基于5-HT及其受体的中医药干预消化系统疾病研究进展

5羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)是一种重要的单胺类神经递质,具有广泛的生物学效应。血清和胃肠道中的5-HT含量可占人体5-HT总量的95%以上,血液循环中的5-HT也主要来源于肠道。5-HT在消化系统疾病发生发展中的作用历来受到关注。此文从5-HT特征、5-HT受体以及基于5-HT及其受体探讨中医药对消化系统疾病的干预作用进行了概述,以期进一步为消化系统疾病的防治、临床与基础研究提供新思路。

四神丸对腹泻型肠易激综合征大鼠5-HT信号通路表达的影响

目的通过研究四神丸对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)模型大鼠5-羟色胺(5-HT)信号通路表达的影响,进一步揭示其治疗IBS-D的内脏敏感机制。方法SD大鼠32只,随机分为正常组、模型组、四神丸组和得舒特组,采用番泻叶灌胃联合避水应激法制备IBS-D大鼠模型,给药14d后进行Bristol粪便性状量表评分,依据腹壁撤退反射评定内脏疼痛阈值,ELISA法检测血清5-HT、SERT含量,免疫组化法检测结肠组织5-HT的阳性表达,Westernblotting法检测结肠组织5-HT4R的蛋白表达。结果与正常组比较,模型组大鼠Bristol粪便性状量表评分升高,内脏疼痛阈值降低,血清中5-HT含量增加、SERT含量减少,结肠组织中5-HT的阳性表达升高、5-HT4R的蛋白表达降低(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,四神丸组大鼠Bristol粪便性状量表评分降低、内脏疼痛阈值升高,血清5-HT含量减少,SERT含量增加,结肠组织5-HT的阳性表达降低、5-HT4R的蛋白表达升高(P<0.05或P<0.01),且对5-HT、5-HT4R表达的影响四神丸组优于得舒特组(P<0.05)。结论四神丸治疗IBS-D的内脏敏感机制可能与调节5-HT信号通路的表达有关。

吡喹酮通过5-HT2B受体对肝癌细胞恶性生物学行为的影响

目的探讨吡喹酮(praziquantel,PZQ)对肝癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响及其作用机制。方法体外培养Hep3B人肝癌细胞株和Hepa1-6小鼠肝癌细胞株,分为正常对照组、PZQ处理组、5-羟色胺2B(5-HT2B)受体抑制剂组(RS127445组)、5-HT2B受体抑制剂+PZQ处理组(RS127445+PZQ处理组)。采用实时荧光定量PCR(qRTPCR)检测Hep3B人肝癌细胞株和Hepa1-6小鼠肝癌细胞株中5-HT2B受体mRNA相对表达水平,CCK-8法检测细胞增殖情况,划痕实验检测细胞迁移能力,流式细胞术检测细胞凋亡率,western blot法检测Bax、Bcl-2凋亡相关蛋白表达量。结果Hep3B人肝癌细胞株和Hepa1-6小鼠肝癌细胞株5-HT2B受体mRNA相对表达水平正常对照组为1.02±0.09和1.01±0.20,PZQ处理组为1.36±0.16和1.66±0.16,经PZQ处理后5-HT_(2B)受体mRNA相对表达水平均增加(t=3.22、5.07,P均<0.05)。PZQ处理组两种细胞株48 h细胞增殖率为(74.00±4.58)%和(77.00±5.29)%,低于正常对照组(t=9.88、7.47,P均<0.01);72 h细胞增殖率为(71.00±6.08)%和(67.33±7.57)%,低于正常对照组(t=7.87、6.00,P均<0.05)和RS127445+PZQ处理组(t=5.48、3.48,P均<0.05)。PZQ处理组两种细胞株48 h细胞迁移率为(52.91±3.15)%和(17.28±1.78)%,低于正常对照组(t=7.86、13.46,P均<0.01);72 h细胞迁移率为(58.79±3.25)%和(22.29±5.87)%,低于正常对照组(t=11.65、9.57,P均<0.05)和RS127445+PZQ处理组(t=3.13、6.97,P均<0.05)。PZQ处理组两种细胞株72 h细胞凋亡率为(16.13±0.66)%和(20.70±2.85)%,高于正常对照组和RS127445+PZQ处理组(t=27.82、5.65、9.54、4.10,P均<0.01);Bax相对蛋白表达水平分别为1.70±0.18和2.23±0.14,高于正常对照组(t=2.83、7.89,P均<0.05)和RS127445+PZQ处理组(t=9.40、5.25,P均<0.05);Bcl-2相对蛋白表达水平分别为0.52±0.17和0.53±0.02,低于正常对照组(t=3.57、8.39,P均<0.05)和RS127445+PZQ处理组(t=12.09、6.12,P均<0.05)。结论PZQ可通过5-HT2B受体对肝癌细胞的增殖、迁移和凋亡造成影响。

