无创产前筛查在高龄妊娠染色体非整倍体筛查中的应用

目的评价无创产前筛查(NIPT)在高龄妊娠染色体非整倍体筛查中的应用价值。方法选取2018年2月至2022年5月在广州市花都区幼保健院接受NIPT检测的3263例高龄妊娠孕妇纳入为高龄妊娠组,并以同期在本院接受NIPT检测的7732例低龄妊娠孕妇纳入为低龄妊娠组,分析NIPT结果和染色体核型结果,比较两组的检测效能。结果高龄妊娠组检出NIPT高风险17例(0.52%),T21、T18、T13及SCA的高风险检出率分别为0.12%、0.06%、0.12%和0.21%;低龄妊娠组检出NIPT高风险44例(0.52%),T21、T18、T13及SCA的高风险检出率分别为0.13%、0.06%、0.04%和0.28%,两组NIPT高风险检出率比较,差异无统计学意义(χ^(2)=0.0006,P>0.05)。高龄妊娠组T21、T18、T13及SCA的阳性预测值(PPV)分别100%、50%、25%和83.33%,复合PPV为68.75%(11/16);低龄妊娠组T21、T18、T13及SCA的PPV分别90%、40%、0%和31.82%,复合PPV为50%(18/36),两组的复合PPV比较,差异无统计学意义(χ^(2)=0.0298,P>0.05)。结论NIPT在高龄妊娠染色体非整倍体的筛查效能与低龄妊娠组相近,能准确检测T21,对T18和T13的检测效率有待提高,对SCA也起着有效的筛查作用。

无创产前筛查在双胎妊娠染色体非整倍体筛查中的应用及胎儿游离DNA浓度分析

目的评估无创产前筛查(non-invasive prenatal testing,NIPT)在双胎妊娠染色体非整倍体的应用价值,并对胎儿游离DNA浓度进行分析。方法收集2018年1月至2023年5月在广州市花都区妇幼保健院接受NIPT检测的双胎样本617例(辅助生殖双胎284例,自然妊娠双胎333例)为研究对象,同期12688例单胎妊娠样本作为对照,采用高通量测序方法进行检测,对染色体非整倍体高风险样本行核型分析,根据Y染色体唯一比对条数对男胎进行胎儿游离DNA浓度计算,使用基于浅深度的母亲血浆DNA测序方法(SeqFF)对女胎进行胎儿游离DNA浓度计算。结果双胎妊娠检出2例T21和1例T18,未检出T13,T21、T18的阳性预测值分别为100%、0,阴性预测值均为100%;单胎妊娠T21、T18、T13的阳性预测值分别为88.89%、45.45%、25%,阴性预测值均为100%。双胎妊娠胎儿游离DNA浓度为10.48%,较单胎妊娠(11.35%)稍低;双胎妊娠首次建库成功率为99.03%,较单胎妊娠(99.99%)低,差异有统计学意义(χ^(2)=104.105,P=0.00)。结论NIPT在双胎妊娠染色体非整倍体筛查有一定应用价值,T21筛查效率高,胎儿游离DNA浓度影响NIPT检测的成败和结果准确性。

