超微血府逐瘀汤对急性心肌缺血大鼠缺血心肌血管新生及bFGF、ANG-1表达的影响

目的:探讨超微血府逐瘀汤对急性心肌缺血大鼠缺血心肌血管新生及bFGF、ANG-1表达的影响。方法:采用结扎冠状动脉左前降支的方法复制急性心肌缺血模型,应用免疫组化法测定缺血心肌内皮细胞数和微血管密度(MVD),检测缺血心肌局部碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、血管紧张素1(ANG-1)表达的影响。结果:超微血府逐瘀汤组内皮细胞数、微血管密度及bFGF、ANG-1蛋白表达均有明显升高,与麝香保心丸组比较,差异显著(P<0.01或P<0.05)。结论:超微血府逐瘀汤能够促进心肌缺血大鼠缺血心肌血管新生,对缺血心肌具有保护作用,其作用机制可能与上调心肌局部bFGF、ANG-1蛋白表达有关。

通窍化栓汤对急性脑梗死患者血清中VEGF、Ang-1的影响

目的:观察通窍化栓汤对急性脑梗死的临床疗效及其血清中VEGF、Ang-1含量的影响。方法:选择60例急性脑梗死患者随机分为观察组30例,对照组30例,对照组采用血栓通注射液及阿斯匹林肠溶片;观察组采用在对照组基础上加通窍化栓汤治疗,疗程15天。分别比较两组治疗前后神经功能缺损(NFD)评分及血清中Ang-1、VEGF水平的变化。结果:治疗后两组NFD评分较治疗前均有明显改善,但观察组NFD评分改善较对照组更为显著(P<0.01);治疗后两组患者血清中VEGF含量均有不同程度增加(P<0.01);观察组治疗后血清VEGF含量增高尤为明显,与对照组比较有统计学意义(P<0.01)。治疗后两组患者血清中Ang-1含量均有不同程度下降(分别P<0.01,P<0.05),治疗后两组比较亦有统计学意义(P<0.05)。结论:通窍化栓汤可调节脑梗死患者血清中Ang-1、VEGF的含量,改善神经功能缺损,值得进一步研究及应用。

在创伤愈合中VEGF和Ang-1表达的生物动力学变化研究

目的研究大鼠皮肤损伤愈合过程中血管内皮细胞生长因子（VEGF）和促血管生成素-1（Ang-1）表达的动态变化，阐明其在组织修复血管再生中的作用。方法在大鼠背侧切开皮肤全层建立大鼠创伤模型，不同时问后活体取材，应用HE染色观察组织病理形态学变化；应用免疫组化SP法检测VEGF和Ang-1的蛋白表达。结果伤口组织病理学检查可见，毛细血管在伤后第3d即见增多，伤后第7d达高峰，随后逐渐减少。血管内皮细胞胞浆VEGF蛋白表达在伤后第1d呈阳性。伤后第3d呈强阳性，伤后第5d呈阳性，而于伤后第7d阳性程度逐渐减弱。伤后第1～14d VEGF蛋白表达与对照组比较，有非常显著性差异（P〈0．01）。血管内皮细胞胞浆Ang-1蛋白表达在伤后第1d部分呈阳性表达，部分呈弱阳性表达，在伤后第3d呈阳性表达。伤后第5、7d呈强阳性、阳性表达。随后阳性程度逐渐减弱。伤后第3～21d Ang-1蛋白表达与对照组比较，有非常显著的统计学差异（P〈0．01）。结论VEGF和Ang—1在血管内皮细胞中的表达强度与组织损伤愈合程度密切相关，在创伤愈合过程中互相协调、促进并调节血管肉芽组织的生长和成熟。

