Potential Mechanism of Herb-Drug Interaction Mediated by Angelica dahurica: Inhibition on CYP3A Enzymes in Rats

Angelica dahurica is commonly referred to as ‘Baizhi’ in China and has been noted for its therapeutic significance. The major active ingredients of Angelica dahurica is coumarin, which is reported as a kind of potent inhibitor of cytochrome P450 enzymes (CYP450s). The aim of this study was to investigate the inhibition of CYP3A enzymes by total coumarin extract (TCE) obtained from dried root of Angelica dahurica by using in situ single pass intestinal perfusion (SPIP) and in situ liver perfusion in rats. When midazolam (MDZ) which is a substrate of CYP3A co-perfused with TCE (198 μg/mL) from Baizhi in duodenum and ileum segments, the Peff of MDZ has increased significantly compared with the MDZ single perfused group (p 0.05) (n = 6). During in situ liver perfusion study, the results demonstrated that, 3 days oral administration of TCE obtained from Baizhi could significantly reduce the elimination rate of MDZ in the perfusate (p Angelica dahurica extract co-administrated with drugs which are the substrates of CYP3A, much more attention should be paid rather than that of other CYP450 enzymes. These findings may facilitate in predicting possible herb-drug interactions (HDIs) when Angelica dahurica is used in combination with other drugs, and decrease the incidence of the CYP450-mediated HDIs.

白芷香豆素提取及其药理作用研究进展

中药白芷(Angelica Dahurica Radix)为伞形科植物白芷或杭白芷的干燥根,香豆素类成分是其主要功能活性物质之一,具有多种药理作用,受到人们广泛关注。近年来(2011年后),国内有关白芷中香豆素类成分的提取主要有溶剂提取法、微波辅助提取法、超声辅助提取法和超临界CO_(2)提取法,各种提取方法均有各自的优点,但也存在一些明显不足,白芷中香豆素类成分最佳提取工艺尚未确定,有待进一步研究和选择,进而发现一种能高效提取白芷中香豆素类成分的方法。近年来(2011年后),国内有关白芷中香豆素类成分药理作用的研究主要有抗氧化、抗癌、抗炎、抑菌和镇痛等,尚不够全面和完善,白芷香豆素药理作用研究极为有限,许多药理作用尚未明晰,有关白芷香豆素量效、作用机制研究还很少,特别是白芷香豆素药理作用研究多为实验室研究,缺乏临床应用研究数据,不足以为白芷中香豆素类成分的开发应用提供理论依据。可见,有关白芷香豆素产业化生产和应用还任重道远。以近年来(2011年后)国内发表文献为依据,归纳综述白芷中香豆素提取及其药理作用研究进展,为白芷中香豆素的进一步研究和开发应用提供参考。

白芷、白芍水和乙醇提取物对酪氨酸酶的抑制效应

采用水和乙醇提取制备白芷、白芍的水及醇提取物,并利用分光光度法检测提取物对酪氨酸酶的抑制效应。结果表明:质量浓度为0.2 mg/mL时,(1)白芷醇提取物的酪氨酸酶抑制率为3.48%,IC_(50)为1.4 mg/mL;(2)白芍水提取物的酪氨酸酶抑制率为13.08%,IC_(50)为0.6 mg/mL;(3)白芍醇提取物的酪氨酸酶抑制率为11.18%,IC_(50)为1.2 mg/mL;(4)白芷水提取物对酪氨酸酶未呈现抑制作用。综上,白芷醇提取、白芍水提取以及白芍醇提取的天然植物提取物可以一定程度地抑制酪氨酸酶活性,可作为美白功效性化妆品原料进行研究。

表面活性剂协同超声辅助提取白芷黄酮工艺优化及其抗氧化活性

该研究考察表面活性剂协同超声辅助提取白芷黄酮的工艺,并对其体外抗氧化能力进行分析。在单因素试验的基础上考察表面活性剂浓度、料液比、提取时间及提取温度对白芷黄酮得率的影响,并通过正交设计对白芷黄酮的提取工艺进行优化。结果表明:白芷黄酮超声提取最佳工艺为提取温度60℃、提取时间60 min、十二烷基硫酸钠浓度0.5%、料液比1∶50(g/mL),在此条件下白芷黄酮得率为1.982%。白芷黄酮对体外的自由基有较好的清除作用。

