门静脉血Angiopoietin-2 mRNA定量检测与结直肠癌异时性肝转移及预后的关系

目的探讨结直肠癌(colorectal cancer,CRC)患者外周血和门静脉血中血管生成素-2 (Angiopoietin-2,Ang-2) mRNA的表达量与其肝转移及预后的关系。方法应用实时荧光定量RT-PCR检测89例CRC患者术前外周血和术中门静脉血Ang-2 mRNA表达量。所有患者术后随访3年。分析术中门静脉血Ang-2 mRNA表达量与CRC患者异时性肝转移、临床病理特征及预后的关系。结果异时性肝转移患者术前外周血和术中门静脉血Ang-2 mRNA表达量分别显著高于无异时性肝转移患者(P均<0. 01)。CRC患者术中门静脉血Ang-2 mRNA表达量与肿瘤分化程度、肿瘤大小、肿瘤浸润深度、是否有淋巴结转移、是否有术后复发、术后生存期长短密切相关(P <0. 05)。单因素分析显示,术前外周血和术中门静脉血Ang-2 mRNA表达量均与CRC异时性肝转移相关(χ2=4. 082,7. 389;P <0. 05);Cox多因素回归分析显示,两者均是其独立危险因素(相对危险度分别为4. 131,9. 625)。术中门静脉血Ang-2 mRNA高表达组患者的术后2年和3年生存率分别显著低于低表达组(P均<0. 05)。结论术中门静脉血Ang-2mRNA的表达量与CRC患者的重要临床病理特征及异时性肝转移、预后密切相关,其对异时性肝转移的预测价值比外周血Ang-2mRNA高,可成为CRC术后预后的评价指标。

外周血Angiopoietin-2 mRNA定量表达与早期胃癌淋巴结转移状态的关系

目的检测早期胃癌患者术前外周血血管生成素-2(Angiopoietin-2,Ang-2)mRNA的定量表达,探讨其与淋巴结转移状态的关系。方法应用实时荧光定量RT-PCR检测62例早期胃癌患者术前和30位健康者外周血Ang-2 mRNA的表达量,以淋巴结组织HE染色和CK20表达检测评价淋巴结转移状态。分析术前外周血Ang-2 mRNA表达量与早期胃癌病理特征、淋巴结转移状态的关系。结果早期胃癌组术前外周血Ang-2 mRNA表达量显著高于正常对照组(3.76±3.15 vs 0.35±0.22,P<0.01)。淋巴结转移阳性胃癌组和淋巴结微转移阳性组外周血Ang-2 mRNA表达量分别显著高于淋巴结阴性胃癌组和淋巴结微转移阴性组(6.84±1.38 vs 3.10±2.21,P<0.01);(4.33±2.16vs 2.82±1.78,P<0.05)。术前外周血Ang-2 mRNA表达量与早期胃癌分化程度、肿瘤大小、浸涧深度均相关(P<0.01),而与肿瘤组织类型无关。单因素分析显示术前外周血Ang-2 mRNA的高表达量与早期胃癌淋巴结转移及淋巴结微转移呈明显相关性(P<0.05)。Logistic多元回归分析显示,术前外周血Ang-2 mRNA表达量是影响早期胃癌淋巴结转移的独立高危因素。结论术前外周血Ang-2 mRNA表达量可能成为评价早期胃癌淋巴结转移的有价值的临床预测指标,有助于指导治疗。

SARS-CoV-2S蛋白mRNA疫苗对不同毒株交叉中和活性的研究

新型冠状病毒(SARS-CoV-2)在感染和持续性进化过程中不断发生变异,导致现有疫苗的有效性降低,因此人类迫切需要能够建立广谱免疫保护的有效疫苗.作者采用mRNA疫苗技术,设计了原型(Prototype)株刺突(Spike,S)蛋白mRNA疫苗(P0).在S蛋白基因序列中引入氨基酸突变位点,制备了Prototype-mut mRNA疫苗P1~P7,并对小鼠进行了免疫.结果表明,引入Q498R-Y505H-H655Y和Q498R-N501Y突变位点的S蛋白mRNA疫苗可以显著提升对Delta株的中和抗体(neutralizing antibody,NAb)滴度(P<0.05).引入Q493R-Q498R-H655Y和Q498R-N501Y突变疫苗对Prototype、Alpha、Beta、Delta、Omicron BA.1等多个毒株的几何平均滴度(geometric mean titer,GMT)分别为1∶194.0、1∶73.5、1∶32.0、1∶194.0、1∶16.0和1∶294.1、1∶294.1、1∶64.0、1∶256.0、1∶8.0.同时,引入Q493R-Q498R-H655Y、Q498R-Y505H和Q498R-Y505H-H655Y等突变疫苗对Prototype、Alpha、Beta、Delta 4种毒株的中和抗体阳转率可达到100%.通过在S蛋白mRNA疫苗中引入点突变的策略,验证了可能具有免疫逃逸或改变受体结合亲和力潜力的氨基酸突变位点的引入对mRNA疫苗交叉中和活性的影响,这为提升mRNA疫苗广谱性的研发提供了参考.