眼针运动疗法对MCAO模型大鼠缺血半暗带区域脑组织Ang-1、Tie2影响的实验研究

目的:观察眼针运动疗法对脑缺血再灌注(MCAO)模型大鼠大脑缺血半暗带区域脑组织内Ang-1、Tie2表达水平的影响,探讨眼针运动疗法对MCAO模型大鼠大脑缺血半暗带区域内新生血管影响的机制。方法:采用随机数字法,将100只SD大鼠随机分为3组:空白对照组(10只)、假手术组(10只)、模型复制组(80只)。对模型复制组大鼠采用线栓法进行脑缺血再灌注模型复制,再将模型复制成功的大鼠66只(模型复制80只,失败13只,模型评价1只)随机分别为:模型对照组(17只);头针组(17只);眼针组(16只);眼针运动组(16只)。分别进行头针、眼针及眼针运动进行干预治疗。头针组取穴百会、曲鬓,眼针组取穴定位参照人体取穴方法,取肝区、上焦区、下焦区、肾区。眼针运动疗法组眼针干预同时,在跑步机上进行训练。采用酶联免疫吸附(ELISA)法,检测各组大鼠血清中Ang-1含量,采用RT-PCR及western-blot法对各组大鼠脑组织中Ang-1、Tie2基因及蛋白表达水平进行检测。结果:与空白组比较,模型组、眼针组、头针组、眼针运动组大鼠缺血半暗带区域脑组织中Ang-1、Tie2表达水平显著上调(P<0.01);与模型组比较,眼针组和眼针运动组Ang-1、Tie2表达水平显著上调(P<0.05)。与空白组比较,模型组、眼针组、头针组、眼针运动组大鼠缺血半暗带区域脑组织中Ang-1、Tie2 mRNA表达水平显著上调(P<0.01);与模型组比较,眼针组和眼针运动组Ang-1、Tie2 mRNA表达水平显著上调(P<0.05)。结论:眼针运动疗法在一定程度上能促进血清中Ang-1含量,增加Ang-1及其mRNA表达增加,与受体Tie-2结合,启动Ang/Tie-2信号传导系统,在时间和数量上调节缺血半暗带新生血管和侧支循环的形成,改善缺血半影区的脑血流,从而抑制神经元凋亡,恢复脑血流量,促进脑缺血后神经功能的恢复。

电针傍刺对大鼠皮肤压疮Ang-1及Ang-2表达的影响

目的:研究电针傍刺对大鼠皮肤压疮血管生成素Ang-1及Ang-2表达的影响,探讨电针傍刺对大鼠皮肤压疮修复的作用及作用机制。方法:90只SD大鼠采用随机数字表法分成电针组、针刺组与空白组,每组30只。再将其随机分入5个治疗时间点,即1天组、3天组、5天组、7天组、9天组,每小组6只。在大鼠腿部近膝关节骨隆突处用造模装置制造压疮后针刺组取压疮局部皮肤进行傍刺治疗,电针组在针刺组基础上配合电针治疗,每次30min,每日1次。连续观察治疗过程中创面/修复的形态学变化并应用免疫组化法检测Ang-1与Ang-2的表达情况。结果:大鼠压疮皮肤Ang-1表达阳性细胞累计积分,电针3天组与9天组均高于针刺与空白3天与9天组(P<0.05);电针3天组高于电针1天组(P<0.05);针刺5天组低于针刺3天组(P<0.05);大鼠压疮皮肤组织Ang-2表达阳性细胞累计积分,电针1天组与9天组均高于空白1天组与9天组(P<0.05);电针3天组与7天组均高于针刺与空白3天与7天组(P<0.05);电针5天组高于针刺5天组(P<0.05);针刺5天组高于空白5天组(P<0.05);电针3天组高于电针1天组(P<0.05);电针5天组低于电针3天组(P<0.05);针刺7天组低于针刺5天组。结论:电针傍刺能促进大鼠压疮皮肤创伤修复,其机制可能与调节不同时间内压疮皮肤中Ang-1及Ang-2表达情况有关。

