北京市房山区长角血蜱携带山羊无形体的调查？

为确认我国华北地区广泛分布的长角血蜱是否携带新近发现的山羊无形体Anaplasma capra，2012、2015年5～9月期间，在北京房山地区采集长角血蜱并进行检测。结果共采集游离的长角血蜱311只，其中成蜱95只，若蜱156只，幼蜱60只。提取蜱基因组DNA后对山羊无形体的gltA和16S rRNA两个基因片段进行PCR扩增。结果显示，共有3（3.2％）只成蜱阳性，若蜱和幼蜱中未检测到山羊无形体。遗传进化分析显示，扩增出的gltA和16S rRNA序列和早先报道的牡丹江人感染的A． capra的序列相一致。证实了在我国华北地区的媒介蜱携带该新发现的山羊无形体，该地区为山羊无形体潜在的自然疫源地。加强该地区蜱媒传染病的防控工作具有必要性和紧迫性。

牛无浆体和山羊无浆体双重PCR检测方法的建立

无浆体是一种专性血液寄生的可经硬蜱传播的病原体,世界范围内分布广泛。本研究旨在建立一种可以同时检测牛无浆体和山羊无浆体的双重PCR方法。通过对2种病原gltA基因和msp4基因位点引物的筛选,PCR反应体系中引物剂量、酶剂量和PCR反应条件中的退火温度、循环次数的优化,最终确定了一个引物组合和最适的PCR反应体系和条件,并对其进行了重复性和特异性验证。结果表明,本研究建立的双重PCR方法有效,操作简便、特异性、重复性良好,为兽医工作者和科研人员提供了一种山羊无浆体和牛无浆体感染快速鉴别诊断和流行病学监测工具。

山羊无形体可视化等温扩增法的建立与应用

目的 山羊无形体(Anaplasma capra)是无形体属中近年来新发现的一种人兽共患无形体,可引起无形体病,严重威胁人类的健康。建立一种适用于现场快速检测山羊无形体的可视化环介导等温扩增(LAMP)方法,对无形体病的诊断与防控有重要意义。方法 用聚合酶链式反应(PCR)扩增山羊无形体的msp2基因,构建重组质粒。利用在线引物设计软件设计LAMP引物,优化其反应条件和反应体系;加入一定浓度的钙黄绿素,建立可视化LAMP方法,评价其敏感性和特异性,并与PCR方法比较。结果 建立的可视化LAMP反应可准确检测山羊无形体的重组质粒和样品中的山羊无形体基因,且不与其他无形体发生交叉反应,最低检测限为1 copy/μL,比PCR方法的灵敏度高100倍。用该方法检测已知山羊无形体阳性蜱的总DNA,结果均为阳性;检测承德市野外采集的蜱标本,山羊无形体阳性率为16.1%,PCR方法的阳性率为12.5%。结论 建立的可视化LAMP方法敏感性、特异,操作简单、快捷,可用于人感染山羊无形体的早期检测与蜱携带无形体的监测。