5-HT1A受体拮抗剂对七氟烷致老年认知功能障碍模型大鼠突触可塑性的作用及其机制

目的探讨5-HT1A受体拮抗剂对七氟烷致老年认知功能障碍模型大鼠突触可塑性的作用及其机制。方法将30只18月龄Sprague-Dawley大鼠随机分为对照组、模型组以及治疗组。模型组吸入50%空气、氧气混合物(2 L/min)和2%七氟烷4 h后左侧脑室给予生理盐水(5μL),治疗组在吸入50%空气、氧气混合物(2 L/min)和2%七氟烷4 h后左侧脑室给予5-HT1A受体拮抗剂(3μg),对照组仅吸入50%空气、氧气混合物(2 L/min)4 h。水迷宫法检测各组大鼠的学习记忆能力;HE染色法观察各组大鼠海马组织病理变化情况;尼氏染色和高尔基染色观察海马区神经元和突触的病理形态变化;免疫荧光法检测MeCP2、p250GAP、PSD-95、GAP-43与Syn蛋白表达;实时荧光定量PCR检测PKA、CREB1、BDNF mRNA表达水平;Western blotting检测PKA、CREB1、p-CREB1、BDNF蛋白表达水平。结果与对照组比较,模型组大鼠逃避潜伏期显著延长,穿越平台次数显著减少(P<0.05);与模型组比较,治疗组大鼠逃避潜伏期显著缩短,穿越平台次数明显增多(P<0.05)。HE、尼氏和高尔基染色显示,与对照组比较,模型组大鼠海马神经元形态不规则,排列松散,周围组织间隙扩大,细胞核固缩深染,部分神经元内尼氏体减少,树突分支数量以及树突棘密度明显减少;与模型组比较,治疗组大鼠海马神经元形态规则,结构相对完整,排列均匀,神经元内尼氏体数量增多,树突分支数量及树突棘密度显著增加。与对照组比较,模型组大鼠脑组织MeCP2、PSD-95、GAP-43、Syn蛋白,PKA、CREB1、BDNF mRNA和蛋白表达明显减少(P<0.05),p250GAP蛋白表达明显增加(P<0.05)。与模型组比较,治疗组MeCP2、PSD-95、GAP-43、Syn蛋白,PKA、CREB1、BDNF mRNA和蛋白表达明显增加(P<0.05),p250GAP蛋白表达明显减少(P<0.05)。结论5-HT1A受体拮抗剂通过激活CREB/BDNF通路,增强PSD-95、GAP-43、Syn表达,促进突触重塑,保护大鼠海马神经元细胞,从而改善七氟烷致老年认知功能障碍模型大鼠的学习记忆能力。

