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多烯大环内酯类抗生素——链霉菌FR-008代谢产物的研究 被引量:8
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作者 黄曦 邓子新 廖仁安 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第5期329-333,共5页
 链霉菌FR-008 是一株抗生素产生菌。发酵液经萃取、大孔树脂吸附、分配层析等方法处理,从中获得了一种七烯大环内酯类抗生素,即抗生素FR-008。HPLC分析研究表明,它与灰色链霉菌IMRU 3570产生的杀假丝菌素...  链霉菌FR-008 是一株抗生素产生菌。发酵液经萃取、大孔树脂吸附、分配层析等方法处理,从中获得了一种七烯大环内酯类抗生素,即抗生素FR-008。HPLC分析研究表明,它与灰色链霉菌IMRU 3570产生的杀假丝菌素是同一种物质,均含有4个保留时间完全相同的主要组分。其中抗生素FR-008b 经核磁共振(NMR)研究被证实为杀假丝菌素D;FR-008a也经1H-NMR的比较分析提出了它的可能结构。 展开更多
关键词 链霉菌fr-008 七烯大环内酯 抗生素
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葡萄糖流加策略对基因工程FR-008/杀念菌素衍生物CS103补料分批发酵过程的影响 被引量:1
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作者 毛相朝 杨亮 +3 位作者 陈实 沈亚领 魏东芝 邓子新 《工业微生物》 CAS CSCD 2009年第2期1-6,共6页
以组合生物合成技术得到的链霉菌FR-008突变株CS103为研究对象,研究了3.7L发酵罐上维持一定葡萄糖浓度对其次级代谢产物脱羧FR-008/candicidin衍生聚酮抗生素CS103生物合成的影响。当初始葡萄糖浓度20g/L,发酵过程还原糖浓度维持在10g/L... 以组合生物合成技术得到的链霉菌FR-008突变株CS103为研究对象,研究了3.7L发酵罐上维持一定葡萄糖浓度对其次级代谢产物脱羧FR-008/candicidin衍生聚酮抗生素CS103生物合成的影响。当初始葡萄糖浓度20g/L,发酵过程还原糖浓度维持在10g/L时,抗生素CS103最高产量较分批发酵最高产量相比提高30%。研究了3.7L罐上补料分批发酵生产CS103的工艺,主要考察了脉冲补料、间歇流加补料和连续流加补料三种补料分批发酵工艺,并与分批发酵进行了比较。连续流加补料维持糖浓度的效果明显,最高产量达到126.9μg/mL,与分批发酵相比提高了44%左右。 展开更多
关键词 葡萄糖 流加策略 补料分批发酵 基因工程fr-008/杀念菌素
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Determination of Candicidin/FR-008 and Related Components in Fermentation Broth by RP-HPLC
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作者 毛相朝 沈亚领 +2 位作者 魏东芝 陈实 邓子新 《Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences》 CAS 2005年第2期115-118,共4页
Aim A liquid chromatographic method for the determination ofcandicidin/FR-008 and related components in fermentation broth has been developed. Methods Therewere four major components in the candicidin/FR-008 complex, ... Aim A liquid chromatographic method for the determination ofcandicidin/FR-008 and related components in fermentation broth has been developed. Methods Therewere four major components in the candicidin/FR-008 complex, which were separated by HPLC under thefollowing conditions: SB-C8 column (4.6 mm x 250 mm, 5 μm) was used, the mobile phase consisted ofacetonitrileam-monium acteate (20 mmol·L^(-1) , pH 4.0) (40:60, V/V) , with a flow rate of 1 .0mL·min^(-1) , the UV detection