Role of ethanol in the regulation of hepatic stellate cell function

Evidence has accumulated to suggest an important role of ethanol and/or its metabolites in the pathogenesis of alcohol-related liver disease. In this review, the fibrogenic effects of ethanol and its metabolites on hepatic stellate cells (HSCs) are discussed. In brief, ethanol interferes with retinoid metabolism and its signaling, induces the release of fibrogenic cytokines such as transforming growth factor β-1 (TGFβ-1) from HSCs, up-regulates the gene expression of collagen I and enhances type I collagen protein production by HSCs. Ethanol further perpetuates an activated HSC phenotype through extracellular matrix remodeling. The underlying pathophysiologic mechanisms by which ethanol exerts these pro-fibrogenic effects on HSCs are reviewed.

Inhibition of Hepatitis B Virus Replication by Rheum palmatum L. Ethanol Extract in a Stable HBV-producing Cell Line

肝炎 B 病毒(HBV ) 感染是在世界上的一个严重健康问题。然而，仍然为 HBV 感染没有令人满意的治疗学的策略。到为有更高的功效和更少的副作用的新 anti-HBV 代理人的搜索，繁体中文药感冒 palmatum L 的禁止的活动。对 HBV 复制的乙醇摘录(RPE ) 在这研究被调查。量的即时聚合酶链反应(PCR ) 被采用在稳定的生产 HBV 房间线 HepAD38 对 HBV-DNA 复制分析 RPE 的禁止的活动；HBV 表面抗原(HBsAg ) 和 e 抗原(HBeAg ) 的表示层次被酶也决定在 RPE 处理以后的连接 immunosorbent 试金(ELISA ) 。RPE 能 dose-dependently 禁止 HBV-DNA 和 HBsAg 的生产。50% 抑制(IC50 ) 的集中在 209.63 点被计算， 252.53 渭 g /mL， respectivel y。然而，它对 HBeAg 表示的禁止的活动甚至在高集中是细微的。RPE 在 HepAD38 房间上有弱细胞毒素的效果(CC50 = 1 640 渭 g /mL ) 并且选择索引(SI ) 在 7.82 点被计算。与二 anthraquinone 衍生物 emodin 和 rhein 相比， RPE 显示出 anti-HBV 和更弱的 cytotoxicity 的更高的能力。那么感冒 palmatum L。可能拥有能有效地禁止 HBV-DNA 复制和 HBsAg 表示的另外的功能的代理人。他们改进功效并且减少的结构的活跃代理人，鉴定和修正的进一步的纯化 cytotoxicity 被要求。关键词肝炎 B 病毒(HBV )- 抗病毒 - 感冒 palmatum L.ethanol 摘录(RPE )- HepAD38 房间 CLC 数字 R373 同等地相应的作者。

穿心莲内酯对乙醇诱导肝细胞氧化应激损伤的作用及机制

目的研究穿心莲内酯(AD)对乙醇诱导肝细胞氧化应激损伤的保护作用,并探讨其作用机制。方法体外培养肝细胞L-02,用0~30μmol/L AD孵育1 h后,采用酶学方法测定处理前后谷胱甘肽巯基转移酶(GST)及其过氧化物酶(GPx)和还原酶(GR)活性变化,实时定量PCR检测其mRNA表达;同时采用Western blot分析丝裂原活化蛋白激酶家族(MAPKs)中p38,JNK和ERK以及Akt的磷酸化变化,并采用PI3K/Akt和ERK抑制剂LY294002和PD98059处理细胞,观察其在介导核转录因子Nrf2转位和GST、GPx和GR表达中的作用;MTT检测细胞活性变化。结果 0~30μmol/L AD处理L-02细胞后,GST、GPx和GR的酶活性显著增高,同时其mRNA表达也明显增多。AD也能诱导ERK和Akt磷酸化,但对p38和JNK无明显影响。采用LY294002或PD98059处理细胞后,可抑制AD诱导Nrf2核转位及Akt和ERK磷酸化,同时也能明显消除AD对乙醇处理后L-02细胞毒性的保护作用。结论 AD经PI3K/Akt和ERK上调抗氧化蛋白GST、GPx和GR的表达而发挥对乙醇毒性的保护作用。

