安寐丹调控AMPK信号通路线粒体生物合成对睡眠剥夺大鼠能量代谢紊乱的作用

目的:探讨安寐丹(AMD)对睡眠剥夺大鼠能量代谢的影响。方法:60只大鼠随机分为空白组、模型组、安寐丹组和褪黑素组。通过自制睡眠剥夺箱进行持续性睡眠剥夺4周。力竭性游泳评价活动能力,血生化和酶联免疫吸附实验(ELISA)检测空腹血糖(FBS)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)、ATP及ATP酶的含量。HE染色观察下丘脑组织形态,透射电镜观察下丘脑神经元线粒体结构,Western blotting检测下丘脑CaMKKβ、AMPK、PGC-1α蛋白表达,免疫组化和免疫荧光检测Nrf-1、TFAM蛋白表达。结果:与空白组比较,模型组力竭性游泳时间显著降低,FBS、TG、TC、LDL-C水平显著升高,HDL-C水平显著下降,ATP含量、Na-+K-+ATP酶、Ca-2+Mg-2+ATP酶含量显著降低(P<0.01);下丘脑细胞数量减少,胞浆浓缩,核固缩;线粒体结构损坏,嵴断裂,伴有肿胀空泡化;p-CaMKKβ、p-AMPKα、PGC-1α蛋白相对表达显著降低,Nrf-1、TFAM蛋白阳性率显著下降(P<0.01)。与模型组比较,安寐丹组可显著增强大鼠活动耐力,延长游泳时间(P<0.01),降低FBS、TG、TC、LDL-C水平,升高HDL-C水平及ATP、Na-+K-+ATP酶、Ca-2+Mg-2+ATP酶含量(P<0.01),下丘脑细胞数量增加;线粒体水肿减轻,p-CaMKKβ、p-AMPKα、PGC-1α蛋白相对表达升高,Nrf-1、TFAM阳性率增加(P<0.01)。结论:安寐丹改善睡眠剥夺大鼠能量代谢紊乱,其作用可能与促进AMPK通路线粒体生物合成,增加Nrf-1、TFAM蛋白表达有关。

安寐丹对不同周期睡眠剥夺模型大鼠昼夜节律、学习记忆及食欲素的影响

目的:观察安寐丹对3、6、9月龄睡眠剥夺(SD)模型大鼠昼夜节律、学习记忆及食欲素(OX)的影响并探讨其最佳显效周期及可能机制。方法:根据大鼠生长周期,分别选取3、6、9月龄SD大鼠,运用随机数字表分为空白组、模型组、艾司唑仑组(0.09mg·kg-1·d-1)、安寐丹组(9.09g·kg-1·d-1),除空白组外均采用对氯苯丙氨酸(PCPA)腹腔注射叠加多平台水环境剥夺法建立SD模型,空白组、模型组给予等容0.9%氯化钠溶液灌胃,灌胃1周。运用自主活动仪监测大鼠昼夜节律,Morris水迷宫检测其学习记忆,ELISA检测大鼠血清食欲素A(OXA)、食欲素B(OXB)含量,免疫荧光检测下丘脑区OX含量表达。结果:各月龄大鼠造模后昼夜节律紊乱,其活动时间和活动距离均高于空白组(P<0.05,P<0.01);大鼠造模后下丘脑区OX含量较空白组增多,尤以9月龄大鼠OX含量增多较为明显;安寐丹能一定程度改善SD大鼠上平台潜伏期、游泳总路程、穿越站台次数和象限活动时间(P<0.05,P<0.01),且各月龄改善效果有别,但9月龄大鼠安寐丹灌胃后上平台潜伏期、游泳总路程最短(P<0.01);安寐丹能一定程度降低各月龄SD大鼠OXA、OXB含量(P<0.05,P<0.01),但各月龄降低程度有别,且安寐丹组降低9月龄大鼠OX含量较艾司唑仑组明显。结论:安寐丹能改善不同周期SD模型大鼠的昼夜节律紊乱、学习记忆障碍,其机制可能与调节OXA、OXB有关,且初步认为安寐丹对9月龄SD模型大鼠作用效果最佳。