唐氏筛查临界风险的非高龄孕妇有必要行无创性产前检测：6804例结果分析

目的探讨无创性产前基因检测技术对血清学筛查阳性的非高龄孕妇血浆胎儿游离DNA进行染色体非整倍体检测的有效性。方法选择2011年10月~2018年6月于佛山市妇幼保健院行无创性产前基因检测的6804例非高龄孕妇(预产期年龄<35岁)为研究对象,孕周:12~24周,预产期年龄:21~34岁,均为单胎。按照血清学指标分为高风险组和临界风险组,血清学筛查高风险组3763例(21三体风险值≥1/270或18三体风险值≥1/350),临界风险组3041例(1/1000≤21三体风险值<1/270或1/1000≤18三体风险值<1/350)。对无创性产前基因检测结果阳性的孕妇行羊膜腔穿刺或脐静脉血穿刺,行常规染色体核型分析和/或高通量测序检测。对所有检测孕妇行电话随访,并统计分析无创性产前基因检测的准确性在两组差别有无统计学意义。结果6801例成功完成无创性产前基因检测,3例样本由于血浆游离DNA浓度过低检测失败。3761例血清学筛查高风险组中产前基因检测染色体拷贝数异常高风险者共70例,其中53例行进一步产前诊断,结果显示高风险组无创性产前检测技术对21三体检测的灵敏度为95.65%,特异度99.91%,阳性预测值88.0%,假阳性率0.09%,假阴性率4.35%;对18三体检测的灵敏度100%,特异度100%,阳性预测值100%,假阳性率0,假阴性率0。对13三体检测的假阳性率0.09%,假阴性率0;对性染色体异常检测的灵敏度100%,特异度99.80%,阳性预测值30.0%,假阳性率0.2%,假阴性率0;对其他染色体异常检测的灵敏度100%,特异度99.88%,阳性预测值16.60%,假阳性率0.18%,假阴性率0。3040例血清学筛查临界风险组产前基因检测染色体拷贝数异常高风险者共54例,其中的36例行进一步产前诊断,结果显示临界风险组孕妇无创性产前检测技术对21三体检测的灵敏度为100%,特异度100%,阳性预测值100%,假阳性率0,假阴性率0;对18三体检测的假阳性率0.11%,假阴性率0。13三体检测的假阳性率0.04%,假阴性率0;对性染色体异常检测的灵敏度100%,特异度99.79%,阳性预测值50%,假阳性率0.21%,假阴性率0;对其他染色体异常检测的假阳性率0.18%,假阴性率0。高风险组和临界风险组对21三体和性染色体非整倍体检测敏感度、特异度,假阳性率,阳性预测值差别均无统计学意义(P>0.05)。结论唐氏筛查高风险但拒绝产前诊断和临界风险的非高龄孕妇很有必要进一步行无创性产前检测。该技术检测胎儿染色体非整倍体具有高敏感度和特异度,假阳性率和假阴性率很低。

胎儿染色体非整倍体无创产前基因检测技术在周口市的临床应用分析

目的探讨胎儿染色体非整倍体无创产前基因检测(non-invasive prenatal testing,NIPT)技术在周口市胎儿染色体非整倍体疾病筛查中的临床应用。方法选取2014年1月-2015年11月间,在周口市中心医院进行唐氏综合征筛查结果提示高风险(RISK>1/275)、高龄孕妇(孕龄≥35岁)、有既往不良孕产史以及超声检查提示胎儿异常的共计829例孕妇,进行胎儿染色体非整倍体无创产前基因高通量测序分析,结果提示高风险的孕妇手术抽取羊水后核型分析。结果 612例唐氏筛查高风险孕妇组经外周血胎儿游离DNA检测结果提示高风险者共计7例(6例21-三体、1例18-三体);169例高龄孕妇组共检出1例18-三体结果高风险者;7例既往不良孕产史孕妇组检出1例21-三体结果高风险者;41例超声检查提示胎儿异常孕妇组共检出2例结果高风险(1例21-三体、1例13-三体)。NIPT结果提示21、18、13-三体异常高风险孕妇分别为8例、2例、1例,进一步行染色体核型分析的确诊例数分别为:8例、2例、1例,结果证实NIPT用于检测胎儿21-三体、18-三体、13-三体的敏感度为100%,特异度为100%,准确率100%,与染色体核型分析结果一致。结论周口市孕妇外周血游离胎儿DNA高通量测序分析可用于胎儿常见染色体非整倍体疾病的筛查,敏感度高、特异度强、准确率高应推广临床应用。

用果蝇检测851营养液的遗传毒性

应用果蝇ＳＬＲＬ试验检测８５１营养液、１／２稀释液及稀释液突变率为０．１３～０．２％，结果无诱变效应；应用非整倍体试验检测亦未见非整倍体效应。表明８５１营养液对果蝇无遗传毒性作用。