养荣润肠舒合剂对慢性传输型便秘SD大鼠结肠5-HT、VIP的影响

目的探讨慢性传输型便秘大鼠结肠黏膜5-羟色(5-hydroxytryptophan,5-HT)、血管活性肠多肽(vasoactive intestinal polypeptide,VIP)的含量,以明确中药制剂养荣润肠舒合剂对大鼠结肠5-HT、VIP表达的调节作用。方法将60只健康的SD大鼠随机分为空白组10只,造模组50只(模型组10只、莫沙必利组10只、养荣润肠舒合剂高、中、低剂量组各10只)。应用复方地芬诺酯灌胃(2 mL/200 g体质量)以复制慢性传输型便秘大鼠模型(每天1次,连续10 d)。期间记录大鼠首次排便时间,并收集粪便、测量粪便剂量、含水量以判断造模是否成功。复制模型成功后进行药物治疗,每天1次,连续10 d。然后采用间接酶联免疫吸附试验(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)观测大鼠结肠5-HT、VIP的光密度(optical density,OD)值。结果①与空白组比较,模型组SD大鼠的首次排便时间延后,且新鲜粪便的剂量、含水量减少,差异有显著统计学意义(P<0.01)。②与模型组比较,莫沙必利组和养荣润肠合剂低、中、高剂量组治疗后大鼠的首次排便时间均提前,且粪便的含水率、重量除使用养荣润肠低组外均有所增长(P<0.01)。③与莫沙必利组比较,养荣润肠舒合剂中组剂量组大鼠的一般状况最好,首次排便时间最接近莫沙必利组且较短于莫沙必利组,差异无统计学意义(P>0.05),新鲜粪便剂量最接近莫沙必利组且较重于莫沙必利组,差异无统计学意义(P>0.05),含水量明显优于莫沙必利组,差异有统计学意义(P<0.05);养荣润肠舒合剂高剂量组大鼠排便状况与莫沙必利组相差不大,差异无统计学意义(P>0.05);莫沙必利组大鼠排便状况明显优于养荣润肠舒合剂低剂量组,差异有显著统计学意义(P<0.01)。④养荣润肠舒合剂中剂量组的大鼠一般状况更佳,而低剂量组的大鼠状况较差,新鲜粪便的剂量、含水量较小。⑤与空白组比较,模型组大鼠近端结肠组织5-HT、VIP的含量显著降低,OD值缩小(P<0.01)。⑥治疗后与模型组比较,莫沙必利组及养荣润肠舒合剂低、中、高剂量SD大鼠结肠5-HT、VIP含量显著升高,OD值增加,差异有明显统计学意义(P<0.01)。⑦治疗后与莫沙必利组比较,养荣润肠舒合剂中剂量大鼠结肠的5-HT、VIP含量及OD值增加,最接近莫沙必利组且较高于莫沙必利组,差异无统计学意义(P>0.05);养荣润肠舒合剂高剂量组大鼠状况及大鼠结肠5-HT、VIP含量与莫沙必利组相差不大,差异无统计学意义(P>0.05)。⑧与养荣润肠舒合剂高剂量组比较,养荣润肠舒合剂中剂量组大鼠结肠5-HT、VIP含量更高,OD值差异无统计学意义(P>0.05),而养荣润肠舒合剂低剂量组大鼠结肠的5-HT、VIP含量相对较低,与养荣润肠舒合剂中剂量组相比OD值也较低,具有统计学意义(P<0.01)。结论5-HT作为脑—肠轴的关键神经递质,VIP作为存在于中枢神经和肠神经系统中的神经递质,在慢性传输型便秘的发病中起着重要的作用;中药方剂养荣润肠舒合剂能有效提高慢性传输型便秘大鼠结肠5-HT、VIP含量,增强5-HT、VIP的表达有关;因此,作者认为养荣润肠舒合剂可能是通过这一机制改善慢性传输型便秘的临床症状,从而达到“以补治秘”的目的。

5-HT1A基因C-1019G多态位点的研究进展

5-HT1A基因编码5-羟色胺(血清素)的G蛋白偶联受体(属于5-羟色胺受体亚家族)。C-1019G多态位点是5-HT1A基因启动子区一个重要的功能性多态位点,人群中存在3种基因型即CC、CG、GG,它与个体的恋爱关系及抑郁症、焦虑症等精神疾病密切相关。本文对5-HT1A基因C-1019G多态位点的相关机制、检测方法、研究进展等进行综述。The 5-HT1A gene encodes a G protein-coupled receptor for serotonin, which belongs to the 5-hydroxytryptamine receptor subfamily. C-1019G polymorphism is an important functional poly-morphism in the promoter region of 5-HT1A gene. There are three genotypes (CC, CG and GG) in the population, which are closely related to individual’s romantic relationship and mental disorders such as depression and anxiety. In this paper, the mechanism, detection methods and research progress of C-1019G polymorphism of 5-HT1A gene were reviewed.