SRPK2调控前体mRNA选择性剪接在酒精性肝病脂质代谢中的机制研究进展

酒精性肝病是长期大量饮酒导致的主要疾病之一,有可能进展为肝硬化甚至肝癌。脂质代谢紊乱在酒精性肝病的发展中扮演着重要的角色。国内外研究尚未完全揭示酒精性肝病中脂质代谢紊乱机制。已有研究证实,SRPK2调控的前体信使RNA选择性剪接在酒精性肝病脂质代谢紊乱中发挥关键作用。本文就国内外文献进行综述,包括酒精性肝病中典型的脂质代谢紊乱机制以及选择性剪接的新机制,旨在为推动酒精性肝病的预防和治疗提供理论参考。

2023年诺贝尔生理学与医学奖解读--核苷碱基修饰与mRNA疫苗

2023年诺贝尔生理学或医学奖授予美国科学家卡塔琳•卡里科(Katalin KARIK)和德鲁•魏斯曼(Drew WEISSMAN),以表彰他们在核苷碱基修饰方面的发现,为研发有效的抗新型冠状病毒(SARS-CoV-2)的mRNA疫苗做出了杰出贡献。掺入修饰碱基的mRNA可以逃避不良的免疫反应,而且含假尿苷的mRNA能更有效地进行翻译。以两位科学家的研究为基础,科研人员完善了mRNA疫苗的研发技术体系。展望了核苷碱基修饰、mRNA疫苗、脂质纳米颗粒技术、mRNA疫苗的应用前景。

子宫内膜癌组织中miR-145-5p、IGF2BP1 mRNA表达变化及与患者预后的关系

目的探讨子宫内膜癌(EC)组织中微小RNA-145-5p(miR-145-5p)、胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白1(IGF2BP1)mRNA表达变化及与患者预后的关系。方法选取2018年5月—2021年5月于南通市肿瘤医院行手术切除的EC组织及对应癌旁组织标本115例份,采用实时荧光定量PCR法检测EC组织及癌旁组织中miR-145-5p、IGF2BP1 mRNA表达,Pearson相关法分析miR-145-5p与IGF2BP1 mRNA表达的相关性。根据EC组织中miR-145-5p、IGF2BP1 mRNA表达的中位数将患者分为高/低表达组,Kaplan-Meier法绘制高/低miR-145-5p、IGF2BP1 mRNA表达的EC患者生存曲线;多因素Cox回归分析影响EC患者预后的因素。结果与癌旁组织比较,EC组织中miR-145-5p表达降低,IGF2BP1 mRNA表达升高(t分别为-22.201、19.038,P均<0.05)。miR-145-5p与IGF2BP1 mRNA表达呈负相关(r=-0.748,P<0.05)。EC组织中miR-145-5p、IGF2BP1 mRNA表达与组织分化程度、国际妇产科联盟(FIGO)分期和淋巴结转移有关(P均<0.05)。115例EC患者3年总生存率为67.83%(78/115)。miR-145-5p高表达组3年总生存率高于miR-145-5p低表达组,IGF2BP1 mRNA高表达组3年总生存率低于IGF2BP1mRNA低表达组(χ^(2)分别为13.484、11.755,P均<0.05)。EC患者死亡的独立危险因素为组织分化程度低分化、FIGO分期Ⅲ期、有淋巴结转移、IGF2BP1 mRNA表达≥1.53(OR分别为5.434、6.092、4.327、5.339,95%CI分别为1.735~17.021、1.930~19.225、1.424~13.154、1.515~18.811),独立保护因素为miR-145-5p表达≥0.74(OR=0.298,95%CI:1.515~18.811)。结论EC组织中miR-145-5p低表达,IGF2BP1 mRNA高表达,与组织分化程度、FIGO分期、淋巴结转移和患者预后有关。

