响应面法优化白蔹多糖的闪式提取工艺

目的:通过单因素实验筛选和响应面分析,确定闪式提取白蔹多糖的最优工艺条件。方法:以中药白蔹为原料,通过单因素试验,以料液比、电压、提取时间为自变量,确定主要影响因素;通过响应面分析法确定闪式提取白蔹多糖的最优工艺条件。结果白蔹多糖的闪式提取最优工艺条件为料液比(g/m L)1∶25,电压220 V,提取时间110 s,此条件下提取白蔹多糖的理论提取率为10.14%,验证实验中白蔹多糖的提取率为9.92%。结论:闪式提取法适合白蔹多糖的提取,该方法提取率高,提取时间少,具有快捷、方便的优点。

白蔹的化学成分、质量控制及药理作用研究进展

目的全面系统总结中药白蔹的成分、质量控制和药理作用。方法查找迄今为止发表的白蔹相关论文,总结了白蔹分离提纯的化学成分、质量控制和主要的药理作用。结果白蔹成分大体有:多酚类、蒽醌类、黄酮类、甾醇类、有机酸类、三萜类、挥发油类和木脂素类等;质量控制:还没有明确标准,目前主要有大黄素、没食子酸、原儿茶醛、儿茶素、白藜芦醇以及总酚酸含量测定方法,可用于白蔹的质量控制。但是由于产地不同,含量差异较大,需要综合多因素考虑。药理作用:抑菌作用、抗肿瘤、免疫调节、促进伤口愈合和保护多巴胺神经元等。结论中药白蔹成分逐渐明朗,具有重要的药理作用,但是质量控制不明确,还有待于进一步深入研究。

白蔹的化学成分(Ⅱ)

目的研究白蔹的化学成分。方法利用各种色谱法进行分离,根据理化性质和波谱分析鉴定化合物结构。结果从白蔹的氯仿和乙酸乙酯萃取部分又分离得到7个已知成分,分别鉴定为五味子苷(1)、大黄酚(2)、大黄素甲醚(3)、大黄素-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(4)、poriferast-5-en-3β,7α-diol(5)、棕榈酸(6)、齐墩果酸(7)。结论化合物4和5为首次从该植物中分离得到。

白蔹化学成分的研究

从白蔹Ａｍｐｅｌｏｐｓｉｓｊａｐｏｎｉｃａ（Ｔｈｕｎｂ．）Ｍａｋｉｎｏ块根中分离出７种化合物，经理化常数测定，光谱分析及化学方法分别鉴定为正二十五烷（Ⅰ）、三十烷酸（Ⅱ）、二十八烷酸（Ⅲ）、β－谷甾醇（Ⅳ）、豆甾醇（Ⅴ）、槲皮素（Ⅵ）和豆甾醇－β－Ｄ－葡萄糖甙（Ⅶ）。除β－谷甾醇外，其他化合物均为首次从该植物中分得。

白蔹的化学成分研究

目的研究白蔹的化学成分。方法利用各种色谱法进行分离,根据理化性质和波谱分析鉴定化合物结构。结果从白蔹的氯仿和乙酸乙酯萃取部分又分离得到7个已知成分,分别鉴定为甲基-α-D-呋喃果糖苷(1)、甲基-β-D-吡喃果糖苷(2)、β-D-呋喃果糖甲苷(3)、β-D-呋喃果糖(4)、尿苷(5)、腺苷(6)、大黄素-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(7)。结论化合物1、2、3、4、5、6为首次从该植物中分离得到。

白蔹多糖的分离纯化及其对小鼠脾细胞增殖的影响

[目的]分离纯化白蔹多糖,研究白蔹均一多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响。[方法]采用水提醇沉法提取白蔹多糖,通过三氯乙酸法脱除蛋白,用中空纤维超滤膜和DEAE Cellulose DE-52对白蔹多糖进行分离纯化,高效凝胶过滤色谱法鉴定纯度并测定分子量,PMP柱前衍生化测定单糖组成,采用MTT法测定均一多糖对Con A和LPS诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖的影响。[结果]PAJM-A均一多糖分子量为1.29×105u,由甘露糖(Man)、鼠李糖(Rha)、葡萄糖醛酸(Glc A)、半乳糖(Gal)、葡萄糖(Glc)、木糖(Xly)组成,其物质的量比为1.36∶1.87∶2.02∶1.58∶1.04,均一多糖对Con A诱导的T淋巴细胞和LPS诱导的B淋巴细胞有较显著的增殖作用。[结论]PAJM-A是一种新的白蔹均一多糖,并与Con A、LPS对T、B淋巴细胞的增殖有协同刺激作用。

