充血性心力衰竭患者血清抗碳酸酐酶Ⅱ和Ⅲ自身抗体检测的意义

目的：使用已建立的方法检测充血性心力衰竭（CHF）患者血清中的抗碳酸酐酶Ⅱ和Ⅲ自身抗体、抗氧化物及细胞因子水平，初步评价其临床意义。方法选取58例3个月～1年前曾发生心肌梗死的CHF患者和58名健康对照者，测定其血清抗碳酸酐酶Ⅱ和Ⅲ自身抗体、红细胞沉降率（ESR）、超氧化物歧化酶（SOD）等5种抗氧化物和白细胞介素2（IL-2）等5种细胞因子的水平。结果 CHF患者血清抗碳酸酐酶Ⅱ自身抗体和ESR水平显著高于对照组（P＜0．05），SOD、谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）、过氧化氢酶（CAT）和总抗氧化能力（TAC）显著低于对照组（P＜0．05），丙二醛（MDA）水平显著高于对照组（P＜0．05）。CHF患者血清的IL-2和白细胞介素17（IL-17）水平较对照组显著升高（P＜0．05），白细胞介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）和γ干扰素（IFN-γ）与对照组差异无统计学意义（P＞0．05）。结论 CHF患者可能存在自身免疫的现象，IL-2、IL-17和抗氧化能力的检测可能作为判断抗碳酸酐酶Ⅱ抗体出现的指标。

碳酸酐酶Ⅲ自身抗体在1型糖尿病人中的测定

目的探讨1型糖尿病(T1D)患者血清抗碳酸酐酶Ⅲ自身抗体水平的变化及其与抗氧化物、细胞因子之间的关系。方法选取T1D患者共368例(T1D组),另选取性别年龄匹配的健康受试者为对照组,测定其血清抗碳酸酐酶Ⅲ自身抗体、红细胞沉降率、超氧化物歧化酶(SOD)等4种抗氧化物和白细胞介素(IL)-2等4种细胞因子的水平。结果 T1D患者血清抗碳酸酐酶Ⅲ自身抗体水平显著高于健康对照组(P<0.05);T1D患者的SOD、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)和丙二醛(MDA)水平显著低于健康对照组(P<0.05);T1D患者的IL-2、IL-3和干扰素(IFN)-γ显著高于健康对照组(P<0.05)。结论抗氧化物和细胞因子水平的变化可能参与了T1D患者碳酸酐酶Ⅲ抗体的产生。

血清抗碳酸酐酶Ⅲ抗体ELISA检测方法的建立与初步应用

目的建立人血清抗碳酸酐酶(CA)Ⅲ抗体的ELISA检测方法,并对系统性红斑狼疮、皮肌炎、糖尿病肾病、高血压肾病患者和健康人群的血清抗CAⅢ抗体水平进行初步调查。方法使用抗CAⅢ抗体标准品、CAⅢ及相应酶标抗体建立血清抗CAⅢ抗体ELISA检测方法,验证试剂稳定性、标本保存稳定性,并进行精密度、灵敏度、回收率、抗干扰性等方法学评价;各项技术指标均合格后对系统性红斑狼疮、皮肌炎、糖尿病肾病和高血压肾病患者的血清进行抗CAⅢ抗体水平检测。结果成功建立ELISA检测人血清抗CAⅢ抗体的方法,其批内精密度为6.2%,批间精密度为8.2%,灵敏度为0.025,回收率为106%,且具有较好的抗干扰性、试剂稳定性和标本保存稳定性。系统性红斑狼疮和糖尿病肾病患者的血清抗CAⅢ抗体水平高于健康对照相(P<0.05),阳性率分别为43%和18%。皮肌炎和高血压肾病患者的血清抗CAⅢ抗体水平与健康对照组比较无统计学差异(P>0.05),且未出现阳性结果。结论使用现有市售试剂进行人血清抗CAⅢ抗体的ELISA检测是可行的,抗CAⅢ抗体可能参与了系统性红斑狼疮和糖尿病肾病的发生发展。