白芷醇溶蛋白质提取工艺优化及其指纹图谱研究

目的:基于响应面设计优化白芷醇溶蛋白质提取工艺,并研究其指纹图谱特征。方法:首先考察液料比、提取时间、乙醇浓度、提取温度四个单因素对白芷醇溶蛋白质提取率的影响,再通过Box-Behnken方法对影响提取率的工艺因素进行响应面优化,最后对白芷及易混淆药材的醇溶蛋白质指纹图谱进行对比分析。结果:最佳提取工艺条件为:液料比13∶1(mL/g),提取时间8.75 h,乙醇浓度42%,提取温度45℃,在此条件下提取率为0.294%。SDS-PAGE分析表明白芷醇溶蛋白质样品分子量范围介于15~95 kDa,91.4 kDa与65.6 kDa分子为高丰度蛋白质。此外,白芷与天花粉、粉葛、山药的醇溶蛋白质指纹图谱有显著差异。结论:利用响应面法优化了白芷醇溶蛋白质的提取工艺,并建立其专属性SDS-PAGE指纹图谱,为其分子鉴定及资源开发提供实验依据。

白芷提取物介导转化生长因子-β/Smad2通路对糖尿病大鼠感染性溃疡性愈合效果的影响及相关机制

目的探究白芷提取物介导转化生长因子-β(TGF-β)/Smad2通路对糖尿病大鼠感染性溃疡愈合效果的影响及相关机制。方法100只雄性SD大鼠采用随机数字表法分成对照组、模型组和白芷提取物低、中、高剂量组(3.8、7.5、15 mg/kg),每组20只。制备糖尿病大鼠感染性溃疡模型,观测各组创面情况(创面温度、红肿范围、溃疡面积和病理变化),对大鼠创面组织进行菌落计数,采用免疫组织化学法检测创面组织α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和血管内皮生长因子(VEGF)表达,蛋白质免疫印迹法检测创面组织中TGF-β1、Smad2和磷酸化Smad2(p-Smad2)蛋白表达。结果与模型组比较,白芷提取物中剂量组给药14、21 d(t_(14d)=4.377,t_(21d)=3.513,P<0.05)、高剂量组给药3、7、14、21 d(t_(3d)=3.049,t7d=5.166,t_(14d)=6.175,t_(21d)=5.270,P<0.05)创面温度降低,白芷提取物低、中剂量组给药7、14、21 d(低剂量:t7d=3.991,t_(14d)=8.860,t_(21d)=5.683,P<0.05;中剂量:t7d=7.052,t_(14d)=11.794,t_(21d)=9.848,P<0.05);高剂量组给药3、7、14、21 d(t_(3d)=3.237,t7d=11.356,t_(14d)=15.695,t_(21d)=15.187,P<0.05)创面愈合率升高(P均<0.05)。与模型组比较,白芷提取物低、中、高剂量组给药3、7、14及21d创面菌落数降低(低剂量:t_(3d)=2.580,t7d=2.614,t_(14d)=3.327,t_(21d)=4.923,P<0.05;中剂量:t_(3d)=4.519,t7d=3.505,t_(14d)=4.813,t_(21d)=6.141,P<0.05;高剂量:t_(3d)=5.201,t7d=5.147,t_(14d)=6.040,t_(21d)=9.632,P<0.05)。与模型组比较,白芷提取物中、高剂量组创面组织中α-SMA、VEGF表达升高(α-SMA:t=2.107、6.782,P<0.05;VEGF:t=2.653、6.002,P<0.05)。与模型组比较,白芷提取物中、高剂量组TGF-β1、p-Smad2/Smad2水平升高(TGF-β1:t=2.369、4.145,P<0.05;p-Smad2/Smad2:t=3.043、4.980,P<0.05)。结论白芷提取物可促进糖尿病大鼠感染性溃疡的愈合,有效清除创面细菌,可能与激活TGF-β/Smad2通路有关。

超临界萃取中药白芷的化学成分的气相色谱-质谱分析

采用超临界流体萃取法对传统中药白芷的化学成分进行了分离提取研究,利用气相质谱联机技术,对其中的55种化学成分进行了鉴定,并测定了相对含量。与传统的水蒸气蒸馏法提取的白芷挥发油进行了比较,分析。实验结果表明,超临界CO2萃取法所得的产物,能保留药材白芷的所有有效成分,可以入药。

复方元胡止痛贴中延胡索、白芷乙醇回流提取工艺研究

目的优选延胡索、白芷乙醇提取工艺条件。方法以延胡索乙素的提取量为考察指标,用高效液相色谱法测定其含量,采用L9(34)正交试验优选提取工艺。结果优选工艺为:以3倍量75%乙醇提取3次,每次提取1.5h。结论优选的提取工艺合理,转移率高。

白芷淀粉的提取工艺研究

以NaOH为浸泡剂,探讨了料液比、pH、浸泡时间、浸泡温度对淀粉提取率的影响,并用正交试验确定了白芷淀粉提取的最佳工艺。结果表明:淀粉提取的最适宜的提取工艺条件为料液比1:6,NaOH浸提液的pH9.0,浸泡时间6h,浸泡温度30℃。在此工艺条件下,淀粉的提取率为84.56%。

