脑胶质瘤ABCC3、PEBP4及Anxa7的表达及与病理特征和预后的关系

目的 研究脑胶质瘤ATP结合盒转运蛋白3(ABCC3)、磷脂酰乙醇胺结合蛋白4(PEBP4)及膜联蛋白7(Anxa7)的表达与病理特征、预后的关系。方法 收集2016年5月至2018年6月于新乡医学院第一附属医院行肿瘤切除术的88例脑胶质瘤患者的胶质瘤组织作为实验组,同时收集瘤旁组织(距离肿瘤5 cm处)作为对照组;根据预后分为生存组(n=51)及死亡组(n=37)。对比各组间ABCC3、PEBP4及Anxa7表达情况;分析脑胶质瘤中ABCC3、PEBP4及Anxa7的表达与病理特征、预后的关系。结果 实验组ABCC3、PEBP4阳性率及Anxa7阴性率较对照组高,差异有统计学意义(P<0.05)。ABCC3、PEBP4阳性及Anxa7阴性患者的分化程度、远处转移、TNM分期高于ABCC3、PEBP4阴性及Anxa7阳性患者,差异具有统计学意义(P<0.05)。死亡组ABCC3、PEBP4阳性率及Anxa7阴性率较生存组高,差异有统计学意义(P<0.05)。组织分化程度、远处转移、TNM分期、ABCC3、PEBP4、Anxa7为影响脑胶质瘤预后的独立危险因素(P<0.05)。结论 脑胶质瘤中ABCC3、PEBP4阳性表达高,Anxa7阴性表达高,三者可作为脑胶质瘤患者病情预后有效评估指标。

ANXA7基因mRNA水平在神经胶质瘤中的研究

目的研究ANXA7基因mRNA水平与神经胶质瘤的相关性。方法选择神经胶质瘤患者70例,健康对照组24例。提取脑组织mRNA,设计定量PCR引物与探针,经PCR扩增进行荧光定量分析。结果定量PCR检测结果显示,24例正常脑组织ANXA7基因mRNA水平高于70例神经胶质瘤患者(p=0.001);同时高级别神经胶质瘤患者ANXA7基因mRNA水平低于低级别组(P=0.01)。最后我们采用DNA甲基化特异性PCR技术(MS-PCR)检测70例神经胶质瘤患者ANXA7启动子区甲基化水平,并与其mRNA水平进行相关性分析,结果显示高甲基化组ANXA7基因mRNA水平显著低于低甲基化组(p=0.003)。结论 ANXA7基因表达降低与ANXA7基因启动子区甲基化水平有一定相关性,与神经胶质瘤的发生发展密切相关,为疾病进展的早期监测提供分子理论依据。

不同分化程度胃癌患者血清ANXA7、E-cadherin水平变化及联合监测临床意义探讨

目的探讨不同分化程度胃癌患者血清膜联蛋白A7(ANXA7)、E钙蛋白(E-cadherin)水平变化及联合监测临床意义。方法选取2018年2月-2019年3月我院收治的200例胃癌患者作为胃癌组,选取同期非胃癌健康体检者200例(对照组)及良性胃部疾病200例(良性胃病组),比较各组血清ANXA7、E-cadherin水平,绘制胃癌患者ANXA7、E-cadherin接收者操作特征曲线(ROC),分析ANXA7、E-cadherin诊断价值,并比较不同分化程度胃癌患者血清及胃癌组织ANXA7、E-cadherin水平,采用Spearman分析ANXA7、E-cadherin与分化相关性。结果胃癌组血清ANXA7、E-cadherin均较对照组、良性胃病组高(P<0.05);对照组与良性胃病组血清ANXA7、E-cadherin比较,差异无统计学意义(P>0.05);ANXA7 ROC曲线下面积为0.847,以>67.63 ng/L作为临界值,对胃癌诊断敏感性为75.50%,特异性为81.00%,E-cadherin ROC曲线下面积为0.827,以>30.05 ng/ml作为临界值,对胃癌诊断敏感性为68.00%,特异性为87.00%;ANXA7+E-cadherin ROC曲线下面积为0.921,以两者均阳性为阳性标准,对胃癌诊断敏感性为81.00%,特异性为88.00%;高、中、低分化血清及胃癌组织ANXA7、E-cadherin依次升高(P<0.05);ANXA7、E-cadherin与胃癌分化程度均呈负相关(P<0.05)。结论胃癌患者血清ANXA7、E-cadherin高表达,可用于胃癌诊断,且与胃癌分化程度均呈负相关。