许氏平鲉5-HT1A基因单核苷酸多态性与攻击行为表型相关性研究

以许氏平鲉(Sebastes schlegelii)幼鱼为研究对象,旨在探究5-HT1A受体基因在攻击行为调控中的作用。首先,通过注射8-OH-DPAT(特异性5-HT1A受体激动剂)对许氏平鲉幼鱼的攻击行为进行了分析,评估了受体对幼鱼攻击行为的影响;其次,对不同攻击表型的许氏平鲉幼鱼进行了5-HT1A受体基因的多态性位点筛选,以期获得与许氏平鲉攻击行为显著相关的潜在SNP标记。结果显示:(1)8-OH-DPAT处理组幼鱼攻击行为的频率和时间显著低于对照组(P<0.05),但攻击潜伏期显著高于对照组(P<0.05);(2)在5-HT1Aα启动子区域中发现了7个与攻击表型差异显著相关的多态性位点(P<0.05),分别为SNP 1236、SNP 1245、SNP 1260、SNP1301、SNP 1302、SNP 1309和SNP 1330位点;在5-HT1Aβ启动子区域中发现了2个与攻击表型差异显著相关的多态性位点(P<0.05),分别为SNP 892和SNP 1147位点,但在5-HT1A基因CDS编码区并未发现与攻击差异表型显著相关的多态性位点(P>0.05)。综上所述,研究结果证明了5-HT1A受体的激活能够显著抑制许氏平鲉的攻击行为,筛选了与攻击性差异个体相关的5-HT1A受体基因SNP位点。

关于5-HT 2A受体关键氨基酸位点的研究进展

5-HT 2A受体作为许多精神活性药物如致幻剂、抗抑郁药、抗焦虑药和非典型抗精神病药等的作用靶点,一直是神经精神药理学领域研究热点。5-HT 2A受体的某些关键氨基酸位点对于维持受体的特定构象、偶联不同G蛋白以及行使相应特定功能等起重要作用。进一步的研究显示,突变这些特定的氨基酸位点,能够引起相应配体的亲和力、效能等变化。同时,5-HT 2A受体作为一种典型的G蛋白偶联受体,其结构域中不同的氨基酸位点能与不同配体产生相互作用,引起受体相应的动态结构变化,从而影响受体的功能。因此,研究5-HT 2A受体结构和功能与关键氨基酸位点的关系,对于相关精神疾病的治疗以及设计高效低毒的新型药物具有重要意义。

基于子午流注理论选穴电针治疗对中风后便秘患者肠道菌群及5-HT的影响

目的:探讨基于子午流注理论选穴电针治疗对中风后便秘患者肠道菌群及5-H量的影响。方法:选取本院针灸科收治的中风后便秘患者90例,按照随机数字表法以1∶1∶1划分为3组,药物组采用西沙必利口服,常规电针组选用常规针刺+电针治疗,子午流注电针组以纳甲法为理论基础进行选穴后电针治疗,3组患者分别于治疗前后进行肠道菌群、5-HT体内含量测定。结果:子午流注电针组能够提高体内有益菌及5-HT水平,降低有害菌水平,效果且优于药物组和常规电针组(P<0.05)。结论:基于子午流注理论选穴电针治疗可改善中风后便秘患者肠道菌群及5-HT水平。

封闭负压引流在口腔颌面间隙感染患者中的应用效果及对IL-6、5-HT、NPY水平影响

目的 探究封闭负压引流(VSD)在口腔颌面间隙感染患者中的应用效果及对IL-6、5-HT、NPY水平的影响。方法 选取2019年3月至2023年7月期间邯郸市口腔医院收治的口腔颌面间隙感染患者121例,并根据引流方式的差异将其分为对照组(采用切口引流,n=60例)与观察组(予以VSD,n=61例)。对比两组临床疗效、治疗情况、白介素-6(IL-6)、5-羟色胺(5-HT)、神经肽Y(NPY)水平、疼痛程度以及术后感染情况。结果 观察组(98.36%)的总有效率明显高于对照组(88.33%),差异有统计学意义(P<0.05);观察组术后瘢痕长度、住院时间短于对照组,张口受限缓解值高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,两组IL-6、5-HT、NPY水平、VAS评分均降低,且观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组术后感染总发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 应用VSD治疗口腔颌面间隙感染患者的临床疗效佳,可有效改善炎症反应、疼痛程度以及美观度,值得临床推广应用。

养血清脑颗粒联合艾司西酞普兰治疗卒中后抑郁的临床效果及对血清5-HT和NE水平影响

目的:研究养血清脑颗粒联合艾司西酞普兰治疗卒中后抑郁(Post-stroke depression,PSD)的临床效果及对血清5-羟色胺(5-Hydroxy tryptamine,5-HT)和去甲肾上腺素(Norepinephrine,NE)水平影响。方法:选取我院收治的卒中后抑郁患者400例。随机分为2组各200例。对照组给予艾司西酞普兰,治疗组在此基础上联用养血清脑颗粒。分析对比两组的疗效、汉密顿抑郁量表(Hamilton depression scale,HAMD)评分、简易精神状态检查量表(Mini-mental state examination,MMSE)评分和Barthel指数评分及血清5-HT和NE水平。结果:治疗后,治疗组总有效率显著高于对照组(P<0.05)。治疗后,两组HAMD各条目评分均较治疗前显著降低(P<0.05);并且治疗组降低程度较大(P<0.05)。治疗后,两组MMSE评分和Barthel指数评分及血清5-HT和NE水平均显著升高(P<0.05);且治疗组升高程度较大(P<0.05)。结论:采用养血清脑颗粒联合艾司西酞普兰治疗PSD可提高临床疗效,能够改善认知功能。

