Toll样受体4增强β2糖蛋白1免疫小鼠B细胞的活化

目的探讨Toll样受体4(TLR4)在β2糖蛋白Ⅰ(β2GP1)免疫的小鼠中,对B细胞活化过程的影响。方法将C3H/HeN(TLR4正常型)和C3H/HeJ(TLR4缺陷型)2种小鼠随机分为β2GP1免疫组和生理盐水对照组,分别注射β2GP1或等量的生理盐水进行免疫。采用皮下多点注射进行初次免疫,2次腹腔注射加强免疫,最后冲击免疫的方法免疫小鼠。采用间接ELISA检测小鼠血清中抗β2GP1抗体的效价;HE染色观察小鼠脾脏生发中心数量及大小的变化;免疫组织化学法观察脾脏生发中心内的CD40配体(CD40L)表达;流式细胞术检测小鼠脾脏B淋巴细胞中共刺激分子CD80和CD86的水平变化。结果经β2GP1免疫后,2种小鼠血清中均出现高效价的抗β2GP1抗体,且C3H/HeN血清效价高于C3H/HeJ小鼠。与生理盐水对照组相比,2种小鼠经β2GP1刺激后,CD40L、CD19+CD80+细胞和CD19+CD86+细胞的数量均显著增加;但C3H/He J小鼠CD40L,CD19+CD80+细胞和CD19+CD86+细胞的数量低于C3H/He N小鼠。经β2GP1刺激的小鼠脾脏生发中心,比生理盐水组更大更多,C3H/HeN小鼠的生发中心的数量多于C3H/HeJ小鼠。结论 TLR4增强β2GP1免疫小鼠B细胞的活化。

协同因子β_2-GPI的分离、纯化和鉴定

目的 进一步研究β2 糖蛋白Ⅰ (β2 GPI)、心磷脂 (CL)和抗心磷脂抗体 (aCL)三者之间的关系 ,以及 β2 GPI在aCL致血栓形成中所起的作用 ,从人血清中提纯 β2 GPI。方法 采用高氯酸沉淀血清中的杂蛋白 ,过DEAE纤维素层析柱和DEAESephadexA 5 0层析柱。 结果 经SDS PAGE测定纯化样品的分子量为 5 0KD ;经皮免疫小鼠后 ,小鼠血清中可检测到高滴度的aCL。结论 上述组合方法方便可行 ,为β2 GPI的进一步研究奠定了良好的基础。

重组人β2糖蛋白1第一结构域二聚体作为抗磷脂抗体综合征B细胞耐受原的初步探讨

目的:探讨重组人β2糖蛋白1第一结构域二聚体(rhβ2-GP1-DⅠ2)对重组人β2糖蛋白1(rhβ2-GP1)免疫小鼠β2-GP1特异性B细胞反应的抑制作用。方法:应用固相ELISA方法,检测静脉注射rhβ2-GP1-DⅠ2后免疫小鼠产生的抗β2糖蛋白1抗体(anti-β2-GP1)滴度及anti-β2-GP1产生水平比率;应用ELISPOT方法,检测静脉注射rhβ2-GP1-DⅠ2后免疫小鼠脾脏β2-GP1特异性抗体形成细胞(AFC)数量。结果:静脉注射rhβ2-GP1-DⅠ2后,与对照组比较,rhβ2-GP1免疫小鼠βanti-β2-GP1滴度明显降低(P<0.01),anti-β2-GP1产生水平比率下降,β2-GP1特异性AFC数量明显减少(P<0.01)。结论:静脉注射rhβ2-GP1-DⅠ2能够抑制rhβ2-GP1免疫小鼠β2-GP1特异性B细胞的反应能力。

