期刊文献+
共找到7篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
CRISPR/Cas9技术在鸡抗病毒感染中应用的研究进展 被引量:3
1
作者 王金萍 路宏朝 +1 位作者 张涛 王令 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第4期28-34,41,共8页
传染性病毒病是制约鸡养殖业发展的重要因素之一,严重影响鸡群健康和养殖效益。基因编辑技术在家禽抗病育种中的应用是现代禽类育种和疫情防控研究的热点。CRISPR/Cas9(clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRIS... 传染性病毒病是制约鸡养殖业发展的重要因素之一,严重影响鸡群健康和养殖效益。基因编辑技术在家禽抗病育种中的应用是现代禽类育种和疫情防控研究的热点。CRISPR/Cas9(clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR-associated protein 9)作为一种高效精准的基因编辑工具,在诸多禽病毒病研究和防控中发挥重要作用。笔者简要综述了CRISPR/Cas9技术靶向敲除鸡病毒受体基因、修饰抗病毒相关基因、改造病毒基因组等方面的应用研究,展望该技术在抗病新品系培育和禽类重组病毒载体疫苗研发等方面的应用前景,为禽类病毒病的基础研究、预防和治疗提供参考依据。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9 家禽 抗病毒 基因编辑 抗病育种 疫苗开发
下载PDF
靶向抑制CDK12/13在高级别胶质瘤中的体外治疗效果和作用分子机制探究
2
作者 梅艳青 韩雨洁 +2 位作者 翁文筠 张蕾 唐玉杰 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期545-559,共15页
目的·筛选高级别胶质瘤(high-grade gliomas,HGGs)共有的表观转录靶向治疗新策略,并进行体外治疗效果的测试与相关分子机制的探究。方法·对HGGs中恶性程度和致死率均较高的多个胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)和弥漫性内生性... 目的·筛选高级别胶质瘤(high-grade gliomas,HGGs)共有的表观转录靶向治疗新策略,并进行体外治疗效果的测试与相关分子机制的探究。方法·对HGGs中恶性程度和致死率均较高的多个胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)和弥漫性内生性脑桥胶质瘤(diffuse intrinsic pontine glioma,DIPG)细胞系进行表观转录相关的靶向小分子药物库筛选和基于CRISPR-Cas9系统的功能基因组筛选,以寻找在GBM和DIPG中共同的表观转录靶向治疗新策略。然后针对筛选得到的目标表观转录调控因子,分别测试经CRISPR-Cas9方法敲除该基因以及对应的靶向小分子处理对GBM和DIPG细胞系的体外生长、细胞增殖与凋亡的影响。继而对靶向小分子处理的GBM和DIPG细胞系进行RNA-seq转录组分析,解析其抗肿瘤分子机制。基于此分析结果,通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,RT-qPCR)、蛋白质印迹法以及流式细胞术进一步验证目标表观转录调控因子的抗肿瘤分子机制。结果·针对表观转录调控因子的靶向小分子药物库筛选和功能基因组筛选鉴定出CDK12和CDK13(CDK12/13)是GBM和DIPG共同的潜在治疗新靶点。在多个GBM和DIPG细胞系中,通过CRISPR-Cas9方法敲除CDK12能够显著降低其体外细胞活性。CDK12/13抑制剂SR-4835或THZ531也均能够通过拮抗细胞增殖和促进细胞凋亡造成这2类HGGs细胞系的体外生长受到显著抑制。SR-4835处理GBM和DIPG细胞之后的RNA-seq转录组分析结果表明,HGGs细胞中受CDK12/13抑制剂作用而表达显著下调的基因主要富集在转录调控、DNA损伤反应(DNA damage response,DDR)通路、泛素-蛋白酶体通路以及细胞周期等生物学过程。进一步通过一系列实验方法验证了在DIPG和GBM中,靶向抑制CDK12/13显著下调DDR相关基因的转录进而引起DNA损伤的累积,并诱导细胞发生G2-M细胞周期阻滞。结论·CDK12/13是GBM和DIPG这2类HGGs共同的潜在表观转录靶向治疗靶标;该发现为后续体内模型验证、组合治疗测试提供了理论支持,也为未来进一步的临床转化应用奠定了基础。 展开更多
关键词 胶质母细胞瘤 弥漫性内生性脑桥胶质瘤 分子靶向治疗 抗肿瘤药物库筛选 CRISPR-Cas9 CDK12 CDK13
下载PDF
CRISPR/cas系统及其在家禽上的应用研究进展
3
作者 黄玲玲 黄小红 +1 位作者 陈黎 卢立志 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2018年第3期9-14,共6页