肝脏干细胞生长及凋亡特性的研究

目的了解大鼠肝脏干细胞(WB-F344)的基本特征,探讨各种理化因素对肝脏干细胞凋亡的影响。方法观察肝干细胞的形态特征并绘制细胞生长曲线;采用细胞DNA琼脂糖凝胶电泳图检测饥饿、紫外线及乙醇对肝干细胞凋亡的影响;RT-PCR法、Western-blottting法及免疫组化法检测肝干细胞ALB、AFP的表达;结果WB细胞倍增时间约为48h,与正常人肝细胞系LO2细胞的倍增时间相近,是人肝癌细胞系HepG2细胞的2倍;紫外线和缺乏营养可引起WB细胞凋亡,而乙醇则引起WB细胞坏死;WB细胞较HepG2细胞和LO2细胞对乙醇、紫外线及饥饿的耐受性强;免疫组化、RT-PCR法及Western-blot法的结果相似,提示WB细胞和LO2细胞均表达AFP、ALBmRNA和蛋白,HepG2细胞仅表达AFPmRNA和蛋白,而不表达ALBmRNA和蛋白。结论肝干细胞倍增时间与正常肝细胞相仿;紫外线、乙醇和饥饿等理化因素可引起肝干细胞凋亡或坏死,但肝干细胞对它们的耐受性明显高于正常肝细胞及肝肿瘤细胞。

自噬抑制剂对乙醇诱导的肝星状细胞活化作用的影响

目的观察自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)对乙醇诱导的肝星状细胞(HSC)活化作用,并探讨其作用机制。方法体外培养大鼠肝星状细胞株HSC-T6,设立空白对照组、阳性对照组(乙醇刺激组)、低剂量组(5mmol/L 3-MA+100 mmol/L乙醇)、高剂量组(10 mmol/L 3-MA+100 mmol/L乙醇)。RT-PCR分析各组HSC活化标志蛋白α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及Ⅰ型胶原基因表达,Western blot法检测各组HSC中自噬水平标志蛋白LC3Ⅱ、α-SMA、Ⅰ型胶原表达;MTT法检测3-MA对乙醇诱导的HSC增殖的影响。结果与空白对照组比较,阳性对照组中α-SMA、Ⅰ型胶原mRNA和蛋白表达及LC3Ⅱ表达量明显增加(P<0.05),高剂量组却显著减少(P<0.01);与阳性对照组比较,低剂量组和高剂量组中α-SMA、Ⅰ型胶原mRNA和蛋白表达及LC3Ⅱ表达量逐渐减少(P<0.05);与低剂量组比较,高剂量组中α-SMA、Ⅰ型胶原mRNA和蛋白表达及LC3Ⅱ表达减少(P<0.05)。与阳性对照组比较,加入3-MA处理后的HSC增殖显著减少(P<0.05)。结论 3-MA可抑制乙醇诱导的HSC-T6细胞中LC3Ⅱ蛋白的表达、α-SMA、Ⅰ型胶原mRNA及蛋白的表达,抑制HSC增殖,且高剂量的作用更明显。

乙醇诱导肝星状细胞凋亡模型的建立

目的:探讨乙醇诱导肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)凋亡模型的作用及其与凋亡相关基因caspase-3、p53、bax和bcl-2表达的关系。方法:用CCK-8法检测不同浓度(0、10、20、40、60和80 m L/L)的乙醇对HSC的杀伤作用。采用40 mL/L乙醇作用6 h诱导HSC细胞凋亡。通过流式细胞术分析乙醇诱导对凋亡的影响,并用实时定量PCR检测乙醇诱导对凋亡相关基因caspase-3、p53、bax和bcl-2表达的影响。结果:随着乙醇浓度的增加,对HSC的杀伤能力逐渐增加。40 m L/L乙醇使HSC发生显著的细胞凋亡变化。流式细胞术检测发现乙醇诱导可使HSC早期+晚期凋亡明显增加(8.76%±0.43%vs 11.51%±0.54%),差异具有统计学意义(t=2.11,P<0.05);促凋亡基因caspas-3、bax和p53的mRNA表达水平上调,抑制凋亡基因bcl-2的mRNA表达水平下调。结论 :低浓度乙醇可诱导HSC凋亡增加,其凋亡发生与凋亡相关基因caspase-3、p53、bax和bcl-2表达改变相关。

