电离辐射对胃肠道间质瘤细胞增殖以及Ano1蛋白表达的影响

目的探究电离辐射后胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromaltumor,GIST)细胞增殖活性和凋亡以及电离辐射后GIST中Ano1分子的mRNA和蛋白表达。方法实验细胞为人胃肠道间质瘤细胞株(GIST-T1),实验分组为未照射组、2 Gy照射组、5 Gy照射组、7 Gy照射组,观察时间点分别为照射后1 d、2 d、3 d、4 d、5 d。通过CCK8法和流式细胞仪检测电离辐射后GIST细胞增殖活性和凋亡,以RT-PCR和Western Blot方法检测电离辐射后GIST中Ano1分子的mRNA和蛋白表达。结果GIST细胞在接受不同剂量的电离辐射急性照射后,生长受到抑制,且有凋亡表现,Ano1蛋白的表达出现了先下降、后回升的变化。随着照射剂量增加,Ano1表达下降的程度越大、到达谷值时间越短,且Ano1的表达恢复速度越慢。结论GIST细胞增殖活性的抑制程度和细胞凋亡率与照射剂量和照射后时间呈依赖关系,Ano1蛋白的表达出现了先下降、后回升的变化。提示Ano1可能是GIST的放疗靶点。

钙激活氯通道蛋白ANO1在小鼠主动脉平滑肌细胞的表达及其功能鉴定

探讨钙激活氯通道蛋白ANO1在C57BL/6小鼠主动脉平滑肌细胞中的表达及其功能特性。运用胶原酶消化法获得原代培养的小鼠主动脉平滑肌细胞,流式细胞术检测平滑肌细胞纯度;应用RT-PCR检测主动脉平滑肌细胞ANO1 mRNA的表达;免疫印迹检测ANO1蛋白在主动脉平滑肌细胞的表达情况;应用荧光淬灭动力学实验检测ANO1钙激活氯通道的功能特性。原代培养成功获得主动脉平滑肌细胞;RT-PCR结果分析表明,主动脉平滑肌细胞在mRNA水平有ANO1表达;免疫印迹显示主动脉平滑肌细胞蛋白水平有ANO1表达;荧光淬灭动力学实验证实表达在主动脉平滑肌细胞的ANO1具有阴离子转运功能,即钙激活氯通道典型特性。小鼠主动脉平滑肌细胞表达的ANO1是钙激活氯通道的分子基础。

DOG1蛋白在胃肠道间质瘤中的表达及相关性分析

目的 分析DOG1蛋白与胃肠道间质瘤（GIST）的相关性.方法 收集2005年1月至2010年6月77例GIST患者,应用免疫组化法检测GIST中DOG1蛋白的表达,并结合原有免疫组化指标CD117、CD34的检测结果进行对照分析.结果 77例GIST患者中,DOG1蛋白和CD117的阳性表达率分别为96.1%（74/77）和90.9%（70/77）,两组间差异无统计学意义（P＞0.05）.不同性别、年龄组、病变部位及危险度间DOG1蛋白阳性表达率差异亦无统计学意义（P值均＞0.05）.7例CD117阴性表达的GIST患者中6例DOG1蛋白阳性表达.3例DOG1蛋白阴性表达的GIST中2例CD117阳性表达.结论 DOG1蛋白作为一种新的GIST标志物,具有与CD117同样的高敏感性,与CD117联用于GIST诊断互补性较好,尤其对CD117阴性的GlST诊断价值优势较大,但不能作为划分GIST危险度的指标.