CRISPR/cas是一种获得性免疫防御系统,广泛存在于细菌和古细菌中。Strep tococcus pyogenes cas9(Spcas9)作为目前研究最多、最清楚的效应蛋白,因其酶活性高和靶点广而被应用于生命科学各个领域,但Spcas9分子量大、脱靶率高等缺点在一... CRISPR/cas是一种获得性免疫防御系统,广泛存在于细菌和古细菌中。Strep tococcus pyogenes cas9(Spcas9)作为目前研究最多、最清楚的效应蛋白,因其酶活性高和靶点广而被应用于生命科学各个领域,但Spcas9分子量大、脱靶率高等缺点在一定程度上限制了其应用。随着CRISPR系统技术被深入开发,一些新效应蛋白被发现,本文就CRISPR/cas系统分类、原理、新效应蛋白发现及cas9(S.Pyogenes)多种变构体技术开发在及家禽上的应用进行综述,为相关领域的研究提供参考。 展开更多
关键词 CRISPR/cas 新效应蛋白 Spcas9变构体 家禽 anti-CRISPR
下载PDF
Anti-CRISPRs: The natural inhibitors for CRISPR-Cas systems 被引量:1
4
作者 Fei Zhang Guoxu Song Yong Tian 《Animal Models and Experimental Medicine》 CSCD 2019年第2期69-75,共7页
CRISPR (clustered regularly interspaced short palindromic repeats)‐Cas (CRISPR associated protein) systems serve as the adaptive immune system by which prokaryotes defend themselves against phages. It has also been d... CRISPR (clustered regularly interspaced short palindromic repeats)‐Cas (CRISPR associated protein) systems serve as the adaptive immune system by which prokaryotes defend themselves against phages. It has also been developed into a series of powerful gene‐editing tools. As the natural inhibitors of CRISPR‐Cas systems, anti‐CRISPRs (Acrs) can be used as the “off‐switch” for CRISPR‐Cas systems to limit the off‐target effects caused by Cas9. Since the discovery of CRISPR‐Cas systems, much research has focused on the identification, mechanisms and applications of Acrs. In light of the rapid development and scientific significance of this field, this review summarizes the history and research status of Acrs, and considers future applications. 展开更多
关键词 anti‐CRISPRs Cas9 CRISPR‐Cas system
下载PDF
针对第2大类CRISPR-Cas系统的acr基因的发现及Acr蛋白多样化的抑制机制
5
作者 邓谢淑婷 王久宇 王艳丽 《中国科学:生命科学》 CSCD 北大核心 2024年第3期409-427,共19页
CRISPR-Cas系统是细菌和古细菌来源的RNA介导的适应性免疫系统,利用RNA介导的核酸酶活性抵抗以噬菌体为代表的外源核酸的入侵.为逃避这种来源于宿主的免疫反应,噬菌体进化出了较小的anti-CRISPR蛋白(Acr).Acrs采用不同的抑制策略,将Cas... CRISPR-Cas系统是细菌和古细菌来源的RNA介导的适应性免疫系统,利用RNA介导的核酸酶活性抵抗以噬菌体为代表的外源核酸的入侵.为逃避这种来源于宿主的免疫反应,噬菌体进化出了较小的anti-CRISPR蛋白(Acr).Acrs采用不同的抑制策略,将Cas效应蛋白限制在不同的阶段,从而使其失活.随着Cas蛋白在生物技术领域和临床上的广泛应用,Acr已被开发为有用的调控工具.对Acr的研究不仅可以加深人们对Cas蛋白别构调控的理解,而且可以为开发新型的基于Acr的调控工具打下基础.利用实验和生物信息学的手段,越来越多的Acr被发现,其中第2大类CRISPR-Cas系统目前有大约50种.本综述聚焦于第2大类CRISPR-Cas系统的Acr,从基因发现、抑制机制和技术应用三个方面对其进行总结,并对未来的研究方向做出展望. 展开更多
关键词 CRISPR-Cas系统 Cas9 Cas12a anti-CRISPR
原文传递
Green CoNi_(2)S_(4)/porphyrin decorated carbon-based nanocomposites for genetic materials detection
6
