杂合抗菌肽KL-21与抗生素体外协同抗菌效果研究

为了进一步研究杂合抗菌肽KL-21的抗菌活性和探索其应用潜力,试验测定了KL-21和抗生素对4种常见致病菌的抑菌活性,同时评估了KL-21与4种常见抗生素联用的协同效果。试验采用微量倍比稀释法测定KL-21和4种抗生素的最小抑菌浓度(MIC)及最小杀菌浓度(MBC),利用棋盘试验法测得部分抑菌浓度指数(FIC)评估联用后的协同效果。结果表明,KL-21对4种致病菌均有良好的抑菌活性,与卡那霉素、庆大霉素、链霉素及氯霉素联合使用时具有协同或部分协同作用,可以将抗生素体外抑菌试验的MIC减少至1/16~1/2,为人工设计杂合抗菌肽KL-21的实际应用提供了参考,为畜牧生产以及动物疫病治疗提供更多选择。

青蛙皮肤活性肽QUB2984的重组表达及体外活性评价

背景:青蛙活性肽有丰富活性,如抗菌、抗肿瘤,有望解决抗生素耐药性问题。目的:从红眼树蛙皮肤分泌物中发现活性肽QUB2984,采用生物信息学手段模拟其结构和性质,合成、纯化、鉴定该肽并考察其生物学功能。方法:采用电刺激得到红眼树蛙皮肤分泌物,分离出mRNA构建cDNA文库,测序得到肽序列。用生物大分子序列搜索工具进行肽序列比对,蛋白质结构模型和功能预测工具开展蛋白二级结构模拟。通过固相合成法合成多肽、反向高效液相进行纯化、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱进行验证。所获得的纯肽用于生物活性评价,采用最小抑菌浓度法评价其抗菌作用,MTT法检测其细胞毒作用,溶血实验考察其安全性。结果与结论:①所得活性肽QUB2984的结构预测为α-螺旋,有完整的疏水面,对生物膜有一定破坏能力,其序列上第3个氨基酸位置由W组成,并具有G-X-G结构;②活性肽QUB2984对革兰阳性金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为2μmol/L,对革兰阴性大肠杆菌的最小抑菌浓度为2μmol/L,对真菌白色念珠菌的最小抑菌浓度为8μmol/L;③活性肽QUB2984在10^(-5)mol/L浓度下对人非小细胞肺癌细胞NCI-H838具有明显抑制作用,在64μmol/L浓度下对马红细胞的溶血作用为50%;④结果显示,QUB2984具有抗菌抑癌活性,其带+3正电荷,有利于与细菌或细胞接触。

两种方法测试抗菌肽与抗生素的联合抑菌效果

为了解抗菌肽泰立停与抗生素的联合抑菌作用,本研究通过倍比稀释法和纸片法测试了泰立停和抗生素在单用和联用时对大肠杆菌和沙门菌的抑菌活性。结果表明:抗菌肽泰立停和抗生素安普霉素、恩诺沙星、多西环素在单用时对大肠杆菌和沙门菌均有不同程度的抑菌活性,在联合使用时,倍比稀释法观察到泰立停与恩诺沙星联合可以提高对大肠杆菌CVCC1568的抑菌活性;纸片法观察到仅泰立停与多西环素以8∶2的比例进行联合时对大肠杆菌AE1具有联合抑菌作用,同时观察到泰立停与某些抗生素联合时,抑菌效果与该抗生素单用的效果相当。说明抗菌肽泰立停与某种抗生素联合可针对某种菌的某些菌株有很好的抑菌活性,同时可以降低抗生素的使用剂量。这将减少抗生素在临床中的应用,进而避免或减少耐药菌的形成,维护人与动物的健康,保护生态环境。