lncRNA HOXC-AS1和IGF2BP2 mRNA在胃癌组织中的表达及临床意义

目的:探究胃癌(GC)组织中长链非编码RNA HOXC反义RNA1(lncRNA HOXC-AS1)、胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白2(IGF2BP2)mRNA表达水平与患者临床病理特征及术后5年内生存的关系。方法:选取我院2015年5月至2018年4月收治的GC患者139例,手术收集GC组织及癌旁组织。荧光定量PCR法检测lncRNA HOXC-AS1和IGF2BP2 mRNA表达。对GC患者进行术后随访5年,记录GC患者生存情况,分为生存组88例,死亡组51例。比较GC组织和癌旁组织中lncRNA HOXC-AS1和IGF2BP2 mRNA表达水平、不同临床病理特征患者GC组织中lncRNA HOXC-AS1和IGF2BP2 mRNA表达情况、生存组和死亡组临床病理特征和GC组织中lncRNA HOXC-AS1和IGF2BP2 mRNA表达水平。分析GC组织中lncRNA HOXC-AS1和IGF2BP2 mRNA表达水平的相关性、GC组织中lncRNA HOXC-AS1和IGF2BP2 mRNA表达情况与术后5年生存的关系、影响GC患者术后5年内生存的危险因素。结果:与癌旁组织相比,GC组织中lncRNA HOXC-AS1和IGF2BP2 mRNA表达水平均显著升高(P<0.05);GC组织中lncRNA HOXC-AS1和IGF2BP2 mRNA表达水平呈正相关(P<0.05);GC组织中lncRNA HOXC-AS1和IGF2BP2 mRNA表达水平与淋巴结转移、TNM分期、肿瘤分化程度相关(P<0.05);lncRNA HOXC-AS1高表达组、IGF2BP2 mRNA高表达组患者术后5年总生存率分别显著低于lncRNA HOXC-AS1低表达组、IGF2BP2 mRNA低表达组(P<0.05);生存组和死亡组淋巴结转移、TNM分期、肿瘤分化程度比较差异有统计学意义(P<0.05);死亡组患者GC组织中lncRNA HOXC-AS1和IGF2BP2 mRNA表达水平显著高于生存组(P<0.05);TNM分期为III期、肿瘤低分化、lncRNA HOXC-AS1高表达、IGF2BP2 mRNA高表达是影响GC患者术后5年内生存的独立危险因素(P<0.05)。结论:GC患者癌组织中lncRNA HOXC-AS1及IGF2BP2 mRNA表达水平均显著升高,且术后5年内死亡的GC患者较存活患者更高,二者与淋巴结转移、TNM分期、肿瘤分化程度密切相关,二者高表达是影响GC患者术后5年内生存的独立危险因素。

