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The market for amino acids: understanding supply and demand of substrate for more efficient milk protein synthesis 被引量:2
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作者 Virginia L.Pszczolkowski Sebastian I.Arriola Apelo 《Journal of Animal Science and Biotechnology》 SCIE CAS CSCD 2021年第1期37-48,共12页
For dairy production systems, nitrogen is an expensive nutrient and potentially harmful waste product. With three quarters of fed nitrogen ending up in the manure, significant research efforts have focused on understa... For dairy production systems, nitrogen is an expensive nutrient and potentially harmful waste product. With three quarters of fed nitrogen ending up in the manure, significant research efforts have focused on understanding and mitigating lactating dairy cows' nitrogen losses. Recent changes proposed to the Nutrient Requirement System for Dairy Cattle in the US include variable efficiencies of absorbed essential AA for milk protein production. This first separation from a purely substrate-based system, standing on the old limiting AA theory, recognizes the ability of the cow to alter the metabolism of AA. In this review we summarize a compelling amount of evidence suggesting that AA requirements for milk protein synthesis are based on a demand-driven system. Milk protein synthesis is governed at mammary level by a set of transduction pathways, including the mechanistic target of rapamycin complex 1(mTORC1), the integrated stress response(ISR), and the unfolded protein response(UPR). In tight coordination, these pathways not only control the rate of milk protein synthesis, setting the demand for AA, but also manipulate cellular AA transport and even blood flow to the mammary glands, securing the supply of those needed nutrients. These transduction pathways, specifically mTORC1, sense specific AA, as well as other physiological signals, including insulin, the canonical indicator of energy status. Insulin plays a key role on mTORC1 signaling, controlling its activation, once AA have determined mTORC1 localization to the lysosomal membrane.Based on this molecular model, AA and insulin signals need to be tightly coordinated to maximize milk protein synthesis rate. The evidence in lactating dairy cows supports this model, in which insulin and glucogenic energy potentiate the effect of AA on milk protein synthesis. Incorporating the effect of specific signaling AA and the differential role of energy sources on utilization of absorbed AA for milk protein synthesis seems like the evident following step in nutrient requirement systems to further improve N efficiency in lactating dairy cow rations. 展开更多
关键词 amino acids Blood flow Insulin Mammary uptake Milk proteins mTORC1 Nitrogen efficiency Splanchnic tissues
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H1N1亚型猪流感病毒HA蛋白225位氨基酸对病毒致病性的影响 被引量:1