抗磷脂综合征57例临床分析

目的分析抗磷脂综合征(antiphospholipid syndrome,APS)的临床表现、诊断及治疗,以提高本病的诊治水平。方法回顾性分析2004-2013年在本院诊断明确的57例APS患者的临床特征和免疫学特点。结果 57例中男性14例(24.6%),女性43例(75.4%),确诊时平均年龄(37±14)岁;原发性APS 21例(36.8%),继发性APS 36例(63.2%)。血栓发生率71.9%,血栓复发率41.5%,原发性APS的血栓复发率高于继发性APS(P<0.05);病态妊娠发生率63.3%。本组患者65.4%抗心磷脂抗体(anticardiolipin antibodies,ACL)阳性,71.9%抗β2-糖蛋白Ⅰ抗体阳性,42%血小板减少。在确诊APS前,43.9%被诊断为血栓事件,33.3%被诊断为自身免疫性疾病,8.8%被诊断为血小板减少。结论 APS临床表现以血栓形成、病态妊娠为主,免疫学特点为高滴度的ACL和(或)抗β2-糖蛋白Ⅰ抗体阳性。APS临床症状多样化导致其误诊率较高。

抗磷脂抗体与子痫前期关系的Meta分析

目的:综合评价抗磷脂抗体和子痫前期的关系。方法:对符合纳入标准的13篇文献用Review manager 4.2软件进行Meta分析,计算比值比(0R)、95%可信区间(95%CI)并进行异质性检验,评价发表偏倚并进行敏感性分析。结果:狼疮抗凝物(LA)、抗心磷脂抗体IgG、抗心磷脂抗体IgM、β2糖蛋白-Ⅰ抗体与轻、重度子痫前期相关性的合并OR值及95%CI分别为1.68(0.51,5.54),13.34(4.70,37.84);1.44(0.95,2.20),2.20(0.72,6.75);1.24(0.78,1.98),1.28(0.72,2.29);0.75(0.40,1.43),2.04(0.86,4.82)。结论:LA可能增加重度子痫前期的危险性,对预测子痫前期的妊娠结局有一定作用,有必要对LA进行筛查,更好的服务于子痫前期的诊断和治疗。

抗心磷脂抗体与不良妊娠结局的关系研究进展

抗磷脂抗体是一组可以与细胞表面上带负电荷的磷脂特异性结合的抗体,主要包括抗心磷脂抗体、狼疮凝固抑制物以及抗β2糖蛋白Ⅰ抗体。它们可引起一系列特征性临床症状,统称为抗磷脂综合征(APS),目前国际上对此已有较为一致的分类诊断标准。大量研究表明,抗心磷脂抗体与不孕、流产、死胎、子痫前期、胎盘功能不全等不良妊娠结局有关,但其具体致病机制尚未完全明确。但是也有研究者认为,抗心磷脂抗体并非引起不良妊娠结局的主要原因。综述抗心磷脂抗体与不良妊娠结局的相关性,以期今后的研究能够进一步优化实验设计,明确分类诊断标准,获得更权威可信的研究结果,更好地指导临床实践。

酶联免疫吸附试验与化学发光法在抗磷脂综合征患者检测中的应用价值

目的比较酶联免疫吸附试验(ELISA)与化学发光法(CLIA)在抗磷脂综合征(APS)患者检测中的应用价值。方法选取2019年1月至2020年12月延津县人民医院收治的68例APS患者为观察组,再选取同期延津县人民医院73名健康体检者为对照组。分别采用CLIA、ELISA检测抗心磷脂抗体(aCL)和抗β_(2)糖蛋白Ⅰ抗体(aβ_(2)GPⅠ)的免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白G(IgG)水平。比较两组上述指标。以临床结果为金标准,统计ELISA、CLIA诊断APS的检查结果及诊断效能。结果CLIA、ELISA检测观察组血清aCL和aβ_(2)GPⅠ的IgA、IgG、IgM水平均高于对照组(P<0.05)。经ELISA检出64例阳性、77例阴性,经CLIA检出70例阳性、71例阴性。CLIA诊断APS的灵敏度、准确度高于ELISA,漏诊率低于ELISA(P<0.05);CLIA诊断APS的特异度、误诊率与ELISA比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论CLIA和ELISA均可对APS患者进行诊断,但采用CLIA可提高诊断灵敏度、准确度,降低漏诊率。