颐脑解郁方联合五行音乐对轻中度卒中后抑郁患者血清5-HT、NE的影响研究

【目的】探讨颐脑解郁方联合五行音乐对轻中度卒中后抑郁(PSD)患者的治疗效果及对血清5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)的作用。【方法】将120例轻中度PSD患者随机分为西药组、颐脑解郁方组、五行音乐组、联合组4组,每组各30例,各组患者在常规脑卒中康复治疗基础上,分别给予盐酸氟西汀胶囊、颐脑解郁方、五行音乐、颐脑解郁汤联合五行音乐治疗,疗程为4周。观察各组患者治疗前后汉密尔顿抑郁量表(HAMD)评分、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)神经功能评分、改良Rankin量表(mRS)评分、Barthel指数(BI)评分及血清5-HT、NE水平的变化情况,并评价各组患者的临床疗效。【结果】(1)治疗4周后,西药组、五行音乐组、颐脑解郁方组、联合组的总有效率分别为86.67%(26/30)、76.67%(23/30)、73.33%(22/30)、93.33%(28/30);组间比较,联合组的总体疗效优于其他3组(P<0.05),西药组优于五行音乐组和颐脑解郁方组(P<0.05),而五行音乐组与颐脑解郁方组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。(2)治疗后,各组患者的HAMD评分、NIHSS评分、m RS评分和BI评分均较治疗前明显改善(P<0.05);组间比较,联合组对各项量表评分的改善作用优于其他3组,西药组优于五行音乐组和颐脑解郁方组,五行音乐组又优于颐脑解郁方组,差异均有统计学意义(P<0.05)。(3)治疗后,各组患者血清5-HT、NE水平均较治疗前明显升高(P<0.05);组间比较,联合组的血清5-HT、NE水平高于其他3组,西药组高于五行音乐组和颐脑解郁方组,五行音乐组又高于颐脑解郁方组,差异均有统计学意义(P<0.05)。【结论】颐脑解郁方联合五行音乐疗法治疗轻中度PSD患者疗效确切,可有效调控血清5-HT、NE水平,改善患者抑郁症状,促进患者神经功能恢复,改善患者预后,提高患者生活质量。

仁青常觉对胃动力低下大鼠胃残留率、5-HT以及c-kit表达的影响

目的验证仁青常觉提取物对胃动力低下大鼠胃肠道平滑肌的影响。方法采用甘草灌胃诱导胃动力低下模型,随后采用不同剂量的仁青常觉提取物(低、中、高)灌胃处理,通过胃残留率以及胃体、胃底5-HT以及c-kit表达量的变化,说明仁青常觉提取物对胃动力低下的作用。结果在经过仁青常觉提取物治疗后,胃动力低下大鼠的胃残留率显著改善,并且不论是胃体还是胃底的5-HT水平增加显著,c-kit相对表达量也被上调,且与仁青常觉提取物的剂量呈正相关。结论仁青常觉提取物可显著的抑制胃动力低下大鼠的胃残留率,并且促进了胃体、胃底5-HT以及c-kit的表达,是一种可行的用于增强胃动力的藏药。

