变应性鼻炎相关动物模型研究进展

目的综述变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)相关动物模型的研究进展,为深入研究AR的发病机制及药物评价提供参考。方法通过对国内外文献的查阅,从AR模型动物的种类、特点、模型种类、建模方法、模型成功的标准和评价指标等方面进行总结。结果变应性鼻炎相关动物模型包括西医病理模型和中医病症结合模型,动物选择多使用豚鼠、小鼠、大鼠、新西兰兔等。结论总结已有AR动物模型的种类、方法和评价指标以及在AR发病机制研究中的应用,可为后续AR的深入研究提供参考。

大鼠过敏性鼻炎模型建立及应用

目的 :建立一种能简单而又客观反映过敏性鼻炎临床症状及评价药效的动物模型。方法 :采用卵白蛋白对大鼠的全身致敏和局部攻击的方式制作过敏性鼻炎模型 ,通过 PCA反应测定 Ig E抗体效价 ,证实是否被致敏。结果 :过敏性鼻炎的打喷嚏数、搔鼻次数在抗原致敏第 1 4 d开始明显增加 ,同时血中 Ig E抗体效价明显上升。酮替芬和阿司咪唑可分别浓度依赖 ,并显著地减少由抗原攻击引起的打喷嚏数和搔鼻次数。证明酮替芬和阿司咪唑均可明显抑制过敏性鼻炎症状。结论 :该模型适合于评价和筛选治疗 型过敏性鼻炎的药物。

变应性鼻炎大鼠模型的建立

目的:建立变应性鼻炎(AR)Wistar大鼠模型,探讨呼吸道变应性炎症的发病机制,为临床治疗AR提供实验依据。方法:将30只Wistar大鼠随机分成模型组、正常组和地塞米松(DEX)组,每组10只。模型组大鼠经腹腔注射卵清蛋白(OVA)变应原,鼻腔滴入OVA鼻内激发;正常组大鼠以生理盐水替代OVA;DEX组大鼠激发成AR后再用DEX(0.2mL.kg-1)后肢肌肉注射,观察大鼠行为学症状;采用HE染色和免疫组织化学染色法检测大鼠鼻黏膜组织学变化、嗜酸性粒细胞计数及其鼻黏膜免疫球蛋白E(IgE)的吸光度(A)值。结果:模型组大鼠均出现鼻痒、喷嚏和流清涕等AR的临床特征,大鼠鼻黏膜可见大量的嗜酸性粒细胞、淋巴细胞浸润,黏膜水肿增厚、腺体增生、分泌旺盛和鼻黏膜表面纤毛破坏等组织形态学变化。正常组大鼠仅轻度抓鼻,且喷嚏少。DEX组Wistar大鼠小血管无明显扩张,黏膜厚度较模型组明显降低,炎性细胞浸润程度减轻。模型组和DEX组大鼠嗜酸性粒细胞计数及其A值均高于正常组(P<0.05),DEX组大鼠鼻黏膜中嗜酸性粒细胞计数及A值均低于模型组(P<0.05)。结论:成功建立OVA变应原致敏的AR Wistar大鼠模型。

鹅不食草挥发油治疗过敏性鼻炎作用机理的研究

目的:探讨鹅不食草治疗过敏性鼻炎的作用机理。方法:运用豚草花粉过敏原建立豚鼠过敏性鼻炎的动物模型,通过提取鹅不食草的有效成分,对过敏性鼻炎进行治疗,观察豚鼠鼻黏膜组织形态学的动态病理变化。结果:过敏性鼻炎阳性对照组鼻黏膜上皮组织充血、水肿,炎性细胞浸润,可见大量中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞以及肥大细胞,鼻黏膜上皮细胞出现大量溶酶体、细胞器空泡化、细胞核变形,固有层结缔组织细胞结构紊乱,细胞器呈碎片状。而鹅不食草挥发油治疗组上述变化明显减轻至接近阴性对照组。结论:鹅不食草挥发油对过敏性鼻炎有明显治疗效果。