wavelength was 380 nm, and the whole process was performed at 25℃ .Results The linearity was obtained in the range of 6.25 - 500 μg· mL^(-1) candicidin/FR-008 withthe regression equation of Y = 20 461 x + 30 748 and the correlation coefficient of 0.999 1. Theinstrument precision was 1.84% and the method precision was 3.8%. Conclusion This method isaccurate, rapid and simple; it can be used for determination of candicidin/FR-008 and relatedcomponents in fermentation broth. 展开更多
关键词 candicidin/fr-008 HPLC fermentation broth METABOLITES
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吸水链霉菌应城变种种内融合子FR-008产生的新抗生素灭蚊幼的实验研究
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作者 张吉斌 徐博钊 +2 位作者 明桂珍 周启 梁蓉芳 《湖北预防医学杂志》 1992年第1期18-20,共3页
本文报道吸水链霉菌应城变种(Streptomyces hygroscopicus var yingchengensis)种内融合子FR-008产生的新抗生素(简称FR-008抗生素)对3种蚊虫幼虫的灭蚊活性以及蚊龄、温度、紫外线对FR-008抗生素灭蚊活性的影响。实验表明:FR-008抗生素... 本文报道吸水链霉菌应城变种(Streptomyces hygroscopicus var yingchengensis)种内融合子FR-008产生的新抗生素(简称FR-008抗生素)对3种蚊虫幼虫的灭蚊活性以及蚊龄、温度、紫外线对FR-008抗生素灭蚊活性的影响。实验表明:FR-008抗生素对3种蚊虫幼虫均有较强的致死作用。对3龄致倦库蚊幼虫的LD_(50),24h为1.3309μg/ml,48hLD_(50)为0.5021μg/ml;对3龄白纹伊蚊幼虫的LD_(50),24h为2.0113μg/ml,48hLD_(50)为0.6321μg/ml;对3龄中华按蚊幼虫LD_(50),24h为2.8317μg/ml。不同虫龄对PR-008抗生素的敏感性不同,1龄至2龄幼虫比4龄初幼虫敏感。48h,1龄至2龄致倦库蚊幼虫LD_(50)为0.9055μg/ml;4龄初致倦库蚊幼虫LD_(50)为4.7124μg/ml。FR-008抗生素,在19~31℃之间,随温度升高灭蚊效果更好。经紫外线照射4h的2.5μg/ml FR-008抗生素稀释液,其活性降低为非照射组的51.4%。 展开更多
关键词 fr-008 抗生素 灭蚊 幼虫
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基因工程FR-008/杀念菌素脱羧衍生物发酵过程优化 被引量:2
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作者 杨亮 毛相朝 +4 位作者 周文瑜 陈实 沈亚领 邓子新 魏东芝 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期333-337,共5页
以组合生物合成技术得到的基因工程FR-008/杀念菌素脱羧衍生物CS103为研究对象,在摇瓶水平进行培养条件的初步优化。确定了接种量、接种时间、发酵过程pH、装液量等初步条件。对3.7L发酵罐水平的培养条件进行优化,确定了最适搅拌转... 以组合生物合成技术得到的基因工程FR-008/杀念菌素脱羧衍生物CS103为研究对象,在摇瓶水平进行培养条件的初步优化。确定了接种量、接种时间、发酵过程pH、装液量等初步条件。对3.7L发酵罐水平的培养条件进行优化,确定了最适搅拌转速和通气量,并初步建立了补料分批发酵工艺。结果表明,接种时间30h、接种量为10%、控制pH6.5-7.0、搅拌转速450r/min、通气量200L/h,发酵过程维持发酵液残余葡萄糖浓度5g/L左右,在3.7L发酵罐基因工程FR-008/杀念菌素脱羧衍生物CS103产量达到99.87μg/ml。本研究为基因工程FR-008/杀念菌素工业化生产工艺提供了依据。 展开更多
关键词 链霉菌fr-008 基因工程fr-008/杀念菌素 衍生物 发酵过程优化
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对氨基苯甲酸生物合成基因pabAB的缺失对抗生素FR-008生物合成的影响