复制型HBV-Tg小鼠原代肝细胞的培养

目的建立复制型HBV-Tg原代肝细胞体外培养方法,观察HBV-Tg小鼠原代肝细胞的氧化应激敏感性。方法改良的两步灌注法分离、纯化、培养HBV-Tg小鼠原代肝细胞,24孔板培养7天,每天换液,收集上清,检测乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）、丙氨酸转移酶（alanine transaminase,ALT）、天冬氨酸转移酶（aspartate trans-aminase,AST）、白蛋白（albumin,ALB）和病毒学指标HBsAg、HBV-DNA的水平;分离HBV-Tg小鼠与野生型Balb/c鼠肝细胞,培养24h后加不同浓度酒精,于16h后检测两种小鼠原代肝细胞培养上清的AST水平。结果 HBV-Tg小鼠原代肝细胞从铺板第3天开始,LDH、ALT、AST水平达到平衡,膜稳定性恢复正常;在第3~5天ALB水平稳定于较高水平;HBV复制及表达指标（HBsAg、HBV-DNA）在铺板后1~5天能保持较高水平;酒精对原代肝细胞的氧化应激损伤,浓度〈2%时,野生型Balb/c鼠肝细胞损伤程度明显低于HBV-Tg小鼠,浓度≥2%时,两种鼠肝细胞的损伤程度相当。结论复制型HBV-Tg小鼠原代肝细胞培养可以在体外稳定维持肝细胞活性与功能,表达高水平的HBV-DNA和HBsAg,为体外研究乙型肝炎病毒发病机制提供新的模型。

葛花解酲方对乙醇性HBV转基因小鼠肝癌前病变GST-Pi和PCNA表达及Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的:探讨葛花解酲方对乙醇性乙型肝炎病毒(HBV)转基因小鼠肝癌前病变谷胱甘肽-S转移酶(GST-Pi)和增殖细胞核抗原(PCNA)表达及Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路的影响。方法:将100只HBV转基因小鼠根据随机数字法分为对照组、模型组、葛花解酲方组和葛花解酲方+氧化锂(LiCl)组,每组25只。红星二锅头灌胃建立肝癌癌前病变小鼠模型,葛花解酲方水煎剂(40 g/kg)灌胃干预肝癌癌前病变,Wnt/β-catenin激动剂LiCl[1 mEq/(kg·d)]灌胃干预Wnt/β-catenin信号通路,共20周。伊红-苏木素(HE)染色观察肝脏病理学变化,免疫组化染色测定肝脏GST-Pi和PCNA表达,Western blot测定肝脏组织中Wnt-1、β-catenin蛋白水平。结果:与对照组比较,模型组小鼠肝脏重量、肝脏指数、GST-Pi IDO、PCNA IDO、Wnt-1和β-catenin蛋白升高(P<0.05);与模型组比较,葛花解酲方组小鼠肝脏重量、肝脏指数、GST-Pi IDO、PCNA IDO、Wnt-1和β-catenin蛋白降低(P<0.05);与葛花解酲方组比较,葛花解酲方+LiCl组小鼠肝脏重量、肝脏指数、GST-Pi IDO、PCNA IDO、Wnt-1和β-catenin蛋白升高(P<0.05)。HE染色:对照组小鼠肝脏结构和形态正常;模型组小鼠肝细胞变质和结节性增生明显,可见典型的假小叶,炎症细胞浸润明显,胆管上皮增生并具有异型性;葛花解酲方组小鼠肝细胞变质、结节性增生、炎症细胞浸润、胆管上皮增生及异型性较轻;葛花解酲方+LiCl组小鼠肝细胞变质、结节性增生、炎症细胞浸润、胆管上皮增生及异型性介于模型组和葛花解酲方组之间。结论:葛花解酲方可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路降低肝组织GST-Pi和PCNA表达逆转乙醇性HBV转基因小鼠肝癌前病变的发生。

