探索替莫唑胺联合amlexanox对胶质瘤细胞的作用效果及机制

目的:探索替莫唑胺(TMZ)联合amlexanox对胶质瘤细胞的作用效果及机制。方法:本研究分为体外和体内实验,其中体外实验分为4组:对照(NC)组、amlexanox组、TMZ组和TMZ+amlexanox组,包括检测细胞增殖能力的cell counting kit-8(CCK-8)实验、检测细胞侵袭和迁移的细胞划痕和Transwell实验及检测核因子κ-B激酶抑制剂(IKBKE)及蛋白激酶B(Akt)通路蛋白质变化的Western印迹实验;体内实验分为3组:NC组、TMZ组和TMZ+amlexanox组,包括颅内成瘤实验和免疫组织化学染色(IHC)实验。结果:与amlexanox组、TMZ组相比,TMZ联合amlexanox组U87 MG和原代细胞增殖能力明显受抑制、划痕愈合面积显著降低(P<0.01)。Transwell侵袭和迁移实验表明,TMZ+amlexanox组穿出小室细胞数量显著降低(P<0.01)。Western印迹实验结果显示,TMZ联合amlexanox组Akt和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)活性明显受抑制。动物实验表明,TMZ联合amlexanox组裸鼠颅内肿瘤生长显著抑制(P<0.01),颅内肿瘤动物模型的生存时间延长(由21 d延长至31 d);IHC结果显示,TMZ联合amlexanox组肿瘤标本中磷酸化Akt(p-Akt)、磷酸化mTOR(p-mTOR)表达量明显下降。结论:TMZ联合amlexanox能显著抑制U87 MG和原代细胞增殖、迁移和侵袭能力,而且二者联合能显著抑制裸鼠颅内肿瘤生长并延长裸鼠生存时间。该作用机制可能是amlexanox在一定程度上通过抑制IKBKE活性逆转TMZ诱导Akt激活,进而降低胶质瘤细胞对TMZ的耐药性。

A Validated Stability Indicating LC Method for Amlexanox in Bulk Drugs

A novel and sensitive stability indicating RP-HPLC method has been developed for the quantitative determination of amlexanox in bulk drugs. The separation was accomplished on C18 column using 10 mM ammonium dihydrogen orthophosphate (pH adjusted to 4.8 by using ortho phosphoric acid) and methanol (30:70 v/v) as mobile phase in an isocratic elution mode at a flow rate of 1.0 mL min-1. The eluents were monitored by PDA detector at 245 nm. The drug was subjected to stress conditions of hydrolysis, oxidation, photolysis and thermal degradation. Significant degradation was found under basic, acidic stress and UV light. The resolution (Rs) between amlexanox and its degradation products was found to be greater than 2.5. Regression analysis shows correlation coefficient greater than 0.999 for amlexanox. The inter and intraday precision values for amlexanox were found to be within 1.0% RSD. The method has shown good and consistent recoveries for amlexanox in bulk drugs (98.86% - 101.05%). The developed method was validated with respect to linearity, accuracy, precision and robustness.

氨来呫诺口腔贴片治疗轻型复发性口腔溃疡的临床研究

目的:研究氨来诺口腔贴片治疗轻型复发性口腔溃疡的疗效和安全性。方法:将42例轻型复发性口腔溃疡患者随机分为试验组(20例)与对照组(22例),分别给予氨来诺口腔贴片、安慰剂,片剂贴于患部,4次/d,连用5d。结果:治疗3d、5d,试验组与对照组溃疡面积愈合有效率分别为85.0%、36.4%(P<0.005)和95.0%、59.1%(P<0.005);溃疡疼痛缓解有效率分别为90.0%、59.1%(P<0.005)和95.0%、90.9%(P<0.05)。结论:氨来诺口腔贴片可加速溃疡愈合和缓解疼痛,且安全。

氨来呫诺口腔膜治疗轻型复发性口腔溃疡的临床研究

目的研究氨来呫诺口腔膜治疗轻型复发性口腔溃疡的有效性和安全性。方法采用随机、双盲、平行对照的临床试验方法。试验组(17例)和对照组(15例)分别给予氨来呫诺口腔膜和安慰剂贴于患部,4次/d,连用5d。在治疗满3d和治疗满5d时观察溃疡面积大小和疼痛指数。结果用药后3d和5d,试验组和对照组溃疡面积愈合有效率分别为76.5%、31.3%和100.0%、73.3%;溃疡疼痛缓解有效率分别为82.4%、86.7%和94.1%、86.7%。结论氨来呫诺口腔膜可促进溃疡愈合,使用安全,但止痛效果不太明显。