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作者 杨时鳗 许程志 +4 位作者 许榜丰 吴运谱 贾云慧 乔传玲 陈化兰 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期816-824,共9页
【目的】流感病毒的致病性是由多个基因共同决定的,笔者之前的研究结果发现当两株具有相似基因特征的H1N1亚型猪流感病毒进行HA基因替换以后,病毒对小鼠的致病性发生了改变。通过确定影响病毒致病性的关键氨基酸位点,为进一步揭示流感... 【目的】流感病毒的致病性是由多个基因共同决定的,笔者之前的研究结果发现当两株具有相似基因特征的H1N1亚型猪流感病毒进行HA基因替换以后,病毒对小鼠的致病性发生了改变。通过确定影响病毒致病性的关键氨基酸位点,为进一步揭示流感病毒致病力差异奠定了基础。【方法】对ZD71和SY130的HA蛋白氨基酸序列进行比对,确认氨基酸差异位点并设计定点突变引物,构建单点突变的重组病毒并测定其鸡胚半数感染量(EID50)。将拯救的亲本病毒、HA单基因替换重组病毒及单点突变重组病毒以感染复数(MOI)为0.001和0.1的病毒量分别接种于MDCK和A549细胞,测定病毒的体外复制能力;将上述各株病毒以50μL含106EID50的剂量经滴鼻途径接种BALB/c小鼠,分别采集小鼠的脑、鼻甲、肺、脾、肾等脏器,匀浆处理后接种鸡胚分析病毒在小鼠体内各脏器的复制情况;将病毒分别以50μL含101-106 EID50的剂量经鼻腔感染BALB/c小鼠,感染后每天称量小鼠体重,当小鼠体重下降比率超过25%时判定为死亡,统计死亡情况,测定病毒的小鼠半数致死量(MLD_(50)),评估各突变病毒对小鼠的致病性,与亲本病毒进行分析比较后,获知决定病毒致病性的关键氨基酸位点。【结果】ZD71和SY130病毒HA蛋白共存在4个氨基酸差异位点,分别为4、138、144和225位(H3 Numbering)。经过定点突变、病毒拯救及序列测定确认,分别获得含有单个位点突变的重组病毒。通过测定病毒在MDCK和A549细胞上的复制情况,结果发现与亲本病毒rZD71相比较,突变病毒rZD71-HA/G225E在感染MDCK细胞的各检测时间点、及感染A549细胞24—48 h后,复制滴度均显著提高;与rSY130相比较,突变病毒rSY130-HA/E225G在感染MDCK细胞12—36 h后、及感染A549细胞36—72 h后,复制滴度均显著降低。而4、138、144位点的突变对病毒的复制影响较小。进一步的小鼠感染试验发现HA 225位氨基酸的改变显著影响了病毒对小鼠的致病性,与亲本病毒rZD71相比,225位氨基酸由G突变为E后,病毒rZD71-HA/G225E的MLD_(50)由4.32 log_(10)EID_(50)降低至3.0 log_(10)EID_(50);病毒不仅在小鼠鼻甲和肺脏内检测到,而且在脾脏和肾脏中也均有一定水平的复制。【结论】HA蛋白225位氨基酸对两株H1N1 SIV对小鼠的致病性具有重要决定作用,提示在后续开展的病原学监测中要密切关注该位点氨基酸的变异情况,为更好地防控动物流感乃至人流感的大流行提供科学依据。 展开更多
关键词 猪流感病毒 ha蛋白 氨基酸 致病性
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大鼠中性氨基酸转运蛋白SNAT1-HA融合蛋白的构建和表达(英文)
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作者 王函 孟雯 +2 位作者 董晓云 李洋 张舟 《上海师范大学学报(自然科学版)》 2011年第5期515-521,共7页
Na+偶联的中性氨基酸转运蛋白SNAT1是一种膜蛋白,属于转运蛋白第38家族(SLC38),在中枢神经系统(CNS)中起到重要的生理学作用.为了更容易地检测SNAT1在细胞膜上的表达,以pBK-CMVΔ-SNAT1为模板,用PCR,双酶切和T4连接酶连接的方法在SNAT1... Na+偶联的中性氨基酸转运蛋白SNAT1是一种膜蛋白,属于转运蛋白第38家族(SLC38),在中枢神经系统(CNS)中起到重要的生理学作用.为了更容易地检测SNAT1在细胞膜上的表达,以pBK-CMVΔ-SNAT1为模板,用PCR,双酶切和T4连接酶连接的方法在SNAT1的C端加上了一个HA标签蛋白,构建了一个新质粒pBK-CMVΔ-SNAT1-HA.用该质粒瞬时转染人胚胎肾细胞(HEK293T),转染36 h以后,融合蛋白SNAT1-HA可以用HA抗体检测.Western blot结果显示在约54 kDa处有一条特异性条带,与预期分子量大小一致.利用重组质粒pBK-CMVΔ-SNAT1-HA可以更方便地检测到SNAT1在细胞膜上的表达与定位,为进一步研究SNAT1结构与功能奠定了基础. 展开更多
关键词 中性氨基酸转运蛋白SNAT1 ha标签蛋白 融合蛋白 表达
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Proteolipid protein 1 gene sequencing of hereditary spastic paraplegia 被引量:1
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作者 Yu Gao Lumei Chi Yinshi Jin Guangxian Nan 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2012年第2期91-95,共5页
