草果提取物对金黄色葡萄球菌抑菌机制的初探

对草果抑菌物质进行初步提取和分离,研究石油醚萃取物、氯仿萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物对金黄色葡萄球菌生长曲线及膜通透性的影响,探讨草果提取物的抑菌机理。结果表明,乙酸乙酯萃取物和氯仿萃取物最小抑菌浓度最小均为1.25mg/mL,石油醚萃取物为2.5mg/mL,正丁醇萃取物为5mg/mL。在草果提取物最小抑菌浓度作用下,金黄色葡萄球菌生长曲线各时间点的OD值增长不明显,细胞膜通透性有所提高,其中蛋白质含量呈小幅度降低,菌液电导率呈上升趋势。草果提取物能有效地抑制金黄色葡萄球菌的生长,可能与其对金黄色葡萄球菌细胞膜和细胞壁的破坏直接相关。

地榆鞣质提取物的抗菌活性及对金黄色葡萄球菌的抑菌机制研究

目的:研究地榆鞣质提取物的体外抗菌活性及其对金黄色葡萄球菌的抑菌机制。方法:采用牛津杯法和试管二倍稀释法测定地榆鞣质提取物的抗菌活性,并以金黄色葡萄球菌为供试菌,测定胞外碱性磷酸酶(AKP)、钾离子(K^+)、可溶性蛋白含量,及菌体胞内和胞外总三磷酸腺苷酶(T-ATPase)含量;通过聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)观察蛋白谱带变化和通过透射电镜(TEM)观察菌体超微结构,从而阐述地榆鞣质的抗菌机制。结果:地榆鞣质能够有效抑制革兰阳性菌,而对革兰阴性菌无明显的抑制作用。地榆鞣质作用金黄色葡萄球菌后,菌悬液中AKP、K^+、可溶性蛋白、DNA和RNA等大分子物质的含量比对照组显著增大;胞内和胞外ATP酶浓度发生显著变化;SDS-PAGE蛋白图谱结果表明,经地榆鞣质处理的菌体无明显的蛋白条带形成;透射电镜观察发现,菌体细胞完整性被破坏。结论:地榆鞣质在体外具有显著的抗菌活性,能够改变金黄色葡萄球菌细胞膜的通透性,并破坏细胞的完整性。

夹江石斛水提取物对金黄色葡萄球菌的抑菌作用及机制研究

探讨夹江石斛水提取物(DJWEs)对金黄色葡萄球菌的抑菌作用及抑菌机制。采用96孔板微量肉汤稀释法以及平板培养法检测DJWEs对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(MIC),并通过测定培养液中碱性磷酸酶(AKP)、电导率、大分子物质吸光度(OD)值以及菌体DAPI的荧光强度,研究DJWEs对金黄色葡萄球菌细胞壁通透性、细胞膜通透性和核酸合成的影响。DJWEs对金黄色葡萄球菌的MIC浓度为70 mg/mL;经DJWEs处理后,金黄色葡萄球菌培养液中AKP的含量明显增高(P<0.05),但电导率和大分子物质的OD值差异无统计学意义(P>0.05),而DAPI染色后核酸荧光强度有显著变化(P<0.01)。DJWEs对金黄色葡萄球菌有较强的抑菌作用,抑菌机理可能涉及影响金黄色葡萄球菌的细胞壁通透性和核酸DNA和RNA合成。