子宫内膜癌组织中IGF2BP1mRNA,PEG10mRNA表达及与增殖基因表达的相关性和预后研究

目的研究子宫内膜癌(endometrial carcinoma,EC)组织中胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白1(insulinlike growth factor 2 mRNA binding protein 1,IGF2BP1)mRNA,父系表达遗传印记基因10(patrilineal expression of genetic imprinting gene 10,PEG10)mRNA表达及与增殖基因表达的相关性及预后。方法选取2017年1月~2019年1月湖北理工学院附属妇幼保健院诊治的100例EC患者。实时荧光定量PCR检测EC癌组织和癌旁组织中IGF2BP1 mRNA,PEG10 mRNA及增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)mRNA,细胞周期素D1(cyclin D1)mRNA,细胞周期蛋白依赖激酶4(cyclin dependent kinase 4,CDK4)mRNA表达。免疫组织化学检测IGF2BP1,PEG10蛋白表达。相关性采用Pearson相关分析。Kaplan-Meier曲线分析不同IGF2BP1,PEG10表达组EC患者的预后差异。COX回归分析EC患者的预后影响因素。结果EC癌组织中IGF2BP1 mRNA(1.84±0.33),PEG10 mRNA(2.12±0.40),PCNA mRNA(3.14±0.42),cyclinD1 mRNA(2.81±0.36),CDK4 mRNA(2.37±0.34)高于癌旁组织(0.78±0.21,0.91±0.25,0.74±0.13,0.67±0.21,0.59±0.18),差异具有统计学意义(t=25.652~54.588,均P<0.05)。癌组织中IGF2BP1(70.00%),PEG10(72.00%)蛋白阳性率高于癌旁组织(100%,9.00%),差异具有统计学意义(χ^(2)=75.000,82.363,均P<0.05)。EC中IGF2BP1 mRNA,PEG10 mRNA表达与PCNA mRNA,cyclinD1 mRNA,CDK4 mRNA表达呈正相关(r=0.562~0.625,均P<0.05)。EC中IGF2BP1 mRNA与PEG10 mRNA表达呈显著正相关(r=0.663,P<0.05)。FIGO分期Ⅲ期、并发淋巴结转移EC癌组织中IGF2BP1(86.49%,87.50%),PEG10(89.19%,90.63%)阳性率高于FIGO分期Ⅰ~Ⅱ期(60.32%,61.90%)、无淋巴结转移(61.77%,63.24%),差异具有统计学意义(χ^(2)=6.863~8.608,均P<0.05)。IGF2BP1阳性组患者三年总体生存率70.00%(49/70)低于阴性组的90.00%(27/30);PEG10阳性组患者三年总体生存率为69.44%(50/72),低于阴性组的92.86%(26/28),差异具有统计学意义(Log-rankχ^(2)=4.133,5.491,P=0.042,0.019)。FIGO分期Ⅲ期(OR=1.449,95%CI:1.148~1.830)、并发淋巴结转移(OR=1.442,95%CI:1.124~1.850),IGF2BP1阳性(OR=1.637,95%CI:1.239~2.163)及PEG10阳性(OR=1.576,95%CI:1.136~1.187)是影响EC患者生存预后的独立危险因素(均P<0.05)。结论EC中IGF2BP1,PEG10表达升高,两者与增殖基因表达呈正相关,是EC预后评估的肿瘤标志物。

宫颈脱落细胞中mybl2 mRNA的表达在LSIL患者中的分流价值

目的 探究宫颈脱落细胞中mybl2 mRNA的表达在宫颈低级别鳞状上皮内病变(LSIL)患者中的分流价值。方法 180例宫颈病变患者,根据病理结果分为宫颈炎(NC)组(40例)、LSIL组(100例)及宫颈高级别鳞状上皮内病变(HSIL)组(40例)。比较三组的宫颈脱落细胞中mybl2 mRNA及人乳头瘤病毒(HPV) E6/E7 mRNA表达量、阳性率;比较LSIL组中不同转归者的宫颈脱落细胞中mybl2m RNA及HPV E6/E7 mRNA表达量、阳性率;分析LSIL患者宫颈脱落细胞中mybl2 mRNA与HPV E6/E7 mRNA的相关性。结果 NC组的宫颈脱落细胞中mybl2 mRNA及HPV E6/E7 mRNA表达量分别为(1.23±0.16)、(1.76±0.32), LSIL组分别为(3.39±0.59)、(5.01±1.32), HSIL组分别为(6.56±0.93)、(8.10±1.69)。三组的宫颈脱落细胞中mybl2 mRNA及HPV E6/E7 mRNA表达量比较,差异有统计学意义(P<0.05);HSIL组的宫颈脱落细胞中mybl2 mRNA及HPV E6/E7 mRNA表达量显著高于NC组、LSIL组, LSIL组显著高于NC组,差异有统计学意义(P<0.05)。NC组的宫颈脱落细胞中mybl2 mRNA及HPV E6/E7 mRNA阳性率分别为25.00%、27.50%, LSIL组分别为76.00%、71.00%, HSIL组分别为95.00%、100.00%。三组的宫颈脱落细胞中mybl2 mRNA及HPV E6/E7 mRNA阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.05);HSIL组的宫颈脱落细胞中mybl2 mRNA及HPV E6/E7 mRNA阳性率显著高于NC组、LSIL组,LSIL组显著高于NC组,差异有统计学意义(P<0.05)。LSIL组中不同转归者的宫颈脱落细胞中mybl2mRNA及HPV E6/E7 mRNA表达量、阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.05);进展者的宫颈脱落细胞中mybl2 mRNA及HPV E6/E7 mRNA表达量、阳性率显著高于持续者和消退者,持续者显著高于消退者,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析显示, LSIL患者宫颈脱落细胞中mybl2 mRNA与HPV E6/E7 mRNA呈正相关(r=0.816, P<0.05)。结论 LSIL患者宫颈脱落细胞中mybl2 mRNA的表达与HPV E6/E7 mRNA密切相关,其在LSIL患者中的分流价值较高。