玉屏风散对过敏性鼻炎动物模型的Th1/Th2影响

目的:本研究通过玉屏风散治疗对卵白蛋白(OVA)致敏和激发的过敏性鼻炎小鼠模型,了解其对Th1和Th2及其平衡的影响。方法:8周龄Balb/c小鼠经OVA全身和鼻部局部致敏激发制作过敏性鼻炎小鼠动物模型,早期干预组和治疗组分别给予玉屏风散提取物2,500 mg/kg,7天后采用流式细胞术分别检测脾脏Th1和Th2细胞以及鼻部病理改变。结果:动物模型组Th2细胞表达显著增高(9.86±1.40);玉屏风散治疗组Th2表达显著下降(3.41±0.72,P<0.01);中药干预组也可保护OVA诱导的Th2细胞早期表达增高(6.27±1.21,P<0.05)。本研究表明玉屏风散可抑制Th2介导的上气道非特异性炎症反应(F=30.53,P<0.0001)。结论:本研究证明玉屏风散对Th2介导的上气道非特异性炎症反应有治疗作用,该方剂能提高Th1/Th2比值和抑制Th2细胞的过度表达。

实验性变应性鼻炎鼠类模型的建立

目的:建立稳定的实验性变应性鼻炎(AR)鼠类模型。方法:将NIH小鼠和SD大鼠雌雄各60只,随机分为实验组(n=60)和对照组(n=60)。实验组经腹腔隔日1次注射卵清蛋白(OVA)变应原7次后,鼻腔滴入 OVA鼻内激发;对照组以生理盐水替代OVA。结果:实验组均出现鼻痒、喷嚏、流清涕等变应性鼻炎的临床特征 (评分>5分),鼻粘膜和肺组织见大量的嗜酸性粒细胞浸润,粘膜水肿、腺体增生且鼻粘膜表面纤毛破坏等组织形态学变化。对照组均无上述变化。结论:本实验成功建立OVA变应原致敏的变应性鼻炎鼠类模型,具有操作简单、重复性好的优点,为今后变应性鼻炎的诊断、治疗及研究工作提供了有效的方法及组织形态学依据。

变应性鼻炎大鼠模型建造

目的建立稳定的实验性变应性鼻炎(AR)SD大鼠模型。方法将SD大鼠雌雄各60只,随机分为实验组(n=60)和对照组(n=60)。实验组经腹腔隔日1次注射卵清蛋白(OVA)变应原7次后,鼻腔滴入OVA鼻内激发;对照组以生理盐水替代OVA。结果实验组SD大鼠均出现鼻痒、喷嚏、流清涕等变应性鼻炎的临床特征(评分>5分),鼻黏膜见大量的嗜酸性粒细胞、淋巴细胞浸润,粘膜水肿增厚、腺体增生、分泌旺盛,鼻黏膜表面纤毛破坏等组织形态学变化。对照组SD大鼠仅轻度抓鼻,且喷嚏少(评分<5分),鼻黏膜组织形态学均无实验组上述变化。结论本实验成功建立OVA变应原致敏的变应性鼻炎鼠类模型,具有操作简单、重复性好的优点,为今后变应性鼻炎的病变研究提供了有效的方法及组织形态学依据。

穴位敷贴对过敏性鼻炎小鼠血细胞分类和血清SIgE的影响

【目的】观察穴位敷贴对过敏性鼻炎模型小鼠外周血嗜酸性粒细胞(EOS)和血清卵白蛋白(OVA)特异性IgE(SIgE)的影响。【方法】选用BALB/C小鼠60只,随机分成5组:正常对照组、模型组、穴位敷贴组、激素阳性对照组(激素组)和磷酸盐缓冲液(PBS)阴性对照组(PBS组);除正常对照组以外,其他组均采用OVA致敏及攻击方法复制过敏性鼻炎模型,穴位敷贴组以中药(白芥子、玄胡、细辛、甘遂、苍耳子)敷贴大椎穴,激素组以100mg/L地塞米松腹腔注射,PBS组采用大椎穴假治疗同时腹腔注射PBS。以苏木素—伊红(HE)染色检测各组小鼠外周血EOS计数及百分率,酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组小鼠血清SIgE水平。【结果】模型组小鼠外周血EOS计数与百分率、血清SIgE水平均显著性升高(P<0.05或P<0.01);穴位敷贴组和激素组的治疗均可显著性降低模型小鼠EOS计数与百分率及SIgE水平(P<0.05),两治疗组作用相仿(P>0.05)。【结论】穴位敷贴治疗过敏性鼻炎的作用可能与其能降低外周血EOS计数及血清SIgE水平有关。

