端粒酶活性检测方法的改进及dNTP浓度对端粒酶活性的影响

利用重新设计的引物和反应步骤 ,对检测端粒酶活性的 TRAP反应进行了改进。与原有方法相比 ,新方法在PCR扩增过程中不改变端粒酶产物的长度和比例 ,能更准确地反映端粒酶反应产物的性质。利用这个方法 ,考察了d NTP浓度对端粒酶的影响 ,发现不同的脱氧核苷酸对端粒酶活性的影响有差异。

两种简便又较为准确检测SOD酶活性的方法

由于SOD的作用底物极不稳定，至今还未建立统一的检测SOD酶活性的方法，该文介绍了两种既简便又较为准确检测样品SOD酶活性的方法，采用这两种方法可较为准确地测定出不同样品的SOD含量及酶活性。

盐酸克伦特罗的酶联免疫分析试剂盒的研制——Ⅱ克伦特罗酶联免疫检测方法的研究

〔目的〕在成功制备关键试剂的基础上 ,建立克伦特罗酶联免疫检测方法 ,并研制其测试盒。〔方法〕应用ELISA法重复测定样品 ,变异系数为 6.9% ,方法的添加回收率尿样为 92 .5 % ,检测限可达 0 .1ng/ml ,克伦特罗抗体与沙丁胺醇、异丙肾上腺素交叉反应率分别为 1.2 5 %、0 .0 3 %。〔结果〕自制的试剂盒与英国Randox公司的 β -Agonist试剂盒对比试验结果 ,两组数据经极差t检验分析 ,|t| <t0 .975无显著差异。〔结论〕该试剂盒具有专一性、快速、灵敏、准确的特点。

一种检测蛋白酶活性的荧光素酶报告基因系统的构建及应用

为建立一种检测蛋白酶活性的方法,本研究将IL-1β前体基因和荧光素酶基因融合,克隆至p CAGGS真核载体,构建了基于荧光素酶的报告基因系统(iGLuc),同时构建GLuc真核表达质粒作为对照。以PRRSV nsp4和ASFV S273R蛋白酶为检测对象,利用该报告基因系统对病毒蛋白酶活性进行检测,将iGLuc中蛋白酶酶切位点(FVCDAN)相对应的基因序列替换为Kpn I酶切位点,构建重组质粒Kpn I-iGLuc,然后分别将PRRSV nsp4和ASFV S273R蛋白酶切割位点对应的核酸序列插入至报告基因Kpn I-iGLuc中的Kpn I位点,构建重组质粒nsp4-iGLuc和S273R-i GLuc。分别将报告基因质粒(iGLuc、GLuc、Kpn I-i GLuc、nsp4-i GLuc和S273R-iGLuc)与不同剂量的相应蛋白酶真核表达质粒共转染HEK293T细胞,24 h后检测上清中荧光素酶GLuc的活性。结果显示,转染i GLuc、nsp4-iGLuc或S273R-iGLuc质粒的上清中荧光信号随着相应蛋白酶的剂量增加而升高,呈现剂量依赖性,而缺失蛋白酶切位点的对照质粒无该现象,表明构建的荧光素酶报告基因能够特异性地检测细胞蛋白酶和病毒蛋白酶的活性。本研究首次建立了一种检测蛋白酶活性的方法,并以PRRSV nsp4和ASFV S273R蛋白酶验证了该方法的应用价值,为后续开展高通量化筛选抗PRRSV、ASFV等药物的研究奠定了基础。

过氧化物酶活性检测方法的研究

研究了一种新的过氧化酶的活性检测方法 ,以苯胺为底物进行测定。通过试验确定了该方法适宜的工作条件 ,包括酶浓度、底物浓度、H2O2 浓度、温度、pH值等。同时确定了酶活力检测的一些相关条件(如温度、pH值等)。实验表明 ,该方法有较高的精密度 ,且简便易行。

链霉素酶联免疫检测试剂盒方法学评价的设计及应用

由于检测试剂盒方便、快捷,使用范围越来越广泛,其质量直接关系到结果的准确,需要有合适的评价方法确保试剂盒的性能指标符合使用需求。该文针对链霉素酶联免疫检测试剂盒方法学评价,设计完整的评价方案并应用于实际,结果表明:该方案对于判别试剂盒的质量具有较高的实际应用价值。

HIV-1整合酶活性检测方法的研究进展

H IV-1整合酶介导病毒DNA与宿主染色体的整合,是病毒复制周期中必不可少的环节,抑制整合酶能有效阻止病毒在体内复制.同时,人体细胞中无整合酶的功能类似物,因此,整合酶是抗H IV-1的理想靶点.近年来,整合酶活性的体外检测方法得到快速发展,并广泛应用于整合酶活性检测、反应机理研究及整合酶抑制剂的体外筛选等研究中.本文综述了整合酶活性检测方法的研究进展.

