化学药物诱导的大鼠急性肾损伤模型中肾损伤分子-1表达的研究

目的:探讨由顺铂、庆大霉素、环孢素诱导的急性肾损伤(AKI)对大鼠肾组织内肾损伤分子-1(Kim-l)表达水平的影响。方法:将36只SD雄性大鼠随机分6组,并建立庆大霉素、顺铂、环孢素诱导大鼠AKI模型组及各对照组,每组6只。运用实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测肾Kim-1基因表达水平,Westernblot法检测肾脏Kim-1蛋白表达水平,分析肾Kim-1表达水平与AKI的相关性。结果:病理学检查发现顺铂、庆大霉素和环孢素对大鼠肾脏造成不同程度的肾小管损伤,所建AKI模型成功。各模型组与其对照组比较,肾Kim-lmRNA水平均升高(P<0.05或P<0.01);肾Kim-l蛋白在各阴性对照组内呈阴性结果,而在顺铂、庆大和环孢素AKI模型组内均呈阳性表达。结论:化学药物诱导AKI发生时,肾Kim-1基因转录和蛋白表达水平与肾损伤直接相关,为以尿Kim-1作为预测早期肾损伤的生物标志物提供可靠依据。

C6细胞肝与脾原位接种模型的建立及比较

目的探讨大鼠肝癌细胞系C6肝与脾原位接种成瘤在不同内环境情况下对肿瘤发生与侵袭转移等能力的影响,并筛选最佳C6肝细胞癌肺转移动物模型。方法 C6进行体外培养。将雌性BALB/cA裸鼠随机分为肝与脾原位接种2组。观察裸鼠C6成瘤率、裸鼠存活率、肿瘤病理学特点和远处脏器癌细胞转移等情况。结果肝原位接种组成瘤率100%,肿瘤呈结节状膨胀性生长,对周围肝组织和腹壁有粘连、侵袭,肺转移率100%。脾原位接种组脾成瘤率100%,肿瘤呈结节状膨胀性生长,对周围组织和腹壁亦有粘连、侵袭,肝、肺转移率分别为100%和71.4%。结论 C6细胞肝和脾原位接种均易成瘤和转移,可作为肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)体内研究和转移模型。脾原位接种模型可能与HCC自发性肿瘤发生和转移的生物学特性更相似,更适合于HCC发生和转移的机制,以及治疗干预等研究。

姜黄素对2型糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用

目的:观察姜黄素对2型糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏的保护作用。方法:雄性SD大鼠,除空白组外均给予高脂高糖饲料,50d后腹腔注射STZ 30mg/kg建立2型DN大鼠模型,造模成功后,随机分为模型组、姜黄素低、高剂量组,给药30d,称重、检测大鼠血糖及血清肌酐(CRE)和尿素氮(BUN)水平;取右肾做HE染色,观察大鼠肾组织病理学变化。结果:姜黄素各剂量组可显著性增加大鼠的体重(P<0.05或P<0.01);姜黄素高剂量组血糖显著降低(P<0.01);姜黄素低、高剂量组CRE和BUN值显著性降低(P<0.05或P<0.01);HE染色显示,与模型组比较,姜黄素低、高剂量组大鼠肾脏组织形态有显著性改善。结论:姜黄素可增加2型糖尿病肾病模型大鼠的体重,降低血糖、CRE和BUN,改善模型大鼠肾脏病理损伤,有一定肾脏保护作用。

灌服与喂饲次黄嘌呤复制大鼠持续性高尿酸血症模型方法初探

目的考察次黄嘌呤和尿酸酶抑制剂联合使用,观察造模后受试动物不同时间段血清尿酸的变化,探讨复制大鼠持续性高尿酸血症模型的方法。方法采用次黄嘌呤灌胃给予和饲料喂养,同时皮下注射尿酸酶抑制剂,分别测定造模后不同时段大鼠相关生化指标。结果采用喂饲50g或100g次黄嘌呤/kg饲料,皮下注射尿酸酶抑制剂200mg·kg-1,可明显升高大鼠血尿酸值(P<0.01),且可维持48h。结论采用喂饲次黄嘌呤饲料,同时皮下注射尿酸酶抑制剂的方法造模,所复制的大鼠持续性高尿酸血症模型具有血尿酸值高、维持时间长、操作简便的特点。