渝东北地区胎儿染色体非整倍体疾病的NITP分析

目的应用无创产前基因检测(noninvasive prenatal genetic testing,NIPT)技术研究渝东北地区胎儿染色体非整倍体疾病的发病率和年龄分布。方法利用美国life公司二代测序平台及生物信息分析技术,分析2016年7月～2018年5月在重庆三峡中心医院基因检测中心行NIPT检测的2 784例12～24周孕妇的外周血,从中获取胎儿染色体相关信息。对NIPT结果为高风险的孕妇实施羊膜腔穿刺及胎儿染色体核型分析,对NIPT结果为低风险的孕妇进行电话随访至出生后。结果渝东北地区孕妇染色体非整倍体疾病高风险阳性检出率为0.72%(20/2 784)。其中≥40岁阳性率为2.97%,30～39岁阳性率为0.75%,<30岁阳性率为0.54%。羊膜腔穿刺分析显示,21-三体、18-三体高风险诊断符合率为100%(11/11,2/2),13-三体高风险诊断符合率为80.00%(4/5)。NIPT诊断胎儿染色体非整倍体疾病的敏感度为100.00%(2 784/2 784),总特异度为94.44%(17/18),总假阳性率为0.03%(1/2 784),假阴性率为0.00%(0/0)。结论渝东北地区NIPT检测胎儿染色体非整倍体疾病的阳性检出率为0.72%,检出主要以21-三体为主,占61%,≥40岁高龄孕妇NIPT阳性率较其他年龄组明显升高,达2.97%。

避孕药醋炔诺酮肟对果蝇的致畸性和致突变性的研究

采用果蝇致畸试验，果蝇伴性隐性致死试验和果蝇非整倍体试验对避孕药醋炔诺酮肟进行致畸和致突变性研究。结果表明当醋炔诺酮肟在浓度分别为５ｍｇ／ｍｌ和５０ｍｇ／ｍｌ时，不引起果蝇致畸率和伴性隐性致死率升高。但在５０ｍｇ／ｍｌ浓度时可引起果蝇非整倍体频率上升，并具有统计学意义。

大规模平行测序无创基因检测用于胎儿染色体非整倍体异常产前诊断的临床价值

目的探讨大规模平行测序无创基因检测在胎儿染色体非整倍体异常产前诊断中的临床应用价值。方法选择预约做产前诊断的高危孕妇914例,按危险因素分为唐氏综合征筛查高危组563例,高龄妊娠组245例和其他原因组106例。抽取孕妇外周血,提取血浆DNA,制备测序文库,用高通量测序仪器检测,结果与人类的参考基因组比对;同时采集胎儿羊水,经细胞培养后行羊水细胞染色体核型分析。结果 914例孕妇经大规模平行测序技术检出21-三体综合征高风险8例,18-三体综合征高风险3例,13-三体综合征高风险1例;与染色体核型分析相比,产前无创基因检测21-三体综合征、18-三体综合征、13-三体综合征的阳性预测值均为100%,而假阳性率均为0。914例样本中,检出45,X高风险3例、47,XXX和47,XXY高风险各2例;与染色体核型分析相比,产前无创基因检测45,X的假阳性率为0.11%,阳性预测值为66.7%,47,XXY和47,XXX的假阳性率均为0.22%,阳性预测值均为50%。结论大规模平行测序技术对胎儿常染色体非整倍体疾病的诊断,具有极高的阳性预测值,但对胎儿性染色体非整倍体异常的阳性预测值较低;只能作为一种高级筛查性检测而不是确诊方法。

无创产前基因检测技术在胎儿染色体非整倍体检测中的临床应用

目的 评价无创产前基因检测技术(NIPT)在产前胎儿染色体非整倍体筛查中的应用价值。方法 收集2017年10月至2021年6月在清远市人民医院行NIPT检测的6 535例孕妇的临床资料,高风险孕妇行羊水穿刺术进行核型确诊,低风险孕妇进行产前产后电话随访。结果 6 535例样本中共检出胎儿染色体非整倍体异常高风险88例,检出率为1.35%。其中68例进行产前诊断确诊21三体综合征(T21)、18三体综合征(T18)、13三体综合征(T13)、性染色体异常(SCA)、罕见染色体异常(RATs)的例数分别为18、5、8和1例,其阳性预测值(PPV)分别为72%(18/25)、83.3%(5/6)、40%(8/20)和7.14%(1/14)。高龄组阳性检出率大于低龄,差异有统计学意义(χ^(2)=13.005,P<0.05);唐筛高风险组阳性检出率大于临界风险或单指标异常组,差异有统计学意义(χ^(2)=18.565,P<0.05)。结论NIPT技术可快速准确地检测胎儿18、21号染色体非整倍体,但13号染色体PPV较低,而SCA及RATs的检出及有效性有待完善及优化。高龄及唐筛高风险人群患染色体异常疾病的风险升高,应重点关注NIPT在此类人群的应用。

