同种异体脂肪干细胞复合脱钙骨支架材料修复兔胫骨缺损的实验研究

目的探讨同种异体脂肪干细胞复合脱钙骨支架材料修复兔胫骨缺损的实验研究。方法购自北京生物有限公司(动物实验中心)新西兰大白兔8对,其中2对白兔进行脂肪干细胞分离培养,并采用反复滴加方法将细胞均匀分布于支架材料上,获取脂肪干细胞复合脱钙骨材料。其中6对构建兔胫骨骨缺损模型,造模后即刻将单纯脱钙骨材料植入右侧缺损区设为对照组,将诱导后的兔脂肪干细胞-脱钙骨支架复合物植入左侧缺损区设为实验组。于术后12周采用空气栓塞处死大白兔,获取大白兔双侧后肢胫骨修复骨及其周围软组织,行Micro-CT和组织学检测,了解实验组和对照组白兔骨组织生长情况,兔脂肪干细胞-脱钙骨材料成骨表型测定体内降解情况和组织学检测结果。结果大体观察显示实验组白兔后肢骨缺损区可见骨样组织修复,对照组白兔为纤维样组织充填未见骨样组织覆盖;三维CT影像学显示实验组白兔骨缺损断端和材料接合部已充分融合且骨轮廓、光滑的骨塑形清晰可见,对照组白兔骨缺损处多为纤维性连接;HE染色下可见实验组白兔有典型再生骨组织、大量骨陷窝、骨细胞及部分骨小梁结构,对照组白兔为胶原纤维样组织和残留脱钙骨基质、无大片再生骨样组织。两组白兔Ⅱ型胶原免疫组织化学染色均呈阳性,细胞胞浆及胞外基质呈棕黄色,胞核呈蓝色,证实修复细胞表达Ⅱ型胶原,为软骨细胞。实验组和对照组白兔修复组织评分分别为(2.41±0.40)、(2.70±0.45)分,实验组白兔组织修复得分高于对照组白兔,差异有显著性(P<0.05)。结论兔脂肪干细胞接种于脱钙骨材料,经成骨诱导后具有较强成骨分化能力,能较好地修复兔胫骨骨缺损,具有较高临床疗效。

严重复合组织缺损皮瓣修复术后应用自体脂肪干细胞构建组织工程骨重建骨支架

目的探讨严重复合组织缺损皮瓣修复术后采用自体脂肪干细胞（ADSCs）复合脱钙骨支架构建组织工程骨重建骨支架的临床疗效。方法2013年4月至2015年6月．共收治创伤性骨皮肤复合组织缺损的患者9例，男7例，女2例，年龄20～58岁，平均43岁。一期选择腹壁下动脉穿支（DIEP）皮瓣修复创面皮肤及软组织缺损。同时采用皮瓣修薄时切除的多余脂肪组织，经体外培养获取ADSC。并诱导向成骨细胞转化，然后复合同种异体脱钙骨支架构建组织工程骨。二期将制备完成的组织工程骨回植体内重建骨支架．并同时行皮瓣修薄整形术。术后进行随访。结果术后9例随访12～36个月．平均18个月。截至末次随访．5例胫骨中下段骨缺损者新骨生长明显．均已达到临床愈合标准．可完全负重行走。1例肱骨中段骨缺损患者新生正常骨组织长人．骨干横截面的2／3以上已恢复连续性。1例肱骨和1例桡骨骨缺损者已达骨性愈合。1例颅骨缺损患者CT显示有大量新骨生长。结论应用自体ADSC。构建组织工程骨联合穿支皮瓣为治疗复合组织缺损中合并骨骼大块缺如的患者开辟了一条新的途径．具有取材便利、不产生新的供区损伤、疗效可靠和操作安全等诸多优点。

喷墨全包芯骨支架与脂肪干细胞复合体修复兔桡骨缺损的研究

目的采用脂肪干细胞(ADSCs)复合喷墨全包芯骨支架修复兔桡骨缺损.方法成功成骨诱导的ADSCs与喷墨全包芯骨支架复合构建细胞支架复合体(A组),ADSCs/聚乳酸-乙醇酸(PLGA)/β磷酸三钙(β-TCP)复合体(B组)、空白缺损(C组)作为对照.采用随机区组设计植入36只兔桡骨1,5 cm缺损部位,术后12、24、48周取材,进行相关分析.结果影像学、大体观察、组织学检测示A组骨缺损完全修复,显著优于B组部分修复,C组没有修复;Lane-Sandhu评分示A组(5.11±0.70)、(8.31±0.48)、(12.98 ±0.60)分,骨缺损修复效果明显好于B组(1.22±0.59)、(4.89 ±0.81)、(6.18 ±0.71)分(t=18.000,P<0.05);B组明显好于C组(0.58±1.00)、(0.58±1.00)、(0.58±1.00)分(t=13.500,P<0.05).结论 ADSCs/喷墨全包芯骨支架复合体可修复兔桡骨1.5 cm缺损.