血液病患者产生抗HLA抗体的危险因素分析

目的在造血干细胞移植前的血液病患者中,探究抗人类白细胞抗原(human leucocyte antigen,HLA)抗体产生的危险因素。方法收集2016-2018年间本院1008名血液病患者在移植前采用Luminex技术平台进行抗HLA抗体检测的结果及临床数据,并对其进行统计学分析。结果1008名患者的抗HLA抗体总体阳性率为24.08%。多因素分析显示,与抗HLA抗体产生相关的独立危险因素包括年龄≥30岁(P=0.046,OR 1.467,95%CI 1.007-2.136)、疾病确诊至抗体检测的时间≥41d(P=0.000,OR 1.830,95%CI 1.306-2.565)、初诊PLT计数<20×109/L(P=0.020,OR 1.543,95%CI 1.072-2.220)、有妊娠史(P=0.000,OR 5.187,95%CI 3.689-7.293)、入院前有输血史(P=0.001,OR 1.762,95%CI 1.257-2.470)和入院后PLT输注总量≥30U(P=0.000,OR 2.352,95%CI 1.638-3.376)。其中年龄≥30岁(P=0.023,OR=1.839,95%CI 1.088-3.108)、妊娠史(P=0.042,OR=5.258,95%CI 1.062-26.038)分别与抗HLA-Ⅰ类、Ⅱ类抗体的产生有关;疾病确诊至抗体检测时间≥41d(P=0.000,OR=2.873,95%CI 1.612-5.119)、初诊PLT计数<20×109/L(P=0.008,OR=2.164,95%CI 1.225-3.822)、妊娠史(P=0.002,OR=6.734,95%CI 1.993-22.751)、入院前的输血史(P=0.001,OR=2.746,95%CI 1.531-4.925)、入院后PLT输注>30U(P=0.006,OR=3.459,95%CI 1.416-8.451)与抗HLA-Ⅰ+Ⅱ类抗体的产生有关。结论年龄较大、病程较长、PLT计数较低、有妊娠史和输血史、PLT输注总量较多,均是影响抗HLA抗体产生的危险因素。因此,对移植前血液病患者宜根据情况检测抗HLA抗体,这对于指导供者选择、监测抗体变化和改善移植预后具有重要价值。

mDRA-6与尼美舒利对人肝癌细胞系SMMC-7721细胞的协同杀伤效应

背景与目的:mDRA-6为本实验室制备的具有肿瘤细胞杀伤作用的抗人死亡受体5(death receptor5,DR5)的单克隆抗体,尼美舒利作为特异性环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)抑制剂,近年来发现其对某些肿瘤细胞系的细胞具有促凋亡作用,本研究探讨mDRA-6与尼美舒利对肝癌细胞系SMMC-7721的杀伤作用,及二者有无协同效应。方法:流式细胞术检测细胞表面DR5的表达率;分别用一定浓度的mDRA-6、尼美舒利、mDRA-6联合200μmol/L尼美舒利处理SMMC-7721细胞,MTT法检测细胞毒性作用,Hoechst33258染色观察SMMC-7721细胞核形态变化,流式细胞术定量分析凋亡细胞率。结果:SMMC-7721细胞表面DR5的表达率为95.0%,mDRA-6能够诱导SMMC-7721细胞凋亡,存在浓度依赖性(r=0.984,P=0.002),25ng/mL作用12h可杀伤10.5%的细胞,1600ng/mL作用12h可杀伤35.0%的细胞。尼美舒利能够诱导SMMC-7721细胞凋亡,200μmol/L作用12h可使5.0%的细胞凋亡,800μmol/L作用12h可杀伤34.0%的细胞,存在浓度依赖性(r=0.929,P=0.002)。尼美舒利与mDRA-6联合对SMMC-7721细胞具有协同杀伤作用(q=1.23),200μmol/L的尼美舒利协同25ng/mL与1600ng/mL的mDRA-6作用12h可分别杀伤31.2%与91.1%的SMMC-7721细胞,Hoechst33258染色和Annexin V/PI染色证实杀伤作用是通过诱导细胞凋亡实现的。结论:mDRA-6与尼美舒利均有杀伤SMMC-7721细胞的作用,二者具有协同作用,该作用是通过诱导凋亡实现的。