基于AQP8和线粒体细胞凋亡途径相关性探讨马兰草乙醇提取物对活化的大鼠肝星细胞HSC-T6体外增殖和凋亡的影响

目的研究马兰草乙醇提取物在体外对转化生长因子-β1(TGF-β1)活化的大鼠肝星形细胞(HSC-T6)增殖、凋亡及基于AQP8蛋白靶点调控活化的HSC-T6细胞线粒体凋亡途径的影响,探究该药抗肝硬化腹水的作用机制。方法体外培养HSC-T6,用TGF-β1刺激24 h后,用不同浓度的马兰草乙醇提取物体外干预12、24、36、48 h,用MTT法检测马兰草乙醇提取物对活化HSC-T6存活率的影响,流式细胞术检测HSC-T6细胞凋亡和细胞线粒体膜电位的影响,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测AQP8mRNA的表达水平,Western Blot检测AQP8、Cty-C的蛋白表达。结果阴性对照组相比,各组OD值和细胞存活率均有下降,基质对照组的凋亡率下降(P<0.05),其余各组的凋亡率均有所上升(P<0.05),基质对照组和马兰提取物组(20、40μg/mL)的AQP8mRNA的表达水平明显上升(P<0.05);与基质组相比,大黄素各剂量组和马兰乙醇提取物各剂量组的细胞存活率均呈时间/剂量依赖性下降,大黄素组的早期凋亡有所上升(P<0.05),马兰提取物各剂量组各时期的凋亡增加的同时呈剂量依赖性升高(P<0.05),且线粒体细胞膜电位呈剂量依赖性显著下降(P<0.05)。Western Blot检测结果显示,Cty-C和AQP8的表达趋势一致,大黄素组的表达较较阴性对照组和基质对照组均有明显增多(P<0.05),马兰提取物组(40μg/mL)的表达量最多(P<0.05)。结论马兰草乙醇提取物在体外可抑制活化的HSC-T6增殖,促进细胞凋亡,其机制可能与激活线粒体细胞凋亡途径和上调AQP8表达有关。

云南松松塔醇沉物体外抗肝纤维化作用的研究

目的:研究云南松松塔醇沉物(YN-E、YN-F、YN-DEF)体外抗肝纤维化作用。方法:MTT法检测云南松松塔醇沉物对HSC增殖的影响及对L-02的毒性作用;ELISA法检测培养上清液中TGF-β1和Col-Ⅰ、Col-Ⅲ的含量。结果:24、48、72 h云南松松塔3种醇沉物均能抑制HSC的增殖,且抑制强度呈浓度和时间依赖性;3种醇沉物在72 h能抑制TGF-β1、Col-I和Col-Ⅲ的生成,而在48 h则只抑制TGF-β1和Col-Ⅰ的生成,对Col-Ⅲ的生成无抑制作用;浓度为1 000.00μg/m L,72 h的作用条件下,L-02在YN-E、YN-F、YN-DEF 3种醇沉物中的存活率分别为71.34%、73.33%、73.80%。结论:云南松松塔3种醇沉物均具有一定的体外抗肝纤维化作用,其中YN-DEF抑制HSC增殖的作用最强,其机制可能为抑制HSC增殖和TGF-β1、Col-Ⅰ的生成,且对正常肝细胞毒性小。

穿心莲内酯激活Nrf2抑制乙醇诱导肝细胞氧化应激损伤

本研究为观察穿心莲内酯（AD）对乙醇诱导肝细胞氧化应激损伤的保护作用，体外培养肝细胞L-02，用不同浓度（0—30μmol／L）AD孵育1h，随后加入100mmol／L乙醇作用24h。ELISA测定AD处理前后细胞培养上清中谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST）的含量；比色法检测丙二醛（MDA）和谷胱氨肽（GSH）的变化；荧光探针DCFH2-DA检测胞内活性氧（ROS）的产生；Western blotting和分析血红素氧合酶-1（HO—1）mRNA和蛋白的表达。电泳迁移率实验（EMSA）检测核转录因子Nrf2的DNA结合活性。结果表明，100mmol／L乙醇处理肝细胞后，可在不影响L-02活性的情况下显著增加培养上清中ALT和AST的含量，而AD预处理后可抑制ALT、AST、MDA和ROS的增加以及上调胞内GSH的水平。此外，Westem blotting和实时定量PCR结果也证实乙醇可降低肝细胞内源性HO-1的表达，而AD预处理后可增强转录因子Nrf2的活性并进一步上调HO-1的表达水平。AD可能通过激活Nrf2上调HO-1表达而发挥对乙醇所致肝细胞损伤的保护作用。