桂千金子提取物对金黄色葡萄球菌体外抗菌作用及机制的初步研究

目的:探讨桂千金子提取物对金黄色葡萄球菌的体外抗菌活性及作用机制。方法:通过体外抑菌试验,测定桂千金子乙醇提取物及其乙酸乙酯、正丁醇萃取物对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC),比较标准菌株金黄色葡萄球菌(SA)及临床分离的金黄色葡萄球菌(MSSA)和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的抗菌活性大小。测定桂千金子乙醇提取物作用后MRSA碱性磷酸酶(AKP)活性、外流DNA/RNA大分子含量、胞内蛋白含量的变化,采用电镜观察MRSA细胞形态。结果:桂千金子提取物对3种供试菌株的抑菌圈直径均大于15 mm,MIC为1.56~12.50 mg/mL,MBC为3.13~25.00 mg/mL,抗菌强度排序为乙醇提取物≈乙酸乙酯萃取物>正丁醇萃取物;与空白对照组比较,实验组AKP活性升高(P<0.05),各实验组与空白组外流DNA/RNA大分子含量和胞内蛋白含量比较,差异均无统计学意义(均P>0.05);电镜下MRSA菌体细胞变形,表面粗糙有颗粒附着。结论:桂千金子提取物对金黄色葡萄球菌及其耐药菌株均具有显著的抗菌活性,其抗菌作用可能与细胞壁结构破损致通透性发生改变有关。

赪桐提取物抗菌活性及其对金黄色葡萄球菌的抗菌机理

【目的】揭示赪桐提取物(Extracts from Clerodendrum japonicum,EFC)对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的抗菌机理,为临床抗病原菌感染药及植物杀菌剂的研发提供理论依据。【方法】采用纸片扩散法和微量肉汤稀释法测定金黄色葡萄球菌、伤寒沙门菌和枯草芽孢杆菌对EFC的敏感性,明确EFC的抗菌活性;通过试剂盒、流式细胞仪及扫描电镜等测定EFC作用后金黄色葡萄球菌细胞膜、细胞壁、三羧酸(TCA)循环、可溶性蛋白、胞内活性氧(ROS)水平、细胞凋亡及形态结构的变化,研究EFC的抗菌机理。【结果】EFC对金黄色葡萄球菌、伤寒沙门菌和枯草芽孢杆菌3种供试细菌均具有抗菌活性,其中对金黄色葡萄球菌的抗菌活性最强,其抑菌圈(IZ)、最小抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)分别为19.04 mm、0.50 mg/mL和1.00 mg/mL。经EFC作用10 h后,金黄色葡萄球菌的乳酸脱氢酶(LDH)、钾离子(K+)及碱性磷酸酶(AKP)外泄分别显著增加72.0%、43.0%和78.0%(P<0.05,下同),琥珀酸脱氢酶(SDH)和苹果酸脱氢酶(MDH)活性分别显著下降80.0%和36.4%。金黄色葡萄球菌经EFC作用24 h后,与对照组相比,5MIC(2.50 mg/mL)、10MIC(5.00 mg/mL)和20MIC(10.00 mg/mL)组的胞外蛋白含量分别上升28.6%、41.8%和61.5%,胞内蛋白含量分别下降40.9%、61.3%和82.5%,胞内ROS水平分别增加9.1%、33.5%和51.0%,细胞凋亡率分别增加24.0%、50.6%和72.8%。经EFC作用24 h后,扫描电镜下的菌体形态结构不规则、萎缩、畸形。【结论】EFC通过破坏金黄色葡萄球菌细胞壁和细胞膜的完整性及通透性,影响蛋白合成,导致TCA循环减慢而发挥抑菌作用。

黄芩提取物对金黄色葡萄球菌的体外抗菌活性及作用机制

试验旨在探究黄芩提取物对金黄色葡萄球菌的抗菌活性及作用机制。采用水提醇沉法获得黄芩提取物,探究其对金黄色葡萄球菌的体外抑菌机制。结果显示,黄芩提取物对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC)为1.25 g/L、最低杀菌浓度(MBC)为2.50 g/L。在30 h时,2 MIC、4 MIC的黄芩提取物可显著抑制金黄色葡萄球菌的生长(P<0.05)。1 MIC、2 MIC的黄芩提取物处理金黄色葡萄球菌,金黄色葡萄球菌胞外可溶性蛋白及核酸含量显著高于对照组(P<0.05)。研究表明,2 MIC黄芩提取物可通过破坏金黄色葡萄球菌细胞膜,导致金黄色葡萄球菌核酸和可溶性蛋白外泄,对金黄色葡萄球菌具有明显的抗菌活性。

