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siRNA沉默AT2受体通过Ang(1-9)-ACE2-AT2通路抑制心脏微血管内皮细胞NO的生成
1
作者
张岩
李永勤
+5 位作者
王聪霞
张春艳
胡艳超
寇惠娟
马维冬
刘晓唤
《山西医科大学学报》
CAS
2017年第8期757-763,共7页
目的研究重组人血管紧张素转化酶2(rh ACE2)作用于心脏微血管内皮细胞后对NO产生的影响,采用siRNA沉默AT2受体研究Ang(1-9)-ACE2-AT2通路在这一过程中的作用。方法体外培养人心脏微血管内皮细胞(CMVEC),分为对照组、AngⅡ组、AngⅡ+rh A...
目的研究重组人血管紧张素转化酶2(rh ACE2)作用于心脏微血管内皮细胞后对NO产生的影响,采用siRNA沉默AT2受体研究Ang(1-9)-ACE2-AT2通路在这一过程中的作用。方法体外培养人心脏微血管内皮细胞(CMVEC),分为对照组、AngⅡ组、AngⅡ+rh ACE2组、AT2受体抑制剂组和阴性对照siRNA组。Griess试剂法测定细胞培养上清液中NO的含量,RT-PCR检测HUVEC中eNOS mRNA的表达,检测细胞内NO的生成及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性。Western blot检测磷酸化eNOS的表达。观察rh ACE2对AngⅡ作用后CMVEC生成NO、eNOS mRNA、eNOS蛋白表达的影响,同时观察加用AT2受体抑制剂PD123319干预后,rh ACE2对磷酸化eNOS蛋白表达的影响。观察siRNA干扰CMVEC中AT2受体蛋白后对eNOS活性、NO的影响。结果 AngⅡ组NO的含量[(3.495±0.362)nmol/L]明显低于对照组[(11.513±0.392)nmol/L,P<0.05];AngⅡ+rhACE2组细胞培养液中NO的含量和磷酸化eNOS表达水平均明显高于AngⅡ组(P<0.05),而eNOS mRNA和非磷酸化eNOS蛋白表达水平与AngⅡ组相比无统计学差异(P>0.05)。经AT2通路抑制剂PD123319干预后的AT2受体抑制剂组磷酸化eNOS表达水平明显低于AngⅡ+rhACE2 30 min组(P<0.05)。Western blot检测结果显示转染AT2siRNA组转染48 h AT2受体蛋白表达降低(P<0.05);与AT2受体抑制剂组和阴性对照siRNA组相比,转染AT2 siRNA组的eNOS活性和NO含量均显著降低。结论 rh ACE2作用于人心脏微血管内皮细胞后,eNOS活性增强,NO生成增加,Ang(1-9)-ACE2-AT2信号通路参与这一过程。
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关键词
siRNA
AT
2
受体
重组人血管紧张素转化酶
2
ang
(1
-
9
)
-ace
2
-at
2
通路
微血管内皮细胞
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职称材料
题名
siRNA沉默AT2受体通过Ang(1-9)-ACE2-AT2通路抑制心脏微血管内皮细胞NO的生成
1
作者
张岩
李永勤
王聪霞
张春艳
胡艳超
寇惠娟
马维冬
刘晓唤
机构
西安交通大学第二附属医院心血管内科
出处
《山西医科大学学报》
CAS
2017年第8期757-763,共7页
文摘
目的研究重组人血管紧张素转化酶2(rh ACE2)作用于心脏微血管内皮细胞后对NO产生的影响,采用siRNA沉默AT2受体研究Ang(1-9)-ACE2-AT2通路在这一过程中的作用。方法体外培养人心脏微血管内皮细胞(CMVEC),分为对照组、AngⅡ组、AngⅡ+rh ACE2组、AT2受体抑制剂组和阴性对照siRNA组。Griess试剂法测定细胞培养上清液中NO的含量,RT-PCR检测HUVEC中eNOS mRNA的表达,检测细胞内NO的生成及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性。Western blot检测磷酸化eNOS的表达。观察rh ACE2对AngⅡ作用后CMVEC生成NO、eNOS mRNA、eNOS蛋白表达的影响,同时观察加用AT2受体抑制剂PD123319干预后,rh ACE2对磷酸化eNOS蛋白表达的影响。观察siRNA干扰CMVEC中AT2受体蛋白后对eNOS活性、NO的影响。结果 AngⅡ组NO的含量[(3.495±0.362)nmol/L]明显低于对照组[(11.513±0.392)nmol/L,P<0.05];AngⅡ+rhACE2组细胞培养液中NO的含量和磷酸化eNOS表达水平均明显高于AngⅡ组(P<0.05),而eNOS mRNA和非磷酸化eNOS蛋白表达水平与AngⅡ组相比无统计学差异(P>0.05)。经AT2通路抑制剂PD123319干预后的AT2受体抑制剂组磷酸化eNOS表达水平明显低于AngⅡ+rhACE2 30 min组(P<0.05)。Western blot检测结果显示转染AT2siRNA组转染48 h AT2受体蛋白表达降低(P<0.05);与AT2受体抑制剂组和阴性对照siRNA组相比,转染AT2 siRNA组的eNOS活性和NO含量均显著降低。结论 rh ACE2作用于人心脏微血管内皮细胞后,eNOS活性增强,NO生成增加,Ang(1-9)-ACE2-AT2信号通路参与这一过程。
关键词
siRNA
AT
2
受体
重组人血管紧张素转化酶
2
ang
(1
-
9
)
-ace
2
-at
2
通路
微血管内皮细胞
Keywords
siRNA
AT
2
receptor
rhACE
2
ang
(1
-
9
)
-ace
2
-at
2 pathway
microvascular endothelial cells
分类号
R331.3 [医药卫生—人体生理学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
siRNA沉默AT2受体通过Ang(1-9)-ACE2-AT2通路抑制心脏微血管内皮细胞NO的生成
张岩
李永勤
王聪霞
张春艳
胡艳超
寇惠娟
马维冬
刘晓唤
《山西医科大学学报》
CAS
2017
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