α2巨球蛋白cDNA片段-增强型绿色荧光蛋白质粒的构建

目的:构建α2巨球蛋白cDNA片段(FP6)-增强型绿色荧光蛋白(pEBFP)质粒(pEBFP/FP6双表达质粒)。方法:利用PCR技术克隆出FP6,将其克隆至pMD18-T载体中,再通过分子克隆技术将FP6插入pEBFP表达基因中,构建pEBFP/FP6质粒,双酶切和测序鉴定。结果:PCR方法能克隆FP6,并成功构建pEBFP/FP6质粒,双酶切和测序结果表明构建的pEBFP/FP6质粒完全符合设计要求。结论:利用PCR、酶切、连接反应等基因克隆手段,可以构建pEBFP/FP6双表达质粒。

肝再生中α2-巨球蛋白的表达动态分析

目的确定更多的与肝再生相关的基因，方法借助4～8正向抑制性消减文库（0-4-8-12短间隔连续部分肝切除）产生的α2-巨球蛋白基因片段．运用cDNA芯片分析了其mRNA在再生肝中的表达动态。结果肝再生中α2-巨球蛋白呈上调表达．而且变化幅度很大，至高点超过21倍。大部分肝切除中α2-巨球蛋白的表达高峰出现在8h和16h.短间隔连续部分肝切除中α2-巨球蛋白的表达呈现不同的变化趋势．4h短间隔的连续肝切除诱导α2-巨球蛋白表达不断升高．而第二次的36h短间隔的连续肝切除才能诱导α2-巨球蛋白表达显著升高。结论肝再生中α2-巨球蛋白可能在早期的正相急性反应中起重要作用，减少切除伤害带来的炎症．促进肝再生的顺利进行。