卵白蛋白诱发变应性鼻炎豚鼠模型的特点及鉴定

目的:建立卵白蛋白(ovalbumin,OVA)诱发的变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)豚鼠模型,观察其临床症状、病理学和免疫炎症反应有关指标的变化特点。方法:实验豚鼠分为正常组和模型组。模型组动物经腹腔注射0.8ml的OVA混悬液进行全身致敏,并经双侧鼻腔按每侧20μl的OVA生理盐水溶液(60mg/ml)滴鼻进行局部致敏,致敏期限为21d;间隔1周后,以OVA生理盐水溶液(60mg/ml)滴鼻激发,每天1次,连续7d,而后改为两天1次,连续14d,剂量均为50μl/kg。正常组动物以生理盐水代替OVA悬液或OVA生理盐水溶液,用法用量与模型组相同。激发阶段,动态观察各组豚鼠喷嚏、抓鼻、眼泪、鼻涕及呼吸困难症状变化;激发期结束,动物取血制备血清用于IgE含量检测,剥取鼻黏膜用于组织病理学观察及组胺含量测定。结果:与正常组比较,模型组豚鼠出现典型的变应性鼻炎症状,喷嚏数增加并伴有严重抓鼻现象,血清IgE及鼻黏膜组胺含量均明显升高(P<0.01);鼻黏膜组织出现嗜酸粒细胞浸润、血管扩张及上皮脱落等典型的炎性病理变化。结论:OVA诱发的变应性鼻炎豚鼠模型,可较好模拟人类变应性鼻炎的临床特征,该模型是研究变应性鼻炎机制及治疗药物的良好模型。

变应性鼻炎小鼠模型鼻黏膜组织重塑和转录因子T-bet/GATA-3的表达

【目的】建立变应性鼻炎小鼠模型,了解鼻黏膜组织重塑情况,探讨核因子T-bet/GATA-3比值在变应性鼻炎免疫失衡中的意义。【方法】建立卵清蛋白(OVA)诱导的变应性鼻炎小鼠模型;20只BALB/c小鼠随机分为正常组和实验组。HE染色观察呼吸道黏膜炎症变化;ELISA法(酶联免疫吸附法)检测血浆中白细胞介素4(IL-4)和干扰素γ(IFN-γ)的水平;Western blot法检测T-bet、GATA-3蛋白在鼻黏膜组织的表达。【结果】变应性鼻炎小鼠鼻和支气管黏膜均存在组织重塑。与正常组相比,实验组鼻黏膜出现上皮脱落,杯状细胞增生,鳞状上皮组织转化,上皮坏死,固有层和黏膜下层腺体增生,血管扩张,组织水肿,并见特征性的嗜酸性粒细胞浸润。实验组血浆中IL-4和IFN-γ的水平分别是(16.5±4.1)pg/mL和(6.5±1.1)pg/mL,而对照组分别是(7.3±1.7)pg/mL,和(11.4±3.3)pg/mL;实验组血浆中IL-4的含量明显高于对照组,差异具有显著性(P<0.05),而IFN-γ的量低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。对照组鼻黏膜T-bet/GATA-3蛋白表达量的比值(0.62±0.17),明显高于实验组(0.12±0.03;P<0.05)。【结论】变应性鼻炎小鼠模型鼻黏膜存在组织重塑,可能与转录因子T-bet/GATA-3表达失衡导致下游Th1/Th2细胞免疫失衡和细胞因子IL-4/IFN-γ分泌失调有关。