不同亚型抗磷脂抗体在系统性红斑狼疮诊断中的价值

目的 探讨不同亚型（IgG、IgM和IgA型）抗心磷脂抗体（aCL）和抗β2糖蛋白1抗体（抗β2GP1抗体）,以及狼疮抗凝物（LA）在系统性红斑狼疮（SLE）诊断中的价值.方法 病例对照研究.2012年1月至2013年9月在北京协和医院风湿免疫科确诊为SLE的患者共100例（其中42例确诊为继发性抗磷脂综合征,SAPS）,44名健康对照者和32例除外SLE和抗磷脂抗体综合征（APS）的其他结缔组织病患者采用酶联免疫吸附法（ELISA）分别用IgA/G/M多亚型筛选试剂和IgA、IgG、IgM单亚型试剂检测aCL和抗β2GP1抗体,采用改良的稀释蝰蛇毒磷脂时间（dRVVT）检测狼疮抗凝物（LA）,并回顾分析SLE患者中抗磷脂抗体与APS临床表现的相关性.采用x2检验比较SLE组、健康对照组及其他结缔组织疾病组中抗磷脂抗体的阳性率,不同组间抗体浓度分布的比较采用独立样本Kruskal-Wallis检验.抗磷脂抗体与APS临床表现的相关性采用Spearman相关分析.在SLE组患者中,以APS的临床诊断作为金标准,采用四格表统计抗磷脂抗体对APS的诊断效能.结果 SLE组中IgG型aCL（x2=15.031,P＜0.001）,IgA/G/M型（x2=11.678,P =0.003）和IgA型（x2 =6.17,P =0.036）抗β2GP1抗体的阳性率高于健康对照组和疾病对照组,差异有统计学意义.IgA/G/M型（r=0.207,P=0.039）,IgG（r=0.230,P=0.021）和IgA型（r=0.217,P=0.030） aCL,IgA/G/M型（r=0.218,P=0.029）和IgA型（r=0.255,P=0.叭）抗β2GP1抗体,及LA（r =0.233,P =0.02）与血栓事件相关.IgA/G/M型抗β2GP1抗体（r=0.22,P=0.029）和LA（r=0.254,P=0.011）与病态妊娠相关.aCL阳性的SLE患者中,23.1％ （6/26）仅IgM和/或IgA亚型阳性;抗β2GP1抗体阳性的SLE患者中,53.6％（15/28）仅IgM和/或IgA亚型阳性.在SLE患者中,IgA/G/M型aCL对APS的特异度和敏感度分别为98.3％和26.2％,IgA/G/M型抗β2GP1抗体对APS的特异度和敏感度分别为84.5％和40.5％.当2种以上抗体亚型阳性时,aCL和抗p2GP1抗体对APS的特异度高于仅检测IgG型aCL（98.3％/94.8％）和抗p2GP1抗体（98.3％/93.1％）.当任意一项亚型项阳性时,aCL和抗β2GP1抗体对APS的敏感度高于仅检测IgG型aCL（47.6％/40.5％）和抗β2GP1抗体（42.9％/21.4％）.结论 IgA/G/M多克隆试剂筛查aCL对于APS的敏感度较低,建议初筛时应同时检测IgG型和IgM型aCL.多克隆IgA/G/M型抗β2GP1抗体对于APS的敏感度较高,并与血栓和病态妊娠显著相关,建议采用IgA/G/M多亚型抗β2GP1抗体作为初筛,初筛阳性患者再进一步确认抗体亚型.IgA型抗磷脂抗体与血栓事件相关,在IgG和IgM型抗体阴性时检测IgA型抗体有助于APS疑似患者的诊断.

抗磷脂抗体检测的临床应用专家共识

抗磷脂抗体(aPLs)是一组以磷脂和/或磷脂结合蛋白为靶抗原的自身抗体总称。aPLs是抗磷脂综合征的重要血清标志物,亦是血栓形成和病理妊娠的危险因素。aPLs检测的标准化对其临床应用至关重要。