正交设计试验多目标同步优化氨利口腔膜剂处方

目的:对氨利口腔膜剂进行处方优化。方法:以聚乙烯醇(PVA17-88)、羧甲基纤维素纳(CMC-Na)、甘油为成膜材料,以膜的柔软性、成膜性、光滑性、均匀性、溶出度作为考察指标,采用正交设计优化处方。结果:最佳成膜材料处方为PVA17-88 3.0 g,CMC-Na 2.0 g,甘油2.5 ml。按照最优处方制备的膜剂符合《中国药典》的有关规定,膜剂体外释药曲线符合Higuchi方程。结论:该膜剂处方和制备工艺可行。

氨来呫诺口颊黏附片的制备与评价

目的研制氨来诺口颊黏附片,考察其生物黏附性和体外释药行为之间的关系。方法采用羧甲基纤维素钠、低取代羟丙基纤维素和卡波姆作为黏附性材料以不同配比制备氨来诺口颊黏附片,用自制黏附力测定装置测定其体外黏附力,网碟法测定体外释放度。结果以羧甲基纤维素钠、低取代羟丙基纤维素和卡波姆(17∶8∶3)为黏附材料的处方制得的口颊黏附片较好。结论口颊黏附片的生物黏附性与体外释药行为具有一定的相关性,通过调整处方可筛选出生物黏附性和体外释药均较理想的处方。

氨来呫诺口含片的处方优化和质量标准研究

目的:优化氨来呫诺口含片的处方工艺,并建立氨来呫诺口含片的质量标准。方法:以卡波姆和羟丙甲基纤维素的总量在处方中所占的比例(因素A)和卡波姆与羟丙甲基纤维素的重量比(因素B)为考察因素,以颗粒的流动性和溶化性作为考察指标,采用正交试验设计法优化处方,采用高效液相色谱法测定氨来呫诺含量。结果:最佳处方为卡波姆和羟丙甲基纤维素的总量在处方中占60%,卡波姆与羟丙甲基纤维素的重量比为1:3。制得的氨来呫诺含片口感好、表面光滑美观、色泽均匀、硬度适中、服用方便,质量可靠。结论:氨来呫诺含片制剂处方工艺简单合理,质量可控。

氨来呫诺对大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的影响

目的探讨氨来呫诺调控大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨分化的作用,为其在抗骨质疏松治疗等方面的应用提供理论依据。方法体外分离、培养SD大鼠BMSCs。(1)通过CCK8法检测不同浓度氨来呫诺对BMSCs增殖的影响;(2)设置对照组和氨来呫诺(25μmol/L)处理组,利用成骨诱导培养基进行诱导,诱导后第10天进行碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色检测;诱导后第21天进行茜素红染色;(3)实时荧光定量PCR检测诱导后第3、7、14天成骨分化相关基因ALP、Runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,RUNX2)、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)的表达水平。结果 (1)CCK8检测结果显示25μmol/L氨来呫诺对BMSCs增殖没有明显影响,50μmol/L氨来呫诺显著抑制BMSCs的增殖,故在后续实验中均采用25μmol/L氨来呫诺作为效应浓度。(2)干预后第10天,氨来呫诺处理组较对照组的ALP染色阳性面积明显增多;干预后第21天,氨来呫诺处理组较对照组的钙结节形成密集,钙结节数目明显增多。(3)干预后第7天,氨来呫诺处理组较对照组中ALP的表达显著提高;第14天时,氨来呫诺处理组较对照组中RUNX2、OPN的表达显著提高。结论氨来呫诺可能通过促进BMSCs成骨分化相关基因表达,进而促进BMSCs细胞中ALP的表达和钙结节形成,促进BMSCs成骨分化。

星点设计-效应面法优化氨来呫诺眼用温敏凝胶的处方

目的研制氨来呫诺眼用温敏凝胶。方法采用冷法工艺制备氨来呫诺眼用温敏凝胶,以泊洛沙姆407和泊洛沙姆188为温敏凝胶材料,以二者用量为考察因素,以人工模拟泪液稀释前后的胶凝温度为考察指标,采用星点设计-效应面法进行处方优化并验证。结果氨来呫诺眼用温敏凝胶优化处方P407和P188的质量浓度配比为190∶40,胶凝温度为28.37℃,经模拟泪液稀释后胶凝温度为32.63℃。结论星点设计-效应面法优化处方的方法可行,建立的数学模型预测性好,该眼用温敏凝胶满足眼部用药的设计要求,可进一步研究开发。