美托洛尔联合重组人脑利钠肽对高龄心衰患者心功能、内皮细胞、GRK2mRNA表达的影响研究

探究美托洛尔联合重组人脑利钠肽对高龄心衰患者心功能,内皮细胞,GRK2 mRNA表达影响研究。方法 选择在2020年1月至2022年1月期间在我院接受治疗的54例高龄心衰患者作为研究对象,采用奇数偶数的顺序法进行分组,分为对照组和实验组,每组各27例。对照组接受重组人脑利钠肽治疗,实验组增加美托洛尔治疗。对比两组疗效。结果 治疗后,实验组患者的左心室射血分数和一氧化氮较对照组更高,血清NT-ProBNP水平和内皮素-1及GRK2 mRNA较对照组更低(P<0.05);两组患者的不良反应对比差异无统计学意义(P>0.05)。结论 美托洛尔联合重组人脑利钠肽治疗高龄心衰,可改善心功能和内皮功能及GRK2 mRNA,用药安全性较好。

HPV E6/E7mRNA检测与P16/Ki-67免疫组化检测对宫颈CIN2级病变的筛查价值探究

目的:研究人乳头瘤病毒(Human papilloma virus,HPV)E6/E7mRNA与免疫组化抑癌基因P16/细胞增殖核抗原Ki-67在宫颈上皮内瘤样病变(Cervical intraepithelial neoplasia,CIN)2级病变筛查中的应用价值。方法:选取2020年2月至2023年2月期间本院收治的92例宫颈炎症及病变患者作为研究对象。根据病理检查结果,将CIN2级患者纳入研究组(n=45),宫颈CIN1级和宫颈炎患者纳入对照组(n=47)。对比两组HPV E6/E7mRNA、P16/Ki-67单独及联合检测阳性表达率差异,采用Logistic回归分析影响CIN2诊断的危险因素,并采用受试者工作曲线分析HPV E6/E7mRNA与P16/Ki-67单独及联合检测在宫颈CIN2级病变筛查的价值。结果:研究组HPV E6/E7mRNA、P16/Ki-67单独检测阳性率、联合检测阳性率(82.22%,77.78%,84.44%)高于对照组(63.83%,48.94%,53.19%)(P<0.05)。Logistic回归分析显示HPV E6/E7mRNA、P16/Ki-67是影响CIN2诊断的危险因素(P<0.05);HPV E6/E7mRNA、P16/Ki-67联合检测CIN2级病变的受试者工作特征曲线下面积为0.688(95%CI:0.579~0.798),优于HPV E6/E7mRNA、P16/Ki-67单独预测[0.592(95%CI:0.476~0.708);0.634(95%CI:0.519~0.748)]。联合检测的准确度、灵敏度、特异度(68.8%,84.4%,53.2%)均高于单独检测HPV E6/E7mRNA(59.2%,82.2%,36.2%)、P16/Ki-67(63.4%,77.8%,48.9%)。结论:HPV E6/E7mRNA与P16/Ki-67免疫组化检测在宫颈CIN2级病变筛查中具有一定的应用价值,可以显著提高筛查宫颈CIN2级病变的诊断效能。

缩泉丸对肾阳虚多尿大鼠肾脏AQP-2 mRNA与AVPR-V2 mRNA表达的影响

目的:观察缩泉丸对肾阳虚多尿模型大鼠肾脏AQP-2 mRNA和AVPR-V2 mRNA表达的影响。方法:用腺嘌呤250mg/kg灌服大鼠4w,造成肾阳虚多尿模型,分别给予缩泉丸或去氨加压素治疗4w,用实时荧光定量PCR法观察缩泉丸对肾阳虚多尿模型大鼠肾脏水通道蛋白AQP-2 mRNA及加压素二型受体(AVPR-V2)mRNA表达的影响。结果:肾阳虚多尿模型组大鼠肾脏AQP-2 mRNA与AVPR-V2mRNA表达比正常对照组明显降低(P<0.01),dDAVP组和缩泉丸高剂量组AQP-2 mRNA表达与AVPR-V2 mRNA表达比模型组明显升高(P<0.05);其余给药各组与模型组相比无显著差异(P>0.05)。结论:缩泉丸能提高肾阳虚多尿模型大鼠肾脏AQP-2 mRNA与AVPR-V2 mRNA表达。