ANXA7基因异常甲基化与神经胶质瘤发生相关性的研究

目的研究ANXA7基因异常甲基化与神经胶质瘤发生的相关性。方法采用硫化测序PCR(BS-PCR)引物以及DNA甲基化特异性PCR(MS-PCR)引物检测ANXA7基因在人脑神经胶质组织及正常脑组织中的表达差异,随后经PCR扩增进行电泳以及测序分析。结果 5例健康标本及5例神经胶质瘤患者标本DNA经硫化且BS-PCR测序分析,其健康标本甲基化率分别为1.5%、1%、1%、1.5%、1%,神经胶质瘤患者甲基化率分别为92%、78.5%、86%、56%、90%;MS-PCR分析结果显示:ANXA7基因在24例正常脑组织中呈完全非甲基化状态,在60例神经胶质瘤患者中其甲基化阳性率为46.67%(p=0.000);高级别神经胶质瘤患者甲基化阳性率(56.67%)高于低级别组(26.67%)(P=0.018)。结论 ANXA7基因异常甲基化可能参与神经胶质瘤的发生发展。

新型^(99m)Tc-DTPA-GGGRDN-IF7靶向肿瘤血管Anxa1分子探针的制备及SPECT显像

目的制备针对肿瘤血管表面受体Annexin A1(Anxa1)分子探针^(99m)Tc-二乙三胺五乙酸(DTPA)-甘氨酸-甘氨酸-甘氨酸-精氨酸-天冬氨酸-天冬酰胺(GGGRDN)-异亮氨酸-苯丙氨酸-亮氨酸-亮氨酸-色氨酸-谷氨酰胺-精氨酸(IFLLWQR,IF7),进行体外肿瘤细胞(人脑星形胶质细胞瘤U87细胞)实验;探讨^(99m)Tc-DTPA-GGGRDN-IF7在荷瘤小鼠体内的生物学分布规律,并利用单光子发射计算机体层摄像术(SPECT)进行显像研究。方法将100μg DTPA-GGGRDN-IF7溶于10μL二甲基亚砜(DMSO)中,充入氮气保护。加入10μL 1 mg/mL氯化亚锡(SnCl2)溶液(pH 4.0),再加入约111 MBq(3 mCi)Na^(99m)TcO_4,37℃水浴反应30 min,经C_(18)柱淋洗后制备^(99m)Tc-DTPA-GGGRDN-IF7。取样注入分析型高效液相色谱(HPLC)仪分析^(99m)Tc-DTPA-GGGRDN-IF7的放射化学纯度及体外血清稳定性。将U87细胞与^(99m)Tc-DTPA-GGGRDN-IF7共同孵育后,测定放射性计数并计算摄取率。取30只4～5周龄18～20 g荷瘤裸鼠,建立U87荷瘤裸鼠模型,进行^(99m)Tc-DTPA-GGGRDN-IF7的体内分布实验及SPECT显像。结果 ^(99m)Tc-DTPA-GGGRDN-IF7标记产率大于95%,放射化学纯度大于95%。在大鼠血清中37℃保温2 h后性状稳定,放射化学纯度大于92.3%。U87细胞在体外对^(99m)Tc-DTPA-GGGRDN-IF7摄取在60 min时达峰值(6.85%±0.97%),过量的GGGRDN-IF7可以明显降低细胞的摄取。体内分布实验结果显示,药物均在血浆清除较快,肝肾摄取高,主要从肝肾排泄。SPECT显像结果表明,肿瘤部位呈明显放射性浓聚态,注射2 h后肿瘤对^(99m)Tc-DTPA-GGGRDN-IF7摄取值为(3.56±0.44)%ID/g。结论 ^(99m)Tc-DTPA-GGGRDN-IF7合成简便,放射化学纯度高,易于推广;U87细胞对^(99m)Tc-DTPA-GGGRDN-IF7具有较强亲和力;SPECT显像表明肿瘤明显浓聚^(99m)Tc-DTPA-GGGRDN-IF7,体内生物分布理想,靶向性强,有望用于肿瘤显像。