蛇白蔹白藜芦醇合酶基因CNRS2的克隆与原核表达

白藜芦醇合酶(resveratrol synthetic enzyme,RS)是植物白藜芦醇合成途径中的关键酶,利用已知的葡萄RS基因(AF274281)序列设计并合成了一对引物,以蛇白蔹基因组DNA为模板,PCR扩增得到包含RS完整基因在内的一段序列,测序与序列分析表明:该克隆片段全长1 536bp,其中包含一个内含子及两个外显子。采用悬挂延伸PCR法克隆了目的基因,命名为CNRS2。序列分析表明该基因的开放读码框1 170 bp,编码389个氨基酸残基。同源性比较发现,CNRS2与已知葡萄RS基因序列的同源性达93%～98%。CNRS2与pET-30a(+)构建原核表达载体,经IPTG诱导后可表达获得相对分子量约为46 kD的外源融合蛋白。以上结果证实CNRS2属葡萄RS基因家族成员,为今后进一步对该基因的研究利用打下基础。

白蔹中没食子酸含量测定研究

研究并优化了白蔹中没食子酸含量测定时供试品溶液的最佳制备方法。采用法测定白蔹中没食子酸含量,并用正交试验法考察了提取方法、提取溶剂、溶剂用量对没食子酸含量测定结果的影响。得出最佳提取条件为:以50%(质量分数)甲醇为提取溶剂,加入药材10倍体积量的溶剂,超声提取1 h。其中提取方法因素的影响最为显著。该方法下没食子酸的提取率高,共存组分干扰小,操作简便易行,可作为白蔹及含白蔹化妆品中没食子酸含量测定时的供试品溶液制备方法。

白蔹挥发油化学成分分析

首次采用水蒸气蒸馏法制备白蔹挥发油,通过面积归一化法测定其相对百分含量,应用气相色谱-质谱联用技术研究分析其化学成分。最终分离鉴定出14种化学成分,占挥发油总量的99.997%,主要包括:芳姜黄酮(21.465%)、2-甲基-6-对甲苯基-2-庚烯醇(17.438%)和蒽(14.224%)等,为白蔹的进一步开发利用提供了研究依据。

白蔹多糖PAJM-Ⅰ的分离纯化和结构分析

目的从白蔹中提取分离白蔹多糖,并研究其结构性质。方法经热水提取、乙醇沉淀、Sevag法脱蛋白后得到粗多糖PAJM,进一步用DEAE-Sapharose Fast Flow,Sephadex G-200分离纯化得到PAJM-Ⅰ,对分离到的主要多糖应用高碘酸氧化、高效凝胶渗透色谱(HPGPC),GC,GC-MS,IR等方法进行结构分析。结果提取纯化的白蔹多糖(PAJM-Ⅰ)是均一的多糖,相对分子量为3.25×104,鼠李糖,木糖,甘露糖和半乳糖组成摩尔比为:12.98∶23.52∶45.06∶18.44。分子中1→3,1→2,1→6连接的糖苷键数比为51%∶26%:23%。结论首次从白蔹中分离得到PAJM-Ⅰ均一多糖,且PAJM-Ⅰ含有α-D-葡萄吡喃糖。

白蔹的化学成分研究

目的研究中药白蔹的化学成分。方法采用大孔吸附树脂、硅胶柱色谱、聚酰胺色谱、葡聚糖凝胶(sephadex LH-20)柱色谱、十八烷基硅烷键合硅胶(ODS)色谱等手段进行分离纯化,根据化合物的理化性质和波谱学等方法鉴定中药白蔹所含化学成分的结构。结果从白蔹植物的70%乙醇提取物中分离得到9个化合物,分别鉴定为尿苷(uridine,1),腺苷(adenosine,2),阿魏酸(ferulic acid,3),原儿茶酸(protocatechuate,4),没食子酸(gallic acid,5),大黄素-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(emodin-8-O-β-D-glucopyranoside,6),咖啡酸(caffeic acid,7),β-谷甾醇(β-sitosterol,8),7β-羟基-β-谷甾醇(7β-hydroxy-β-sitosterol,9)。结论化合物4和化合物9是从蛇葡萄属(Ampelopsis Michx.)植物中首次分离得到,化合物1~3和化合物7为首次从白蔹Ampelopsis japonica(Thunb.)Makino植物中分离得到。