密蒙花总黄酮对去势导致干眼症雄鼠泪腺Bax mRNA、Bcl-2 mRNA表达的影响

目的观察密蒙花总黄酮对雄激素水平下降所致干眼症雄鼠的泪腺上皮细胞中Bax mRNA、Bcl-2mRNA表达的影响。方法将健康1月龄、体质量150～180gWistar雄性大鼠150只随机分为A1、B1、C1、D1、E1、A3、B3、C3、D3、E3、A5、B5、C5、D5、E5共15组,每组10只。采用去势的方法建立雄激素水平下降所致干眼症动物模型,分别观察各组SchimerI试验、泪膜破裂时间及角膜荧光素染色情况,以确定干眼症模型是否建立成功。其中,A代表正常组;B代表假手术组;C代表模型对照组;D代表雄激素对照治疗组(造模成功后,丙酸睾酮1mg.kg-1大腿肌肉注射,每3d1次);E代表密蒙花总黄酮治疗组(造模成功后,密蒙花总黄酮0.045g.kg-1灌胃,每3d1次);1代表饲养1个月;3代表饲养5个月;5代表饲养7个月。用RT-PCR法对各组泪腺组织中Bax mRNA、Bcl-2mRNA的表达进行检测,并比较。结果SchimerI试验、泪膜破裂时间及角膜荧光素染色结果显示,大鼠均在造模3个月后形成干眼症。D3组、D5组泪腺组织中的BaxmRNA相对含量较C3组、C5组降低,差异均有统计学意义(均为P<0.01);E3组、E5组较C3组、C5组亦降低,差异亦均有统计学意义(均为P<0.01);且E3组(3.787±0.165)与E5组(5.707±0.411)BaxmRNA相对含量差异有统计学意义(P<0.01);D5组(4.610±0.481)与E5组间比较差异亦有统计学意义(P<0.01)。D3组、D5组Bcl-2mRNA的相对含量较C3组、C5组增加,差异均有统计学意义(均为P<0.01);E3组、E5组较C3组、C5组亦增加,差异均有统计学意义(均为P<0.01);D5组(5.713±0.339)与E5组(3.147±0.057)间比较Bcl-2mRNA表达差异有统计学意义(P<0.01);且E3组(8.427±0.055)与E5组比较差异亦有统计学意义(P<0.01)。结论密蒙花总黄酮可使大鼠泪腺中Bcl-2mRNA表达增加,降低BaxmRNA的表达,但随病程的延长其作用弱于雄激素。密蒙花总黄酮治疗雄激素水平下降所致干眼症的机制可能与其产生拟雄激素效应后,对凋亡相关基因Bcl-2mRNA表达的上调和Bax mRNA表达的下调有关。

灵芝多糖体外对小鼠脾细胞IL-2,IL-3 mRNA表达的影响

目的观察灵芝多糖体外对小鼠脾细胞ＩＬ－２、ＩＬ－３ｍＲＮＡ的表达水平是否有影响。方法逆转录多聚酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测ｍＲＮＡ表达，凝胶图象光密度分析系统进行相对定量。结果在原代小鼠脾细胞培养开始时加入不同浓度的灵芝多糖ＧＬＢ７（５，１０，２０，４０ｍｇ·Ｌ－１），培养１２ｈ及２１ｈ后观察ＧＬＢ７与ＩＬ－２及ＩＬ－３ｍＲＮＡ表达水平之间的量效关系。发现在一定范围内，随着ＧＬＢ７浓度的升高，ＩＬ－２及ＩＬ－３ｍＲＮＡ表达水平也相应提高，对ＩＬ－２ｍＲＮＡ的提高率分别为１０．４％，２１．９％，３７．８％，４６．６％；对ＩＬ－３ｍＲＮＡ的提高率分别为１５．４％，３５．２％，５２．４％，７４．５％。１９９８－０４－０８收稿，１９９８－０７－２６修回＊国家自然科学基金资助课题，Ｎｏ３９４００１６５作者简介：王庆彪，男，２６岁，硕士；雷林生，男，３８岁，医学博士，副教授培养１２ｈ和３０ｈ的上清液中ＩＬ－２样活性及ＩＬ－３样活性处理组与对照组相比亦有明显升高，且有一定的浓度依赖关系。