流体动力学法乙型肝炎病毒感染动物模型的建立

目的:建立一种简便、有效、稳定的乙型肝炎病毒(HBV)感染的动物模型,观察该模型动物体内不同时间点各种HBV标志物的表达情况．方法:以流体动力学法尾静脉注射BALB／c 小鼠pcDNA3．1-HBV,1 wk内检测各种HBV 标志物,时间分辨免疫荧光分析法(IFMA)检测血清中HBsAg,HBeAg,抗HBs,抗HBe,抗 HBc,荧光定量PCR法(FQ-PCR)检测血清HBV DNA,免疫组织化学法检测肝组织HBsAg和 HBcAg．结果:成功建立一种急性HBV感染动物模型, 第1天血清中HBsAg表达达高峰,后逐渐降低, HBeAg表达量少,分别在第4、5、7天检测到抗HBc,抗HBe,抗HBs,d1 HBV DNA滴度亦达高峰,后渐下降,免疫组织化学示HBsAg呈胞质内弥漫性分布,HBcAg亦主要为胞质型分布．结论:以流体动力学法建立的HBV模型是一种新型有效的HBV感染动物模型,能稳定较高水平表达大部分HBV标志物．

力竭运动对小鼠骨骼肌细胞自噬的影响及相关调节机制研究

目的:研究力竭运动对C57BL/6小鼠骨骼肌细胞自噬的影响,并探讨AMPK在骨骼肌自噬中的作用和调节机制。方法:8周龄C57BL/6小鼠96只,随机分为AICAR注射组,力竭运动组,Compound C注射+力竭运动组及相应对照组。各组小鼠分别在AICAR注射后1h,2h和6h或在进行终强度为11m/min的力竭跑台运动后即刻,3h,6h,12h,24h取材,每组6只。通过ELISA法测定AMPK酶活性,采用Western Blot法测定p-ULK1,ATG 7,LC3,Beclin1和p62蛋白表达,免疫共沉淀法测定AMPK/ULK1结合量。结果:AICAR注射后1h时AMPK酶活性、p-ULK1、AMPK/ULK1结合量、LC3-I和LC3-II显著升高(P<0.05),LC3-II/LC3-I比值显著增大(P<0.01),ATG 7、Beclin1显著下降(P<0.05),p62变化不明显,2h时除LC3-II显著下降外(P<0.01),其余指标基本恢复;力竭运动组AMPK酶活性,p-ULK1、AMPK/ULK1结合量,LC3-I和LC3-II运动结束即刻增加非常显著(P<0.01),LC3-II/LC3-I比值显著增大(P<0.01),恢复期(3h、6h、12h、24h)显著下降(P<0.01),ATG 7、Beclin1和p62运动后即刻显著下降(P<0.05),恢复期ATG 7始终低于对照组,Beclin1和p62逐渐恢复;Compound C注射+力竭运动组AMPK活性,p-ULK1含量和AMPK/ULK1结合量基本不变,LC3-I,LC3-II和LC3-II/LC3-I比值在运动后变化同力竭组一致,但显著低于力竭组(P<0.05),ATG 7,Beclin1变化同力竭组,但显著高于力竭组(P<0.05),p62在运动后即刻显著升高,恢复期(3h、6h、12h、24h)显著下降(P<0.05)。结论:AMPK是骨骼肌内细胞自噬的重要调节因子,力竭运动可以通过AMPK/ULK1途径显著提高骨骼肌细胞自噬水平,但AMPK/ULK1并非是调节骨骼肌细胞自噬的唯一途径。