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作者 章亦荣 白林泉 +1 位作者 邓子新 李敏 《上海交通大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1837-1841,共5页
抗生素FR-008是由链霉菌FR-008产生的一种七烯大环内酯类抗真菌抗生素,它以对氨基苯甲酸(PABA)为起始单位,在I型聚酮合酶(PKS)的催化下合成聚酮内酯环.前期生物合成基因簇序列测定发现了可能的对氨基苯甲酸生物合成基因(pabAB),编码4-氨... 抗生素FR-008是由链霉菌FR-008产生的一种七烯大环内酯类抗真菌抗生素,它以对氨基苯甲酸(PABA)为起始单位,在I型聚酮合酶(PKS)的催化下合成聚酮内酯环.前期生物合成基因簇序列测定发现了可能的对氨基苯甲酸生物合成基因(pabAB),编码4-氨基-4-脱氧-分支酸(ADC)合成酶.通过同框缺失实验获得pabAB发生缺失的基因置换突变株BLQ-1并通过聚合酶链式反应(PCR)扩增进行了验证.高效液相色谱(HPLC)分析和生物测定证实突变菌株BLQ-1丧失了合成抗生素FR-008的能力.这种产量的丧失可以通过回补克隆的pabAB基因或喂养外源PABA得到回复.实验证明,pabAB负责对氨基苯甲酸的合成,是抗生素FR-008生物合成的必需基因. 展开更多
关键词 抗生素fr-008 链霉菌 对氨基苯甲酸 起始单位
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农抗5102产生菌原生质体融合育种的研究——Ⅳ.融合子FR-008的验证及其产生新活性物质的分离和鉴别 被引量:5
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作者 袁德军 周启 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1991年第2期142-147,共6页
本文在探索5102-1号抗生素液相色谱(HPLC)分析法的基础上,从出发菌株10-22和融合子FR-008的发酵物中均分离出5102-1号抗生素的主要组分,进一步证实融合于FR-008为吸水链霉菌应城变种种内融合的重组子。实验还从融合子FR-008的发酵物中... 本文在探索5102-1号抗生素液相色谱(HPLC)分析法的基础上,从出发菌株10-22和融合子FR-008的发酵物中均分离出5102-1号抗生素的主要组分,进一步证实融合于FR-008为吸水链霉菌应城变种种内融合的重组子。实验还从融合子FR-008的发酵物中分离和纯化了出发菌株不能产生的活性物质,通过与浓硫酸和浓盐酸反应呈深兰色,紫外可见光谱在403,380,360,340um处有吸收峰等特征,表明它是一种七烯大环内酯类抗生素。在建立该抗生素中芳香残基的液相色谱分析法时,证明其中含有对氨基苯乙酮残基。用氨基酸分析仪测定经硫酸甲醇醇解和醇解产物再水解后的抗生素样品,表明它含有与已知七烯大环内酯类抗生素不同的氨基糖残基,其详细结构有待进一步研究确定。 展开更多
关键词 融合子fr-008 抗生素fr-008 育种
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厦门霉素生物合成基因簇在白色链霉菌及吸水链霉菌FR-008中的异源表达
8
作者 张金龙 《信阳师范学院学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2015年第2期168-172,共5页
将携带有厦门霉素生物合成的整合质粒p LMO09404,通过供体菌大肠杆菌ET12567(p UZ8002)与受体菌白色链霉菌及吸水链霉菌FR-008进行接合转移,将得到的接合转移菌株经PCR验证后进行发酵,发酵液经HPLC和质谱检测.结果显示,厦门链霉菌来源... 将携带有厦门霉素生物合成的整合质粒p LMO09404,通过供体菌大肠杆菌ET12567(p UZ8002)与受体菌白色链霉菌及吸水链霉菌FR-008进行接合转移,将得到的接合转移菌株经PCR验证后进行发酵,发酵液经HPLC和质谱检测.结果显示,厦门链霉菌来源厦门霉素基因簇可以在白色链霉菌及吸水链霉菌FR-008中异源表达. 展开更多
关键词 厦门霉素 白色链霉菌 吸水链霉菌fr-008 异源表达
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FR-008抗生素现场灭致倦库蚊的效果
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作者 张吉斌 徐博钊 +2 位作者 明桂珍 周启 梁蓉芳 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS CSCD 1994年第6期416-417,共2页
应用FR-008抗生素在现场杀灭致乏库蚊,LD_(50)24h为1.309μg/ml,48h为0.5154μg/ml.实验室模拟试验,剂量为5μg/ml时,48h蚊幼虫密度下降率可达98.9%:在室外静水沟中使用2.... 应用FR-008抗生素在现场杀灭致乏库蚊,LD_(50)24h为1.309μg/ml,48h为0.5154μg/ml.实验室模拟试验,剂量为5μg/ml时,48h蚊幼虫密度下降率可达98.9%:在室外静水沟中使用2.5~5μg/ml剂量,72h蚊幼密变下降率达88.8%。 展开更多