PCR amplification and sequencing of whole blood DNA from an individual with hereditary spastic paraplegia, as well as family members, revealed a fragment of proteolipid protein 1 (PLP1) gene exon 1, which excluded t... PCR amplification and sequencing of whole blood DNA from an individual with hereditary spastic paraplegia, as well as family members, revealed a fragment of proteolipid protein 1 (PLP1) gene exon 1, which excluded the possibility of isomer 1 expression for this family. The fragment sequence of exon 3 and exon 5 was consistent with the proteolipid protein 1 sequence at NCBI. In the proband samples, a PLP1 point mutation in exon 4 was detected at the basic group of position 844, T→C, phenylalanine→leucine. In proband samples from a male cousin, the basic group at position 844 was C, but gene sequencing signals revealed mixed signals of T and C, indicating possible mutation at this locus. Results demonstrated that changes in PLP1 exon 4 amino acids were associated with onset of hereditary spastic paraplegia. 展开更多
关键词 amino acid gene sequencing hereditary spastic paraplegia neural regeneration proteolipid protein 1 sequence analysis
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Gene environment interaction in periphery and brain converge to modulate behavioral outcomes:Insights from the SP1 transient early in life interference rat model 被引量:1
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作者 Eyal Asor Dorit Ben-Shachar 《World Journal of Psychiatry》 SCIE 2016年第3期294-302,共9页
It is generally assumed that behavior results from an interaction between susceptible genes and environmental stimuli during critical life stages.The present article reviews the main theoretical and practical concepts... It is generally assumed that behavior results from an interaction between susceptible genes and environmental stimuli during critical life stages.The present article reviews the main theoretical and practical concepts in the research of gene environment interaction,emphasizing the need for models simulating real life complexity.We review a novel approach to study gene environment interaction in which a brief post-natal interference with the expression of multiple genes,by hindering the activity of the ubiquitous transcription factor specificity protein 1(Sp1) is followed by later-in-life exposure of rats to stress.Finally,this review discusses the role of peripheral processes in behavioral responses,with the Sp1 model as one example demonstrating how specific behavioral patterns are linked to modulations in both peripheral and central physiological processes.We suggest that models,which take into account the tripartite reciprocal interaction between the central nervous system,peripheral systems and environmental stimuli will advance our understanding of the complexity of behavior. 展开更多
关键词 Gene-environmental interaction SPECIFICITY protein 1 MITHRAMYCIN Stress Animal-model Essential amino acids TRYPTOPhaN Insulin
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岗田酸诱导大鼠脑神经细胞表达谷氨酸转运体EAAT1 被引量:9
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作者 魏建设 张玲妹 +2 位作者 黄娅琳 朱粹青 孙凤艳 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期287-293,共7页