脂氧素受体激动剂BML-111对左向右分流大鼠肺动脉压力影响及其机制的研究

目的:观察脂氧素受体激动剂BML-111对左向右分流大鼠肺动脉压力的影响及与基质金属蛋白酶(MMP-2、9)及组织途径抑制物(TIMP-1)的关系。方法:将SD大鼠30只分为C组、P组、B组,P组和B组大鼠行建立左颈总动脉-颈外静脉吻合,吻合饲养6周后,B组每天腹腔注射1mg/kgBML-111连续4周,P组每天腹腔注射等量生理盐水。实验测量指标:各组大鼠体重增长速度、平均肺动脉压力、右心室收缩压、右室(RV)/(左室LV+室间隔S)、肺小动脉中膜厚度百分比、肺血管纤维化程度比、肺组织MMP-2、MMP-9、TIMP-1的水平。结果:P组、B组与C组相比平均肺动脉压力、右心室收缩压、RV/(LV+S)、肺小动脉中膜厚度百分比、肺血管纤维化程度比、肺组织MMP-2、MMP-9、TIMP-1的水平均高于P组,体重增长速度低于C组(P<0.05);B组与P组相比,平均肺动脉压力、右心室收缩压、肺小动脉中膜厚度百分比、肺血管纤维化程度比、肺组织MMP-2、MMP-9、TIMP-1低于P组,体重高于P组(P<0.05)。结论:脂氧素受体激动剂BML-111减轻肺动脉高压的作用机制可能与降低MMP-2、9和TIMP-1的表达有关。

注射用头孢呋辛钠他唑巴坦钠制剂安全性研究

为考察注射用头孢呋辛钠他唑巴坦钠(4∶1)制剂的安全性,分别进行豚鼠全身过敏性、家兔局部刺激性和家兔红细胞溶血性试验.结果显示,动物给药后未见明显溶血反应,家兔耳缘静脉和股四头肌未见明显刺激反应,豚鼠也无全身过敏反应.表明本品符合肌肉和静脉注射用药安全性要求.

襄阳地区药用动植物资源分布调查

目的:调查襄阳地区药用动植物资源分布状况,包括重点品种、一般品种及栽培品种的具体情况。方法:采用查阅文献、走访和实地考察等方法,明确襄阳市药用动植物资源的分布状况。结果:普查结果表明襄阳地区分布常用药用动植物达918种,其中,菌类植物5科9属12种;地衣植物1科1属2种;苔藓植物3种4属7种;蕨类植物19科26属38种;裸子植物8科15属18种;被子植物138科514属765种;动物类51科64属77种。本地栽培的主要药材52种,新发现中药36种。结论:建议当地政府积极引导农民在环境适宜区开展人工栽培,合理开发利用本地区中药资源。

矿盐粉粒吸入疗法对哮喘小鼠肺组织病理形态及血清IL-4、IL-5、IL-13水平的影响

目的:探讨天然矿盐粉粒吸入对哮喘小鼠肺组织病理及血清IL-4、IL-5、IL-13水平的影响。方法:将40只Balb/c雌性小鼠随机分为对照组、模型组、30 min治疗组、60 min治疗组,每组10只。第0、7天分别在模型组、30 min治疗组、60 min治疗组小鼠腹腔注射致敏液鸡卵清蛋白(Ovalbumin,OVA),对照组注射生理盐水。第14天对模型组和治疗组行超声雾化吸入OVA以诱发哮喘;对照组则以生理盐水雾化吸入。第15天起,两治疗组每天分别用矿盐粉粒吸入治疗30 min或60 min,对照组和模型组则吸入空气,各组共吸入10 d。第22至第24天连续诱发哮喘3天,第25天处死小鼠,取肺组织常规行病理切片,ELISA法检测血清IL-4、IL-5、IL-13水平。结果:与对照组比较,模型组小鼠肺组织病理出现支气管收缩、管腔狭窄、黏膜上皮坏死脱落,大量炎症细胞浸润、嗜酸性粒细胞聚集。与模型组比较,治疗组上述表现明显减轻。与对照组比较,模型组小鼠血清IL-4、IL-5和IL-13含量明显升高(P<0.01或P<0.05);与模型组比较,两治疗组的IL-4、IL-5、IL-13含量则明显降低(P<0.01)。结论:吸入天然矿盐粉可减轻支气管哮喘小鼠气道炎症,降低血清中哮喘相关细胞因子IL-4、IL-5、IL-13的含量。