抗菌肽的来源、活性及作用机制最新研究进展

在过去的几十年中,抗生素药物的过量使用导致耐药性(antimicrobial resistance,AMR)的产生,这促使人们开始寻找传统抗生素的潜在替代品,从而降低AMR的发生率。目前,研究人员开始持续关注具有广谱抗菌活性的抗菌肽(antimicrobial peptides,AMPs)。AMPs是一种能够抑制细菌、真菌、病毒、寄生虫、肿瘤细胞等的小分子多肽,是不同生物体先天免疫系统的重要组成部分,是宿主抵御病原体的第一道防线,具有快速杀伤活性、低毒性和细胞选择性等优点,在医药、食品、畜牧业、农业等领域均具有良好的应用前景。本文概述了AMR的发展、来源、结构、生物活性和作用机制,并讨论了AMPs转化为临床应用所面临的挑战,旨在总结AMPs结构和作用机制的最新研究进展,并提供其微生物活性的详细证据,为人们进一步深入研究AMPs的抗微生物作用机制提供借鉴与参考。

鲎素抗菌肽的分子结构稳定性及生物活性

为了实现鲎素这种高效、广谱的抗菌肽在生产实践中的应用,采用不同温度、pH值、体外蛋白酶（胃蛋白酶、胰蛋白酶、弹性蛋白酶、羧肽酶B）分别处理鲎素,通过检测鲎素最小抑菌浓度（M IC）的变化来衡量鲎素的生物活性稳定性;采用高效液相色谱（HPLC）检测鲎素残留量,通过HPLC图谱变化来评定鲎素分子结构的稳定性.结果表明：温度小于120℃、pH值小于11.30时,鲎素对大肠杆菌K88的M IC为1.25～5.00mg/L;高效液相色谱检测得鲎素残留量在65.46～70.21μg之间;鲎素对胃蛋白酶的作用表现出很高的稳定性,对胰蛋白酶、羧肽酶B、弹性蛋白酶的作用稍微敏感;在胃蛋白酶酶活浓度不高于5.33mmol/（s.L）、胰蛋白酶酶活浓度不高于0.67mmol/（s.L）、羧肽酶B酶活浓度不高于0.17mmol/（s.L）、弹性蛋白酶酶活浓度不高于0.021mmol/（s.L）的条件下,鲎素仍具有活性.这说明鲎素抗菌肽具有较强的高温耐受性,在酸性条件下具有稳定性,且具有一定的耐受蛋白酶降解的能力.

抗菌肽的结构特征及其与活性的关系

抗菌肽是生物体内一类具有抗菌活性的多肽,是宿主非特异性防御系统的重要组成部分,广泛存在于自然界中,具有广谱的杀菌活性,其独特的生物学活性与其结构特征密切相关。文章简要介绍了抗菌肽的结构及其活性之间的关系,以期为设计新型抗菌肽分子,开发活性更高,抗菌谱更广的抗菌类药物提供理论依据。

天然抗菌肽的分子结构与功能特性研究进展

抗菌肽来源广泛,抑菌谱广,选择杀伤性强,作用速度快,在临床、医药、禽畜养殖、水产养殖和食品等行业都有良好的应用前景。然而,如今仍面临两大难题:一是与抗生素相比抑菌活力较弱,二是溶血活性和稳定性难以调控。需要人们对天然抗菌肽进行人工改造,从而获得高效、稳定、安全的抗菌肽产品。本文简述了抗菌肽的结构与功能关系,重点阐述影响抗菌肽活性的主要调控因素,如正电荷数、疏水性、两亲性、螺旋度、特殊氨基酸等。为对抗菌肽结构进行针对性设计改造提供了新思路。

鱼类抗菌肽的研究进展

鱼类抗菌肽是鱼体天然免疫的重要组成部分 ,其结构和组成复杂多样 .根据生化和结构特点 ,可将它们分为 4种基本类型 :具有疏水或双亲性α螺旋结构的抗菌肽、含多对二硫键并可形成 β折叠结构的抗菌肽、组蛋白样抗菌肽和具有糖基化修饰的抗菌肽 .鱼类抗菌肽多以前肽原的形式合成 ,通过酶解切除信号肽和羧基端酸性片段后形成有活性的成熟肽 .成熟肽具有很强的抑菌活性 ,其最小抑制浓度多在毫摩尔水平 .目前 ,已克隆了多个鱼类抗菌肽基因 ,揭示了pleurocidin等基因家族的结构及其转录调控特点 .鱼类抗菌肽的抗菌机制已建立了“桶 桶板”和“地毯”样两种模型 。