臭茉莉正丁醇提取物抑菌活性研究

目的:研究臭茉莉正丁醇提取物(ECP)的抑菌效果及机理。方法:采用纸片扩散法、微量肉汤稀释法测定表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球、伤寒杆菌及绿脓杆菌对ECP的敏感性。并通过考察金黄色葡萄球菌(S.aureus)细胞膜、细胞壁及形态结构等的变化,研究ECP的抑菌活性及机理。结果:ECP对4种供试细菌均具有抑菌活性,其中对S.aureus的抑菌活性最强,其最低抑菌浓度(MIC)及最低杀菌浓度(MBC)均为0.5 mg/mL。ECP处理后S.aureus细胞内容物外泄、氧化损伤和细胞凋亡均明显增加,脱氢酶活性及蛋白含量均明显下降,扫描电镜(SEM)观察到菌体形态结构受损严重。结论:ECP对S.aureus的抑菌靶点可能为细胞膜、细胞壁、三羧酸(TCA)循环关键酶、蛋白质和遗传物质等,臭茉莉具有成为天然食品添加剂的潜力。

厚鳞柯叶水提物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的抑菌机理

【目的】明确厚鳞柯叶水提物(Aqueous extract of Lithocarpus pachylepis leaf,AELL)对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)的抑菌效果及其作用机理,为开发安全高效、低毒环保、无残留的抗MRSA药物提供理论依据。【方法】采用微量肉汤稀释法、平板菌落计数法分别测定AELL对MRSA的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),以比浊法绘制AELL处理后MRSA的生长曲线,并通过酶标仪测定、流式细胞仪及扫描电镜等测定AELL处理后MRSA生物被膜清除作用、纤维蛋白原黏附率、呼吸代谢活力、可溶性蛋白含量、DNA含量、细胞周期分布、细胞凋亡率、胞内活性氧(ROS)水平及其形态结构特征的变化情况。【结果】AELL可能通过影响MRSA对数生长期而发挥抑制或杀灭作用,其MIC和MBC均为0.15625 mg/mL。与空白对照组相比,经AELL处理后MRSA的生物被膜含量明显下降;随着AELL处理浓度的增加,MRSA相对黏附率呈逐渐下降趋势,从47.486%下降到5.440%。随着AELL处理时间的延长,MRSA的呼吸代谢活力逐渐降低,且呼吸链脱氢酶活性明显低于空白对照组,说明AELL可能是通过抑制MRSA呼吸链脱氢酶活性促使菌株处于死亡甚至呈破碎状态。经AELL处理后,MRSA可溶性蛋白呈明显下降趋势,还扰乱MRSA细胞周期分布,使其停滞在S期,同时抑制DNA合成;MRSA的细胞凋亡率和胞内ROS水平均随AELL浓度的增加而呈逐渐上升趋势;MRSA的形态结构不规则、萎缩、畸形,细胞塌陷,细胞间隙出现裂痕,细胞壁严重弯曲、变形。【结论】AELL具有开发成抗MRSA兽药、植物杀菌剂的潜力,其抑菌机理是通过清除MRSA生物被膜,降低其对纤维蛋白原黏附力,抑制蛋白和DNA生成,阻碍呼吸代谢,延缓细胞繁殖周期及促进菌体内脂质过氧化等,从而导致菌体细胞凋亡。

草果萃取物对金黄色葡萄球菌的抑菌作用及其机理研究

对草果抑菌物质提取分离,得到石油醚萃取物、氯仿萃取物和乙酸乙酯萃取物,通过生长曲线的绘制,采用便携式溶氧仪和扫描电镜研究其对金黄色葡萄球菌呼吸速率及细胞形态的影响,以探究草果抑菌物质的作用机制。研究结果表明:金黄色葡萄球菌生长曲线各时间点的OD值增长不明显。石油醚萃取物、氯仿萃取物和乙酸乙酯萃取物均能不同程度的抑制细胞呼吸速率,且主要通过糖代谢的三羧酸循环途径;氯仿萃取物和乙酸乙酯萃取物导致细胞大片粘连,对金黄色葡萄球菌细胞膜影响较大。草果萃取物对金黄色葡萄球菌的抑制,可能与其对细胞呼吸及细胞结构的影响直接相关。