抗-PP1P^(k)的血清学特性探究及P血型相关文献分析

目的本研究旨在深入了解抗-PP1P^(k)的血清学特性,探索小p血型孕妇顽固性流产的可能性治疗方法。方法通过使用鸽子蛋清、人血浆中和法;2-巯基乙醇试剂破坏IgM抗体;添加补体成分等方法对抗-PP1P^(k)进行探究。在不同处理条件、不同介质、不同温度下测定抗-PP1P^(k)的效价,研究人血清对抗-PP1P^(k)及其致敏补体能力的中和作用。结果所采用抗-PP1P^(k)在盐水和柱凝集中的效价分别为4和8,低温会使抗-PP1P^(k)效价增高,2-巯基乙醇破坏会明显降低其效价。鸽子蛋清可以部分中和抗-PP1P^(k)。人血浆同样可以降低抗-PP1P^(k)的效价,其中和能力高于鸽子蛋清,且中和能力存在个体差异。结论抗-PP1P^(k)是1种IgM和IgG并存、冷性、可以激活补体的混合抗体。人血浆可以有效降低抗-PP1P^(k)效价以及激活补体的能力,输注中和能力高的血浆有望成为治疗p表型孕妇习惯性流产的新方法。

用p[Tj(a-)]外周血淋巴细胞建立抗-PP1P^(k)杂交瘤细胞株

目的建立分泌抗-PP1P^(k)(又称抗-Tj^(a))的淋巴母细胞样细胞系(lymphoblastoid cell line,LCL)和单克隆杂交瘤细胞株。方法无菌条件下常规方法制备p[Tj(a-)]血型献血者外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cells,PBMC),用EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)转化单个核细胞中的B淋巴细胞,使其增殖形成B淋巴母细胞样细胞克隆。用菠萝酶处理的正常AB型和O型红细胞以及p[Tj(a-)]红细胞筛选培养上清,通过显微吸引分离技术获得分泌特异性抗-PP1P^(k)的LCL,与SHM-D33骨髓瘤细胞进行融合。异源杂交瘤细胞经次黄嘌呤(H)-氨基蝶呤(A)-胸腺嘧啶(T)-脱氧胞嘧啶核苷(D)-毒毛旋花苷(O)即HOTD培养基选择性培养、抗体筛选以及有限稀释亚克隆,建立分泌特异性抗体的单克隆杂交瘤细胞株。结果从O型p[Tj(a-)]献血者外周血B淋巴细胞EBV转化细胞培养上清中,初筛得到与正常红细胞全部凝集,与p[Tj(a-)]红细胞不凝集的单个淋巴母细胞样克隆5E1-E5,初步鉴定培养上清具有抗-PP1P^(k)特异性。随后利用杂交瘤技术,将5E1-E5细胞与SHM-D33骨髓瘤细胞进行融合,建立了持续稳定分泌IgM抗-PP1P^(k)的单克隆杂交瘤细胞株。结论本研究通过EBV转化和杂交瘤技术建立了分泌抗-PP1P^(k)的人单克隆细胞株,这项工作使大规模筛选稀有p[Tj(a-)]血型成为可能,对我国稀有血型库的建设具有重要意义。

罕见IgG抗PP1P^(K)致新生儿溶血病1例

新生儿溶血病(hemolytic disease of the new born,HDN)主要是指母婴血型不合引起的同种免疫性溶血病。临床上以ABO血型不合引起的HDN最为常见,其次为Rh和MNS两个血型系统[1-2]。抗-PP1P^(K)能引起严重的溶血性输血反应、早期习惯性流产和HDN[3-5],具有十分重要的临床意义。抗-PP1P^(K)属于高频抗原抗体,在中国人群中非常罕见,由此导致的HDN更为罕见。本文报道1例由罕见抗-PP1PKIgG引起的HDN,对产科、儿科医生进一步认识罕见HDN及其诊治具有一定的临床指导意义。

罕见p表型的分子生物学新特征及其多态性探讨

病例为A型、Rh(D)阳性的48岁男性献血者,在临床交叉配血过程中发现其作为供血者与多位ABO同型患者主侧配血结果均为阴性、次侧其血浆凝集所有人红细胞并严重溶血(4+H),而作为受血者则结果相反。进一步以盐水试管法及抗人球蛋白微柱凝胶法对样本血浆分别进行不规则抗体筛检和单特异性抗体鉴定,结果血浆与筛检细胞1~3及谱细胞1~10呈全阳性反应(4+H),但与人源p红细胞无反应。血浆中存在抗-P1P^(k)P抗体(IgG+IgM),效价1∶64。以单克隆抗-P1抗体检测红细胞P1抗原为阴性,表型为p。以Sanger法进行PA(α1,4-半乳糖基转移酶,A4GALT)和PB(β1,3-半乳糖基转移酶,B3GALNT)外显子测序,发现其P1PkP血型基因型为A4GALT^(*)241-243TTCdel/A4GALT^(*)241-243TTCdel,B3GALNT未出现突变。基因A4GALT241-243位点碱基TTC纯合子缺失突变是一种新的分子生物学特征,美国国家生物技术信息中心GenBank授予序列号OR900206。对相关文献报道进行回顾性分析发现p表型的基因突变呈现复杂多态性。在临床输血实践中,因其血浆中存在高效价能溶解所有非p型者红细胞并发生急性溶血性输血反应的抗-P1P^(k)P抗体(IgG+IgM),故不能输给p型之外任何人;红细胞经充分洗涤后可输给ABO且Rh(D)同型(或AB型)的任何人,如作为受者只能接受ABO同型或O型的p型红细胞。