补中益气汤对脾虚型变应性鼻炎的治疗作用

目的探讨补中益气汤对脾虚型变应性鼻炎(AR)豚鼠模型的影响。方法将花色豚鼠随机分为AR(A)组、AR+脾气虚(B)组、补中益气汤(C)组和空白对照(D)组。各组用卵清蛋白(D组用生理盐水代替)行基础致敏,结束后行PCA试验,确定卵清蛋白IgE抗体效价升高后,以卵清蛋白滴入鼻腔行局部致敏(D组滴入生理盐水),C组同时给予灌胃补中益气汤(5.6g/kg),观察豚鼠鼻部症状的变化。实验结束时处死豚鼠,行鼻分泌物涂片寻找嗜酸细胞(EOS)及取鼻粘膜病理切片寻找嗜酸细胞与肥大细胞。结果A、B、C组在局部致敏的前期,均出现了抓鼻、打喷嚏、流清涕等典型的鼻部症状,至后期,C组鼻部症状减轻;C、D组鼻分泌物及鼻粘膜EOS阳性率均低于A、B组,而C、D组之间则无显著性差异;鼻粘膜肥大细胞计数C组亦低于A、B组。结论补中益气汤能抑制脾虚AR豚鼠鼻粘膜嗜酸细胞及肥大细胞的浸润,从而改善鼻部症状。

苯环喹溴铵对大鼠变应性鼻炎的治疗作用

目的探讨苯环喹溴铵对大鼠变应性鼻炎的治疗作用及机制。方法以卵清白蛋白(Ova)和Al (OH)_3建立大鼠变应性鼻炎模型。将60只大鼠随机分为模型组,苯环喹溴铵大、中、小剂量组,倍氯米松组和溶媒对照组,每组10只大鼠。各组动物经鼻给予相应药物2 wk后,观察各动物的症状和鼻黏膜组织形态学的状况,对各动物单侧鼻分泌物进行称重,并检测血清和鼻黏膜中Ova特异性IgE。结果模型组大鼠症状评分、鼻分泌物重量、血清和鼻分泌物中Ova特异性IgE水平及鼻黏膜病理学评分均高于溶媒对照组(P<0.01)。与模型组相比,苯环喹溴铵各剂量组大鼠的鼻炎症状均得到明显改善(P<0.01);大、中剂量组大鼠鼻黏膜的组织形态改变明显减轻(P<0.01);大剂量组大鼠血清和鼻黏膜中的Ova特异性IgE水平以及鼻分泌物量均明显降低(P<0.01)。结论经鼻给予苯环喹溴铵,对于大鼠变应性鼻炎有明显的治疗作用,其作用机制之一可能是通过降低Ova特异性IgE来实现的。

Tim-3在变应性鼻炎小鼠鼻黏膜中的表达及其作用的实验研究

目的探讨小鼠鼻黏膜内T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(Tim-3)表达水平及其与变应性鼻炎(AR)发病机制的关系。方法BALB/c小鼠20只随机分为变应性鼻炎组(AR组)和正常对照组(N组),每组各10只。AR组:第1,14d腹腔注射鸡卵清蛋白(OVA)100μg加氢氧化铝2mg的生理盐水悬液0.1ml。第21d每侧鼻腔给与1%OVA各10μg,持续7d。N组用生理盐水代替OVA。通过免疫组化和RT-PCR方法检测鼻黏膜内Tim-3表达,同时应用ELISA方法检测血清中IL-4、IL-5及IFN-γ表达,并分析Tim-3与血清中IL-4、IL-5及IFN-γ表达的相关性。结果AR组和N组均有Tim-3表达,AR组表达强度明显高于N组,差异有统计学意义(P<0.05)。Tim-3表达强度与IFN-γ表达量呈负相关,与IL-4、IL-5表达量呈正相关。结论Tim-3在变应性鼻炎的发病过程中可能起重要作用。