甲状腺乳头状癌中EphA7和ANXA1的表达及其意义

目的探讨受体酪氨酸激酶A7(Ephrin A7,Eph A7)和重组人膜联蛋白A1(Annexin A1,ANXA1)在甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)中的表达及其相关性。方法应用免疫组化En Vision两步法检测65例PTC、19例结节性甲状腺肿、19例癌旁甲状腺组织中Eph A7和ANXA1蛋白的表达,并分析二者与PTC临床病理特征的关系。结果 Eph A7和ANXA1在PTC组中的阳性率(64.6%、61.5%)高于结节性甲状腺肿组(26.3%、21.1%)以及癌旁甲状腺组(31.6%、26.3%,P均<0.05)。Eph A7蛋白和ANXA1蛋白在PTC伴淋巴结转移组中的表达高于不伴淋巴结转移组(P<0.05)。PTC组中ANXA1蛋白表达与患者淋巴结转移和临床分期相关(P均<0.05),ANXA1蛋白与患者性别、年龄、部位、肿瘤大小、TG-Ab值和TPO-Ab值无关(P均>0.05)。Eph A7蛋白表达与PTC淋巴结转移、临床分期、TG-Ab值和TPO-Ab值相关,与患者性别、年龄、肿瘤大小和部位无关(P均>0.05)。Eph A7与ANXA1表达呈正相关(P<0.01)。结论 Eph A7与ANXA1可能参与PTC的发生、发展,促进肿瘤淋巴结转移。

Annexin A7在精原干细胞中的表达研究

目的:探讨Annexin A7在睾丸中的表达,尤其是在精原细胞各亚型中的分布。方法:采用原核表达法制备了Annexin A7的重组蛋白,质谱鉴定后用其吸附Annexin A7抗体,并用W estern印迹及免疫组化的方法检测了Annexin A7的表达。结果:研究发现Annexin A7于青春期前的小鼠睾丸中主要在精原细胞中表达,并有一定发育依赖性;在成年睾丸中主要表达于As及Apr精原细胞,且与分化型精原干细胞(SSCs)的分子标志Stra8的共表达也进一步证实上述结果。结论:Annexin A7是As及Apr精原干细胞的内在因子,可参与SSCs的生物学功能。

敲除Annexin A7基因的小鼠早期胚胎心肌细胞钙稳态正常(英文)

目的 :研究AnnexinA7在早期胚胎发育过程中对钙平衡调节的作用 .方法 :利用钙成像技术和膜片钳技术检测敲除AnnexinA7小鼠的早期胚胎心肌细胞的钙平衡以及相应的离子通道的特性 .结果 :在胚胎心肌细胞发育的早期 ,敲除AnnexinA7小鼠胚胎心肌细胞的静息钙 (340 / 380荧光比例 0 .78± 0 .0 2 )、钙峰值 (340 / 380荧光比例 1.2 8± 0 .0 5 )和正常细胞的值相似 ;动作电位 (APD90 2 4 2 .7± 4 3.7ms、最大去极化电位 5 6 .8± 1.7mV)以及L 型钙电流密度 (14 .1± 2 .5pA/ pF)和正常细胞的相似 ,并且钙电流能被碳酰胆碱减小(5 1.7± 8) % ,也和正常细胞相似 .结论 :敲除AnnexinA7基因的小鼠早期胚胎心肌细胞具有正常的钙稳态以及正常的离子通道 .