正交设计法优选白芷的提取工艺

目的以欧前胡素、异欧前胡素的提取总量为考察指标,对影响香豆素类化合物提取工艺的因素进行研究,优选白芷的最佳提取工艺。方法采用RP HPLC法,AccusilC18柱( 2 5 0mm×4 6mm ,10 μm) ,流动相为甲醇 水(体积比6 5∶35 ) ;检测波长2 5 1nm。结果欧前胡素与异欧前胡素分别在0 76 8～19 2 0mg·L-1(r =0 9997)、0 2～16 0mg·L-1(r =0 9998)内与峰面积呈良好的线性关系(n =6 ) ,方法回收率(n =9)分别为96 8%、98 0 % ,RSD分别为2 0 %、1 9%。结论白芷的最佳提取工艺为A3 B2 C3 ,即用8倍量的95 % (w)的乙醇提取3次,每次4h。

白芷提取物对酪氨酸酶的抑制作用

目的:研究白芷提取物对酪氨酸酶的抑制作用。方法:将白芷的95%乙醇提取物依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,并用曲酸作阳性对照、以酪氨酸作底物来测定石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取部分及萃取后水部分对酪氨酸酶的抑制作用。将白芷乙酸乙酯部分进一步用正相硅胶柱和Sephadex LH-20凝胶柱分离纯化得到四个单体化合物,分别为丁二酸、反式咖啡酸、水合氧化前胡素和白当归脑,并对4个单体化合物进行酪氨酸酶抑制试验。结果:经酪氨酸酶活性测定,白芷乙酸乙酯萃取部分对酪氨酸酶的活性抑制作用较强,其半数抑制浓度IC50为1.25 mg/mL,白芷石油醚部分和萃取后水部分均无抑制作用,而白芷正丁醇部分相反有激活酪氨酸酶活性作用。除反式咖啡酸有较弱的酪氨酸酶活性抑制作用外,其它3个单体化合物均无抑制作用。结论:白芷乙酸乙酯部分有较明显的酪氨酸酶抑制作用。本研究没有获得具有明显抑制酪氨酸酶活性的单体化合物,有待于进一步分离纯化研究。

川白芷抑菌活性及对铜绿假单胞菌群体感应的抑制作用

为寻找更加有效的抑菌杀菌药物,本研究利用琼脂平板打孔法和倍比稀释法评价川白芷不同溶剂萃取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌以及肺炎克雷伯氏菌的抗菌活性;特别是通过对铜绿假单胞菌毒力表型的影响研究考察该药物对病菌群体感应是否具有抑制作用。研究结果表明:川白芷提取液对四种细菌均有不同程度的抑制效果,且随提取物浓度增大抑制效果增强;进一步分离发现,三氯甲烷、乙酸乙酯和正丁醇提取物对四种细菌均有一定的抑制效果,其中乙酸乙酯萃取物的抑菌效果最佳;对铜绿假单胞菌的四种毒力表型的影响研究结果表明川白芷具有抑制铜绿假单胞菌群体感应的能力。试验表明川白芷的活性成分可以作为一种新型的群体感应抑制剂,其具有抑制多种细菌能力的同时不易产生耐药性,表明白芷这一传统中草药在现代医疗中具有较好的应用潜力。

祁白芷种子水浸液的萌发抑制效应初探

制备不同处理的祁白芷种子水浸液,分别对小麦、玉米、棉花、荆芥种子的萌发进行了生物检测,并鉴定了祁白芷种子中水溶性内源萌发抑制物质的活性大小。结果表明:祁白芷种子和种翅膜中均含有一定活性的水溶性内源萌发抑制物质。该抑制物质不仅能降低种子的发芽率,还能推迟种子的萌发时间,此外,还会对种苗生长起抑制作用。

白芷提取物的稳定性研究

目的:通过乙醇提取法提取白芷有效成分,由白芷提取物的紫外光谱研究白芷提取物的稳定性。方法:使用紫外分光光度计确定白芷提取物的最大吸收波长,测定其最大吸光度。结果:白芷的提取物(呋喃香豆素类化合物)的最大吸收波长为299 nm,对时间和氧化剂的稳定性较好,光照下稳定性下降,随温度升高稳定性先增加后降低,不同pH值下溶液的吸光度改变不同,金属离子可以提高呋喃香豆素类化合物的稳定性。结论:白芷的乙醇提取物应尽量避光置于碱性条件久储,其本身抗氧化性较好,加入金属离子有利于提取物的长期存放。

白芷治疗头痛的提取工艺评判指标的研究

目的 研究评判白芷治疗头痛的提取工艺指标。方法 运用胃肠动力学、血清动力学和药效学方法。结果(1)提取物中香豆素的代表成分欧前胡素均在大鼠胃、肠液和血液中检测到 ,且在胃液、血液中的检出时间均明显早于细粉 ;峰面积也比相应的细粉的大。(2 )提取物中总香豆素含量增高 ,镇痛作用也相应增强。