激光诱变无核沙田柚的染色体研究

选摘经激光诱变得到的第二代无核(少核)沙田柚叶片,和未经激光处理的对照组进行染色体的对比分析,实验分析发现染色体数目发生了改变,出现了非整倍体。本文对染色体数目进行了统计分析,并讨论了非整倍体与无核化之间的关系。

血清学筛查联合无创产前检测在胎儿常见非整倍体筛查中的应用

目的探讨在川南地区,无创产前检测(NIPT)相对于血清学筛查的优势以及血清学筛查联合NIPT在胎儿常见非整倍体筛查中的临床应用价值。方法选取2015年9月~2016年9月,本院妇产科门诊就诊的孕12~22+6周且自愿进行血清学筛查和NIPT检测的孕妇364例,并随访观察。结果 176例孕妇血清学筛查提示为高风险,其中35岁以下T21临界风险(1/1 000≤T21风险值<1/270)和高风险为(≥1/270)137例,T18临界风险(1/1 000≤T18风险值<1/350)和高风险为(≥1/350)12例。364例全部进行无创DNA检测,其结果全为阴性,在以后的随访中,胎儿均未出现异常情况。结论 35岁以上血清学筛查风险率显著高于35岁以下(P<0.05);无创产前检测相对于血清学筛查具有更高的敏感性和特异性;血清学筛查联合无创产前检测能提高胎儿常见非整倍体检出率,减少染色体异常胎儿出生,提高川南地区人口素质。

无创产前筛查低风险人群中超声软指标阳性的临床意义

目的 探讨无创产前筛查(NIPT)低风险人群中超声软指标阳性与胎儿染色体异常的关系,并分析其临床应用价值。方法 回顾性分析2012—2021年因孕中期超声检查发现胎儿存在超声软指标阳性并在河北省人民医院行介入性产前诊断的单胎妊娠3 856例孕妇的临床资料,根据是否行NIPT将纳入人群分为A组和B两组;A组为未行NIPT组,共3 311例;B组为行NIPT提示低风险组,共545例。比较两组间各项超声软指标中染色体异常的检出情况。结果 2012—2021年共有3 856例单胎妊娠孕妇因超声软指标阳性行介入性产前诊断,经确诊染色体异常胎儿124例,总检出率约为3.22%。各项软指标中,以2项及以上软指标异常的案例染色体异常检出率最高,为8.27%(47/568),明显高于总检出率,其中目标三体比例最多(74.47%,35/47);其次,孤立性单脐动脉和轻度肾盂扩张的检出率(0.78%、1.46%)均明显低于总检出率,差异均有统计学意义(χ^(2)=4.759、4.525,均P<0.05)。B组21-三体综合征(0.00%)、18-三体综合征(0.00%)及染色体异常总检出率(0.37%)均明显低于A组(2.29%、0.75%及3.68%),差异均有统计学意义(χ^(2)=12.761、7.646及16.550,均P<0.05)。B组中孤立性肠管回声增强和2项及以上阳性软指标各发现1例性染色体异常胎儿,其余各项孤立性软指标均未发现染色体异常胎儿。结论 染色体异常胎儿中检出超声软指标阳性的多为21-三体综合征和18-三体综合征胎儿,NIPT低风险可降低因超声软指标阳性提示胎儿可能存在染色体异常的比例,因此对该类孕妇行介入性产前诊断值得思考,应充分权衡胎儿丢失的风险和给孕妇及其家庭带来的焦虑。