敲低膜联蛋白A7对乳腺癌MCF-7细胞凋亡的影响

目的:观察靶向敲低人乳腺癌MCF-7细胞膜联蛋白A7(AXNA7)的表达对MCF-7细胞凋亡的影响。方法:实验分为3组,以靶向ANXA7的si RNA转染MCF-7细胞为si RNA干扰组,另设阴性对照组、空白对照组,采用RT-PCR法和Western blot法检测转染后MCF-7细胞ANXA7的表达情况,应用流式细胞术检测ANXA7低表达对MCF-7细胞凋亡的影响。结果:转染后,si RNA干扰组细胞ANXA7的表达明显低于阴性对照组和空白对照组(P<0.05);敲低ANXA7后,MCF-7细胞凋亡明显增加(P<0.05)。结论:ANXA7低表达可促进乳腺癌细胞MCF-7凋亡。

膜联蛋白7在转移性激素敏感前列腺癌原发灶组织中的表达及其意义

目的检测膜联蛋白7(ANXA7)在转移性激素敏感前列腺癌(HSPC)原发灶组织中的表达,探讨对其预后意义。方法取转移性HSPC原发灶组织106例,免疫组化检测标本ANXA7蛋白表达,分析其表达与常见临床病理指标和疾病无进展生存时间(PFS)及总生存时间(OS)的相关性。对照组为前列腺增生20例,去势抵抗性前列腺癌(CRPC)22例。结果转移性HSPC原发灶组织ANXA7阳性表达率为50/106(47.2%),前列腺增生组织ANXA7全部阳性表达,CRPC组织为3/22(13.6%),差异比较均有显著统计学意义(P<0.05)。ANXA7表达减少与T分期、N分期级别高及Gleason评分高相关,生存分析显示ANXA7表达减少与较短的PFS和OS相关,ANXA7阳性和阴性表达者PFS中位值分别为24.4月和15.5月,OS中位值分别为56.4月和36.1月。结论 ANXA7在转移性HSPC原发灶组织中表达减少,其参与疾病进展过程,表达异常往往与患者不良预后相关。

敲低膜联蛋白A7对胃癌细胞MGC-803增殖的影响

目的:应用RNA干扰技术,靶向敲低人胃癌MGC-803细胞膜联蛋白A7(Annexin A7,ANXA7)的表达,观察ANXA7低表达对MGC-803细胞增殖的影响。方法:实验分为3组,以靶向ANXA7的si RNA转染MGC-803细胞为si RNA干扰组,另设阴性对照组和空白对照组,以Western blot法检测转染后MGC-803细胞ANXA7的表达,应用MTT法、克隆形成实验检测ANXA7低表达对MGC-803细胞的增殖能力的影响。结果:si RNA干扰组细胞ANXA7的表达较阴性对照组和空白对照组明显降低(P<0.05)。敲低ANXA7表达后,MGC-803细胞的增殖活性和克隆形成能力明显降低(P<0.05)。结论:ANXA7低表达可抑制胃癌MGC-803细胞的增殖。

血清ANXA2、ANXA6、ANXA7与乳腺癌患者聚乙二醇多柔比星脂质体相关新辅助化疗方案治疗疗效的关系研究

目的:探讨血清膜联蛋白A2(ANXA2)、膜联蛋白A6(ANXA6)、膜联蛋白A7(ANXA7)与乳腺癌患者聚乙二醇多柔比星脂质体(PLD)相关新辅助化疗方案治疗疗效的关系。方法:选择2019年11月至2022年12月于山西医科大学第一医院95例行PLD相关新辅助化疗的乳腺癌患者。新辅助化疗前检测所有乳腺癌患者的血清ANXA2、ANXA6、ANXA7水平。单因素和多因素Logistic回归分析影响乳腺癌患者PLD相关新辅助化疗疗效的因素。受试者工作特征(ROC)曲线分析血清ANXA2、ANXA6、ANXA7预测乳腺癌患者PLD相关新辅助化疗疗效的价值。结果:无效组新辅助化疗前血清ANXA2、ANXA6、ANXA7水平均高于有效组(P<0.05)。TNM分期IIIA期、ER阳性、高水平ANXA2、高水平ANXA6、高水平ANXA7是乳腺癌PLD相关新辅助化疗无效的危险因素(P<0.05)。血清ANXA2、ANXA6、ANXA7单独检测预测乳腺癌PLD相关新辅助化疗无效的曲线下面积分别为0.783、0.774、0.821,三指标联合检测预测的曲线下面积为0.923,高于各指标单独预测效能。结论:高ANXA2、ANXA6、ANXA7水平及TNM分期ⅢA期、ER阳性均是乳腺癌患者PLD相关新辅助化疗无效的危险因素,联合检测血清ANXA2、ANXA6、ANXA7水平可提高对乳腺癌患者PLD相关新辅助化疗疗效的预测效能。