为研究tau蛋白高度磷酸化与谷氨酸转运体功能之间的关系,实验采用免疫组织化学、荧光双标记技术及大鼠额叶皮质定位注射的方法,观察了蛋白磷酸酶抑制剂岗田酸(okadaic acid,OA)所致神经细胞退化对谷氨酸转运体亚型EAAT1表达的影响。... 为研究tau蛋白高度磷酸化与谷氨酸转运体功能之间的关系,实验采用免疫组织化学、荧光双标记技术及大鼠额叶皮质定位注射的方法,观察了蛋白磷酸酶抑制剂岗田酸(okadaic acid,OA)所致神经细胞退化对谷氨酸转运体亚型EAAT1表达的影响。结果如下:(1)在OA注射中心区神经元早期出现胞体固缩、肿胀、核移位,在注射3d时细胞破碎,发生坏死,并有大量炎性细胞浸润等病理现象;边周区细胞呈AT8(微管相关蛋白tau磷酸化指标)免疫阳性反应;(2)OA首先诱导神经细胞突起远端tau蛋白磷酸化,并逐渐向胞体发展,形成营养不良的神经细胞突起和神经纤维缠结样病理改变;(3)AT8免疫阳性反应脑区的神经细胞高表达谷氨酸转运体EAAT1,在12h阳性表达细胞数显著增多(P<0.01),1d时达峰值(P<0.001),3d时明显减少。在OA作用下EAAT1表达于星形胶质细胞和神经元。结果提示,OA致微管相关蛋白tau高度磷酸化时可诱导该区星形胶质细胞和神经元高表达谷氨酸转运体EAAT1。EAAT1高表达的病理生理意义有待进一步的阐明。 展开更多
关键词 岗田酸 诱导 大鼠 脑神经细胞 表达 谷氨酸转运体 EAAT1 TAU蛋白 磷酸化 神经纤维缠结
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A型猪流感病毒山东分离株鉴定及其HA基因序列分析 被引量:8
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作者 许传田 范伟兴 赵宏坤 《中国病毒学》 CSCD 2004年第1期27-31,共5页
从山东各地疑似流感发病猪分离到10株流感病毒,经国家流感中心鉴定均为A型流感病毒H9N2亚型。将其中一株Sw/SD/1/2003(H9N2)的血凝素全基因(HA)进行克隆与测序,与GenBank收录的其它猪流感和禽流感H9N2亚型的HA基因进行比较,发现Sw/SD/1/... 从山东各地疑似流感发病猪分离到10株流感病毒,经国家流感中心鉴定均为A型流感病毒H9N2亚型。将其中一株Sw/SD/1/2003(H9N2)的血凝素全基因(HA)进行克隆与测序,与GenBank收录的其它猪流感和禽流感H9N2亚型的HA基因进行比较,发现Sw/SD/1/2003(H9N2)的血凝素基因在核苷酸序列方面同广西1999年分离的禽流感毒株Ck/GX/99(H9N2)和2000年云南分离的禽流感毒株Ck/YN/2000(H9N2)的同源性最高;进化树分析表明Sw/SD/1/2003(H9N2)起源于禽源的H9N2亚型流感病毒;Sw/SD/1/2003的HA氨基酸裂解位点与其他H9N2亚型不同,Sw/SD/1/2003的HA氨基酸裂解位点是R-S-L-R-G,而其它猪流感和禽流感H9N2亚型都是R-S-S-R-G。 展开更多
关键词 猪流感病毒 氨基酸裂解化点 ha基因 序列分析
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SNAT1和EMP1在胃癌组织和细胞株中的表达及临床意义 被引量:4
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作者 丁振 崔巍 +4 位作者 韩磊 谷振芳 孔锦 张肖 王军业 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2014年第9期809-813,共5页
目的探讨人钠耦合中性氨基酸转运蛋白1(SNAT1)和上皮膜蛋白1(EMP1)在胃癌组织及胃癌细胞株中的表达水平,分析两者在胃癌组织中表达与临床病理特征的关系。方法采用免疫组化SP法检测82例胃癌组织和67例对应癌旁组织样本中SNAT1和EMP1的... 目的探讨人钠耦合中性氨基酸转运蛋白1(SNAT1)和上皮膜蛋白1(EMP1)在胃癌组织及胃癌细胞株中的表达水平,分析两者在胃癌组织中表达与临床病理特征的关系。方法采用免疫组化SP法检测82例胃癌组织和67例对应癌旁组织样本中SNAT1和EMP1的蛋白表达情况,根据二级计分法分为低表达(<5分)和高表达(≥5分),分析两者不同表达水平与胃癌临床病理特征的关系。同时采用Western blotting检测20例胃癌组织及其癌旁组织、正常胃黏膜上皮细胞株GES-1和胃癌不同分化细胞株(未分化BGC823、低分化AGS、中分化SGC7901和高分化MKN28)中SNAT1和EMP1的蛋白水平。结果胃癌组织的SNAT1高表达率高于癌旁组织(67.1%vs.34.3%,P<0.05),而EMP1高表达率则低于癌旁组织(40.2%vs.62.7%,P<0.05)。胃癌组织中SNAT1与EMP1表达呈负相关(r=-0.272,P=0.014),且两者表达与临床分期和分化程度均有关;另外,SNAT1与年龄、淋巴结转移有关,EMP1与浸润深度有关。胃癌细胞株中的SNAT1蛋白水平均高于癌旁组织和CES-1细胞,而EMP1蛋白水平则相反,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 SNAT1表达在胃癌组织及细胞株中分别较癌旁组织和正常胃黏膜细胞株高,EMP1则相反,胃癌组织中两种蛋白均与临床分期和分化程度有关,提示两者可能在胃癌的发生发展中起重要作用,可用于辅助胃癌的诊断和病情评估。 展开更多
关键词 人钠耦合中性氨基酸转运蛋白1 上皮膜蛋白1 胃癌 预后
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云南省2009年至2014年B型流感毒株血凝素基因进化分析 被引量:1
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作者 曹亿会 李娟 +3 位作者 赵晓南 宁德明 罗春蕊 徐闻 《昆明医科大学学报》 CAS 2016年第11期14-17,共4页
目的了解云南省2009年至2014年B型流感病毒血凝素(HA1)基因突变及其抗原变异情况.方法将云南省2009年至2014年流感哨点监测医院采集的流感样病例咽拭子进行病毒分离,随机抽取12株B型流感病毒进行HA1基因序列测定,并对测序产物进行分析,... 目的了解云南省2009年至2014年B型流感病毒血凝素(HA1)基因突变及其抗原变异情况.方法将云南省2009年至2014年流感哨点监测医院采集的流感样病例咽拭子进行病毒分离,随机抽取12株B型流感病毒进行HA1基因序列测定,并对测序产物进行分析,通过MEGA软件进行同源性比对、构建HA基因进化树.结果云南省流感毒株血清型和基因型鉴定有差异,可能是由于基因变异后量的积累量不够引起.在HA1蛋白的抗原决定簇的3个重要区域120环,150环和160环都有氨基酸的变异.云南省流感毒株在120环的131位置氨基酸变异为N131K,137位置B-Victoria系氨基酸发生了N137H的变异,187位置有2株发生了P187S的变异.结论云南省的B型流感毒株在血凝素基因重要位置发生了多处变异,有和疫苗株相同的变异,也有不同于疫苗株的变异. 展开更多