广枣－钾停搏液对心肌保护作用的研究

采用犬体外循环模型，观察广枣－钾停搏液在低温下对心脏缺血９０ｍｉｎ，再灌注４５ｍｉｎ的保护作用。实验结果显示：广枣－钾停搏液组心功能恢复率较单纯托马氏停搏液组为高；心肌水、钙含王及氧自由基含量明显降低。电镜观察心肌超微结构亦显示前者的保护作用明显优于后者。广枣与托马氏液合用，能加强对心脏的保护作用。本文对广枣护心的作用机制作了讨论。

胃食管反流病动物模型制备的研究进展

胃食管反流病(gastroesophageal reflux disease)是临床常见的消化系统难治性慢性疾病,其病机纷杂,临床疗效尚局限.学者们纷纷投入本病的相关动物实验研究,目前实验选用的动物模型,其制备方法主要分为改变自身胃肠道解剖结构反流诱导食管炎及外源性灌酸诱导食管炎,而前者又包括破坏食管下括约肌、结扎幽门或十二指肠、吻合食管十二指肠或空肠、机械扩张食管下端等.各种制备方法都能不同程度的形成相应的食管病变,但在实际研究中各有其弊端.应根据不同的实验目的及要求,确定适合的研究动物,选择合理的术式,并采取有效措施预防术后并发症,降低非预期死亡率,以提高所制备模型的使用率,制备符合研究需要的理想动物模型.

巨噬细胞MRI检测兔早期腹主动脉粥样硬化斑块

目的观察巨噬细胞MRI在检测兔早期动脉粥样硬化斑块中的应用价值。方法将10只健康新西兰兔随机均分为模型组及对照组,对模型组通过球囊拉伤联合高脂饲料建立腹主动脉粥样硬化模型,对照组不予任何干预。对两组动物行MR扫描,检测静脉注射葡聚糖四氧化三铁纳米颗粒(DCIONP)对比剂前及注射后45min、24h、48h、72h、96h和120h血管壁信号强度(SI)及信号强度变化值(ΔSI)。之后处死动物,病理观察动脉粥样硬化斑块。结果模型组斑块注射DCIONP后45min SI升至最高,48h开始低于注射前水平,96h降至最低;对照组管壁于注射DCIONP后45min均匀强化,24h后SI基本恢复至注射前水平,其后SI无明显变化。两组间各时间点ΔSI差异均有统计学意义(P均<0.05)。病理结果表明血管壁信号衰减区与斑块内铁蓝染区及巨噬细胞分布相符。结论巨噬细胞MRI可检测兔早期动脉粥样硬化斑块,可能具有潜在临床应用价值。

甲泼尼龙诱导股骨头坏死发生发展的实验研究

目的：动态观察甲泼尼龙诱导家兔股骨头坏死的发生发展，找出股骨头坏死动物模型的确切观察终点。方法：以马血清和甲泼尼龙联用诱导兔股骨头坏死模型的产生，通过活体股骨头 Ｘ 线照片、骨密度的测量、股骨头切片光镜和电镜及骨动力学检查，对动物模型不同阶段进行评价。结果：模型８ 周时 Ｘ 线照片显示：骨质软化，不规则骨小梁吸收，坏死，光镜、电镜检查显示软骨下区骨骼造血细胞减少，脂肪细胞肥大；１６ 周时 Ｘ 线照片显示模型动物骨质疏散，骨小梁模糊，股骨头密度减低，光镜、电镜检查呈现股骨头坏死的早期病理改变，属 Ｆｉｃａｔ 分级的Ⅰ级和Ⅱ级，计数空骨陷窝率明显增加，股骨骨生长测定值明显降低。结论：甲泼尼龙诱导的家兔股骨头坏死８ 周时已开始发生，１６ 周已具备确切、明显股骨头坏死特征。

自身免疫相关性干眼动物模型的研究进展

干眼是最常见眼病之一,损伤眼表和视力,影响生活质量,其发病机制尚未完全明了,这严重限制了对干眼的有效治疗。值得关注的是,较为严重的干眼类型多见于自身免疫相关性干眼。近年来,随着转基因小鼠和敲除基因小鼠的出现及分子遗传学和免疫学等学科的飞速发展,人们已经成功建立了许多新的干眼动物模型,对自身免疫相关性干眼的研究有重大价值。