白芷香豆素类化合物的成分分析及CO_2超临界萃取工艺的研究

目的:建立以高效液相色谱(HPLC)法分析白芷香豆素类化合物的成分及CO2超临界流体法萃取白芷中香豆素类成分的的方法。方法:采用正交试验设计考察萃取压力、萃取温度、萃取时间及药材粒度对总香豆素收率的影响,用HPLC法检测萃取物中欧前胡素和异欧前胡素的含量。结果:欧前胡素、异欧前胡素的检测浓度线性范围分别为29.4～235.2、10～80μg/ml,平均回收率分别为(100.46±1.42)%、(99.94±1.18)%(n=3),相对标准差分别为1.76%、1.62%;以无水乙醇作为改性剂,白芷在萃取压力35MPa、萃取温度45℃、药材粒度60目、萃取时间3h时总香豆素收率最高。结论:萃取压力、药材粒度、萃取时间对总香豆素萃取收率均有显著影响;所建立的分析方法精密度高、简便快速,适于欧前胡素和异欧前胡素的含量测定。

白芷香豆素类成分的提取及大孔树脂纯化的工艺研究

目的:研究白芷香豆素的最佳提取工艺及大孔树脂的最佳纯化工艺。方法:选用L9(34)进行正交设计试验,对白芷的醇提工艺进行优选,以欧前胡素的含量为指标,考察乙醇浓度、提取次数、提取倍数对提取工艺的影响。采用单因素试验法对影响白芷香豆素纯化效率的因素进行优化,采用HPLC法测定欧前胡素的含量。结果:得到的最佳醇提工艺条件为使用10倍量90%的乙醇,提取2次,每次2 h;最佳纯化工艺为:选定D101大孔树脂,上样浓度为每m L含生药0.3 g,最大上样量为7倍BV(7倍柱体积),上样速度为4BV·h-1,用6 BV的水以4 BV·h-1的速度洗脱,弃去洗脱液,再用7 BV的90%乙醇以4 BV·h-1的流速洗脱,收集洗脱液。结论:优选出醇提工艺稳定可靠,有效成分含量高;优选出的大孔树脂纯化工艺简便、稳定,有效成分转移率高。

超临界CO_2萃取白芷中香豆素类成分的工艺优化研究

目的 :以氧化前胡素、欧前胡素、总香豆素含量为试验指标 ,优化白芷中香豆素类成分的超临界CO2 萃取工艺。方法 :通过正交试验 ,采用高效液相色谱法测定氧化前胡素、欧前胡素的含量 ,采用极差方差和逐步非线性回归对试验数据进行分析。结果 :白芷中香豆素类成分的超临界CO2 的最佳萃取工艺为萃取温度 5 0℃、萃取压力 2 1MPa、萃取时间 3.5h、分离压力 6 .0MPa、粉碎度 2 0目 ;实验值和模型计算值的相对误差小于 5 %。结论 :萃取压力、温度、时间、药材的粉碎度等工艺参数对试验指标有显著性影响 ,而且部分因素之间存在交互作用 ,回归模型具有较高的预测精度。

气相色谱-质谱法测定白芷中异欧前胡素的含量

目的 通过气相色谱-质谱联用仪,采用选择监测离子法测定白芷中异欧前胡素的含量.方法 色谱柱DB-5MS（30 m×0.32 mm,0.25 μm）石英毛细管色谱柱,样品用CO2超临界流体萃取,萃取液用乙酸乙酯溶解,选择离子监测法定量.结果 异欧前胡素在1.33 ～133.00μg·mL-1（r=0.998 6）范围内线性良好;平均回收率为100.3％,检测限为0.1 ng·mL-1.结论 该方法简便、快速、灵敏度高、结果准确可靠,可以用于测定白芷中异欧前胡素的含量.

超临界CO_2萃取白芷中香豆素类成分工艺研究

目的：优选超临界CO2萃取白芷中香豆素类成分的工艺。方法：以欧前胡素和异欧前胡素的总量得率和纯度为考察指标，采用单因素实验研究夹带剂、萃取温度、萃取压力、药材粒径、CO2流量、萃取时间等参数的影响，优选白芷中香豆素的超临界CO2萃取工艺。结果：优选工艺务件为：以40％的乙醇为夹带剂，夹带剂流量为0．10mL·min^-1，萃取温度为55℃，萃取压力为20MPa，药材粒径为20-80目，CO2流量为2．0L·min^-1，萃取时间为1．5h。该工艺条件下，香豆素的平均得率为0．202％，纯度为18．5％。结论：所得优化工艺稳定可靠。