基于5-HT探讨电针刺激天枢、足三里对IBS-D大鼠的影响

目的观察电针刺激天枢、足三里对腹泻型肠易激综合征(diarrheal irritable bowel syndrome,IBS-D)模型大鼠血清5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)含量及对结肠5-羟色胺受体3A型(5-hydroxytryptamine 3A receptor,5-HT3AR)蛋白表达量的影响,探讨“同经异腑合募配穴”指导下,电针刺激天枢、足三里治疗IBS-D大鼠的作用机制,为电针的临床应用提供实验依据。方法将24只SD雄性大鼠随机分为空白组、模型组、阿洛司琼组及电针组,每组6只。除空白组外,其余3组大鼠采用慢性束缚、避水应激及灌服番泻叶煎剂相结合的方法建立IBS-D大鼠模型。造模成功后,对电针组予以电针刺激双侧天枢、足三里,15 min/次;空白组、模型组和电针组均给予1 mL/100 g体质量生理盐水灌胃;阿洛司琼组给予1 mg/mL浓度的阿洛司琼溶液按1 mL/100 g体质量灌胃;4组均治疗1次/d,连续治疗14 d。观察大鼠一般情况;通过腹壁回撤反射(abdominal wall retraction reflex,AWR)实验进行内脏敏感性评估;记录大鼠体质量增长率的变化;计算大鼠粪便含水量;HE染色观察结肠组织形态;ELISA法检测血浆中的5-HT含量;Western blot检测目的蛋白5-HT3AR相对表达量。结果(1)大鼠一般情况:与模型组比较,电针组大鼠精神良好,活动正常,大便干湿适中,为成形粪粒。(2)体质量增长率:与治疗前比较,治疗后空白组、模型组、阿洛司琼组及电针组体质量增长率显著降低(P<0.001);与空白组比较,模型组与阿洛司琼组体质量增长率降低(P<0.01,P<0.05);与模型组、阿洛司琼组比较,电针组体质量增长率升高(P<0.05)。(3)粪便含水量:与治疗前比较,电针组粪便含水量显著降低(P<0.01);与空白组比较,模型组、阿洛司琼组粪便含水量高(P<0.001,P<0.05);与模型组、阿洛司琼组比较,电针组的粪便含水量降低(P<0.01,P<0.05)。(4)肠道容量阈值:与空白组比较,模型组肠道容量阈值显著降低(P<0.001);与模型组比较,阿洛司琼组与电针组肠道容量阈值升高(P<0.05)。(5)组织HE染色:与模型组比较,阿洛司琼组黏膜上皮完整,坏死范围明显减小;电针组黏膜上皮完整,吸收细胞呈柱状,黏膜皱壁中可见淋巴细胞和少量中性粒细胞等炎细胞浸润。与阿洛司琼组比较,电针组上皮完整,无坏死炎性损伤程度轻。(6)5-HT通路检测:与空白组比较,模型组血清中5-HT的含量上升(P<0.05);与模型组比较,电针组血清中5-HT含量下降(P<0.05)。(7)结肠5-HT3AR蛋白表达:与空白组比较,模型组结肠的5-HT3AR蛋白表达升高(P<0.05);与模型组比较,阿洛司琼组和电针组结肠的5-HT3AR蛋白表达均显著降低(P<0.001);与阿洛司琼组比较,电针组结肠5-HT3AR蛋白表达显著降低(P<0.001)。结论在“同经异腑合募配穴”指导下,电针刺激天枢、足三里对IBS-D大鼠有显著的治疗效果,其作用机制可能通过降低血清5-HT含量及结肠5-HT3AR蛋白表达,恢复肠道运动和内脏感觉功能,从而缓解IBS-D的临床症状。

清郁和降汤抑制反流性食管炎大鼠5-HT释放及TGR5/TRPA1通路蛋白表达

【目的】探讨清郁和降汤对反流性食管炎(RE)大鼠的治疗作用及机制。【方法】将48只雄性SD大鼠随机分为假手术组,模型组,中药低、中、高剂量组及西药组,每组8只。除假手术组,其余5组大鼠采用前胃结扎联合外置幽门部分结扎术建立反流性食管炎模型。成功造模后,中药低、中、高剂量组分别对应给予清郁和降汤7.9、15.8、31.6 g·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,西药组给予泮托拉唑蒸馏水混悬液8.4 mg·kg^(-1)·d^(-1)、莫沙比利蒸馏水混悬液0.19 mg·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,假手术组与模型组给予等体积蒸馏水灌胃。连续灌胃14 d后,将所有大鼠处死取材。采用苏木素-伊红(HE)染色法观察食管组织病理学改变,采用酶联免疫吸附分析(ELISA)检测血清中5-羟色胺(5-HT)、色氨酸羟化酶1(TPH1)、P物质(SP)、降钙素基因相关肽(CGRP)的含量,分别采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法、蛋白免疫印迹(Western Blot)法对应检测食管组织G蛋白偶联胆汁酸受体5(TGR5)、瞬时受体电位锚蛋白1(TRPA1)、瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV1)、磷脂酶C(PLC)、蛋白酶激活受体2(PAR2)mRNA或蛋白表达水平。【结果】与假手术组比较,模型组大鼠可见食管黏膜出现较为明显的损伤及炎细胞浸润,血清中5-HT、TPH1、SP、CGRP含量显著增高(P<0.01),食管组织中TRG5、TRPA1、TRPV1、PLC、PAR2 mRNA及蛋白表达水平显著增高(P<0.01);与模型组比较,中药低、中、高剂量组及西药组大鼠食管黏膜病理损伤得到明显改善,血清中5-HT、TPH1、SP、CGRP含量显著降低(P<0.01),食管组织中TRG5、TRPA1、TRPV1、PLC、PAR2 mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。【结论】清郁和降汤可有效改善大鼠反流性食管炎,其机制可能与抑制TGR5/TRPA1通路,减少5-HT释放,进而降低食管敏感性有关。