利用bcl-2抗Fas凋亡特性联合Fas抗体促进人鼠嵌合肝中人肝细胞的增殖

目的移植bcl-2转基因HepaRG细胞到小鼠体内,并联合使用Jo2抗体诱导鼠肝细胞凋亡策略,促进人鼠嵌合肝中人肝细胞的增殖。方法SCID鼠经脾移植2×106bcl-2转基因HepaRG细胞,移植后1d始腹腔注射0.2mg/kgJo2抗体,每周1次,持续10周为实验组;移植未转染bcl-2基因的HepaRG细胞,同样给予Jo2抗体腹腔注射为对照1组,移植未转染bcl-2基因的HepaRG细胞,未腹腔注射Jo2抗体为对照2组,建立人鼠嵌合肝动物模型。从2周开始,后4、8、12、16、20、24周,分别采用免疫组化、免疫荧光和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测不同时相点实验组和对照组嵌合肝中肝组织人清蛋白以及人清蛋白mRNA,并用酶联免疫法(ELISA)定量检测鼠血清人清蛋白的含量。结果实验组和对照组小鼠均能存活至24周,鼠肝组织和血清中均能检测到清蛋白的表达。实验组肝组织和血清人清蛋白的表达均可持续到24周,人血清清蛋白高峰值为95.32ng/mL,出现在16周;而对照1组肝组织和血清人清蛋白的表达可持续到20周,人血清清蛋白高峰值为42.37ng/mL,出现在12周;对照2组肝组织和血清人清蛋白的表达可持续到12周,人血清清蛋白高峰值为22.91ng/mL,出现在8周。结论利用bcl-2抗Fas凋亡特性,转染bcl-2基因的HepaRG细胞移植并联合小剂量Jo2抗体腹腔注射SCID鼠,有利于人鼠嵌合肝中人肝细胞的增殖和存活。

mDRA-6与尼美舒利对Jurkat细胞的杀伤效应

目的:探讨mDRA-6与尼美舒利对Jurkat细胞有无杀伤作用及二者有无协同效应。方法:常规培养Jurkat细胞,流式细胞术检测细胞表面DR5的表达率,MTT法检测细胞毒性作用,Hoechst33258染色观察Jurkat细胞核形态变化,流式细胞术定量分析凋亡细胞率。结果:①Jurkat细胞表面DR5的表达率为84.83%。②mDRA-6与尼美舒利均能杀伤Jurkat细胞,存在浓度依赖性。400μmol/L的尼美舒利作用细胞10小时,细胞凋亡率为11.51%;0.5ng/ml与1ng/ml的mDRA-6作用细胞10小时,细胞凋亡率分别为3.67%和6.3%;③二者联合具有较好的协同促凋亡作用,400μmol/L的尼美舒利联合0.5ng/ml与1ng/ml的mDRA-6作用细胞10小时,细胞凋亡率分别为50.38%和63.79%。结论:mDRA-6与尼美舒利均有杀伤Jurkat细胞的作用,二者具有较强的协同作用,杀伤作用是通过诱导凋亡实现的。

抗BST-1抗体刺激介导的髓系细胞酪氨酸磷酸化及FcyR表达的研究

目的 探讨髓系细胞表面BST 1(骨髓基质细胞抗原 1) /CD15 7分子能否作为一受体介导信号传导和调节细胞表面FcγR的表达。方法 制备兔抗人BST 1多克隆抗体及其F(ab’) 2 片段 ,以其刺激U937细胞后 ,用免疫沉淀及免疫印迹法研究胞内蛋白酪氨酸磷酸化水平的变化 ;用FACS法检测细胞表面FcγR的表达。结果 抗人BST 1抗体刺激U937细胞可介导胞内多种蛋白的酪氨酸磷酸化水平增高 ,包括Mr 为 12 0× 10 3 的c cbl原癌蛋白 ;并可下调细胞表面CD6 4的表达。抗BST 1抗体的这些作用呈抗体Fc段依赖性。结论 髓系细胞表面BST 1分子可作为一受体介导细胞信号传导 ;抗BST 1抗体刺激U937细胞可下调其表面CD6