从肝治心组方对大鼠缺血心肌血管新生因子Ang-1/Ang-2表达的影响

目的观察从肝治心组方(CGZXP)对冠心病心肌缺血大鼠局部缺血心肌血管生成素-1(Ang-1)、血管生成素-2(Ang-2)蛋白表达,以及对缺血血管新生作用的影响。方法 SD大鼠按随机方法分成假手术组、模型组、麝香保心丸组和从肝治心方组4组。采用冠脉结扎法诱导急性心肌梗死模型,造模24 h后给药,每日1次。于造模14 d后处死大鼠,取出心脏,肉眼观察心肌情况,应用免疫组织化学法进行缺血心肌Ang-1、Ang-2蛋白表达的检测。结果从肝治心方组对改善大鼠活动、对外界反应、精神、食欲、皮毛质感等均优于其他各组;免疫组化结果提示从肝治心方组和麝香保心丸组的心肌细胞Ang-1的表达高于模型组,Ang-2的表达低于模型组(P均<0.01),但两组之间比较差异无统计学意义。结论 CGZXP通过促进Ang-1、抑制Ang-2的表达,可能促进血管新生,从而达到增加心脏侧支循环,抗心肌缺血的作用。

Ang-1、Ang-2在鼻咽癌中的表达与鼻咽癌淋巴管密度的相关性研究

目的研究Ang-1、Ang-2在鼻咽癌组织中的表达情况与鼻咽癌淋巴管密度的相关性。方法用免疫组化法检测Ang-1、Ang-2在鼻咽癌组织及鼻咽部慢性炎症中的表达情况,用单克隆抗体D2-4 0标记鼻咽癌瘤内及瘤周微淋巴管。分析Ang-1、Ang-2与鼻咽癌临床病理参数与微淋巴管密度之间的关系。结果 Ang-1、Ang-2在鼻咽癌组织中阳性表达率分别为46.15%(24/52)、63.5%(33/5 2),明显高于鼻咽部炎性组织2 5.0%(3/1 2)、3 3.3%(4/1 2)(P<0.0 5)。Ang-1在鼻咽癌组织中的表达与性别、年龄、T分级及临床分期、有无淋巴结转移等因素均无明显差异;Ang-2在鼻咽癌组织中的表达与性别、年龄、T分级及临床分期等因素无明显差异,但在淋巴结转移组中的表达率83.9%(26/3 1)明显高于无淋巴结转移组3 3.3%(7/2 1)(P<0.0 1)。D2-4 0标记鼻咽癌微淋巴管阳性表达率达9 2.3 1%(4 8/5 2),并且在淋巴结转移组中瘤内及瘤周微淋巴管密度均高于无淋巴结转移组(P<0.0 5)。联合Ang-1、Ang-2在鼻咽癌组织中的表达与瘤内及瘤周微淋巴管密度均成正相关。结论Ang-2与鼻咽癌淋巴结转移密切相关,微淋巴管密度可作为判断淋巴结有无转移的重要指标之一。

益气活血组方对大鼠缺血心肌血管新生因子Ang-1/Ang-2表达的影响

目的:观察益气活血组方对大鼠缺血心肌血管新生及局部促血管新生因子Ang-1和Ang-2蛋白表达的影响。方法:采用结扎健康SD雄性大鼠左冠状动脉前降支,建立缺血心肌模型。用免疫组化法检测缺血心肌Ang-1、Ang-2蛋白的表达,观察益气活血组方对心肌缺血大鼠缺血心肌Ang-1、Ang-2的影响。结果:益气活血组方组心肌细胞Ang-1的表达高于对照组,Ang-2的表达低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:益气活血组方可能通过促进Ang-1、抑制Ang-2的表达,促血管新生,从而达到增加心脏侧枝循环,抗心肌缺血的作用。