豚鼠和新西兰兔变应性鼻炎模型建立及比较

目的:旨在比较不同动物在不同剂量致敏原诱导下形成变应性鼻炎模型的特点。方法:采用甲苯-2,4-二异氰酸酯(Toluene-2,4-diisocyanate,TDI)致敏豚鼠和新西兰兔制作变应性鼻炎动物模型,在豚鼠和新西兰兔组中又各自使用高低两种TDI剂量。记录建模过程中动物症状体征评分,典型表现;末次激发后行鼻黏膜组织病理学检查及组胺含量测定;记录动物死亡率和建模成功率;对死亡动物行呼吸道解剖和组织病理学检查,探索死亡原因。结果:豚鼠和新西兰兔均能在TDI诱导下形成变应性鼻炎典型症状体征,模型组动物鼻黏膜见大量以嗜酸性粒细胞为主炎症细胞浸润且组胺含量明显增高(与空白对照组比较P<0.01)。但不同动物之间,以及相同动物在不同给药剂量下,其症状体征出现的时间、典型表现、鼻黏膜嗜酸性粒细胞浸润程度、鼻黏膜组胺含量高低、建模死亡率、成功率等均有较大差异。动物死亡原因与药物剂量和变态反应均有一定关系。结论:豚鼠和新西兰兔在不同药物剂量下均可成功建模,但成模特点差异较大,应根据研究目的不同选取所需模型。

玉屏风散对大鼠变应性鼻炎的作用研究

目的观察玉屏风散在卵清蛋白致敏大鼠变应性鼻炎模型的抗过敏作用。方法实验在湖南省儿童医院动物实验室进行,30只6周龄雌性封闭群SD大鼠随机分成空白对照组(n=2)、对照组(n=4)、酮替芬灌服组(n=6)、玉屏风散灌服组(n=6)、玉屏分散滴鼻组(n=6)、布地奈德滴鼻组(n=6)5组。建立卵清蛋白诱导的大鼠变应性鼻炎大鼠模型,第1、8、15天,分别腹腔注射1 000μg卵清蛋白,自22 d开始300μg卵清蛋白滴每侧鼻孔。与此同时,造模第22天开始给药。采用叠加量化法记录各鼻部症状得分,然后计算总分。第37天,解剖获取胸腔心脏血、鼻中隔和双侧鼻腔外侧壁黏膜并且进行分析。结果实验各组与对照组比较,鼻部症状得分减少,纤毛上皮损伤较轻,血清中组胺水平显著降低,鼻黏膜中杯状细胞数量减少,嗜酸性粒细胞数量减少。结论玉屏风散对变应性鼻炎症状得分及鼻部组织具有抗过敏作用。

辛夷挥发油对实验性过敏性鼻炎的作用

目的:观察辛夷挥发油(VOMbP)对过敏性鼻炎豚鼠、大鼠的作用。方法:采用TD I对豚鼠、大鼠分别进行造模,观察症状体征、光镜下鼻黏膜组织形态学变化以及肥大细胞(大鼠)、嗜酸性粒细胞(豚鼠)计数。结果:VOMbP治疗组鼻痒、喷嚏、清涕、鼻黏膜厚度以及豚鼠嗜酸性粒细胞浸润、大鼠肥大细胞浸润明显改善。结论:VOMbP能缓解局部症状,改善局部黏膜的充血、水肿,减少嗜酸性粒细胞和肥大细胞在炎症局部的浸润。

脂多糖对大鼠实验性变应性鼻炎的影响

目的研究脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)对实验性变应性鼻炎的影响。方法SD大鼠40只随机分4组,其中,变应性鼻炎组经腹腔注射及鼻腔滴入卵清白蛋白(OVA)致敏,建立变应性鼻炎动物模型;LPS刺激组经鼻腔滴入LPS(10μg/100μL);变应性鼻炎+LPS刺激组为大鼠激发成变应性鼻炎后再以LPS滴入鼻腔。观察各组的症状变化,如喷嚏,流涕等。行常规HE及甲苯胺蓝染色观察各组鼻黏膜炎性细胞的浸润情况,并行高倍镜下嗜酸性粒细胞计数。结果①变应性鼻炎+LPS刺激组过敏症状评分高于其余各组(P<0.01);正常对照组及LPS刺激组症状评分差异无显著性(P>0.05)。②变应性鼻炎+LPS刺激组鼻黏膜中嗜酸性粒细胞计数高于变应性鼻炎组,差异有显著性(P<0.05);正常对照组及LPS刺激组鼻黏膜中嗜酸性粒细胞计数差异无显著性(P>0.05)。结论LPS刺激可以加重变应性鼻炎的症状及鼻黏膜组织的病理学改变。