人源化抗Siglec-9抗体Fab片段的制备及鉴定

目的:构建人源化抗Siglec-9抗体Fab段原核表达质粒,表达、纯化此抗体以及特性分析,并初步探讨此抗体的生物学功能。方法:利用聚合酶链式反应(PCR)分别获得抗体轻链和重链的可变区及恒定区,经重叠延伸PCR连接,酶切后与原核表达载体p ETDUET-1重组,转入表达感受态Escherichia coli BL21中,通过蛋白纯化系统AKTA和His-trap Lambda Fab纯化。使用SDS-PAGE、ELISA以及Western blot鉴定和分析。采用实时荧光定量PCR初步检测抗Siglec-9抗体Fab段对炎性细胞因子TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8的mRNA表达量的影响。结果:成功获得抗体轻链和重链,构建人源化抗Siglec-9抗体Fab段原核表达系统,经SDS-PAGE、Western blot、ELISA检测证实抗Siglec-9抗体Fab段与Siglec-9抗原特异性结合。抗Siglec-9抗体Fab段可抑制炎性细胞因子TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8的mRNA表达量。结论:人源化抗Siglec-9抗体Fab段进行了原核系统表达、纯化和鉴定,并初步验证可抑制炎性细胞因子的mRNA表达量,为进一步研究该抗体的生物学特性及应用奠定基础。

不同剂量静注人免疫球蛋白(pH4)对川崎病合并冠状动脉损伤患儿外周血CD4^+CD25^+调节性T细胞、TGF-β、IL-10、MMP-9、AECA、ANCA表达的影响

目的探讨不同剂量静注人免疫球蛋白(pH4)对川崎病合并冠状动脉损伤患儿外周血CD4^+CD25^+调节性T细胞、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)、白介素-10(interleukin-10,IL-10)、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinases-9,MMP-9)、抗内皮细胞抗体(anti endothelial cell antibody,AECA)、抗中性粒细胞胞质抗体(antineutrophil cytoplasmic antibody,ANCA)的影响。方法选择2014年1月至2018年1月本院收治的62例川崎病合并冠状动脉损伤的患儿为研究对象,采用随机数表法将其分为观察组(31例)和对照组(31例)。对照组患儿采用常规剂量静注人免疫球蛋白(pH4)联合阿司匹林治疗,观察组患儿采用大剂量静注人免疫球蛋白(pH4)联合阿司匹林治疗,比较两组患儿治疗前后CD4^+CD25^+调节性T细胞、TGF-β、IL-10、MMP-9、AECA、ANCA水平。结果治疗后,两组患儿CD4^+CD25^+调节性T细胞及TGF-β水平均显著高于治疗前(P均<0.05),MMP-9、AECA、ANCA、IL-10水平均显著低于治疗前(P均<0.05)。观察组患儿CD4^+CD25^+调节性T细胞及TGF-β水平均显著高于对照组(P均<0.05),MMP-9、AECA、ANCA、IL-10水平均显著低于对照组(P均<0.05)。结论 CD4^+CD25^+调节性T细胞、TGF-β、IL-10、MMP-9、AECA、ANCA参与了川崎病合并冠状动脉损伤的发生发展,监测其水平变化对预测患儿早期冠状动脉损伤具有重要意义,大剂量静注人免疫球蛋白(pH4)有利于改善患儿机体免疫功能和炎症状态。

SLE患者血清对人脐静脉内皮细胞ICAM-1和MCP-1表达的影响及氟伐他汀的干预作用

目的:观察抗核抗体(ANA)和抗ds-DNA抗体对人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)表达的影响及他汀类药物氟伐他汀(fluvastatin,flu)干预后的变化,以探讨ANA和抗ds-DNA抗体在系统性红斑狼疮(SLE)血管炎中的致病机制和flu对血管内皮保护作用。方法:体外培养HUVEC,收集女性SLE患者血清(以抗核抗体全套为依据,分3组:ANA阴性、ANA滴度1:80、ANA滴度1:80和抗ds-DNA抗体均阳性的患者每组各5例)及女性健康对照者血清作为干预因素,分为空白对照组、正常对照组、SLE血清组1、2、3和SLE血清与氟伐他汀共同干预组。应用免疫细胞化学和双抗体夹心ELISA法检测不同干预因素对HUVECICAM-1和MCP-1的蛋白表达影响。结果:正常对照组和SLE血清组1与空白对照组相比,ICAM-1和MCP-1蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05);SLE血清组2和SLE血清组3的ICAM-1与MCP-1表达高于正常对照组和SLE血清组1(P均<0.01)。氟伐他汀(1×10-5mol/L)能显著降低SLE血清组2和SLE血清组3刺激的HUVEC表达ICAM-1与MCP-1(P<0.01,P<0.05)。结论:ANA阳性(滴度为1:80),尤其是ANA和抗ds-DNA抗体均阳性的SLE血清可激活HUVEC,使其细胞内和细胞培养上清液中ICAM-1和MCP-1的蛋白表达增加;ANA阴性的SLE血清不能激活HUVEC,不能使其细胞内和细胞培养上清液中ICAM-1和MCP-1的蛋白表达增加。氟伐他汀可下调激活的HUVEC表达ICAM-1和MCP-1。