无创DNA产前检测对胎儿染色体非整倍体的诊断价值

目的分析高风险孕妇无创DNA产前检测(NIPT)情况,探讨NIPT对胎儿染色体非整倍体的诊断价值。方法2021年1月—2022年12月开封市妇产医院诊治高风险孕妇1716例,均行NIPT,NIPT结果异常者行羊水穿刺产前诊断。以羊水穿刺产前诊断结果为金标准,计算NIPT对胎儿染色体非整倍体的阳性预测值并观察妊娠结局。结果1716例孕妇中高龄650例(37.88%),唐氏筛查高风险154例(8.97%),唐氏筛查临界风险409例(23.83%),单项值异常93例(5.42%),要求检查224例(13.05%),双胎57例(3.32%),试管婴儿44例(2.56%),超声异常88例(5.13%)。1716例孕妇NIPT检出胎儿异常22例(1.28%),其中21-三体综合征高风险6例,18-三体综合征高风险3例,性染色体异常高风险9例,染色体微缺失微重复综合征4例。22例NIPT异常者行羊水穿刺产前诊断17例,检出胎儿异常13例(76.47%);未行羊水穿刺5例,其中性染色体异常高风险4例(新生儿正常2例,胎停育2例),21-三体综合征高风险1例(胎停育)。NIPT对胎儿染色体非整倍体的阳性预测值为75.80%。6例NIPT为21-三体综合征高风险者羊水穿刺产前诊断确诊5例,终止妊娠;1例未行羊水穿刺者胎停育。3例NIPT为18-三体综合征高风险者羊水穿刺产前诊断确诊3例,终止妊娠。9例NIPT为性染色体异常高风险者行羊水穿刺产前诊断5例,其中超雌综合征保留胎儿1例,克氏征选择终止妊娠1例,结果正常3例。4例NIPT为染色体微缺失微重复综合征者羊水穿刺产前诊断确诊致病性变异3例,终止妊娠;双胎结果正常1例,新生儿正常。结论NIPT对胎儿染色体非整倍体的产前诊断价值较高,可避免不必要的羊水穿刺,可作为产前诊断染色体非整倍体疾病的辅助方法之一。

无创产前基因检测双胎21、18和13-三体综合征的应用研究

目的探讨无创产前基因检测(NIPT)双胎21、18和13-三体综合征在临床应用的可行性。方法选取2012年8月至2014年11月在广州医科大学附属第三医院胎儿医学中心或佛山市妇幼保健院产科中心就诊的双胎妊娠孕妇,其中同意行NIPT检测者共215例,通过对孕妇血浆游离DNA测序来检测胎儿患21、18和13-三体综合征的风险。染色体核型检查是验证NIPT检测准确性的金标准,新生儿体格检查作为辅助检验标准。结果 3例NIPT检测结果提示为21-三体综合征高风险,经染色体核型检查证实均为双胎之一21-三体综合征;余212例NIPT检测结果为低风险,染色体核型或新生儿体格检查中均未发现异常。本研究中NIPT检测双胎21、18和13-三体综合征的准确性为100%,并降低了侵入性产前诊断的发生率。结论 NIPT检测双胎21、18和13-三体综合征是产前筛查的一种新选择,将其投入临床应用具有一定可行性。

无创基因检测技术在胎儿非整倍体及性染色体产前筛查的临床研究

目的无创基因检测技术在胎儿非整倍体及性染色体产前筛查中的临床价值。方法2015年1月至2017年12月在知情同意前提下对4709例孕妇抽取静脉血10ml,提取游离DNA,采用新一代高通量测序技术,结合生物信息分析,得出胎儿非整倍体及性染色体的风险率,对21、18、13高风险及可疑性染色异常的孕妇进一步行羊膜腔穿刺术获得染色体核型。结果共筛查出无创基因高风险孕妇107例,其中21三体高风险77例,18三体高风险23例,13三体高风险7例,94例高风险孕妇经介入性产前诊断羊水细胞核型分析,经统计学分析,无创基因21、18、13三体检出率均为100%,漏诊率为0,假阳性率分别为为0.04%(2/4708)、0.08%(4/4708)和0.06%(3/4708),阳性预测值分别为97.1%(67/69)、78.9%(15/19)和50.0%(3/6),阴性预测值均为100%;共筛查出可疑性染色体异常孕妇96例,66例经介入性产前诊断羊水细胞核型分析,经统计学分析,无创基因性染色体检出率为100%,漏诊率为0,假阳性率为0.30%(14/4708),阳性预测值78.8%(52/66),阴性预测值100%。结论无创基因检测在临床工作中可以提升筛查能力,减少染色体异常儿的出生,减少不必要的有创性性产前诊断操作。

