甲病毒载体的研究进展

甲病毒属于披膜病毒科,是一类有包膜的单股正链RNA病毒。近些年来,国内外有关甲病毒载体的研究非常活跃,其已被用于疫苗研究、基因治疗以及分子生物学等研究领域。基于甲病毒载体的构造原理,将其分为三类,分别为复制完全型载体、复制缺陷型载体和DNA/RNA载体。就这三类载体的改造过程进行了探讨,并对这三类载体的特点及其应用研究进展等方面进行了阐述,以期为开发出更安全、更有效的甲病毒载体提供参考。

甲病毒检测细胞株的构建及其功能鉴定

目的 构建和鉴定可用于甲病毒快速检测的工程细胞株.方法 以辛德毕斯病毒缺陷型复制子载体系统pVaXJ-EGFP-△NSP4为基础,利用慢病毒表达载体pCDH系统,获得含有绿色荧光蛋白（Enhanced green fluorescent protein,EGFP）报告基因的慢病毒表达质粒pCDH-XJ-EGFP.使用脂质体转染法将质粒pCDH-XJ-EGFP和包装质粒pPACKHl Mix共转染HEK293T细胞,48 h、72 h收集慢病毒颗粒用于感染BHK-21细胞,经嘌呤霉素筛选获得用于蚊媒甲病毒检测的细胞系BHK-Alphavirus.结果 BHK-Alphavirus感染辛德毕斯病毒48 h后,可检测到EGFP的表达,表明BHK-Alphavirus能够用于外源甲病毒的检测.BHK-Alphavirus细胞感染甲病毒属中的辛德毕斯病毒（XJ-160和YN87448）、基孔肯雅病毒（SD08Pan）及盖塔病毒（HB0234）均可以检测到特异的绿色荧光,而被黄病毒属的乙脑病毒（P3）、4型登革病毒（P4）和布尼亚病毒属的塔希纳病毒（XJ0625）等其他正链RNA病毒感染后则检测不到绿色荧光.结论 BHK-Alphavirus细胞可用于蚊媒甲病毒的快速检测,且该检测方法特异性良好.