单抗LC-1与针对的人肺腺癌SPC-A-1细胞肿瘤相关抗原复合物的内化研究

我们运用抗人肺癌单抗LC-1结合胶体金免疫电镜技术研究了人肺腺癌SPC-A-1细胞表面抗原抗体复合物被内吞的全过程,发现该细胞表面抗原抗体复合物是通过受体介导内吞途径被内化,经多泡体富集后至溶酶体消化降解。此外我们还用流式细胞仪分析了内吞前后该细胞表面抗原量的变化和短期内的恢复情况。LC-1在诱发该细胞表面抗原内化的同时还诱发了它对该核糖体的自噬。

再生障碍性贫血患者免疫调节剂治疗前后TNF和IL-2水平变化及意义

为了探讨再生障碍性贫血(AA)的免疫发病机理及抗T淋巴细胞单克隆抗体(McAb-T)的免疫调节治疗作用,采用放射免疫分析法检测30例AA患者McAb-T治疗前后血清肿瘤坏死因子(TNF)和白细胞介素-2(IL-2)水平及其中10例AA外周血单个核细胞(PBMNC)体外诱生TNF和IL-2水平的变化。结果表明,治疗前AA患者血清TNF水平显著增高(p<0.01),PBMNC诱生的TNF和IL-2水平均明显高于正常对照(p<0.01)。治疗后血清TNF和PBMNC诱生的TNF和IL-2水平降低,与对照组比较无显著差异(p>0.05)。提示AA患者存在造血调控因子分泌异常,McAb-T对TNF和IL-2能发挥特异性的免疫调节作用。

维甲酸与星状孢子素联合分化诱导HL-60细胞过程中酪氨酸蛋白质磷酸化系统的变化

以人早幼粒白血病细胞株（HL-60）为材料，对维甲酸与星状孢子素联合诱导HL-60细胞过程中胞浆和膜部分的蛋白质酪氨酸磷酸化水平变化进行了研究．结果表明，诱导后2～24h范围内，TPK活力出现波动，随时间延长（24～27h），胞浆部分TPK活力下降，膜溶脱部分TPK活力上升；PTPP活力明显升高且上升幅度比TPK大得多．利用抗P-tyr-BSA抗体分析底物含量变化的结果与相应时相的TPK和PTPP活力变化趋势一致．

4例抗核抗体人喉癌上皮细胞核型AC-29患儿的病例分析

为探讨人喉癌上皮细胞DNA拓扑异构酶Ⅰ型(AC-29)病例的临床特点,回顾性分析南京医科大学附属儿童医院4例AC-29核型患儿的临床特征。结果显示,2020年1月至2021年12月期间南京医科大学附属儿童医院共检测自身抗体阳性血清样本14213例,其中4例抗核抗体(间接免疫荧光法)核型为AC-29。AC-29是近年新定义的一类核型,正确识别对疾病早期的诊断有一定提示意义。

多种肿瘤传代细胞中lg样物质存在与检测

目的：探讨lg样物质是否在多种肿瘤细胞内存在广泛的表达，筛选出lg样蛋白高表达细胞株。方法：通过免疫组织化学方法（直接法、APAAP法），分别用抗人IgG多克隆抗体、抗人IgG重链、轻链单抗，对乳腺癌（T47－D、MCF－7）、大肠癌（HT－29、HCT－8）、卵巢癌（SKOV3、Ca）、肺癌（A549）、口腔上皮样癌（A431）、肝癌（BC－7402）、宫颈癌（S3、MR）等上皮性恶性肿瘤及部分造血系统肿瘤传代细胞（Ran、HL－60、K562）的胞浆内屹样物质进行了检测。结果：当用抗人IgG多抗进行检测时，所有的上皮性恶性肿瘤细胞同阳性对照（杂交瘤）一样，都呈阳性反应；而在造血系统肿瘤中，除Ran细胞呈弱阳性反应外，K562、HL－60为阴性反应。用抗人IgG轻、重链单抗进行APAAP法检测时，所得结果基本同直接法，但在上皮性恶性肿瘤细胞株中显示了明显的阳性强度差异，如：HeInMR、CaOV3、MCF－7、T47－D、对抗人IgG重链单抗呈强阳性反应；而HCT－8、A549、A431、BCL－7402、等细胞株为弱阳性，SKOV3则为阴性。抗人IgG。链阳性率高于λ链。结论：Ig样物质在所检测的上皮性恶性肿瘤传代细胞系中存在广泛的表达。

