皱盖假芝深层发酵液多糖提取工艺优化研究

研究了皱盖假芝深层液体发酵液多糖提取的工艺条件.用正交试验的方法对皱盖假芝深层液体发酵液粗多糖提取工艺条件进行优化,研究了温度、时间、酸碱条件对其的影响.确定了皱盖假芝深层液体发酵液粗多糖提取的最适条件为:温度80℃,盐酸浓度0.3mol/L,时间2h.

响应面法优化超声波辅助提取皱盖假芝粗多糖工艺

以经过渗漉脱杂处理的皱盖假芝(Amauroderma rude)子实体为材料,研究超声波辅助提取皱盖假芝粗多糖工艺,考察液料比、提取温度、提取功率和提取时间4个因素对提取率的影响,采用响应面法优化后,最终确定最佳工艺条件为:液料比30:1,提取温度80℃,提取功率50 W,提取时间60 min,获得最大提取率为3.18%。

皱盖假芝乙醇提取物的LC-MS/MS分析及其体外抗肿瘤活性

【目的】假芝(Amauroderma rugosum)又名血芝,我国野生假芝资源丰富,了解野生假芝提取物的主要成分及其体外抗肿瘤活性,为真菌源抗肿瘤药物筛选提供理论依据。【方法】采用液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)分析皱盖假芝乙醇提取物成分,3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法检测皱盖假芝不同溶剂萃取物对人结肠癌细胞HCT-116和人肝癌细胞HepG2增殖的抑制作用。【结果】皱盖假芝初生菌丝经PDA分离,长势良好,可栽培特性强;皱盖假芝子实体的乙醇提取物在正离子模式下有11个主要化合物,在负离子模式下有19个化合物。皱盖假芝提取物能有效抑制HepG2和HCT-116的增殖,其中石油醚提取物对HepG2半抑制浓度IC 50为69.85μg/mL,正丁醇提取物对HCT-116半抑制浓度IC 50为136.2μg/mL。【结论】皱盖假芝乙醇提取物中主要成分为脂肪酸。皱盖假芝不同溶剂萃取物对人结肠癌细胞HCT-116和人肝癌细胞HepG2增殖具有抑制作用。

血芝液体深层发酵合成三萜类化合物的条件优化

[目的]探究血芝液体深层发酵合成三萜类化合物的最佳发酵条件。[方法]先以单因素试验分析碳源、氮源、转速、p H、接种量对血芝液体深层发酵合成三萜类化合物的影响,选取其中3个主要影响因素,采取响应面分析法进一步优化血芝液体深层发酵合成三萜类化合物的最佳工艺条件。[结果]单因素试验结果显示,血芝发酵合成胞内三萜类化合物的最适条件为p H=6,转速为130 r/min,最适碳源为蔗糖,最适氮源为尿素。响应面法优化的发酵条件为3%接种量、30 g/L蔗糖、1.9 g/L尿素,血芝三萜类化合物含量达16.51mg/g。[结论]该研究为血芝活性成分的研究提供实际参考依据。

皱盖假芝多糖抑制乳腺癌细胞功能的研究

为研究皱盖假芝(Amauroderma rude)多糖抑制乳腺癌细胞的效果。用热水浸提法提取皱盖假芝多糖,并进行醇沉和除蛋白,对纯化后的皱盖假芝多糖抗肿瘤活性进行研究,采用MTT法检测皱盖假芝多糖抑制肿瘤细胞增殖能力,Transwell试验观察对肿瘤细胞侵袭影响,利用流式细胞术检测皱盖假芝多糖对细胞周期和凋亡的影响。结果表明,皱盖假芝多糖能显著抑制鼠乳腺癌(4T-1)细胞和人乳腺癌(MDA-MB-231,MB-231)细胞的增殖,并显著抑制4T-1细胞的侵袭和诱导MDA-MB-231细胞凋亡。旨在为皱盖假芝抑制乳腺癌功能提供科学验证,并为抗乳腺癌药物的开发提供参考依据。

皱盖假芝子实体的化学成分研究

目的研究灵芝科假芝属皱盖假芝Amauroderma rude子实体中的化学成分。方法采用正、反相硅胶柱色谱与Sephadex LH-20凝胶柱色谱进行分离纯化,并运用各种波谱方法鉴定化合物结构,采用MTT法测试化合物对人体肿瘤细胞株的细胞毒活性。结果从皱盖假芝子实体95%乙醇提取物中分离鉴定了12个化合物,分别鉴定为diptoindonesin D（1）、6-脱氧巴西红厚壳素（2）、巴西红厚壳素（3）、3-羧基吲哚（4）、3,4-二羟基苯甲酸甲酯（5）、3,4-二羟基苯乙醇（6）、3β-羟基-7,22E-二烯-麦角甾（7）、3β,7α-二羟基-8,22E-二烯-5α,6α-环氧-麦角甾（8）、3β-羟基-7α-甲氧基-8（14）,22E-二烯-5α,6α-环氧-麦角甾（9）、5α,8α-过氧麦角固醇（10）、3β,5β,7β-三羟基-6,22E-二烯-麦角甾（11）和3β,5α,6β-三羟基-7,22E-二烯-麦角甾（12）。化合物2与3对人体肿瘤细胞株HL-60、SMMC-7721、A549、MCF-7和SW-480具有一定生长抑制活性,化合物9对HL-60、MCF-7和SW-480具有一定生长抑制活性。结论化合物1~12均为首次从皱盖假芝子实体中分离得到,化合物2、3和9对人体肿瘤细胞株具有一定细胞毒活性。

皱盖假芝子实体中1个新的降木脂素类化合物

目的对皱盖假芝Amaurodermarude子实体的化学成分进行研究,以期发现新的活性化合物。方法运用硅胶、凝胶、MCI-gel树脂及RP-HPLC等多种色谱技术进行分离纯化,并根据理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构。结果从皱盖假芝子实体中分离得到了3个化合物,分别鉴定为4-乙氧基-E-3-(3,4-二羟基苯亚甲基)-5-(3,4-二羟基苯基)呋喃-2-酮(1)、七叶内酯(2)、咖啡酸(3)。结论化合物1为新化合物,命名为皱盖假芝素A。

皱盖假芝中1个新的木脂素类成分

目的对皱盖假芝Amauroderma rude子实体中的化学成分进行初步研究。方法采用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、液相色谱等多种色谱方法对皱盖假芝子实体醋酸乙酯相中的化学成分进行分离纯化,并根据其理化性质和波谱数据鉴定化合物结构。结果从皱盖假芝醋酸乙酯相中分离得到3个化合物,包括1个新的木脂素和2个已知的甾醇类化合物,分别鉴定为3,4-二羟基苯甲酰乙酰酮(1)、(22E,24R)-3β,5α-二氢-麦角甾-7,22-二烯-6-酮(2)、(22E,24R)-麦角甾-6,9,22-三烯-3β,5α,8α-三醇(3)。结论化合物1为新的木脂素类成分,命名为假芝木脂素B。