重组pEGFP/Ang-1质粒转染兔骨髓基质干细胞及其表达的实验研究

目的 制备稳定高效表达血管生成素 1(Ang 1)的转基因工程骨髓基质干细胞。 方法 应用基因重组的方法构建Ang 1真核表达质粒 pEGFP/Ang 1,利用脂质体将 pEGFP/Ang 1转入骨髓基质干细胞 ,用流式细胞仪检测转染率 ,用荧光显微镜和免疫细胞化学方法检测蛋白质的表达。结果 质粒酶切电泳显示重组质粒构建成功 ,转染pEGFP/Ang 1质粒的骨髓基质干细胞在荧光显微镜下可见绿色荧光 ;流式细胞仪检测转染率约 5 0 % ;免疫细胞化学检测可见转基因骨髓基质干细胞表达Ang 1蛋白。结论 成功制备表达外源性基因Ang 1的骨髓基质干细胞 ,制备方法是可行的。

少腹逐瘀汤含药血清对子宫内膜异位症在位内膜分泌Ang-1、Ang-2和Tie-2的影响

目的研究少腹逐瘀汤含药血清对子宫内膜异位症在位内膜分泌Ang-1、Ang-2和Tie-2的影响。方法实验分为少腹逐瘀汤含药血清高剂量组、低剂量组及空白对照组。收集接收手术治疗的子宫内膜异位症病人的在位子宫内膜组织,经体外分离、培养,以实时荧光定量PCR分析不同浓度少腹逐瘀汤含药血清对在位内膜细胞表达Ang-1、Ang-2和Tie-2的影响。结果少腹逐瘀汤含药血清能剂量依赖性抑制在位内膜细胞表达Ang-1、Ang-2和Tie-2。结论少腹逐瘀汤含药血清可抑制体外培养的子宫内膜异位症在位内膜细胞Ang-1、Ang-2和Tie-2的分泌,提示少腹逐瘀汤对于治疗子宫内膜异位症可能具有一定的作用。

大肠癌组织中Ang-1、Ang-2及受体Tie-2的表达及意义

目的:旨在研究促血管生成素-1(Ang-1)、促血管生成素-2(Ang-2)和促血管生成素受体(Tie-2)在大肠癌中的表达,分析Ang-1、Ang-2和Tie-2的表达与大肠癌的组织学分化程度的关系,探讨三者在大肠癌进展中的作用,为大肠癌的临床治疗提供新的靶点。方法:应用免疫组化SP法检测64例大肠癌组织中的Ang-1、Ang-2和Tie-2的表达;RT-PCR检测Ang-1、Ang-2和Tie-2mRNA在大肠癌组织中的的表达。结果:Ang-1、Ang-2与Tie-2在癌组织高、中、低分化程度上的表达呈现为肿瘤的分化程度越低,蛋白与RNA表达越明显(P<0.05)。结论:Ang-1、Ang-2及Tie-2的表达程度与大肠癌的进展呈正相关。

Ang-1和Tie2在高血压患者内皮祖细胞中表达水平及临床意义研究

目的探讨Ang-1及其受体Tie2在高血压患者循环内皮祖细胞中的表达水平并评价其临床意义。方法选择杭州师范大学附属医院2012年1月～2013年6月高血压I、Ⅱ级和Ⅲ级患者各15例：正常体检人群30名为对照组。lit—PCR法检测各组外周血中内皮祖细胞内Ang-1、Tie2mRNA表达水平；Western—blot法测定Tie2酪氨酸磷酸化水平。结果Ⅲ级高血压患者内皮祖细胞内Ang-1和Tie2mRNA表达水平均低于Ⅱ、I级高血压患者和对照组（P〈0．05），1I级高血压患者均低于I级高血压患者和对照组（P〈0．05）。Ⅲ级高血压患者内皮祖细胞Tie2磷酸化水平低于Ⅱ、I级高血压患者和对照组（P〈0．05），11级高血压患者Tie2磷酸化水平低于I级高血压患者和对照组（P〈0．05）。常规治疗后，内皮祖细胞Ang-1和Tie2mRNA表达及磷酸化Tie2水平均高于治疗前（P〈0．05）。结论患者循环内皮祖细胞内Ang-1和Tie2表达随高血压分级的增加逐渐下调．治疗后水平升高，可能与高血压病血管内皮细胞修复的调控机制密切相关。