靶向抑制TANK结合激酶1表达对舌及下咽鳞癌细胞增殖及凋亡的影响

目的分析靶向抑制头颈部鳞癌细胞中TANK结合酶1(TANK binding,kinase 1,TBK1)表达后细胞增殖与凋亡水平改变。方法采用转染TBK1 siRNA靶向抑制人下咽鳞癌细胞FaDu、人舌鳞癌细胞Cal-27中TBK1的表达,用CCK-8、流式细胞术、Western Blot等方法检测FaDu及Cal-27中靶向抑制TBK1表达前后细胞的增殖及凋亡水平;克隆形成实验及细胞增殖实验(CCK-8法)检测梯度浓度氨来呫诺处理后FaDu及Cal-27细胞增殖改变。结果Western Blot结果显示,转染后FaDu及Cal-27细胞中TBK1蛋白表达显著抑制;细胞增殖实验结果显示,靶向抑制TBK1蛋白表达后,FaDu及Cal-27的增殖显著抑制;流式细胞术检测显示FaDu及Cal-27细胞凋亡显著增加;克隆形成及细胞增殖实验结果表明FaDu及Cal-27细胞的增殖随着氨来呫诺浓度增加呈现显著下降(P<0.05)。结论靶向抑制TBK1蛋白表达后,舌及下咽鳞癌细胞的增殖能力明显降低,细胞凋亡显著增加;TBK1抑制剂氨来呫诺对于高表达TBK1的舌及下咽鳞状细胞癌的增殖具有抑制作用。

氨来呫诺糊剂治疗顽固性口腔扁平苔藓的可行性初探

目的:初步探讨采用氨来呫诺糊剂治疗顽固性糜烂型口腔扁平苔藓的可行性。方法:5例顽固性糜烂型口腔扁平苔藓患者,采用局部涂用氨来呫诺糊剂1周,观察其初步疗效和可能发生的不良反应。结果:1例治疗后显效,2例有效,2例无效。无不良反应发生。结论:氨来呫诺糊剂治疗顽固性糜烂型OLP有一定疗效趋势。

氨来帖诺糊剂在治疗急性放射性皮肤损伤中的临床运用

目的:评价氨来帖诺糊剂治疗急性放射性皮炎的临床疗效。方法:将60例在放射治疗中出现Ⅱ级急性放射性皮炎的头颈部肿瘤患者随机分为2组:氨来帖诺糊剂治疗组30例,复方维生素B12配制液(维生素B_(12)+庆大霉素)对照组30例。结果:两组治疗效果比较,差异有统计学意义(×2=10.000,P<0.01)。结论:氨来帖诺糊剂治疗组对急性放射性皮炎有疗效,缩短皮损的愈合时间。

氨来呫诺含片的制备与质量控制

目的考察氨来呫诺含片的制备与质量控制方法。方法采用高效液相色谱法测定氨来呫诺含片的含量。色谱柱为汉邦Lichrospher C18(250 mm×4.6 mm,5μm);甲醇-0.01 moL.L-1磷酸二氢铵溶液(70∶30)为流动相;流速1.0 mL.min-1;检测波长350 nm,柱温25℃;进样体积20μL。结果盐酸氨来呫诺含片的含量测定线性范围为1～24μg.mL-1(r2=0.999 8),平均回收率100.07%,相对标准偏差(RSD)为1.46%(n=9);按处方制备的3批样品含量均匀度、溶化性检查、脆碎度检查均符合规定。制得的氨来呫诺含片口感好,表面光滑美观,色泽均匀,硬度适中,服用方便。结论氨来呫诺含片制剂处方工艺可靠,检测方法简便、准确,适用于医院制剂室配制和应用。

高效液相色谱法在甘草锌口腔复合膜剂测定中的应用效果

目的利用高效液相色谱法对甘草锌口腔复合膜剂中的氨来呫诺与甘草酸的含量进行测定,以提高口腔质控的水平。方法利用标准曲线的制备方法称取适量的氨来呫诺和甘草酸单铵盐的标准品进行处理,对其峰面积进行测定,最后利用回归方程计算其各自的浓度。结果经测定与计算,氨来呫诺的精密度RSD约为0.51%;甘草锌的精密度RSD约为0.58%,金属锌的含量约为0.66%,甘草酸的平均回收率约为98.82%。结论氨来呫诺可以有效地减轻患者的疼痛感,而甘草锌则具有锌与甘草酸的药理作用,在临床中具有推广价值。

复方甘草锌口腔复合膜的质控方法研究

目的:确定金属锌的含量,并且建立高效液相色谱法测定甘草锌口腔复合膜剂中甘草酸和氨来呫诺含量的方法。方法:通过配位滴定方法测定金属锌含量;色谱柱为Kromasil-C18柱(Φ200mm×4.6mm,5μm),以甲醇-0.2mol/L醋酸铵溶液-冰醋酸(67:33:1)为流动相,检测波长为250nm,流速为0.8ml/min,进样量为20μl,柱温:室温。结果:金属锌含量为0.67%;甘草酸在4.90～9.80μg/ml范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9999,n=9),平均回收率为98.81%,RSD值为0.62%(n=9);氨来呫诺在1～6μg/ml范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9999,n=9),平均回收率为99.61%,RSD值为0.90%(n=9)。结论:该方法简便、灵敏、准确,重现性好,可用于复方甘草锌口腔复合膜剂的质量控制。