关键词 B型流感病毒 血凝素 hal基因 氨基酸变异 进化分析
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鸡大肠杆菌1型菌毛蛋白氨基酸序列的变异 被引量:1
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作者 戴鼎震 王晓丽 +3 位作者 赵永前 甘黎明 冯秀丽 夏兴霞 《江苏农业学报》 CSCD 2004年第3期197-198,共2页
关键词 大肠杆菌 1型菌毛蛋白 氨基酸序列 粘附因子
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电针水沟穴对全脑缺血昏迷大鼠脑组织谷氨酸转运体-1γ-氨基丁酸转运体-1的影响 被引量:12
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作者 陈魁 胡风云 《山西医药杂志(上半月)》 CAS 2013年第5期501-503,I0001,共4页
目的观察电针水沟穴对全脑缺血昏迷模型大鼠脑组织内谷氨酸转运体1(EAAT-1)和γ-氨基丁酸转运体-1(GAT-1)表达的影响。方法 80只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、针刺组、药物组和针药组;制备全脑缺血性昏迷模型大鼠,针刺组和针药组于... 目的观察电针水沟穴对全脑缺血昏迷模型大鼠脑组织内谷氨酸转运体1(EAAT-1)和γ-氨基丁酸转运体-1(GAT-1)表达的影响。方法 80只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、针刺组、药物组和针药组;制备全脑缺血性昏迷模型大鼠,针刺组和针药组于造模成功后30min进行首次电针水沟穴治疗,直至处死时间段为止每6h针1次,每次留针时间5min;同时药物组和针药组,于造模成功后30min每只腹腔注射胞磷胆碱钠注射液0.1g,每6h1次。24h后断头取脑,使用计算机图像分析系统测定经免疫组织化学染色处理的大鼠脑组织EAAT-1、GAT-1的平均吸光度(A)值,比较各组之间的差异。结果①各组与模型组和假手术组标本内EAAT-1的A值比较差异均有统计学意义(P<0.05),而模型组和假手术之间差异无统计学意义(P>0.05);针刺组与针药组比较差异无统计学意义(P>0.05),但2组分别与药物组比较差异有统计学意义(P<0.05);②针刺组及针药组与其他各组标本内GAT-1的A值比较差异有统计学意义(P<0.05),模型组与假手术组比较差异有统计学意义(P<0.05),但模型组与药物组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论电针水沟穴可以提高全脑缺血昏迷模型大鼠脑组织内EAAT-1和GAT-1的表达。 展开更多
关键词 电针 水沟 兴奋性氨基酸转运子1 GABA质膜转运蛋白质类 大鼠
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产脲节杆菌Dn L1-1拌种对小麦籽粒氨基酸和蛋白质的影响 被引量:1
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作者 李玲 杨玉忠 +3 位作者 杨凯 陈凯 王贻莲 李纪顺 《科学技术与工程》 北大核心 2019年第10期261-264,共4页
探明降解阿特拉津的产脲节杆菌Dn L1-1对小麦籽粒氨基酸和蛋白质的影响,为进一步完善降解菌Dn L1-1的功能,更好地应用该菌剂提供理论基础和实践基础。利用产脲节杆菌Dn L1-1拌种小麦种子并播种在夏玉米田中,使小麦籽粒附着不同浓度的活... 探明降解阿特拉津的产脲节杆菌Dn L1-1对小麦籽粒氨基酸和蛋白质的影响,为进一步完善降解菌Dn L1-1的功能,更好地应用该菌剂提供理论基础和实践基础。利用产脲节杆菌Dn L1-1拌种小麦种子并播种在夏玉米田中,使小麦籽粒附着不同浓度的活菌数目(1×105CFU/粒、1×106CFU/粒),从而测定其对收获小麦氨基酸和蛋白质的影响。结果表明,在收获期,两种浓度的处理均能够提高小麦的产量,上涨幅度为3. 51%和7. 14%,并且小麦籽粒含有的18种氨基酸总含量分别提高13. 94%和19. 33%,蛋白质含量提高10. 56%和22. 26%。由此可见,降解阿特拉津的产脲节杆菌Dn L1-1拌种小麦种子,有利于小麦籽粒氨基酸和蛋白质含量的提高,从而提高小麦的营养品质。 展开更多
关键词 小麦 产脲节杆菌DnL1-1 拌种 氨基酸 蛋白质
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1992~1994年HIV-1国际流行株和云南株膜蛋白V3区氨基酸共有序列比较
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作者 王斌 鲁晓晴 +2 位作者 邵济钧 邵一鸣 曾毅 《中国病毒学》 CSCD 1998年第3期226-231,共6页
对1992~1994年间16个云南HIV1株膜蛋白基因V3区进行了DNA序列测定,经计算机DNASIS及PROSIS软件进行同源性分析,得出其相应的氨基酸共有序列YNV3和两组共有序列YNV3A和YNV3B,计算了... 对1992~1994年间16个云南HIV1株膜蛋白基因V3区进行了DNA序列测定,经计算机DNASIS及PROSIS软件进行同源性分析,得出其相应的氨基酸共有序列YNV3和两组共有序列YNV3A和YNV3B,计算了YNV3中每个氨基酸的保守性。分别将YNV3A和YNV3B与世界各地的HIV1代表株的相应序列进行了同源性比较。结果表明,HIV1云南株膜蛋白V3区氨基酸共有序列YNV3中每个氨基酸的平均变异度为7.66%。两组共有序列YNV3A和YNV3B,分别与HIV1美欧株及泰国流行株B亚群相应序列有较高同源性。这一结果提示,在进化上云南瑞丽HIV1流行毒株间有非常密切的关系,在这一时期该地区的流行毒株以HIV1美欧株、泰国株B亚群及其衍生株为主。 展开更多
关键词 I型 免疫缺损病毒 膜蛋白V3区 氨基酸序列
