA SLC7A11-AS1表达上调(P<0.05);敲减LncRNA SLC7A11-AS1抑制了OSCC细胞的迁移与侵袭(均P<0.05);LncRNA SLC7A11-AS1正向调控YAP1,过表达YAP1部分抵消si-LncRNA SLC7A11-AS1对细胞迁移与侵袭的作用(均P<0.05);m6A相关蛋白METTL3可促进LncRNA SLC7A11-AS1在OSCC中的表达。结论 m6A修饰的LncRNA SLC7A11-AS1在OSCC中过表达,并且通过上调YAP1促进OSCC细胞的迁移与侵袭。

FTO调控PYCR1-RNA-m^(6)A促进膀胱癌发生发展的研究进展

膀胱癌(BLCA)是泌尿生殖系统最常见的恶性肿瘤之一。肥胖相关蛋白(FTO)通过m^(6)A依赖性的去甲基化酶活性广泛参与脂肪形成和肿瘤的发生过程,影响了包括吡咯啉-5-羧酸还原酶(PYCR1)等多个mRNA的转录后修饰,进而导致BLCA的发生发展。本文对FTO调控PYCR1-RNA-m^(6)A促进BLCA发生发展的机制进行详细的总结综述,为后续深入阐明BLCA发生发展的分子机制和临床诊疗提供重要参考。

RNA甲基化修饰N6-甲基腺嘌呤在人实体瘤中的研究进展

最新研究表明,N6-甲基腺嘌呤(m6A)是高等真核生物中RNA最常见的内部修饰之一,为动态可逆的过程,需要甲基转移酶样3/14(METTL3/14)、去甲基化酶肥胖相关蛋白(FTO)/Alk B同源蛋白5(ALKBH5)和甲基化结合蛋白YTH家族蛋白等参与.RNA的m6A修饰可通过影响RNA降解、微小RNA(miRNA,miR)加工和翻译等过程,进而调节下游靶基因的表达.而且在人类基因组中广泛存在的m6A修饰可影响恶性肿瘤的发生发展,本文将针对人实体瘤中m6A的表达水平及作用机制展开论述,以期为阐明肿瘤发生机制、探索新的潜在的治疗方式提供依据.