抗菌肽对蛋鸡血清免疫指标及脾脏白细胞介素2 mRNA表达量的影响

本试验旨在研究饲粮不同水平抗菌肽对蛋鸡血清免疫指标及脾脏白细胞介素2(IL-2)mRNA表达量的影响。选用480只30周龄海赛克斯褐壳蛋鸡,随机分成4组,每组4个重复,每个重复30只鸡。对照组(Ⅰ组)饲喂基础饲粮,试验组分别在基础饲粮中添加200(Ⅱ组)、400(Ⅲ组)、600 mg/kg(Ⅳ组)抗菌肽,试验期4周。结果表明,饲粮中添加不同水平抗菌肽可不同程度地提高脾脏系数,其中Ⅲ组显著高于对照组(P<0.05)。与对照组相比,试验组血清免疫球蛋白A含量分别提高了7.69%(P>0.05)、19.40%(P<0.05)和14.38%(P>0.05),血清免疫球蛋白G含量分别提高了12.69%(P>0.05)、21.24%(P<0.05)和9.10%(P>0.05),而抗菌肽对血清免疫球蛋白M、补体3和补体4含量影响不显著(P>0.05)。Ⅱ组和Ⅲ组中脾脏IL-2 mRNA的表达量均显著高于Ⅰ组和Ⅳ组(P<0.05),Ⅳ组与Ⅰ组之间差异不显著(P>0.05)。由此可见,抗菌肽能提高蛋鸡的免疫功能,且饲粮中添加400 mg/kg抗菌肽效果最佳。

芪黄煎剂对缺血-再灌注大鼠肠黏膜上皮细胞Bcl-2、Bax及Caspase-3、9 mRNA表达的影响

目的观察中药芪黄煎剂对缺血-再灌注(ischemia-reperfusion,I/R)损伤大鼠肠黏膜上皮细胞凋亡基因Bcl-2、Bax mRNA表达和信号转导分子Caspase-3、9 mRNA表达的影响。方法 40只Wistar大鼠随机分为假手术组、I/R损伤组、谷氨酰胺(Gln)组和芪黄煎剂组,每组10只。假手术组管饲生理盐水3天后,仅腹壁切开而不行I/R手术;I/R损伤组与假手术组同样方法干预后,行I/R损伤手术;Gln组和QHD组分别管饲Gln和芪黄煎剂3天后,行I/R损伤手术。RT-PCR方法检测肠上皮细胞凋亡基因Bcl-2、Bax mRNA表达和凋亡信号转导分子Caspase-3、9 mRNA表达。结果与假手术组比较,I/R损伤组大鼠肠黏膜细胞内Bcl-2、Bax、Caspase-3、9 mRNA均明显增多,差异有统计学意义(P<0.05)。与I/R损伤组比较,Gln组、芪黄煎剂组Bcl-2 mRNA表达增多,Bax、Caspase-3、9 mRNA表达减少,差异均有统计学意义(P<0.05)。与Gln组比较,芪黄煎剂组Bax mRNA表达更低(0.281±0.087vs0.350±0.053),Bcl-2/Bax值更高(1.648vs1.374),差异无统计学意义(P>0.05)。结论芪黄煎剂通过抑制细胞凋亡减轻I/R对大鼠肠黏膜上皮造成的损伤,其作用机制可能与增加Bcl-2 mRNA表达和降低Bax、Caspase-3、9 mRNA表达有关。

密蒙花总黄酮含药血浆对干眼症细胞模型Bax mRNA及Bcl-2 mRNA表达的影响

目的:观察密蒙花总黄酮含药血浆对干眼症细胞模型中泪腺上皮细胞Bax mRNA及Bcl-2 mRNA表达的影响。方法:将培养生长状态良好的泪腺上皮细胞,随机分为无雄激素培养黄酮治疗组(以下简称密蒙花总黄酮组),含雄激素培养对照组(以下简称雄激素组),无雄激素培养空白组(以下简称空白组)。分别加入含密蒙花总黄酮血浆、丙酸睾酮、含空白血浆开始进行干预。建立干眼症细胞模型。用Trizol试剂提取细胞总RNA。RT-PCR法检测泪腺上皮细胞中Bax mRNA及Bcl-2 mRNA的表达。结果:密蒙花组、雄激素组能够抑制泪腺上皮细胞中BaxmRNA的表达,与空白组比较差异有显著性(P<0.01);密蒙花组Bax mRNA的表达低于雄激素组,比较差异有显著性(P<0.01)。密蒙花组、雄激素组Bcl-2 mRNA的表达均高于空白组,比较差异有显著性(P<0.01);密蒙花组Bcl-2 mRNA的表达高于雄激素组,比较差异有显著性(P<0.01)。结论:密蒙花总黄酮含药血浆作用于雄激素水平下降所致干眼症的细胞模型可抑制Bax mRNA的表达,使Bax mRNA的表达量降低,同时促进Bcl-2 mRNA的表达,使Bcl-2 mRNA的表达量增加。密蒙花总黄酮含药血浆很可能是通过抑制泪腺上皮细胞中Bax mRNA及促进Bcl-2 mRNA表达的途径而达到抑制细胞凋亡的作用。