关键词 fr-008 抗生素 灭蚊 致倦库蚊
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吸水链霉菌应城变种种内融合子FR-008产生的新抗生素灭蚊幼的研究
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作者 张吉斌 徐博钊 +2 位作者 明桂珍 周启 梁蓉芳 《中国寄生虫病防治杂志》 CSCD 1995年第2期140-142,共3页
本文报道吸水链霉菌应城变种种内融合子FR-008产生的新抗生素(简称FR-008抗生素)对3种蚊虫幼虫的灭蚊活性以及蚊龄、温度、紫外线对FR-008抗生素灭蚊活性的影响。实验证明:FR-008抗生素对3种蚊虫幼虫均有... 本文报道吸水链霉菌应城变种种内融合子FR-008产生的新抗生素(简称FR-008抗生素)对3种蚊虫幼虫的灭蚊活性以及蚊龄、温度、紫外线对FR-008抗生素灭蚊活性的影响。实验证明:FR-008抗生素对3种蚊虫幼虫均有较强的致死作用。对3龄致倦库蚊、白纹伊蚊和中华按蚊幼虫的24hLD_(50)分别为1.3309μg/ml、2.0113μg/ml和2.8317μg/ml。不同虫龄对FR-008抗生素的敏感性不同,1龄至2龄幼虫比4龄初幼虫敏感。FR-008抗生素,在19℃~31℃之间,随温度升高灭蚊效果更好。紫外线照射可显著降低FR-008抗生素的灭蚊活性。 展开更多
关键词 fr-008 抗生素 致倦库蚊 白纹伊蚊 吸水链霉菌
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基因工程FR-008/杀念菌素脱羧衍生物CS103的分离提取及毒性和抗白色念珠菌活性研究
11
作者 毛相朝 陶欣艺 +3 位作者 杨亮 沈亚领 魏东芝 邓子新 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1859-1864,共6页
本文在建立了基因工程FR-008/杀念菌素脱羧衍生物CS103分离提取工艺的基础上,经进一步纯化,获得一定供试样品。通过对比脱羧FR-008/杀念菌素CS103、FR-008/杀念菌素和两性霉素B三种化合物对人胚肾细胞毒性、对人血红细胞的溶血活性和对... 本文在建立了基因工程FR-008/杀念菌素脱羧衍生物CS103分离提取工艺的基础上,经进一步纯化,获得一定供试样品。通过对比脱羧FR-008/杀念菌素CS103、FR-008/杀念菌素和两性霉素B三种化合物对人胚肾细胞毒性、对人血红细胞的溶血活性和对白色念珠菌的抗菌效果,发现脱羧FR-008/杀念菌素CS103的毒性较FR-008/杀念菌素和两性霉素B大大降低,且保持了较高的抗真菌(Candida albicans)活性。 展开更多
关键词 fr-008/杀念菌素 脱羧衍生物CS103 两性霉素B 毒性 抗真菌活性
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亚硝基胍消除链霉菌FR-008的线性质粒 被引量:3
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作者 徐玉松 高土玲 +2 位作者 于昊 邓子新 贺新义 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期141-149,共9页
【目的】利用亚硝基胍(NTG)消除链霉菌FR-008线性质粒以简化其基因组,获得背景清晰的菌株,作为抗生素异源生物合成的底盘细胞。【方法】NTG溶液处理链霉菌FR-008孢子悬液,从存活的诱变株中筛选砷敏感的突变株,再通过脉冲场凝胶电泳(PFGE... 【目的】利用亚硝基胍(NTG)消除链霉菌FR-008线性质粒以简化其基因组,获得背景清晰的菌株,作为抗生素异源生物合成的底盘细胞。【方法】NTG溶液处理链霉菌FR-008孢子悬液,从存活的诱变株中筛选砷敏感的突变株,再通过脉冲场凝胶电泳(PFGE)检测线性质粒是否被消除;用生测实验定性检测各个线性质粒消除突变株杀念菌素合成的能力,最后通过HPLC定量比较突变株和野生型产生杀念菌素的差异。【结果】从103个诱变株中筛选到3株砷敏感的突变株(10#、59#、115#)。PFGE检测发现它们均丢失了大线性质粒p SSFR1,此外,42#突变株的小线性质粒p SSFR2被消除,在此基础上,第二轮NTG诱变获得了双质粒消除的突变株。大线性质粒p SSFR1消除率约为3%,小线性质粒p SSFR2消除率约为1%。发酵结果显示:10#、115#突变株杀念菌素有效组分III产量分别提高了40%和30%。【结论】首次发现NTG是一种有效消除链霉菌线性质粒的诱变剂,2株大线性质粒消除的突变株杀念菌素的产量得到提高。此方法可以用来消除特定链霉菌菌株中的巨型线性质粒以高效简化其基因组,因而是一种有效的抗生素遗传育种的方法。 展开更多
关键词 链霉菌fr-008 质粒消除 线性质粒 亚硝基胍 脉冲场凝胶电泳 砷抗性 基因组简化
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