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磷酸化蛋白质组学鉴定PTPLAD1调控的结肠癌细胞酪氨酸磷酸化蛋白质 被引量:3
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作者 胡阳 杨杰 +1 位作者 余汝媛 汪洋 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期845-851,共7页
目的:用磷酸化蛋白质组学的方法鉴定并分析结肠癌细胞中含蛋白酪氨酸磷酸酶样A结构域蛋白1(PTPLAD1)调控的酪氨酸磷酸化蛋白。方法:运用siRNA技术沉默PTPLAD1的表达,于细胞培养条件下运用氨基酸稳定同位素标记技术(stable lsotope label... 目的:用磷酸化蛋白质组学的方法鉴定并分析结肠癌细胞中含蛋白酪氨酸磷酸酶样A结构域蛋白1(PTPLAD1)调控的酪氨酸磷酸化蛋白。方法:运用siRNA技术沉默PTPLAD1的表达,于细胞培养条件下运用氨基酸稳定同位素标记技术(stable lsotope labeling with amino acids in cell culture,SILAC)标记细胞,用酪氨酸磷酸化抗体免疫沉淀富集酪氨酸磷酸化蛋白,用LTQ-Orbitrap XL质谱鉴定因敲低PTPLAD1所出现的差异表达的酪氨酸磷酸化蛋白,进一步利用Ingenuity Pathway Analysis(IPA)软件对这些差异蛋白进行生物信息学分析。结果:用real-time PCR筛选得到有效的siRNA干扰片段,Western blot验证其干扰效果及有效干扰时间。质谱鉴定PTPLAD1调控的差异酪氨酸磷酸化蛋白共20个,其中显著上调的8个,显著下调的10个,主要为转录因子及肿瘤标志物相关蛋白。IPA软件的结果表明PTPLAD1调控的差异酪氨酸磷酸化蛋白的功能主要与器官发育分化、维持组织分化类型及细胞凋亡、增殖相关。结论:成功鉴定出PTPLAD1调控的差异酪氨酸磷酸化蛋白,可以为后续研究PTPLAD1在结肠癌的发生发展中的作用及机理提供基础。 展开更多
关键词 含蛋白酪氨酸磷酸酶样A结构域蛋白1 HCT-116细胞 小干扰RNA 氨基酸稳定同位素标记技术 磷酸化蛋白质组学
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HA蛋白位点变异影响H7N9亚型流感病毒特性的研究进展 被引量:2
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作者 严雅瑶 顾敏 刘秀梵 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期2093-2106,共14页
2013年春,我国首次出现人感染H7N9亚型禽流感疫情,对家禽养殖和公众健康均产生了严重危害,并且在第5波流行期又演变出血凝素(hemagglutinin,HA)蛋白裂解位点处存在插入突变的高致病性禽流感病毒株。HA作为A型流感病毒表面表达丰度最高... 2013年春,我国首次出现人感染H7N9亚型禽流感疫情,对家禽养殖和公众健康均产生了严重危害,并且在第5波流行期又演变出血凝素(hemagglutinin,HA)蛋白裂解位点处存在插入突变的高致病性禽流感病毒株。HA作为A型流感病毒表面表达丰度最高的糖蛋白,在介导病毒与宿主细胞表面受体的结合、促进病毒囊膜与细胞膜的融合、刺激机体产生中和抗体等方面具有至关重要的作用。本文围绕H7N9病毒,简要综述了HA蛋白的结构与功能,及其关键功能氨基酸位点变异影响病毒生物学特性的研究进展,以期为深入解析HA蛋白在H7N9病毒感染致病中的作用提供重要参考。 展开更多
关键词 流感病毒 H7N9 ha蛋白 功能氨基酸位点 感染与致病
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燕麦分离蛋白消化特性和消化产物对STC-1细胞分泌胆囊收缩素的影响 被引量:1
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作者 傅秋云 方子韵 +4 位作者 宋洪东 管骁 罗可大 孙注 余治权 《食品科学技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期35-44,共10页
为研究燕麦分离蛋白的消化特性及其消化产物对肠内分泌细胞分泌胆囊收缩素(CCK)的影响,以燕麦为原料,采用碱提酸沉法得到燕麦分离蛋白,分析燕麦分离蛋白在模拟胃肠道消化过程中的分子质量变化、氮释放规律、消化产物的氨基酸组成,计算... 为研究燕麦分离蛋白的消化特性及其消化产物对肠内分泌细胞分泌胆囊收缩素(CCK)的影响,以燕麦为原料,采用碱提酸沉法得到燕麦分离蛋白,分析燕麦分离蛋白在模拟胃肠道消化过程中的分子质量变化、氮释放规律、消化产物的氨基酸组成,计算氨基酸评分、化学评分和必需氨基酸指数,并以STC-1细胞为肠内分泌细胞模型评价消化产物对STC-1细胞分泌CCK的影响。实验结果表明:燕麦分离蛋白经胃肠消化后,消化产物的分子质量小于10 kDa,释放的可溶性氮的比例为90.11%,消化产物可溶性部分中游离氨基酸的比例为22.8%,肽的比例为67.31%,并且肽的分子质量主要在1000 Da以下(约74%);燕麦分离蛋白消化产物中必需氨基酸总量占38.75%,必需氨基酸与非必需氨基酸的比值为0.63,且必需氨基酸指数(0.95)大于0.90。燕麦分离蛋白消化产物对STC-1细胞影响的实验结果表明,燕麦分离蛋白消化产物对STC-1细胞生长具有显著的促进作用,且能够增加CCK的合成和分泌。研究结果表明,燕麦分离蛋白作为一种优质的蛋白质原料,不仅具有优良的营养功能,而且具有促进肠内分泌细胞分泌CCK的生物活性,在食品领域具有较大的应用潜力。 展开更多
关键词 燕麦分离蛋白 氨基酸组成 分子质量分布 模拟胃肠消化 STC-1细胞 胆囊收缩素分泌
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大鼠中性氨基酸转运蛋白HA-SNAT3融合蛋白的构建和鉴定(英文)
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作者 陈琛 张舟 《上海师范大学学报(自然科学版)》 2014年第3期221-228,共8页