溶菌酶的活性检测方法

为解决现行溶壁微球菌（比浊）法测定溶菌酶活性方法中存在的测定条件不统一、重复性不高等问题。对该方法中4个主要影响因素——溶茵酶活性范围、底物悬浮液吸光度值范围、检测温度和茵体制备方法进行了研究，以得到最佳的检测条件及菌体制备方法。结果表明：（1）溶茵酶活性75-250U／mL之间，底物悬浮液吸光度值O．45-O．77（OD450）之间，酶活力曲线具有良好的线性关系，与国家药典中基本一致；（2）检测温度25-50℃之间，底物悬浮液的吸光度变化值△OD450随温度升高而增大，适当提高检测温度可提高检测的精度，有待进一步研究；（3）用于大规模样品检测时，冷冻茵体法为制备底物悬浮液的最佳方法，检测具有良好的线性关系、管间重复性及储存稳定性。

一种氨肽酶N抑制剂抑酶活性检测试剂盒的开发

目的开发一种能准确、特异地评价目标化合物对人氨肽酶N的抑酶活性检测试剂盒。方法验证试剂盒准确度、精密度、稳定性等性能指标,同时通过与同类的传统试剂盒进行米氏常数的评价确认该试剂盒的灵敏度。结果精密度验证,试剂盒的CV=4.29%符合CV<15%的要求;准确度验证中,标准化残差δ^(*)=1.747落在(-2,2)区间以内,在95%置信度内是正常实验点,数据准确可靠;酶源稳定性良好;线性范围宽,96孔板中氨肽酶N在加入量120 μL时还能呈现良好的线性关系;该试剂盒米氏常数低于传统试剂盒,说明灵敏度高。结论所开发的试剂盒主要的性能指标表现良好,能准确测定化合物对人源氨肽酶N的抑酶活性,其检测成本和可靠性优于现有上市产品,具有推广应用及开发价值。

豆粕中尿素酶活性检测的意义及检测方法探讨

本文主要通过阐述尿素酶活性检测在豆粕质量控制的重要性及豆粕中尿素酶活性的几种检测方法,从而强调使用尿素酶活性检测作为及时判断豆粕加工品质好坏的依据,避免劣质豆粕在饲料生产中使用,预防饲料质量问题引起动物的不良反应。

探讨“利用淀粉酶探究温度对酶活性的影响”实验检测试剂的选择

人教版生物教材关于"酶的特性"相关内容的教学中,设置了探究实验"影响酶活性的条件",建议"用淀粉酶探究温度对酶活性的影响",所提供的材料用具中有碘液和斐林试剂.在实验教学中经常运用碘液检测底物淀粉的水解程度,但是能否用斐林试剂检测产物还原糖的生成在中学教学中产生了很大争议.大部分教师对此持反对意见,认为本实验需要严格控制温度,而斐林试剂检测还原糖时需要加热,在加热过程中,酶的活性可能发生变化,原来设置的低温条件(如2~4℃)酶活性很低,淀粉水解速度很慢,产生的还原糖很少,几乎无法与斐林试剂生成砖红色沉淀,加热升高温度,酶活性可能随之升高,反应生成较多还原糖,因而可能出现砖红色沉淀,从而影响实验效果.

利用酶反应热效应检测过氧化氢酶活性

为了探索酶活性测定的新方法 ,降低酶活性常规测试中干扰因素的影响 ,提高酶活性测定的准确性 ,利用低电势电位差计及热电偶换能器检测过氧化氢酶活性 .结果表明 ,测定时的 H2 O2 质量分数以 9.6 %为好 ,可以用于酶活性从 0 .5 u至 3.5 u酶活力的检测 ;当 H2 O2 质量分数在 2 .4 %～ 7.2 %时 ,酶反应速率与底物浓度有线性关系 ;当底物质量分数超过 9.6 %时 。

喹噁啉-2-羧酸残留的酶联免疫检测方法及试剂盒

该发明属于免疫化学分析技术领域。公开了一种用于喹噁啉-2-羧酸残留检测的酶联免疫方法及试剂盒，该方法主要包括药物改造，免疫原、包被原、抗体的制备以及样品前处理和ELISA检测方法的建立。试剂盒主要由喹噁啉-2-羧酸（QCA）特异性抗体、QCA标准品、包被有QCA与）γ-氨基丁酸反应后与卵清蛋白偶联物的酶标板组成。

3-甲基喹噁啉-2-羧酸残留的酶联免疫检测方法及试剂盒

该发明属于免疫化学分析技术领域。公开了一种用于3-甲基喹噁啉-2-羧酸残留的酶联免疫检测方法及试剂盒。该方法主要包括免疫原、包被原和特异抗体的制备、样品前处理和ELISA方法的建立。与之相配套的试剂盒由3-甲基喹噁啉-2-羧酸（MQCA）特异性抗体、包被有MQCA与卵清蛋白偶联物的酶标板以及MQCA标准品等组成。

饲料添加剂葡萄糖氧化酶检测方法研究进展

葡萄糖氧化酶是一种绿色饲料添加剂。本文介绍了国内外葡萄糖氧化酶酶活性检测方法的研究进展,对各种检测方法的原理、操作过程进行了阐述,并对6种不同检测方法的优缺点进行了比较分析,以期为建立检测方法标准提供参考。

中国版纳微型猪近交系内源性逆转录病毒酶活性的定量检测

采用 Roche公司的 RT(Reverse transcriptase,RT)检测试剂盒 ,按其操作步骤进行 ,用 HIV- 1作为试剂盒的阳性参照绘制标准曲线 ,PK15作为猪内源性逆转录病毒 (Porcine endogenous retrovirus,PERV)的阳性对照 ,定量检测 34头中国版纳微型猪近交系 (Banna minipig inbreed,BMI)血浆中表达的 PERV的逆转录酶。各猪RT结果均于 4 0 5 nm处测定 OD值 ,用 HIV- 1的实测标准曲线进行定量 (pg/ m l)。检测结果表明全部 34头猪均为阳性反应 ,但各猪血浆中有活性的酶远低于 HIV- 1,也弱于