氨来呫诺糊剂治疗复发性口腔溃疡的疗效探讨

目的探讨氨来呫诺糊剂治疗轻型复发性口腔溃疡的临床效果。方法将2011年5月—2012年6月在该科治疗的轻型复发性口腔溃疡患者94例,随机分为2组,一组采用氨来呫诺糊剂治疗,另一组采用2%碘甘油治疗,两者均采用局部涂抹的方式。结果氨来呫诺糊剂治疗组总有效率93.62%, 2%碘甘油的总有效率67.39%,两组总有效率比较差异有统计学意义(P<0.05)。

氨来呫诺凝胶治疗家兔口腔溃疡的疗效观察

目的:探讨氨来呫诺凝胶对家兔口腔溃疡模型的疗效。方法:将36只家兔随机分为治疗组、对照组、空白组,每组各12只,使用苯酚溶液灼烧家兔口角黏膜形成溃疡。溃疡形成后每日8时、12时、16时对家兔进行治疗,治疗组、对照组和空白组分别使用氨来呫诺凝胶、氨来呫诺糊剂和空白凝胶基质,每日测量家兔溃疡面最大直径,对溃疡愈合程度和愈合时间进行组间对比观察。结果:治疗5 d时,治疗组疗效优于空白组(P<0.05);全部家兔治愈后进行统计,治疗组和对照组愈合时间小于空白组(P<0.05)。结论:氨来呫诺凝胶治疗家兔口腔溃疡疗效确切。

氨来呫诺糊剂治疗复发性阿弗他繯竦牧俅惭芯?

目的:研究50g/L的氨来呫诺糊剂治疗复发性阿弗他繯竦挠行院桶踩浴7椒?应用随机、双盲、平行对照的临床试验方法,试验组和对照组各纳入120例轻型复发性阿弗他受试者,分别应用50g/L氨来呫诺糊剂和空白基质糊剂,4次/d;应用5d。于初诊后第4天和第6天进行随访,采用视觉类比量表获取的疼痛指数评估其镇痛效果,并比较2组受试者的溃疡愈合时间,用药前、后进行血常规、血生化和心电图检查。结果:试验组和对照组完成病例分别为115例和113例(P>0.05)。初诊时2组的总体疼痛指数分别为18.12±7.18和18.09±7.15(P>0.05);第4天分别为7.56±6.87和10.00±7.07(P<0.01);第6天分别为2.14±4.70和3.84±5.75(P<0.01)。50%受试者溃疡愈合在试验组为5d,空白基质组为6d。与研究药物有关的不良事件在氨来呫诺组有10例(8.40%),在空白基质组中有9例(7.5%)(P>0.05)。全部不良事件均为轻度,未经处理即好转。2组受试者在治疗结束时血常规、血生化和心电图检查结果均为正常或异常但无临床意义。

氨来呫诺经对兔口腔颊黏膜的渗透性

目的研究氨来呫诺对兔口腔颊黏膜的渗透机制。方法在不同pH值溶液条件下,测定氨来呫诺的表观油/水分配系数。利用兔口腔颊黏膜体外渗透实验装置,测定不同pH值对氨来呫诺渗透性的影响。结果在pH 5.8,6.4和7.4条件下,氨来呫诺的表观油/水分配系数分别为100.8,33.0和16.2,氨来呫诺的渗透系数分别为4.54,1.81和0.99(cm·s^(-1))。结论表明氨来呫诺的渗透性符合pH-分配学说。

氨来呫诺鼻用温敏凝胶喷雾剂处方优化及质量控制

目的:研制氨来呫诺鼻用温敏凝胶喷雾剂,建立其质量控制方法。方法:采用冷法工艺制备氨来呫诺鼻用温敏凝胶喷雾剂,以泊洛沙姆407和泊洛沙姆188为基质,并以胶凝温度与成胶前黏度为考察指标,采用星点设计-效应面法对两种基质的用量进行考察;采用HPLC法测定氨来呫诺的含量,参照《中国药典》2010年版相关规定,对氨来呫诺鼻用温敏凝胶喷雾剂的外观、p H、黏度、含量、装量、每瓶总喷次和每喷主药含量进行测定。结果:泊洛沙姆407和泊洛沙姆188的最佳配比为17.0%和0.9%;凝胶中氨来呫诺含量测定的平均回收率为98.8%,RSD为1.7%(n=9);制备的3批样品各项质量指标均符合规定。结论:氨来呫诺鼻用温敏凝胶喷雾剂处方和制备工艺合理可行,质量可控,可进一步研究开发。