上皮生长因子及其抗体对人癌细胞系生长的影响

本研究观察了上皮生长因子(EGF)抗EGF抗体和抗EGF受体抗体对3个目建的人胰腺癌细胞系(PC-1,PC-2,PC-3)和3个其它人癌细胞系(肺腺癌LETP,乳腺癌BCP37和胃腺癌SGL7901)生长的影响。结果表明:EGF仅对PC-1和LETP2个细胞系有轻度刺激生长的作用,对其它4个细胞系无明显作用。在有EGF存在的条件下,抗EGF抗体和抗EGF受体抗体对PC-1,LETP和SGL7901 3个细胞系有生长抑制作用。 用Northern核酸杂交技术研究表明这6个人癌细胞系中均有EGF受体mRNA的表达。结果表明:虽然这些细胞系中均有EGF受体的基因表达,但不一定对外源性EGF处理有反应。

小细胞性肺癌患者检测抗纺锤体抗体和抗着丝点抗体的临床意义

目的:研究抗纺锤体(MSA)和抗着丝点(ACA)抗体检测对诊断小细胞性肺癌(SCLC)的临床价值,为SCLC的分子研究提供临床依据。方法:对93例SCLC患者和208例非小细胞性肺癌(NO-SCLC)患者及50例健康体检者,用酶联免疫法定量检测MSA抗体,间接免疫荧光法定性检测MSA、ACA和抗核抗体(ANA),并对其结果进行回顾性分析。结果:1IIF法检测SCLC组MSA和ACA阳性率为36.56%和30.11%,均高于其他肿瘤组(P<0.01)。2相关性分析,MSA与SCLC的RR值高达12.93、12.74,ACA和ANA与SCLC的RR值为4.31和3.48。3MSA检测SCLC的ROC曲线下面积AUC为0.778,诊断价值中等。结论:MSA和ACA对SCLC有很强正相关危险因素,可能参与SCLC的发生发展,对SCLC的早期检测、临床诊断及潜在的治疗方法有一定的应用价值。

抗Fas抗体诱导人肾小球系膜细胞凋亡

目的：研究抗Ｆａｓ抗体对人肾小球系膜细胞的致凋亡作用，探讨ＦａｓＦａｓＬ在肾脏损伤中的作用。方法：常规方法分离、培养人肾小球系膜细胞（Ｍｃｓ），并传代鉴定，用不同浓度的抗Ｆａｓ抗体（０，２，５，１０μｇ／ｍｌ）刺激４～６代Ｍｃｓ１６ｈ后，荧光染色观察Ｍｃｓ凋亡变化，二苯胺法和ＤＮＡ凝胶电泳方法定量和定性分析ＭｃｓＤＮＡ片段化变化。结果：抗Ｆａｓ抗体可诱导Ｍｃｓ凋亡，且致凋亡效应呈依赖性关系。结论：ＦａｓＦａｓＬ系统在Ｍｃｓ凋亡中起着重要作用。