Ang-1、Ang-2及Tie-2在前列腺癌中的表达

很多细胞因子参与癌症的发生发展,其中参与血管新生的血管生成素（Ang）在肿瘤中的作用愈发明显。研究表明〔1〕在大多数癌组织中Ang-1,Ang-2及其受体Tie-2的表达激活,具有调控肿瘤新生血管形成及重建的作用。本文探讨前列腺癌组织中Ang-1、Ang-2及其受体Tie-2与前列腺癌血管生成的关系。

Ang-1、Ang-2/Tie2信号通路在血管生成中的研究进展

促血管生成素-1、-2及其受体Tie2（Angiopoietin-1、An-giopoietin-2/tyrosine Kinase Receptors 2,Ang-1、Ang-2/Tie2）是近年来发现的一种除血管内皮生长因子（Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF）

携带Ang-1的MSCs双介入治疗ANFH的转染与表达

目的建立兔股骨头坏死模型,探讨双介入治疗方法的可行性,检测治疗后股骨头的转染率及表达。材料与方法用激素建立兔股骨头坏死模型80只,随机分为钻孔注入组、动脉灌注组、双介入组、对照组。实验组采用经皮穿刺于股骨头钻孔,直接注入携带血管生成素-1(Ang-1)的骨髓间质干细胞(MSCs),或/和经颈动脉穿刺,行超选择插管至双侧股骨头供血动脉,缓慢注入携带Ang-1的MSCs,对照组不作治疗。术后2、4、6、8周分别处死动物,取股骨头进行组织学观察、荧光检测、免疫组织化学检测。结果介入组转染增强型绿色荧光蛋白(pEGFP)/Ang-1质粒的MSCs分化的细胞在荧光显微镜下见高表达Ang-1基因,同时局部循环血管和成骨细胞增多。明显好于单独治疗组、对照组。结论携带Ang-1的MSCs经双介入治疗不仅能促进毛细血管的生成,而且能定向进行骨分化。

血府逐瘀汤超微饮片和传统饮片对急性心肌缺血大鼠缺血心肌血管新生及bFGF、ANG-1表达影响的比较研究

目的:比较血府逐瘀汤超微饮片和传统饮片对急性心肌缺血大鼠缺血心肌血管新生及bFGF、ANG-1表达的影响。方法:采用结扎冠状动脉左前降支的方法复制急性心肌缺血模型,随机分为模型对照组、血府逐瘀汤超微饮片1/3剂量组、血府逐瘀汤超微饮片等剂量组、麝香保心丸组及假手术组6组,每组8只。用免疫组化法测定缺血心肌内皮细胞数和微血管密度(MVD),检测缺血心肌局部碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、血管紧张素1(ANG-1)的表达。结果:与模型对照组对比,血府逐瘀汤超微饮片两剂量组和传统饮片组内皮细胞数、微血管密度及bFGF、ANG-1表达均有明显升高,差别有统计学意义(P<0.01或P<0.05);与传统饮片组对比,血府逐瘀汤超微饮片等剂量组内皮细胞数、微血管密度及bFGF、ANG-1表达均明显升高,差别有统计学意义(P<0.05)。结论:血府逐瘀汤超微饮片与传统饮片均能促进心肌缺血大鼠缺血心肌血管新生,对缺血心肌具有保护作用,其作用机制可能与上调心肌局部bFGF、ANG-1蛋白表达有关,但同剂量超微饮片作用强于传统饮片。提示超微饮片可以代替传统饮片,且节省药材。

