海南省与云南省两地微小按蚊杂交试验

目的： 观察海南省与云南省两地微小按蚊之间是否存在种间差异。方法： 在两地牛房采集微小按蚊，单雌驯养繁殖， 用强迫交配方法进行杂交试验， 观察 Ｆ１ 代的可育性。制作杂种 Ｆ１ 卵巢营养细胞多线染色体标本， 观察染色体各区域的联会情况。结果： 云南省微小按蚊（ Ｙ） ♀×海南省微小按蚊（ Ｈ） ♂杂交组卵孵化率为０ ， 卵内无胚胎形成。（ Ｈ♀× Ｙ♂） Ｆ１ 各回交组中， 大多数卵孵化率显著低于亲本。（ Ｈ♀× Ｙ♂） Ｆ１ 雌蚊卵巢营养细胞多线染色体３ Ｒ 的２９ 区、３６ 区及３７ 区， Ｘ 性染色体的４ 区和６ 区出现恒定不联会。结论： 海南省与云南省两地微小按蚊已出现明显生殖隔离， 系两个不同的亲缘种。

广西和云南两地微小按蚊的杂交试验

对广西和云南两地微小按蚊进行杂交试验。结果杂种F_1雌蚊都能育,卵巢发育正常。(Y×G)F_1雄蚊均不能育,其睾丸畸形胀大。(G×Y)F_1雄蚊虽能育,但睾丸略显萎缩,与亲本回交所产的卵孵化率均极低。杂种雌蚊卵巢营养细胞多线染色体的X染色体和常染色体均有不联会区段,以38区的不联会最为恒定。上述结果表明两地微小按蚊已出现不完全生殖隔离现象,有可能是微小按蚊复合体的两个亲缘蚊种。

核糖体28S-D3等位基因特异扩增鉴别微小按蚊亲缘种A和C

目的 建立微小按蚊复合体不同亲缘种A和C的分子鉴别方法。方法 用单蚊蚊腿消化提取基因组DNA ,PCR特异扩增 2 8S第 3结构域 (D3 )基因 ,对PCR产物进行纯化、克隆、测序和序列分析 ;基于序列差异设计特异引物 ,进行等位基因特异扩增 (PCR -ASA) ,根据扩增片段大小区分微小按蚊不同亲缘种。结果 发现微小按蚊不同亲缘种A和C(GeneBank登录号 :AF416782 ,AF42 5 5 94) ,根据二者序列差异设计的特异引物能在普通琼脂糖凝胶上直观地区分两亲缘种 ,两者除在 3 76bp处有一共同条带外 ,分别在 2 94bp和 112bp处出现各自的特异扩增带。结论 我们建立的ASA分子鉴别方法能有效地将我国微小按蚊不同亲缘种A和C区分开来。

凌云微小按蚊与元江微小按蚊杂交试验

目的:观察广西凌云微小按蚊与云南元江微小按蚊之间是否存在生殖隔离。方法:分别在两地的牛房采集胞血的微小按蚊,在实验室单雌驯养2代,用人工交配方法进行杂交试验,观察子1代(F1)的可育性。结果:Y×L组的产卵率极低,卵的孵化率为0,卵内未见胚胎形成,显示不育。Y×F1的孵化率、化蛹率均明显低于亲本,可育性低。结论:广西凌云微小按蚊与云南元江微小按蚊已存在部分生殖隔离,系两个不同的亲缘种。

进化速率不同的分子标记对微小按蚊新亲缘种的研究

目的选择进化速率不同的核糖体rDNA-ITS2r、DNA-28S-D3基因和线粒体DNA(mtDNA)COⅡ基因作为分子标记,研究我国微小按蚊变异及新的亲缘种。方法用蛋白酶K消化单蚊蚊腿,提取基因组DNA,PCR特异扩增rDNA-ITS2r、DNA-28S-D3和mtDNA-COⅡ基因片段,对PCR产物进行纯化、测序和序列分析,并基于mtDNA-COⅡ基因采用最大似然法构建种系发生树,分析微小按蚊变异地位和进化关系。结果1)云南元江微小按蚊rDNA-ITS2扩增片段约700 bp,其他微小按蚊为480 bp左右;2)ITS2和D3序列分析显示3种单倍型,其中元江微小按蚊基因长度与碱基组成显著不同;3)mtDNA-COⅡ种系发生树显示元江微小按蚊与其他微小按蚊的亲缘关系较远。结论我国存在微小按蚊A和C之外的新的微小按蚊亲缘种。

桂南与桂西两地微小按蚊杂交试验

对桂南和桂西两地微小按蚊进行杂交试验。发现两地微小按蚊杂种后代都能育，杂种Ｆ１卵巢营养细胞多线染色体未见有恒定不联会区。证明桂南和桂西两地微小按蚊不存在生殖隔离，是同种。

尼日利亚南部阿贝奥库塔地区冈比亚按蚊复合体的形态特征研究(双翅目：蚊科)

对采自尼日利亚南部城市阿贝奥库塔冈比亚按蚊复合体Anopheles gambiae complex的形态特征进行了研究。依据2005年8月至2006年7月灯诱捕获的364个冈比亚按蚊复合体标本,分别对它们的触角、翅、喙、前足、中足和后足6个部位的长度进行了测量,对月平均值进行回归分析,同时利用差异系数(coefficient of difference,CD)进行近缘分析。分析显示,各特征的长度平均值雨季大于旱季,但是回归分析表明长度变化与季节不显著相关(P>0.05)。差异系数分析结果表明,仅触角长度和翅长显示此复合体为两个不同的种群(CD>1.28),而其他特征值表明为同一种群。因此,该研究结果提示触角长度及翅长对冈比亚按蚊复合体近缘种的区分有重要参考价值。

云南省库态按蚊复合体的亲缘种型研究(双翅目,蚊科)(英文)

库态按蚊是1个由5种亲缘种型组成的按蚊复合体,这些种型分别被命名为A、B、C、D 和 E 型。在使用PCR 检测还没有条件的地区,鉴定库态按蚊亲缘种型的一个重要方法是作染色体组型分析。使用库态按蚊幼虫作染色体涂片,对云南地区的库态按蚊种型作了初步研究,并首次报道了该地区存在的亲缘种型成员,认为在云南省库态按蚊 A型和 B 型在同一个地区并存。同时,还展示了库态按蚊复合体的染色体组型、核型模式图及种型在中国毗邻国家的分布地图。