抗菌肽的结构特征、生物活性及应用

抗菌肽分子呈双亲性的α-螺旋结构可使细菌、真菌、寄生虫的质膜形成离子通道,从而导致这些病原体死亡。抗菌肽分子也可通过影响它们的能量转运和代谢,损害它们的呼吸链的功能,抑制它们的蛋白质和DNA的合成,以及干扰病毒的侵染过程和抑制病毒的繁殖等机制,对病原体产生抑制或杀灭作用。此外,抗菌肽还可杀伤肿瘤细胞并提高机体的免疫功能。因此,抗菌肽有望开发为防治人和动物疾病的药物,应用前景广阔。

动物抗菌肽的研究进展

抗菌肽 (antibacterialpeptides)是具有抗菌活性的肽类的总称。目前发现抗菌肽或类似抗菌肽的小分子肽类广泛存在于昆虫、两栖类、水产动物及哺乳动物中 ,这种内源性抗菌肽经诱导而合成 ,在机体抵抗病原的入侵方面起着重要的作用。本文介绍了各种动物抗菌肽的来源和种类 ,抗菌肽的作用及其作用机理 ,并指出了抗菌肽的结构对其活性的影响关系 ;最后 。

家蚕和果蝇的抗菌肽cecropin B基因的原核表达及抑菌活性分析

动物抗菌肽天蚕素(cecropin)因具有抗菌谱广、活性较强、不易产生耐药性等特点而成为新型抗菌剂开发的材料。为了探讨通过原核表达的途径高效获取天然cecropin,以重叠PCR方法分别人工合成家蚕(Bombyx mori)和果蝇(Drosophilamelanogaster)的抗菌肽cecropin B基因(CecB2)并克隆至T载体,测序确认后分别克隆至pET-32a载体,转化至E.coli BL21(DE3)宿主菌进行表达。通过SDS-PAGE和Western blotting检测到2种目的蛋白均得到表达,但表达量存在差异,Bradford法测定纯化后的BmCecB2融合蛋白和DmCecB2融合蛋白的质量浓度分别为0.6、2.0 mg/mL。经Ni-NTA亲和层析纯化和透析处理后的2种产物的抗菌活性存在明显差异:DmCecB2和BmCecB2的质量浓度为10 mg/mL时,对E.coli DH5α的抑菌圈直径分别为15、8 mm左右,最小抑菌浓度分别为0.05、0.10 mg/mL。以上结果说明DmCecbB2的原核表达效率及表达产物的抑菌活性均明显高于BmCecB2。用生物信息学方法分析家蚕和果蝇的CecB2蛋白在结构上存在差异,这可能是导致2种产物活性不同的主要原因。

水产动物抗菌肽的研究进展

抗菌肽广泛分布于多种生物,具有分子量小、耐热、广谱抗菌等特性。它在杀菌过程中不易产生耐药性,使其具有潜在的医药价值。本文综述了水产动物抗菌肽的结构特征、生物学活性、抗菌机制、目前克隆的基因的结构与功能,以及在免疫防御中的表达等一系列问题。

昆虫抗菌肽的生物学特点及药物研发进展

昆虫抗菌肽是由昆虫细胞特定基因编码、由细胞核糖体合成的,具有体液免疫功能的一类碱性多肽,对细菌、真菌、病毒和原虫,甚至癌细胞都具有杀伤作用,有望开发成为新一代的抗菌药物。随着抗菌肽家族的不断扩大,其各方面的研究也日益深入。简要综述了昆虫抗菌肽的种类及结构特点、作用机制、生物活性、构效关系、药物开发情况。

肽脱甲酰基酶抑制剂的构效关系研究进展

肽脱甲酰基酶是细菌蛋白质合成过程中一种关键酶。肽脱甲酰基酶抑制剂通过作用于该酶,影响细菌正常的生长、代谢和繁殖,从而可能成为一类新型抗菌药物。许多拟肽类和非肽类化合物含有与金属离子结合的基团,表现出较高的肽脱甲酰基酶亲和力和较好的抗菌活性。综述该类药物的作用机制、结构修饰和构效关系。