阿托伐他汀对急性心肌梗死大鼠Ang-1及其受体Tie2 mRNA表达的影响

目的通过研究阿托伐他汀对大鼠心肌梗死(AMI)后促血管生成素1 (Ang-1)和Tie2 mRNA表达的影响,探讨阿托伐他汀对于AMI后心肌血管生成的作用机制。方法 80只SD雄性大鼠随机分为正常(CG)组、单纯心肌梗死(AG)组和心肌梗死联合阿托伐他汀(AAG)组;AAG组于术后第3天开始以2.5 mg阿托伐他汀溶液灌胃给药,AG组及CG组以同等剂量生理盐水灌胃;各组分别于术后14 d及28 d取材,实时PCR技术检测心肌Ang-1及Tie2 mRNA的表达。结果在AMI建模14 d时AAG组与AG组Tie2mRNA的表达水平有统计学差异(P <0.05);14 d时Ang-1 mRNA的表达水平3组差异无统计学意义(P> 0.05);在AMI模型28 d时3组Ang-1 mRNA及Tie2 mRNA表达比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。结论阿托伐他汀能够促进AMI血管生成,其可能通过上调Tie2 mRNA的表达,促进新生血管的形成。

过表达P53、Ang-1和VEGF对压力超负荷引起的心肌重构和心力衰竭的影响

目的观察过表达P53、Ang-1和VEGF对压力超负荷引起的心肌重构和心力衰竭过程的影响,以阐明心肌重构和心力衰竭发生发展的机制,为寻找防治该类疾病的新方法提供理论基础。方法将60只C57／BL6小鼠分成3组:P53组、Ang-1 +VEGF组和PBS组,用开胸心腔直接注射方法,分别转染腺病毒携带的P53、Ang-1+VEGF基因和PBS,转染第2天末,用升主动脉缩窄的方法建立压力超负荷模型,模型建立成功后,每周做心脏超声检测心脏功能和形态变化,每组分别于第2天、1周、2周和4周末测量右侧颈动脉压后取材,用H-E染色、Masson染色、TUNEL和免疫组化观察心脏形态变化和新生血管生成,用Western blot检测P53、Ang-1和VEGF表达情况,实验中有仅做手术过程但不缩窄升主动脉的假手术组做对照组。结果①在2-14d,缩窄升主动脉的小鼠心脏射血分数逐渐升高达高峰,14-28 d,逐渐降低,但同PBS组比较,P53组在每一个时期都显著降低, Ang-1+VEGF组都显著升高,组间差异有统计学意义(P<0．05)。②在2-14 d,缩窄升主动脉的小鼠心室壁厚度逐渐升增加达高峰,14-28 d逐渐降低,但同PBS组比较,P53组在每一个时期都显著降低, Ang-1+VEGF组都显著升高,组间差异有统计学意义(P<0．05)。③在2-28 d,缩窄升主动脉的小鼠心肌细胞凋亡数目逐渐增多,但同PBS组比较,P53组在每一个时期都显著增多, Ang-1+VEGF组都显著减少,组间差异有统计学意义(P<0．05)。④在2-14 d,缩窄升主动脉的小鼠新生血管逐渐增多达高峰,14-28 d逐渐降低,但同PBS组比较,P53组在每一个时期都显著减少, Ang-1+VEGF组都显著增多,组间差异有统计学意义．(P<0．05)。⑤Western blot检测腺病毒转染的P53、Ang-1和VEGF显示,转染组同未转染组比较,表达显著升高。结论①P53可以加剧压力超负荷导致心力衰竭发生发展的过程,Ang-1牙VEGF可以延缓压力超负荷导致心力衰竭发生发展的过程。②P53、Ang-1和VEGF分别通过减少和增加新生血管的生成,参与心肌重构和心力衰竭发生发展的过程。

Ang-1在缺血性疾病中的实验研究

血管生成素-1（angiopoietin-1,Ang-1）是一种促血管生长的细胞因子,在组织修复及血管发生方面起了一定作用。自Davis等于1996年发现了Ang-1,其在血管生成、发育、成熟以及维持血管稳定性等方面的重要作用受到了研究者的广泛关注。