棉铃虫5-HT1和5-HT2基因的克隆及表达模式分析

5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)是昆虫体内一种重要的生物胺,其通过结合特异性的G蛋白偶联受体在昆虫体内发挥不同的神经调控作用。本研究基于转录组测序数据结合RT-PCR技术鉴定克隆了棉铃虫5-HT受体基因5-HT1和5-HT2,采用生物信息学方法分析其序列特征,利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术检测了其在幼虫和成虫不同组织内的表达特征。结果显示,棉铃虫体内分别表达5-HT的2类受体基因:5-HT1A、5-HT1B、5-HT2A和5-HT2B。系统进化树分析表明,棉铃虫5-HT受体基因分为3个不同分支,而5-HT1和5-HT2可明显分别分成2个不同分支,各分支均与家蚕和烟草天蛾5-HT相应受体基因具有较高的同源性。RT-qPCR结果显示,在幼虫期,4种5-HT受体基因都在头部显著高表达,成虫期除在脑部高表达外,在触角或腹部也有高表达。其中5-HT1A和5-HT1B在雌成虫触角表达量显著高于雄成虫触角,5-HT1A和5-HT2B在雌成虫腹部表达量显著高于雄成虫腹部,而5-HT1B在雄成虫腹部表达量显著高于雌成虫腹部。以上结果表明5-HT1和5-HT2可能参与棉铃虫脑部神经调控,触角嗅觉感受及生殖发育等活动。该结果为进一步明确棉铃虫5-HT受体的功能奠定了基础。

基于脑肠轴探究半夏泻心汤对DSS-UC小鼠肠道菌群及5-HT的影响

目的观察半夏泻心汤对采用葡聚糖硫酸钠(Dextran sulfate sodium,DSS)自由饮用诱导建立的溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis,UC)模型小鼠肠道微生物及5-HT的影响,从脑肠轴角度分析半夏泻心汤治疗UC的作用机制。方法将40只C57BL6/J雄性小鼠随机分为空白组、模型组、阳性药(美沙拉嗪)组及半夏泻心汤组,除空白组外的各小鼠采用2.5%DSS水溶液自由饮用7天诱导建立UC小鼠模型。自实验第8天起,分别采用灭菌水、美沙拉嗪水溶液、半夏泻心汤水溶液给上述各组别小鼠灌胃。采用HE染色观察结肠组织病理学变化,ELISA方法检测血清、结肠及脑组织中5-HT含量,16S rRNA测序技术进一步检测模型小鼠粪便中菌群的变化。结果经半夏泻心汤干预后,与模型组比较,实验组小鼠较模型组小鼠的DAI指数显著降低(P<0.05);抑炎因子IL-2、IL-4及致炎因子IFN-γ水平均有显著恢复(P<0.05);结肠近端及远端病理组织学评分亦均有显著降低(P<0.01);外周5-HT水平显著降低(P<0.05),中枢5-HT水平有升高趋势;Clostridium_sensu_stricto_1、unclassified_p__Firmicutes相对丰度升高(P<0.05),Lachnospiraceae_NK4A136_group、Lachnoclostridium、norank_f__Oscillospiraceae、Eubacterium_xylanophilum_group相对丰度降低(P<0.05)。同时研究发现,众多肠道微生物菌属与机体外周及中枢5-HT水平存在显著相关性。结论半夏泻心汤可以通过改善UC小鼠肠道微生物组成结构,以降低外周5-HT水平、升高中枢5-HT水平,进而改善肠道炎症反应、缓解焦虑情绪,从而发挥治疗溃疡性结肠炎的作用。