钠离子依赖的中性氨基酸转运蛋白SNAT3是SLC38基因家族N系统的成员之一,主要在脑部和视网膜的星形胶质细胞中表达,负责转运谷氨酰胺,在脑部和肝脏的谷氨酸-谷氨酰胺循环中发挥重要作用.为了方便检测SNAT3在细胞膜上的表达和定位,本研究... 钠离子依赖的中性氨基酸转运蛋白SNAT3是SLC38基因家族N系统的成员之一,主要在脑部和视网膜的星形胶质细胞中表达,负责转运谷氨酰胺,在脑部和肝脏的谷氨酸-谷氨酰胺循环中发挥重要作用.为了方便检测SNAT3在细胞膜上的表达和定位,本研究采用PCR扩增和酶切连接的方法将HA标签连接到质粒pBK-CMVΔ(1098-1300)-SNAT3中大鼠SNAT3的N端,构建了真核生物表达载体pBK-CMVΔ-SNAT3.用脂质体转染法将该表达载体瞬时转染进人胚肾细胞(HEK293T cells),通过Western blotting检测HA-SNAT3融合蛋白的表达.结果表明,HA-SNAT3能够正确在细胞膜上表达.pBK-CMVΔ-SNAT3表达载体的成功构建对于进一步研究SNAT3的结构和功能提供了有效方法. 展开更多
关键词 中性氨基酸转运蛋白 ha-SNAT3融合蛋白 构建和鉴定
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粪便脱落细胞BMP3与BCAT1基因甲基化检测对结肠癌及癌前病变筛查的价值 被引量:2
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作者 李红海 张晓钿 +1 位作者 房一鸣 吴俊梅 《疑难病杂志》 CAS 2021年第7期699-703,共5页
目的分析粪便脱落细胞骨形态发生蛋白3(BMP3)、支链氨基酸氨基转移酶1(BCAT1)甲基化对结肠癌及癌前病变筛查的价值。方法纳入2020年2—12月海南医学院第一附属医院胃肠肿瘤外科患者94例,其中结肠癌患者43例(结肠癌组)、结肠腺瘤患者19例... 目的分析粪便脱落细胞骨形态发生蛋白3(BMP3)、支链氨基酸氨基转移酶1(BCAT1)甲基化对结肠癌及癌前病变筛查的价值。方法纳入2020年2—12月海南医学院第一附属医院胃肠肿瘤外科患者94例,其中结肠癌患者43例(结肠癌组)、结肠腺瘤患者19例(结肠腺瘤组)、单纯痔疮患者32例(对照组),收集结肠癌患者的临床分期、肿瘤最大径、肿瘤体积、分化程度、淋巴结转移、浸润程度情况;取其粪便样本采用甲基化特异性PCR(MSP)检测粪便脱落细胞BMP3、BCAT1甲基化情况;分析结肠癌患者粪便脱落细胞BMP3、BCAT1及二者联合基因甲基化与临床病理特征关系;受试者工作特征曲线(ROC)评价BMP3、BCAT1单基因及二者联合基因甲基化对结肠腺瘤和结肠癌的诊断价值。结果粪便脱落细胞BMP3、BCAT1单基因及二者联合基因甲基化阳性率比较,结肠癌组>结肠腺瘤组>对照组(χ^(2)/P=18.462/0.000、24.203/0.000、56.039/0.000)。粪便脱落细胞BMP3与BCAT1联合基因甲基化结肠癌患者肿瘤最大径、肿瘤体积大于非甲基化患者(t/P=11.417/0.000、3.381/0.002),分化程度越低、临床分期越高基因甲基化阳性率越高,且高于非甲基化患者(χ^(2)/P=11.646/0.003、4.882/0.027)。粪便脱落细胞BMP3、BCAT1单基因及二者联合基因甲基化对结肠腺瘤诊断的ROC曲线显示,BMP3基因甲基化(AUC=0.579,95%CI 0.433~0.716)、BCAT1基因甲基化(AUC=0.521,95%CI 0.377~0.663)、二者联合基因甲基化(AUC=0.574,95%CI 0.428~0.711),三者AUC比较,差异无统计学意义(Z=0.052,P=0.959)。以上指标对结肠癌诊断的ROC曲线显示,BMP3基因甲基化(AUC=0.701,95%CI 0.585~0.802)、BCAT1基因甲基化(AUC=0.744,95%CI 0.630~0.838)、二者联合基因甲基化(AUC=0.852,95%CI 0.752~0.924),三者AUC比较,BMP3与BCAT1联合基因甲基化的AUC最高(Z=3.598,P=0.000)。结论粪便脱落细胞BMP3、BCAT1甲基化对结肠癌癌前病变筛选价值不大,但对结肠癌有较高的筛选价值,且与结肠癌分化程度、临床分期等关系密切,有一定应用价值。 展开更多
关键词 骨形态发生蛋白3 支链氨基酸氨基转移酶1 甲基化 结肠癌 癌前病变
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Protein Supplementation for the Prevention and Management of Sarcopenia in the Elderly 被引量:1
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作者 Na Li Jia Jia Wang +3 位作者 Zong Liang Lu Ming Xing Zhu Hong Xia Xu Jie Liu 《Journal of Nutritional Oncology》 2019年第2期74-84,共11页
Sarcopenia is common in patients with many physiological or pathological conditions, especially in aging people. Nutrition plays an important role in the prevention and treatment of sarcopenia. Sarcopenia is often rel... Sarcopenia is common in patients with many physiological or pathological conditions, especially in aging people. Nutrition plays an important role in the prevention and treatment of sarcopenia. Sarcopenia is often related to insufficient protein intake in the elderly. Muscle protein synthesis occurs mainly through mTORC1 pathway, and degradation occurs by ubiquitination-mediated pathways. This review summarizes the growing body of evidence, including substantial clinical trials, which increasing the