膜联蛋白A7过表达对人胃癌MGC-803细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨膜联蛋白A7(ANXA7)过表达对人胃癌MGC-803细胞增殖和凋亡的影响。方法将人胃癌MGC-803细胞分为ANXA7过表达组、阴性对照组,脂质体转染法将pcDNA3.1-ANXA7重组质粒以及空质粒分别转染ANXA7过表达组和阴性对照组。采用Western blot鉴定ANXA7过表达;转染48h采用CCK-8实验检测各组细胞增殖能力;流式细胞术检测各组细胞凋亡率;Western blot检测各组细胞增殖和凋亡相关蛋白PCNA、CyclinD1、Casepase-3、Cleaved casepase-3的表达。结果与阴性对照组相比,ANXA7过表达组MGC-803细胞增殖能力显著增强、PCNA与CyclinD1的表达均升高(P<0.05);细胞凋亡率降低、Cleaved casepase-3的表达降低(P<0.05);Casepase-3的表达变化无统计学意义(P>0.05)。结论ANXA7过表达可促进人胃癌MGC-803细胞的增殖并抑制其凋亡。

膜联蛋白A7低表达对人胃癌MGC-803细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨膜联蛋白A7(ANXA7)低表达对人胃癌MGC-803细胞增殖和凋亡的影响。方法将人胃癌MGC-803细胞分为ANXA7低表达组(si-ANXA7)和阴性对照组(si-con),分别将靶向ANXA7的si-RNA和阴性对照RNA转染为ANXA7低表达组和阴性对照组。Western blot法检测ANXA7的表达;MTT法检测各组细胞的增殖能力;PI检测各组细胞的凋亡率;Western blot检测各组细胞增殖和凋亡相关蛋白PCNA和Cleaved casepase-3的表达。结果与阴性对照组相比,ANXA7低表达组MGC-803细胞增殖能力显著降低,增殖相关蛋白PCNA表达显著下降(P<0.05);细胞凋亡增强,相关蛋白Cleaved casepase-3的表达显著升高(P<0.05)。结论ANXA7低表达可抑制人胃癌MGC-803细胞的增殖并促进其凋亡。

吉非替尼对敲低ANXA7的HepG2细胞增殖和凋亡的影响

该文目的为研究吉非替尼对敲低膜联蛋白A7(annexin A7,ANXA7)的人肝癌Hep G2细胞增殖及凋亡的影响,为肝癌的治疗提供参考依据。应用MTT法检测0.1、0.5、1.0、5.0、10.0、50.0μmol/L等浓度的吉非替尼作用72 h后Hep G2细胞的增殖情况,计算IC50为5μmol/L;将Hep G2细胞分为敲低加药组、单加药组、敲低组、阴性对照组和空白对照组,采用RNA干扰技术将靶向ANXA7的si RNA和阴性对照si RNA通过脂质体转染法分别转染入Hep G2细胞。转染72 h后采用Western blot法对ANXA7的抑制效果进行鉴定;用MTT法和流式细胞术检测Hep G2细胞增殖和凋亡情况。结果显示,吉非替尼浓度越大,对Hep G2细胞增殖的抑制作用越明显;靶向ANXA7的si RNA能显著抑制ANXA7的表达;敲低加药组、单加药组、敲低组、阴性对照组和空白对照组的生长抑制率分别为73.88%、48.67%、54.33%、1.02%和0.02%,早期凋亡率分别为8.48%、3.06%、2.93%、1.72%和1.64%。与阴性对照组和空白对照组相比,敲低加药组、单加药组和敲低组细胞的增殖抑制率和凋亡率均明显增加(P<0.05),且敲低加药组较敲低组对抑制细胞增殖、促进细胞凋亡的效果更为显著。由此说明,敲低ANXA7后联合药物吉非替尼能抑制Hep G2细胞的增殖,促进其凋亡,可能是一种临床治疗的方法。