四妙勇安汤合生脉饮对缺氧乳鼠心肌细胞活性及天冬氨酸氨基转移酶的影响

目的观察四妙勇安汤合生脉饮对缺氧乳鼠心肌细胞活性及天冬氨酸氨基转移酶(AST)的影响。方法应用醇沉技术制备四妙勇安汤合生脉饮药液,采用胰蛋白酶和胶原酶联合消化的方法分离SD乳鼠心肌细胞,采取2次差速贴壁法对心肌细胞进行纯化,原代培养。利用高纯氮气建立心肌细胞缺氧/复氧模型。原代培养的乳鼠心肌细胞随机分为3组,即正常对照组、模型组及药物干预组。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测心肌细胞活性,采用全自动生化分析仪检测心肌细胞培养液AST的含量。结果药物干预组能提高乳鼠心肌细胞OD值,降低AST含量,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论四妙勇安汤合生脉饮可能提高缺氧/复氧损伤后心肌细胞的活性,降低AST含量,从而对心肌细胞具有保护作用。

肝纤维化自发逆转过程中肝星状细胞上p75的表达

目的 确定低亲和力神经生长因子受体(p75 )在肝纤维化自发逆转过程中的表达分布。方法 四氯化碳诱导的肝纤维化大鼠在去除诱导因素后,应用免疫组化技术动态观察在肝纤维化自发逆转过程中第7,2 0和30d时p75表达的变化,以及肝纤维化病理组织学分级。结果 p75主要在肝星状细胞(HSC)表达,随着肝纤维化的逆转,p75表达减少(P <0 .0 5 )。p75的表达与活化HSC的变化呈相关性(r =0 .89,P <0 .0 1)。结论 p75在HSC有表达,因此,p75可能参与肝纤维化自发逆转的发生。

基质金属蛋白酶-9与自发性高血压大鼠心肌纤维化的相关性研究

目的:探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)与自发性高血压大鼠(SHR)心肌纤维化的相关性。方法:将16只14周龄雄性SHR随机平分为ACEI组和对照组,另以8只同龄雄性SD大鼠作为正常对照组。ACEI组以卡托普利100mg/(kg.d)灌胃,SHR对照组不灌药,于灌药12周后麻醉下取出大鼠心脏。免疫组化分析MMP-9、Collagen和的表达;RT-PCR检测MMP-9mRNA表达;MASSON染色测量胶原容积分数(CVF);碱水解法测定羟脯氨酸(Hypro)含量。结果:(1)SHR对照组LVI、CVF、Hypro、MMP-9、Collagen和的表达明显高于正常对照组(P<0.01);相对于SHR对照组,ACEI组各参数则显著降低(P<0.05);(2)MMP-9与上述指标呈高度正相关(P<0.01)。结论:MMP-9与SHR心肌纤维化密切相关,ACEI能抑制MMP-9的表达。

动物法律地位之争议焦点问题回眸

随着动物保护呼声的高涨和《德国民法典》第90 a条"动物不是物"的规定,动物的法律地位问题日益凸显并在国内法学界引起广泛争论。通过对这一争论呈现的焦点问题之盘查,笔者试图探究这一问题的实质,进而总结这一争论的意义。

“属”字句:从句法层面到修辞层面

由义项为"用十二属相记生年"的动词"属"所构成的句式,主要有:1."NP1([+人])+属+NP2(十二生肖名词)",此类典型、常用,可客观表示属相,说明出生年份及年龄,也是拉近交际距离的常用策略;少数情况可表示比喻,是双关句。2."NP(1[+人])+是+属+NP(2十二生肖名词)+的",多数情况表示比喻;少数情况仍表示属相,是强调句,把属相当作原因和理由来强调和突出。因此有时是歧义结构。3."NP1+是+属+NP(2非十二生肖名词)+的",是比喻。换个角度考察发现:用"属"来陈述自然属相,常用句式"NP1+属+NP2";用"属"来表示比喻,常用句式"NP1+是+属+NP2+的"。