草苁蓉乙醇提取物对大鼠肝星状细胞体外增殖与凋亡的影响

目的:探讨草苁蓉乙醇提取物对体外培养的大鼠肝星状细胞株(HSC-T6)生长抑制及诱导凋亡的影响。方法:选用大鼠HSC-T6进行体外培养,用MTT法测定0.25,0.5,0.75,1.0 g·L-1草苁蓉乙醇提取物作用12,24,36,48 h后对细胞增殖的抑制作用;应用Annexin V与碘化丙啶(PI)双染色荧光显微镜及透射电镜技术观察药物作用后细胞形态学改变;应用流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡率的变化。结果:①MTT实验表明草苁蓉乙醇提取物能抑制HSC-T6细胞增殖,并显出量效和时效关系。0.75 g·L-1草苁蓉刺激12,24,36,48 h对HSC-T6增殖的抑制率分别为(44.58±1.42)%,(51.56±1.34)%,(63.83±0.99)%,(74.77±3.40)%(P<0.05)。②荧光显微镜及透射电镜观察发现草苁蓉乙醇提取物作用于HSC-T6细胞后呈现出典型的细胞凋亡形态学改变,细胞表面微绒毛消失,细胞体积变小,细胞质浓缩,核染色质边集、细胞核固缩、核碎裂、出泡等。③草苁蓉处理后HSC-T6被阻滞于G0/G1期,细胞凋亡率上升,且表现出明显量效关系。0.75 g·L-1草苁蓉乙醇提取物改变HSC-T6周期分布,使G0/G1期细胞由(50.33±0.80)%增至(61.46±1.07)%,表现出G0/G1期阻滞;同时诱导HSC-T6凋亡,凋亡率由(1.44±0.43)%增至(14.20±0.98)%(P<0.05)。结论:草苁蓉乙醇提取物可明显抑制HSC-T6细胞增殖,其作用可能与诱导细胞凋亡,并使细胞周期阻滞于G0/G1期有关。

草苁蓉乙醇提取物对大鼠肝星状细胞增殖与凋亡的影响

目的:探讨草苁蓉提取物对大鼠肝星状细胞株(HSC-T6)生长抑制及诱导凋亡的影响。方法:选用大鼠肝星状细胞株(HSC-T6)进行体外培养,用MTT比色法测定不同浓度、不同时间段草苁蓉乙醇提取物对该细胞的抗增殖作用;应用倒置显微镜、HE染色光学显微镜、吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)双染色荧光显微镜及扫描电镜技术观察药物作用后的细胞形态学改变;应用流式细胞仪(fluorescence activated cell sorter,FACS)检测细胞周期及细胞凋亡率的变化。结果:(1)MTT实验表明:草苁蓉乙醇提取能抑制HSC-T6细胞增殖,并表现出浓度、时间依赖性关系。(2)HE染色、AO/EB荧光染色以及扫描电镜观察发现草苁蓉乙醇提取物作用于HSC-T6细胞后呈现出典型的细胞凋亡形态学改变:细胞表面微绒毛消失,细胞体积变小,细胞质浓缩,核染色质边集、细胞核固缩、核碎裂、出泡等现象。(3)流式细胞仪检测,草苁蓉乙醇提取物处理后大鼠肝星状细胞(HSC-T6)被阻滞于G0/G1期,细胞凋亡率上升,与对照组相比有统计学差异,并随药物浓度的升高呈增高趋势。结论:(1)草苁蓉乙醇提取物在体外可明显抑制HSC-T6细胞的增殖。(2)草苁蓉乙醇提取物在体外可诱导HSC-T6细胞凋亡,并使细胞周期阻滞于G0/G1期。

藏药蕨麻对原代培养小鼠肝细胞酒精损伤保护作用研究

目的研究藏药蕨麻对原代培养酒精损伤肝细胞的保护作用。方法原代肝细胞经分离纯化培养后,MTT法评价藏药蕨麻对酒精损伤肝细胞存活率的影响;荧光染色法测定藏药蕨麻对酒精损伤肝细胞活性氧物质(ROS)含量、细胞内钙离子浓度的影响;流式细胞仪检测藏药蕨麻对酒精损伤肝细胞凋亡的影响;免疫印迹法检测藏药蕨麻对Bcl-2和Bax表达的影响。结果经酒精损伤后,肝细胞存活率降低;细胞内ROS含量和钙离子浓度增高;凋亡抑制基因Bcl-2减弱、促凋亡基因Bax表达增强。藏药蕨麻可明显提高细胞存活率;降低细胞内ROS含量和钙离子浓度;改善凋亡情况,增强Bcl-2表达,抑制Bax表达,且作用呈剂量依赖性。结论藏药蕨麻对原代培养小鼠肝细胞酒精损伤具有一定的保护作用。