系统性红斑狼疮患者血清抗内皮细胞抗体和抗β_2糖蛋白I抗体水平及其对人脐静脉内皮细胞增殖的影响

目的:检测抗内皮细胞抗体(AECA)和抗β2GP-Ⅰ抗体在SLE患者血清中的水平及探讨AECA对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖的影响。方法:收集系统性红斑狼疮(SLE)患者90例和正常对照40例,留取血清,经酶联免疫吸附法(ELISA)检测AECA和抗β2GP-Ⅰ抗体水平。收集SLE患者部分临床指标,分析AECA和抗β2GP-Ⅰ抗体水平与临床指标间的关系。将不同浓度AECA的SLE患者血清加入HUVEC培养基,应用四唑盐比色试验(MTT)法检测各组OD值判断内皮细胞增殖状态。结果:SLE患者血清中AECA和抗β2GP-Ⅰ抗体水平显著高于正常对照组(P<0.01)。在90例SLE患者中33例抗β2GP-Ⅰ抗体阳性,该33例SLE患者对应的AE-CA、APTT水平和SLE活动评分(SLEDAI)积分均显著高于其余57例SLE患者(P<0.01,P<0.05,P<0.05)。同时该33例患者AECA和抗β2GP-Ⅰ抗体水平呈高度正相关(r=0.984,P<0.01),AECA和抗β2GP-Ⅰ抗体水平均与SLE-DAI呈正相关(P<0.05),抗β2GP-Ⅰ抗体水平与凝血酶原时间(PT)间存在正相关(r=0.349,P<0.05)。空白对照组、健康对照血清组和低浓度AECA血清组间OD值无差异,而高浓度AECA血清组OD值显著低于以上3组(P<0.05)。结论:AECA和抗β2GP-Ⅰ抗体与SLE疾病活动相关,AECA在体外对HUVEC增殖有抑制作用。

细胞ELISA检测血清抗内皮细胞抗体

用培养的人脐带静脉内皮细胞作为抗原，经ＥＬＩＳＡ检测了ＳＬＥ患者血清抗内皮细胞抗体，目的在于建立ＥＬＩＳＡ检测抗内皮细胞抗体的方法，并与细胞毒试验作了比较。结果表明，ＥＬＩＳＡ及细胞毒试验检测抗内皮细胞抗体，阳性率分别为７３％和５１％，差异显著（ｘ２＝４．２，Ｐ＜０．０５）；阳性血清用红细胞及淋巴细胞吸收后，抗内在细胞抗体活性无明显降低，提示该法特异、灵敏、且重复性较好，可进行大批量标本筛选，为研究抗内皮细胞抗体特性及其致病作用提供了便利条件。

产前、术前及输血前患者5种传染性指标的检测及意义

目的了解产前、术前及输血前患者5种传染性指标的感染情况,预防与避免医院感染及医疗纠纷。方法采用化学发光微粒子免疫分析(CMIA)技术对2011年8月至2012年1月产前、手术及输血前4 553例患者行乙肝表面抗原(HBsAg)、丙肝病毒抗体(抗-HCV)、人类免疫缺陷病毒抗体(抗-HIV)、梅毒螺旋体抗体(抗-TP)及人类T淋巴细胞白血病病毒抗体(抗-HTLV)检测,并对其结果进行分析。结果 5种指标的阳性率分别为HBsAg 11.55%、抗-HCV 0.46%、抗-HIV 0.04%、抗-TP 2.28%和抗-HTLV 0.11%。结论对产前、术前及输血前患者进行相关传染性指标的检测具有重要的意义。一方面可以全面了解患者的感染情况以减少医疗纠纷的可能性,另一方面可降低医务人员发生院内感染的机会。

抗人CD28激发性单抗对T细胞淋巴瘤的抑制作用研究

目的:研究鼠抗人CD28单克隆抗体(克隆号:2F5)对T淋巴细胞瘤的抗肿瘤效应,为抗体介导肿瘤靶向治疗提供新的方法和思路。方法:流式细胞术检测鼠抗人CD28单克隆抗体2F5对人T淋巴瘤细胞株Jurkat细胞表面膜型CD28分子的识别;MTT法检测2F5对Jurkat细胞体外增殖的影响;将Jurkat细胞株接种于裸鼠腋下,建立Jurkat细胞荷瘤裸鼠模型;经瘤内多点注射2F5(注射剂量1μg/mm3),逐日观察肿瘤的大小和裸鼠的生存状态。结果:2F5能够识别Jurkat细胞表面CD28分子,阳性结合率可达93.37%;2F5与Jurkat细胞共培养后,显微镜下观察可见胞质中出现黑色颗粒,胞膜破裂,细胞的折光性和立体感减弱;MTT法分析结果显示,抗CD28单抗对Jurkat细胞的体外增殖具有明显的抑制作用;将Jurkat细胞接种35只裸鼠(成瘤率达70%);经瘤内多点注射2F5,35天后荷瘤小鼠体内肿瘤的生长速率明显降低;而生理盐水对照组肿瘤生长无明显改变。结论:鼠抗人CD28单克隆抗体2F5通过与Jurkat细胞表面膜型CD28分子结合对其增殖具有明显的抑制作用,提示CD28分子可作为治疗T淋巴瘤的一个潜在靶点,抗体对治疗CD28分子阳性的肿瘤具有潜在临床应用价值。