作者 Mohammad Reza Saeb Navid Rabiee +4 位作者 Farzad Seidi Bahareh Farasati Far Mojtaba Bagherzadeh Eder C.Lima Mohammad Rabiee 《Journal of Bioresources and Bioproducts》 EI 2021年第3期215-222,共8页
A one-pot synthesis method was conceptualized and implemented to develop green carbon-based nanocomposites working as biosensors.Porphyrin was synthesized to adorn the surface of nanocomposites making them highly sens... A one-pot synthesis method was conceptualized and implemented to develop green carbon-based nanocomposites working as biosensors.Porphyrin was synthesized to adorn the surface of nanocomposites making them highly sensitive for giving rise to π-π interactions between the genetic materials,proteins and porphyrin rings.The hydrogen bond formed between the proteins(analytes)and the nitrogen in the porphyrin structure as well as the surface hydroxyl groups was equally probable.In this context,different forms of porphyrins were incorporated to explore the interrelationship between the surface morphology and the ability of detection of genetic material and/or proteins by the aid of the synthesized structures.This phenomenon was conceptualized to optimize the interactions between the biomolecules and the substrate by reaching significant biosensor application in the presence of Anti-cas9 protein and sgRNA(concentration changed between 10 and 500 n mol/L).Almost full quenching of fluorescence emission was observed after addition of 300 n mol/L of Anti-cas9 protein and 250 n mol/L of sgRNA.Surprisingly,CoNi_(2)S_(4)provided 12%-29%cytotoxicity in both HEK-293 and PC12 cell lines. 展开更多
关键词 BIOSENSOR BIOMEDICINE anti-cas9 Green nanocomposite sgRNA
原文传递
高特异性CRISPR/Cas系统及其Acrs 被引量:1
7
作者 王钱繁 杨海涛 +1 位作者 王泽方 陈成 《生命的化学》 CAS CSCD 2020年第10期1760-1770,共11页
CRISPR/Cas系统是在细菌和古生菌中发现的一种适应性免疫系统,可以在序列特异性RNA的引导下利用其核酸酶活性效应蛋白或复合物靶向入侵的移动遗传元件(MGEs),从而抵御噬菌体的侵袭。目前,Ⅱ-A型CRISPR/Cas系统作为一种有效的基因编辑手... CRISPR/Cas系统是在细菌和古生菌中发现的一种适应性免疫系统,可以在序列特异性RNA的引导下利用其核酸酶活性效应蛋白或复合物靶向入侵的移动遗传元件(MGEs),从而抵御噬菌体的侵袭。目前,Ⅱ-A型CRISPR/Cas系统作为一种有效的基因编辑手段已被广泛应用。但研究人员发现,与Ⅱ-C型CRISPR/Cas9系统相比,Ⅱ-A型系统具有高特异性,并且其效应蛋白具有较小的相对分子质量。这一特性使其在进行体内基因编辑时更适于通过重组腺病毒相关载体递送。近年来,在噬菌体体内发现了多种可以抑制CRISPR/Cas系统的抗CRISPR蛋白(Acrs)。这为调节或抑制CRISPR/Cas系统效应蛋白的活性,降低基因编辑中的脱靶效应提供了新的策略。本文综述了Ⅱ-C型CRISPR/Cas系统及其抑制蛋白的结构和机制的研究进展,并简要概述其余已报道Acrs蛋白的作用机制,以期为Ⅱ-C型CRISPR/Cas系统及在基因编辑甚至基因治疗方面的研究和应用提供理论支持和参考。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas系统 抗CRISPR蛋白 基因编辑
原文传递
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部