金雀异黄素对多囊卵巢综合征大鼠卵巢组织中Bcl-2及Bax mRNA表达的影响

本试验旨在探讨金雀异黄素(genistein,GEN)对多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)大鼠卵巢组织中抗凋亡基因Bcl-2及促凋亡基因Bax mRNA表达的影响。将90只雌性Wistar大鼠随机分为6组:对照组,模型组,GEN低、中、高剂量组及雌激素组。按照胰岛素联合人体绒毛膜促性腺激素造模法建立PCOS试验动物模型,造模成功后,每组选择10只大鼠进行试验。剂量组分别给予5、10、20 mg/kg GEN,雌激素组给予0.5 mg/kg己烯雌酚,受试物灌胃给予,持续15 d,观察动情周期10 d。采用原位杂交法检测各组大鼠卵巢组织中Bcl-2和Bax mRNA表达量。同时测定大鼠卵巢组织中超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性及丙二醛含量。结果表明:与模型组相比,GEN能提高大鼠卵巢组织中Bcl-2 mRNA表达量,降低Bax mRNA表达量,并且可调节卵巢组织中抗氧化酶活性,其作用效果与雌激素相似。GEN可以增强大鼠卵巢组织中Bcl-2 mRNA表达量,拮抗Bax mRNA表达量,推测这是GEN改善PCOS卵巢功能的作用途径之一。

ER、bcl-2和p53在鸡与鹌鹑属间杂交种早期胚胎中的mRNA表达

通过人工授精获得鸡（♂10只）与鹌鹑（♀100只）属间杂交种蛋并同机入孵，采用Wpkci引物和多重PCR鉴定66～120h的鸡（♂）与鹌鹑（♀）属间杂交种活胚的性别后，选取不同时间点雌、雄胚胎共300枚，以β-actin为内标，通过RT-PCR分别测定雌激素受体（职）和细胞凋亡因子（bcl-2、p53）的mRNA相对丰度；探讨ER、bcl-2和p53对杂交种早期胚胎发育及性别分化的影响。结果表明：（1）杂交种胚胎ERmRNA表达在66～84h期间雌性极显著高于雄性（P〈0．01=，由此推测杂交种的性分化时间大致在胚胎发育的66～84h范围内；（2）bcl-2和p53的mRNA表达在杂交胚胎发育过程中具有明显的时序性，说明bcl-2和p53基因对早期杂交胚的发育具有重要的影响。

甘氨酸对心肌缺血-再灌注小鼠一氧化氮系统和Bcl-2mRNA表达的影响

目的 :探讨甘氨酸 (Gly)对心肌缺血 -再灌注 (MI/R)损伤的防治作用及机制 ,为临床缺血性心脏病的防治提供新的思路与方法。方法 :将小鼠随机分为 5组 ,以Gly等药物定量灌胃处理。 1周后 ,腹腔注射垂体后叶素和硝酸甘油复制MI/R模型 ,同时记录不同时点的肢体Ⅱ导联心电图。 4h后 ,分别用比色法和硝酸还原酶法检测小鼠心肌组织中一氧化氮合酶 (NOS)、诱导型一氧化氮合酶的活性 (iNOS)和一氧化氮 (NO)的含量 ;用逆转录 -多聚酶链式反应 (RT -PCR)测定各组小鼠心肌组织Bcl-2mRNA的表达。结果 :MI/R组小鼠心电图J点发生明显偏移。Gly预处理组小鼠心肌组织总NOS活性、NO含量及Bcl-2mRNA的表达显著升高 ,而iNOS的活性显著下降。结论 :Gly能保护心脏 ,减轻MI/R引发的损伤。Gly的这一作用可能与其增加缺血再灌注心肌组织中NOS的活性及NO的生成 ,抑制iNOS的活性 。