protein intake can serve as the basis for preventing and managing muscle loss in patients with sarcopenia. Supplementation of essential amino acids (EAA), branched chain amino acids (BCAA), and especially leucine-rich whey protein may promote muscle protein synthesis by activating the mTORC1 signaling pathway, and may inhibit protein degradation by decreasing ubiquitin-mediated degradation. Taking in sufficient energy and protein and engaging in active exercise are the main methods of stimulating muscle protein synthesis and preventing or managing sarcopenia. Therefore, it is necessary to strengthen research on the use of protein supplements for not only elderly patients, but also those with tumor cachexia and other diseases related to sarcopenia. 展开更多
关键词 SARCOPENIA Muscle mass protein synthesis mTORC1 pathway Essential amino acidS LEUCINE WHEY protein
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NMR-based metabolomics pro!le analysis in understanding metabolic variations of Bra LTP1-overexpressing Brassica napus
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作者 Nini Tian Pandi Wang +3 位作者 Xiaojuan Xiong Ping Fu Gang Wu Fang Liu 《Oil Crop Science》 2018年第1期1-11,共11页
BraLTP1 is an important member of lipid transfer protein family in Brassica napus.The aim of current study was to detect, classify and follow variations in metabolite profiling of B. napus with overexpression of BraLT... BraLTP1 is an important member of lipid transfer protein family in Brassica napus.The aim of current study was to detect, classify and follow variations in metabolite profiling of B. napus with overexpression of BraLTP1. In this study, metabolic change in leaves of BraLTP1-overexpressing B. napus plants (BraLTP1-22) and negative control (BraLTP1-22N) was investigated using nuclear magnetic resonance (NMR). Statistical strategy of principle component analysis (PCA) was performed to identify related difference metabolites. PCA score plots indicated not only high reproducibility of various treatments, but also significant difference of metabolite levels between different treatments. PCA loading plots indicated main responsible metabolites and a total of 50 metabolites were quantitatively determined. A wide range of metabolites were detected due to BraLTP1 overexpression,including biosynthesis and metabolism of sugars, amino acids, ammoniums compounds and organic acids. Furthermore, concentrations of 17 amino acids were determined for other set of samples by amino acids component analysis assay. The link between metabolite variations and phenotype were also discussed in BraLTP1-overexpressing B. napus.This work will help to gain insight into BraLTP1 function in B. napus in metabolism. 展开更多
关键词 BRASSICA NAPUS BraLTP1 lipid transfer protein NMR based metabolomics amino acids component ANALYSIS
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