新生大鼠后天感染后脑白质中TRPM7和ANXA1的表达变化及意义

目的观察新生大鼠生后感染后脑白质中TRPM7和ANXA1的表达变化,探讨新生大鼠感染后脑白质损伤的病理机制。方法将64只2 d龄SD大鼠随机分为对照组、实验组。实验组生后第2天开始腹腔注射脂多糖0.6 mg/kg(0.01ml/g),连用5 d,建立新生大鼠脑白质损伤模型;对照组等量生理盐水替代。注射后按观察时间点不同分为12 h、1 d、3 d、7 d 4个亚组(n=8)。处死大鼠时取出脑白质,HE染色后观察脑白质区病理变化;并用免疫组化和半定量RT-PCR法检测各组脑白质中TRPM7、ANXA1蛋白和mRNA水平的表达变化。结果实验组大鼠生长发育迟缓,脑白质病变明显,TRPM7和ANXA1在造模后12 h开始表达,1 d达高峰,随后下降,各时间点均高于对照组(P<0.05)。结论新生大鼠生后感染可引起脑白质损伤,TRPM7、ANXA1的高表达表明其可能参与了感染致脑白质损伤的病理过程。

eEF1A1低表达对肝癌细胞凋亡、增殖与迁移的影响及eEF1A1/A2与ANXA7间的相互作用

[目的]研究shRNA抑制eEF1A1表达对肝癌Hca-P细胞凋亡、增殖、迁移的影响,并通过分别下调eEF1A1和ANXA7的表达,探讨肝癌Hca-P细胞中eEF1A1、eEF1A2与ANXA7表达的相关性及潜在的相互作用。[方法]构建靶向eEF1A1基因的shRNA质粒表达载体,瞬时转染至小鼠肝癌Hca-P细胞中,设无处理组（CON）、eEF1A1-shRNA组（eEF1A1-shRNA）、转染pGPU/GFP/Neo-NC的阴性对照组（NC）三组细胞进行实验。采用实时荧光定量PCR和Westernblot技术检测eEF1A1的抑制效果,并分别检测各组eEF1A2、ANXA7在mRNA和蛋白水平的表达。CCK-8法、流式细胞仪、Transwell小室分别检测对细胞增殖、凋亡、迁移的影响。此外,复苏已稳定低表达ANXA7的Hca-P细胞,通过实时荧光定量PCR和Westernblot技术检测无处理组（CON）、ANXA7-shRNA转染组（ANXA7-shRNA）、阴性对照组（NC）三组Hca-P细胞中eEF1A1、eEF1A2在mRNA和蛋白水平的表达。[结果]eEF1A1靶向shRNA成功下调小鼠肝癌Hca-P细胞中eEF1A1基因的表达。流式细胞仪检测显示,CON组、eEF1A1-shRNA组、NC组细胞凋亡率分别为2.85%±0.37%、4.71%±0.21%和3.01%±0.33%,eEF1A1-shRNA组的细胞凋亡较CON组和NC组明显增加（P〈0.05）;CCK-8实验发现,eEF1A1-shRNA转染细胞后细胞增殖能力较CON组和NC组明显下降;Transwell实验显示,CON组、eEF1A1-shRNA组、NC组迁移细胞数目为123.75±9.26、66.84±17.47、115.31±12.59,eEF1A1-shRNA组细胞迁移能力较CON组和NC组显著减弱（P〈0.05）。qRT-PCR和Westernblot检测显示,eEF1A1-shRNA组eEF1A2、ANXA7在mRNA和蛋白水平的表达量较CON组和NC组明显降低（P〈0.05）,相较其无处理组的蛋白表达水平,eEF1A2和ANXA7分别下降了57%和21%;ANXA7-shRNA组中eEF1A1、eEF1A2在mRNA和蛋白水平的表达量较CON组和NC组亦明显降低（P〈0.05）。[结论]通过靶向eEF1A1的shRNA使eEF1A1低表达,可诱导细胞凋亡,抑制细胞的增殖能力及迁移能力。eEF1A1、eEF1A2与ANXA7的表达密切相关,且eEF1A1与ANXA7存在相互作用,可能共同参与调控肿瘤的发生与发展。