附子-肉桂对慢传输型便秘大鼠5-HT信号通路及c-Kit表达的影响

目的研究不同比例附子-肉桂配伍通过调控STC大鼠5-HT信号通路及c-Kit表达改善肠道动力的作用机制。方法运用盐酸洛哌丁胺灌胃建立STC大鼠模型,随机分为空白组、模型对照组、附子-肉桂(2∶1)组,附子-肉桂(1∶2)组、附子-肉桂(1∶1)组、莫沙必利组。各组按照对应药物或蒸馏水灌胃14天。观察大鼠一般情况,计算大鼠粪便粒数、肠道推进率,HE观察大鼠结肠病理改变,ELISA法测定大鼠血清、结肠5-HT含量,免疫荧光染色检测结肠CgA阳性表达,免疫组化法检测结肠5-HT3R/5-HT4R、c-Kit表达情况,RT-PCR法检测5-HT3R/5-HT4R mRNA表达水平。结果各组大鼠结肠无明显病理改变,与空白组相比,模型对照组大鼠粪便含水率、肠道推进率显著降低(P<0.01),5-HT含量明显下调,CgA、5-HT3R/5-HT4R蛋白与基因表达水平均显著下降(P<0.01),c-Kit表达减少。与模型组相比,附子-肉桂(2∶1)组、附子-肉桂(1∶1)组、莫沙必利组粪便粒数、肠道推进率、5-HT含量、c-Kit、CgA阳性表达显著增加(P<0.01),5-HT3R/5-HT4R蛋白与基因表达水平显著上调(P<0.01)。结论附子-肉桂2∶1及1∶1比例配伍能明显增加粪便粒数,提高肠推进率,其作用可能与通过调节结肠c-Kit、CgA表达,增加Cajal间质细胞数及5-HT含量,从而上调5-HT3R/5-HT4R表达有关。

肉蔻五味丸、槟榔十三味丸、广枣七味散三种蒙药对产后抑郁症大鼠行为学及海马DA、5-HT、BDNF的影响

目的:观察蒙药肉蔻五味丸、广枣七味散、槟榔十三味丸对产后抑郁症模型大鼠行为学及海马中5-HT、DA、BDNF含量的影响。方法:将SD雌性大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组、氟西汀组、肉蔻五味丸组、广枣七味散组、槟榔十三味丸组,建立产后抑郁症大鼠模型并给予药物灌胃,观察大鼠体质量、行为学及海马中5-HT、DA、BDNF含量变化。结果:与空白组比较,模型组大鼠体质量增长缓慢、蔗糖偏好率降低、水平得分及垂直得分减少、游泳不动时间延长(P<0.01),海马5-HT、DA、BDNF表达下降(P<0.01),氟西汀、肉蔻五味丸对以上指标均有改善作用(P<0.05,P<0.01),广枣七味散、槟榔十三味丸仅有部分改善作用。结论:三种蒙药不同程度改善PPD大鼠抑郁样行为,总体疗效由高到低依次为肉蔻五味丸、槟榔十三味丸、广枣七味散,可能作用机制与调节海马中的5-HT、DA、BDNF有关。

血管球瘤的临床组织病理特点及其5-HT、TNF-α和TRPM8的表达

目的:分析45例血管球瘤患者的临床组织病理特征及5-羟色胺(5-HT)、肿瘤坏死因子(TNF)-α和瞬时受体电位离子通道(TRPM)8在其中的表达。方法:分析血管球瘤患者的临床及组织病理特点。检测5-HT、TNF-α及TRPM8在血管球瘤中的表达,分析其在血管球瘤中的作用。结果:血管球瘤女性患者居多,发病年龄多在21~40岁,病程中位数5年,多发生于甲下。瘤体长径0.1~3.3cm,大小与部位无关。指(趾)部的瘤体更易表现出疼痛。组织病理可见实体型和球血管型,分型与部位无关。5-HT及TNF-α在血管球瘤中均高表达,TRPM8在部分血管球瘤中呈弱阳性表达。5-HT和TNF-α的表达强度高于TRPM8(P<0.0005),5-HT和TNF-α的表达强度差异无统计学意义(P=0.340)。结论:血管球瘤具有独特的临床及组织病理特点。5-HT及TNF-α可能在血管球瘤的生发过程中具有一定作用。