乙醇诱导肝癌细胞凋亡的实验研究

目的 研究低浓度乙醇对肝癌细胞的影响及作用机制。方法 采用噻唑蓝比色法观察乙醇对细胞增殖的影响 ;采用流式细胞仪法观察乙醇对肝癌细胞内活性氧的影响 ;采用琼脂凝胶电泳法观察DNA片断化条带。结果 低浓度乙醇可明显抑制细胞增殖 ;乙醇作用于细胞后 2h内引起活性氧产生 ,2 4h后细胞出现典型的凋亡表现。结论 乙醇能够通过诱导细胞内活性氧的产生引起细胞凋亡 ,呈明显的剂量依赖性。

鳖甲煎丸不同提取物对TGF-β1诱导的HSC-T6细胞的影响

目的:探讨鳖甲煎丸不同提取物对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的HSC-T6细胞增殖及相关细胞因子的影响作用,并探究水提物与醇提物抗肝纤维化作用的异同。方法:建立TGF-β1诱导HSC-T6细胞增殖模型,采用MTT法观察水提物与醇提物对HSC-T6细胞增殖的量效和时效关系来探讨鳖甲煎丸提取物对TGF-β1诱导HSC-T6细胞增殖的影响;并采用RT-PCR、ELISA法测定不同提取物对HSC-T6细胞相关细胞因子的影响。结果:鳖甲煎丸水提物在0.125-2.000mg/m L浓度范围,抑制效果随剂量增加而降低,呈线性负相关关系,醇提物未见明显的剂量依赖关系。水提物抑制作用随时间延长表现为先增强后减弱,醇提物则表现出一定的时间依赖性,随时间延长而增强。与空白对照组比较,模型组细胞相关细胞因子α-SMA、Col-Ⅲ、CTGF和PDGF m RNA含量增高(P<0.05)。与模型组比较,鳖甲煎丸水提物使HSC-T6细胞COL-Ⅲ、COL-Ⅳ、PDGF m RNA含量和蛋白表达降低。醇提物使HSC-T6细胞COL-Ⅲ、COL-Ⅳm RNA含量和蛋白表达降低,而PDGF m RNA含量升高促进其蛋白表达。结论:鳖甲煎丸水提物与醇提物对TGF-β1诱导的HSC-T6细胞增殖均有一定的抑制作用,但其抑制作用表现有一定差异;同时均可抑制胶原COL-Ⅲ、COL-Ⅳ的合成;对PDGF表达调控亦有所不同。

穿心莲内酯对慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞的免疫调节作用

目的 探讨穿心莲内酯对体外培养慢性乙型肝炎（CHB）患者外周血单个核细胞（PBMC）表达Th1细胞因子IFN-γ mRNA及Th2细胞因子IL-4 mRNA和IL-10 mRNA的影响及其抗HBV的活性.方法 分别应用穿心莲内酯10mg/L（实验组）及0.1%二甲基亚砜（对照组）加入细胞培养液中刺激CHB患者PBMC.不同浓度穿心莲内酯（实验组）及阿德福韦（对照组）刺激HepG2.2.15细胞系,实时荧光定量PCR检测处理后PBMC的IFN-γ tuRNA、IL-4 mRNA及IL-10mRNA表达水平及HepG2.2.15细胞系HBV DNA复制水平.结果 穿心莲内酯10 mg/L处理16 h后,实验组PBMC的IFN-γ mRNA表达水平高于对照组（Z=-2.78,P=0.05）,IL-4 mRNA及IL-10 mRNA的表达水平明显低于对照组（Z=-3.82,P〈0.01）,IFN一γ/IL-4 mRNA的比例较对照组明显提高（Z=-3.82,P〈0.01）,不同浓度穿心莲内酯对HepG2.2.15细胞系HBV DNA复制无明显影响（t=11.88,P〉0.05）,而阿德福韦对HBV DNA有抑制作用（t=15.95,P〈0.05）.结论 穿心莲内酯对CHB患者PBMC内IFN一γ mRNA、IL-4 mRNA及IL-10 mRNA的表达水平有调节作用,改善Th1/Th2平衡,对HBV DNA无直接抑制作用.