人ⅡA型磷脂酶A_2衍生肽P26抗菌作用与结构修饰的研究

目的比较人ⅡA型磷脂酶A2(phospholipase A2,PLA2)C末端衍生的多肽和经修饰后的环肽对不同细菌在体外的杀菌效应,了解其作用机制。方法根据人ⅡA型PLA2氨基酸顺序C末端26个氨基酸残基,合成直链肽P26,同时将其修饰为环肽P26。采用琼脂铺板计数法,将不同浓度的两种多肽分别与6种细菌在37℃孵育2 h,然后铺板并置于37℃恒温箱培养18～24 h,记录每一琼脂板上的菌落数(CFU),并计算多肽作用后的杀菌率。结果两种多肽对革兰阳性菌金黄色葡萄球菌、枯草杆菌和炭疽杆菌有较强的杀菌活性,环肽P26的作用比直链肽P26强4倍左右;对革兰阴性菌大肠杆菌、变形杆菌和绿脓杆菌的杀菌作用较弱,而环肽P26的作用更弱。结论衍生自人ⅡA型PLA2 C末端26个氨基酸残基的肽P26和修饰得到的环肽P26对G+菌有较强的杀菌活性,经修饰成环肽后作用更强,可能与环肽分子带的正电荷更集中有关。

动物抗菌肽新型饲料添加剂的研究进展

抗菌肽是一类具有抗微生物活性的小分子多肽，具有相对分子质量小、抗菌谱广等特点，具有广谱抗菌活性和抗病毒、真菌、寄生虫及肿瘤等生物活性，且不易产生抗药性，有良好的应用前景。本文对抗菌肽的结构特点、生物活性、作用机理及在饲料中的应用现状进行了综述，并指出在开发研究抗菌肽中存在的问题，对其发展作了展望。

肽抗生素及其应用开发现状

作为宿主天然免疫的重要组成部分,肽抗生素具有抗菌、抗肿瘤、增强传统抗生素对耐药菌的活性、促进创伤愈合等多项生物学功能。它具有抗菌活性强、抗菌谱广、细菌不易产生耐受性等特点,预示其在医药、食品防腐、保健品及化妆品等领域具有广阔的应用前景。现对肽抗生素的应用开发现状进行综述。

经不同无害化及资源化技术处理后头孢菌素C发酵菌渣中抗菌活性物质的变化情况

目的:建立有效评价抗生素发酵菌渣无害化处理效果的手段。方法:采用敏感菌株对无害化处理菌渣的抗菌活性进行筛查,利用HPLC-MS对菌渣中残留/转化组分的结构进行推断,再结合相关化合物数据库对残留组分生物学/安全性信息进行检索。结果:所研究的4种头孢菌素C菌渣中:未经处理菌渣中具有β-内酰胺类活性物质;3种经无害化处理的菌渣中仅有1种不再具有抑菌活性,其余2种与市政污泥混合进行堆肥处理的菌渣中均产生了有别于未经处理菌渣活性的非β-内酰胺类抑菌物质。结论:在对无害化处理效果进行评价时,除利用菌渣中特定的残留抗生素为评价指标外,还应考虑堆肥过程中菌渣残留成分的生物转化问题。

多肽抗生素Apidaecin的研究进展

Apidaecin是一种新型的多肽抗生素,它具有对标受体分子的选择性识别强、对动物细胞无毒副作用等特点。文章阐述了apidaecin多肽抗生素的序列结构、生物学活性及其抗菌机制,为今后更好地利用基因重组技术生产多肽抗生素提供了有效方法。

抗菌肽CJH对常见畜禽病原菌抑菌活性及与抗生素协同杀菌效应研究

抗菌肽CJH是从金环蛇毒液中提取出的一种抗菌活性极强的免疫活性多肽物质。试验测定了抗菌肽CJH对不同革兰氏阴性菌和阳性菌的抑菌活性及杀菌速率,并与常用抗生素的测定结果进行了对比;通过微量肉汤稀释棋盘实验法测定了抗菌肽CJH联用不同抗生素的杀菌效果。结果表明:相比几种常用抗生素,抗菌肽CJH具有广谱的抗菌活性,且杀菌能力较强;抗菌肽CJH与阿莫西林、土霉素联用有协同效应。试验为抗菌肽CJH的实际应用及为了探明其减少甚至替代抗生素成为新型饲料添加剂的潜力提供参考。