大规模平行测序技术在产前无创检测胎儿染色体异常中的临床应用

目的评估孕妇外周血胎儿游离DNA高通量测序在检测胎儿染色体非整倍体异常中的应用及意义,以及探讨其在检测胎儿染色体缺失、重复中的应用。方法对象为我院产前筛查高风险单胎孕妇2120例。通过大规模平行测序技术(Massively Parallel Sequencing,MPS,又称高通量测序技术)进行无创产前检测,对检测结果为高风险者行介入性产前诊断术、胎儿染色体核型分析,随访至胎儿出生后或引产后。结果 2120例标本中无创性基因筛查共检出51例高风险,其中非整倍体高风险49例,包括21-三体21例,18-三体8例,13三体5例,45,X0 5例,47,XXX 5例,47,XXY 4例,8-三体1例,染色体结构异常包括染色体缺失、重复2例。对无创基因检测高风险孕妇行介入性产前诊断及羊水、脐血细胞染色体核型分析,结果1例21-三体高风险假阳性,47,XXY高风险者发现1例假阳性,45,X0高风险者发现1例假阳性;8-三体高风险者假阳性;3例染色体非平衡结构异常高风险与核型结果符合。结论孕妇外周血胎儿游离DNA高通量测序对于无创检测胎儿21-三体、18-三体、13三体准确度高,临床作为筛查价值明确,但因存在假阳性结果,对高风险孕妇仍需行染色体核型确诊。对10Mb以上染色体缺失重复检出率较高,对更小片段的染色体缺失重复的筛查效果仍需要更进一步的研究。

染色体多态性:PGT-A新指征?

目的探讨染色体多态性变异是否可以作为胚胎植入前非整倍体检测(preimplantation genetic testing for aneuploidies,PGT-A)的指征。方法回顾性队列研究分析于郑州大学第一附属医院生殖医学中心2012年1月1日至2021年12月31日期间接受PGT-A解冻移植和体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET)新鲜移植助孕患者的临床资料。根据夫妇染色体核型,PGT-A周期分为女方染色体多态性变异(女方多态组)、男方染色体多态性变异(男方多态组)及双方染色体多态性变异(双方多态组),同期染色体正常夫妇为对照(染色体正常组);IVF周期分为女方染色体多态性变异(女方多态组)、男方染色体多态性变异(男方多态组),同期染色体正常夫妇为对照(染色体正常组);比较组间实验室结果和妊娠结局。结果PGT-A周期中,各组间活检胚胎染色体非整倍体率、解冻移植临床妊娠率、早期流产率、活产率差异均无统计学意义(均P>0.05)。IVF新鲜胚胎移植中,各组间临床妊娠率、早期流产率、活产率差异均无统计学意义(均P>0.05)。IVF助孕后早期流产患者中,女方多态组、男方多态组和染色体正常组流产组织拷贝数变异(copy number variation,CNV)检测异常率分别为26.67%(4/15)、57.89%(11/19)、64.59%(363/562),差异有统计学意义(P=0.010)。结论夫妇染色体多态性变异不影响胚胎非整倍体,同时不影响PGT-A周期和IVF新鲜移植周期妊娠结局,且不增加流产组织染色体异常率。目前无明确证据支持染色体多态性变异可作为PGT-A新指征。

植入前胚胎的非整倍体性和嵌合性与女性年龄的相关性

目的探讨植入前胚胎的非整倍体性及嵌合性与女性年龄的相关性。方法收集2018年5月-2019年10月在沈阳市妇婴医院生殖中心行胚胎植入前非整倍体遗传学检测(PGT-A)助孕的患者,根据年龄将患者分为A组(年龄>35岁)和Y组(年龄≤35岁)。胚胎培养至囊胚期行滋养外胚层细胞活检,PGT-A采用全基因组扩增-下一代测序技术(WGA-NGS),分析胚胎的染色体非整倍体性及嵌合性与女性年龄的关系。结果 A组188枚胚胎扩增成功,其中非整倍体胚胎126枚,嵌合性胚胎16枚;Y组173枚胚胎扩增成功,其中非整倍体胚胎81枚,嵌合性胚胎16枚。两组胚胎在染色体非整倍性上差异有统计学意义(P<0.05),而在嵌合性上差异无统计学意义(P>0.05)。结论植入前胚胎的染色体非整倍体性同女性年龄呈正相关,而嵌合性与女性年龄不相关。