经卵清蛋白致敏过敏性鼻炎模型豚鼠造模方法探讨

目的对经卵清蛋白(OVA)致敏过敏性鼻炎模型豚鼠造模方法进行改进。方法 AR模型动物、过敏原、致敏方式、致敏药物剂量及成模评价方法均参考有关文献进行。选择健康豚鼠经OVA致敏制作过敏性鼻炎模型。若成模率低或模型不稳定,进行造模方法的改进,即选用空白对照组分别以原剂量的1.5倍和2倍进行造模。结果本研究首次造模虽然增加了局部刺激时长,但豚鼠成模率仅为12.5%(2/16),且不够稳定。在造模过程中,大部分豚鼠未出现喉头水肿、下呼吸道及全身过敏。追加药物剂量后,1.5倍和2倍剂量组分别有1只雌鼠和1只雄鼠的症状总分>5分,而另1只鼠未达成模标准,造模成功率为50%(2/4)。4只豚鼠均曾观察到鼻塞,其中成模的雄鼠于第4、6次滴鼻后分别出现鼻翼翕动和呼吸困难。结论 AR模型造模成功与否可能与药物剂量、药物浓度、豚鼠体重、动物性别等有关。剂量分别增加至1.5倍和2倍时,成模时间较原剂量缩短,模型稳定程度更理想,在造模过程中未观察到显著的、因增加剂量而导致的不良反应。因此,将来可以考虑在原剂量的基础上,适当加大剂量对豚鼠进行造模。

制备具有明显OVA吸附作用的Al(OH)_3佐剂及其在变应性鼻炎大鼠模型建立中的应用

目的:制备可明显吸附卵清蛋白(OVA)的Al(OH)_3佐剂并用其建立具备变应性鼻炎(AR)临床客观特征的大鼠模型.方法:通过控制反应条件制备可明显吸附OVA的Al(OH)_3佐剂,对模型组用OVA辅以自制Al(OH)_3佐剂进行基础致敏,继以质量分数为2%OVA生理盐水行鼻内激发.对照组以生理盐水替代自制Al(OH)_3佐剂.采用PCA、行为学评分、Luna染色、HE染色评价模型.结果:1)吸附研究表明自制Al(OH)_3佐剂对OVA具明显吸附作用;2)模型组:PCA(+)证明变应原特异性Ig E产生;行为学评分>5分;Luna染色与HE染色示鼻黏膜嗜酸性粒细胞增多、浸润.对照组无上述变化.结论:所制Al(OH)_3佐剂对OVA具明显吸附作用并在此基础上成功建立了具备Ig E阳性和鼻黏膜嗜酸性粒细胞增多AR临床客观特征的大鼠模型.

卵白蛋白鼻腔强化激发制作变应性鼻炎大鼠模型效果观察

目的比较变应性鼻炎(AR)大鼠模型制作过程中鼻腔不同激发方式的效果,探索较优的激发方式。方法 32只SD大鼠随机分为Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组各8只,Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组分别采用卵白蛋白(OVA)滴鼻、OVA雾化、OVA鼻腔强化激发(滴鼻+雾化),Ⅳ组为生理盐水对照(空白组)。采用症状评分及鼻黏膜HE染色镜下观察的方式,比较其制作AR大鼠模型的效果。结果Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组症状评分均数均大于5,与Ⅳ组比较,有统计学意义(P<0.05),Ⅲ组优于Ⅰ组、Ⅱ组,有统计学意义(P<0.05)。Ⅰ组与Ⅱ组效果相当(P>0.05)。结论制作AR大鼠模型时,在低剂量佐剂,长时间基础致敏的基础上,采用鼻腔强化激发的方式激发,其效果明显优于单用一种方式激发。