IL-4、IL-10和抗IL-12受体β1mAb抑制IL-23诱导正常人记忆T细胞IFN-γ产生

目的探讨重组人白介素23(IL23)是否能够诱导正常人T细胞IFNγ的产生,作用的靶细胞亚群和调节因素。方法正常人PBMC在抗CD3(antiCD3)单克隆抗体或antiCD3和抗CD28(antiCD28)单克隆抗体刺激的条件下与IL23进行培养,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养液中IFNγ的水平;同时采用流式细胞仪,在单个细胞水平上分析IL23诱导PBMCIFNγ表达的T细胞亚群。结果在未经任何刺激的情况下,PBMC产生很低或不产生IFNγ。IL23呈剂量依赖方式促进由antiCD3活化的PBMCIFNγ产生。细胞亚群分析的结果表明,IL23诱导记忆CD4+和CD8+T细胞表达IFNγ,对活化的CD4+T细胞作用较为明显。Th2细胞因子(IL4、IL10)和抗IL12受体β1mAb(IL12Rβ1)抑制IL23诱导T细胞IFNγ产生。结论IL23促进活化的记忆CD4+和CD8+T细胞IFNγ的产生。Th2细胞因子和抗IL12Rβ1mAb抑制由IL23诱导IFNγ产生,提示这些细胞因子和抗体对IL23引起的自身免疫病具有拮抗作用。

细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4 Ig和anti—CD154单抗在移植中的研究进展

细胞毒性T淋巴细胞相关抗原（CTLA）-4 Ig和anti—CD154单抗是目前器官移植的新型生物免疫抑制剂。两者均通过阻断协同刺激信号来抑制T淋巴细胞的活化，从而起到免疫耐受作用，在器官移植中有很好的应用前景。CTLA-4 Ig和anti—CD154单抗在动物模型实验中研究发现单用或联用有长久强效的免疫耐受作用能延长移植物的存活期。在临床中的应用尚处于初期，其临床副作用、安全性及长期的疗效有待进一步观察。

NKG2D mAb对自发性NOD小鼠同种胰岛移植的作用研究

目的探讨NKG2D mAb能否单独作为共刺激信号阻断剂延长自发性非肥胖型糖尿病(NOD)小鼠移植移岛的有功能存活期;NKG2D mAb和CD154 mAb是否有协同作用。方法将分离、纯化的BABL/c小鼠胰岛植入自发糖尿病的NOD小鼠左肾包膜下,移植成功的小鼠分成4组:对照组,NKG2D mAb治疗组,CD154 mAb治疗组和联合治疗组(NKG2D mAb+CD154 mAb)。通过小鼠尾静脉血监测血糖,记录胰岛移植物有功能存活期;胰岛移植物所在肾脏行HE染色和CD3、CD4、CD8免疫组织化学染色。结果 NKG2D mAb治疗组移植物有功能存活期无延长(5~11 d,对照组6~11 d,两者差异无统计学意义),CD154 mAb治疗能明显延长移植物有功能存活期〔20~64 d,中位期41 d,和NKG2D mAb治疗组及对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)〕,联合治疗组较CD154 mAb治疗能延长移植物有功能存活期(23~84 d,中位期51 d,但差异无统计学意义)。各组发生排斥时胰岛移植所在肾脏均见淋巴细胞浸润,CD3、CD4、CD8染色结果无明显差异。结论 CD154 mAb能明显延长NOD小鼠胰岛移植物有功能生存期;单独使用NKG2D mAb治疗,不能延长胰岛移植物有功能生存期;联合治疗有效,但仍不能诱导移植物长期存活。

Th17细胞在胰岛移植中的作用

目的研究Th17细胞在胰岛移植免疫排斥反应中的作用,探讨IL-23R抗体联合应用Anti-CD154mAb诱导胰岛移植免疫耐受的可行性。方法体外实验分为5组:空白对照组,SD大鼠胰岛细胞单独培养;A组,大鼠胰岛细胞混合淋巴细胞培养,不加IL-23R抗体;B、C、D组,将大鼠胰岛细胞混合淋巴细胞培养,分别加IL-23R抗体0.1μg/mL、0.5μg/mL、1.0μg/mL。作细胞甩片后,行丫啶橙(AO)/碘化丙啶(PI)荧光染色、胰岛素和胰高血糖素免疫组化染色、胰岛素刺激实验。体内实验(将分离纯化的胰岛移植于小鼠左肾包膜下)分成4组:对照组,胰岛移植后不予任何干预;IL-23R抗体(200μg)治疗组;Anti-CD154mAb(200μg)治疗组;联合治疗组。监测移植后小鼠血糖,取移植肾作HE染色及胰岛素、胰高血糖素免疫组化染色。结果共培养3 d后,在胰岛素刺激实验中,空白对照组的葡萄糖刺激指数为3.66±0.10,与A、B、C、D组相比升高(P<0.05)。D组刺激指数高于其他各组,达到1.95±0.75。胰岛素和胰高血糖素免疫组化染色,体外和体内实验显示各实验组移植物有功能存活明显好于对照组。移植3 d后,对照组血糖与各实验组相比升高(P<0.05),各实验组血糖比较无明显差异。结论 Th17细胞参与了胰岛移植的免疫排斥反应。通过阻断IL-23R能有效的下调IL-17的表达,阻断效果呈剂量依赖性。Anti-CD154mAb和IL-23R抗体联合应用能在一定程度上防止胰岛移植物的急性排斥反应,但与单独使用Anti-CD154mAb治疗相比无明显差异。