ELISA定量检测ds DNA、ss DNA、histone抗体的初步评估

目的 评价Anti dsDNA、Anti ssDNA、Anti histoneELISA定量试剂盒的敏感性、特异性、稳定性及定量准确性。方法 采用批内、批间重复实验及回收实验和样本检测分析试剂盒的各项质量参数。结果 Anti dsDNA、Anti ssDNA、Anti histone批内重复 (CV)在 3.4 8%～ 6 .6 9%之间 ,回收率分别为 6 6 5 %、6 8 5 %和 112 5 % ,试剂盒稳定性不理想 ,每批测试必须同时进行标准曲线测试。结论 ELISA法检测自身抗体具有较高的灵敏度和特异性 ,但试剂盒在应用中应注意多方面影响因素方能保证结果的准确可靠。

sFas、sFasL及细胞因子在类风湿关节炎疾病中的意义

目的研究sFas,sFasL,细胞因子及抗单链DNA抗体与类风湿关节炎rheumatoidarthritisRA致病的关系及意义。方法采用ELISA法检测32名RA患者的血清标本。结果RA患者血清sFassFasLIL6及IL8的水平均高于正常对照组。活动期sFasL,IL6及IL8的水平显著高于非活动期P0.01,而sFas的水平未见显著差异。在32例RA患者中,有8例sFas和sFasL的水平同时升高,9例抗单链DNA抗体和sFasL同时升高。结论IL6和IL8的水平与RA的炎症程度有关。高浓度的sFas和sFasL可抑制Ts细胞对TH细胞的负向调节。由Fas/FasL启动淋巴细胞凋亡产生的核抗原,可致机体产生抗单链DNA抗体。检测sFassFasLIL6及IL8有助于对RA的诊断,并可为RA的免疫生物治疗提供依据。

游离胎儿DNA及抗DNA抗体与子前期的关系

目的研究孕妇外周血游离胎儿DNA(fDNA)是否与子前期及其严重程度相关,检测子前期孕妇体内抗单链DNA抗体(抗ssDNA抗体)及抗双链DNA抗体(抗dsDNA抗体)是否存在异常变化。方法选择2005年5月至2006年11月在浙江省人民医院妇产科住院的20例轻度子前期孕妇(轻度子前期组),14例重度子前期孕妇(重度子前期组),42例无妊娠合并症及并发症的孕妇(对照组),所有孕妇均妊娠男性胎儿。抽取孕妇外周血后采用实时荧光定量PCR技术(FQ-PCR)对fDNA进行定量,同时采用ELISA技术对抗ssDNA抗体和抗dsDNA抗体定量。结果对照组、轻度子前期组和重度子前期组的fDNA均值分别为(67.83±43.70)拷贝/mL、(172.31±127.89)拷贝/mL、(321.37±47.07)拷贝/mL,差异有统计学意义(χ2=21.8514,P<0.01);三组的抗ssD-NA抗体光密度均值(OD)分别为(0.067±0.074)、(0.075±0.039)、(0.160±0.214),差异有统计学意义(χ2=6.3741,P<0.05);而不同组间抗dsDNA抗体OD均值为(0.0230±0.0102)、(0.0257±0.0099)、(0.0281±0.0119),差异无统计学意义(χ2=2.6340,P>0.05);抗ssDNA抗体与抗dsDNA抗体之间存在显著的相关性(r=0.5985,P<0.05),抗ssDNA抗体、抗dsDNA抗体及新生儿体重与fDNA浓度均无显著的相关性(P>0.05)。结论fDNA与子前期的严重程度密切相关,抗DNA抗体在子前期的发病过程中可能起着重要的作用。

抗双链DNA抗体和抗单链DNA抗体联合及定量检测定对系统性红斑狼疮诊断的临床意义

目的评价抗双链DNA(anti-dsDNA)抗体与抗单链DNA(anti-ssDNA)抗体联合、定量检测对系统性红斑狼疮(SLE)诊断的价值。方法选取郑州大学第一附属医院门诊SLE患者73例,其他疾病对照组37例,健康对照组36例,以酶联免疫吸附试验法(ELISA法)定量检测血清中抗dsDNA抗体和抗ssDNA抗体。结果 73例SLE患者血清中抗dsDNA抗体和抗ssDNA抗体阳性率分别为71.2%和76.7%,两者联合检测阳性率可提高到79.5%。进一步的研究发现该抗体含量的高低与SLE病情的活动性相关。结论联合检测抗ds DNA抗体和抗ssDNA抗体可有效提高SLE的检出率,对于减少SLE漏检具有重要的临床意义。抗dsDNA抗体和抗ssDNA抗体定量检测有提示病情的作用,特别是有肾脏损害的患者,可以作为治疗前后病情监测的指标。