子宫内膜异位症与抗碳酸酐酶抗体的关系

目的 :探讨抗碳酸酐酶Ⅰ、Ⅱ抗体与子宫内膜异位症的关系。方法 :应用酶联免疫吸附 (ELISA)法分别检测内异症 32例、其他妇科疾病 (妇科组 ) 2 0例及正常妇女 12例血清抗碳酸酐酶抗体水平。结果 :(1)内异症患者血清抗碳酸酐酶Ⅰ、Ⅱ抗体阳性率(87.5 %、5 3.1% )高于妇科组 (2 5 %、15 % ) ,两组差异有显著性 (P <0 .0 1) ;(2 )内异症患者血清抗碳酸酐酶Ⅰ、Ⅱ抗体阳性率明显高于正常妇女组 (0 %、0 % ) ,两组差异有显著性 (P<0 .0 1) ;(3)妇科组及正常妇女组血清抗碳酸酐酶Ⅰ、Ⅱ抗体阳性率较低 ,两组差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论

抗CA IX单克隆抗体的^(99)Tc^m标记及其在荷瘤鼠体内显像

碳酸酐酶IX(CA IX)在多种实体肿瘤中过表达,而在相应的正常组织中没有表达或表达水平很低,是肿瘤诊断和治疗中的一个潜在靶点。利用99Tcm直接标记抗CA IX单克隆抗体(MAb),在最佳的标记条件下可以得到标记率为85%的目标产物99Tcm-MAb。此标记物在新生牛血清和PBS中稳定性良好。99Tcm-MAb通过尾静脉注入到荷HT-29肿瘤鼠进行显像,注射24 h后在肿瘤处没有看到明显的放射性浓集。注射24 h后的体内分布实验显示99Tcm-MAb在肿瘤内的摄取率较低。将125I-MAb注入到荷HT-29肿瘤鼠进行显像,注射48 h后在肿瘤处可以看到明显的放射性浓集。由于抗体在体内循环代谢速度较慢,而99Tcm的半衰期相对较短,故99Tcm标记抗CA IX单抗不适用于靶向CA IX的肿瘤显像。

碳酸酐酶Ⅸ抗体在制备抗肿瘤靶向制剂中的应用

以碳酸酐酶Ⅸ抗体(anti-CAⅨ)为靶头,采用透析法制备去甲斑蝥素纳米胶束并考察其载药率、包封率、粒径等指标及抗肿瘤靶向性。结果表明,anti-CAⅨ修饰的去甲斑蝥素纳米胶束呈圆球状,载药量、包封率、粒径和ζ电位分别为(5.26±0.03)%、(80.93±1.01)%、(146.5±48.9)nm和(-14.79±0.67)mV。去甲斑蝥素及其anti-CAⅨ修饰的胶束对A549肿瘤细胞在体外的抑制作用呈剂量和时间依赖性,载药胶束的抑制作用明显优于游离药物。荷A549肿瘤的裸鼠体内试验也表明,anti-CAⅨ修饰的去甲斑蝥素纳米胶束能显示出主动靶向效果,高剂量组(1 mg/kg)的抑瘤率达到75.65%。

碳酸酐酶IV自身抗体在慢性心力衰竭患者中的测定

目的:对慢性心力衰竭(CHF)患者血清中的抗碳酸酐酶IV自身抗体、抗氧化物及细胞因子的水平进行检测。方法:选取CHF患者共73例,测定其血清抗碳酸酐酶IV自身抗体、血沉、SOD等6种抗氧化物和IL-6等4种细胞因子的水平。结果:CHF患者血清抗碳酸酐酶IV自身抗体水平显著高于健康对照组(P<0.05),SOD、GPx、CAT和TAC水平显著低于健康对照组(P<0.05),MDA水平显著高于对照组(P<0.05)。CHF患者血清的IL-2水平较健康对照组显著升高(P<0.05),IL-3、IL-17、IFN-α和IFN-γ与健康对照组无显著性差异(P>0.05)。结论:CHF患者血清抗氧化物水平和IL-2的变化可能参与了其体内碳酸酐酶IV抗体的产生。

碳酸酐酶Ⅸ抗体修饰去甲斑蝥素纳米胶束的肺靶向性研究

目的:制备碳酸酐酶Ⅸ抗体修饰的去甲斑蝥素纳米胶束(anti-CA IX NCTD nano-micelle),探讨并比较其与普通去甲斑蝥素纳米胶束(NCTD nano-micelle)的抗肿瘤作用。方法:将碳酸酐酶Ⅸ抗体孵化修饰去甲斑蝥素纳米胶束,考察其载药率、包封率、粒径等指标;通过MTT法考察去甲斑蝥素及载药胶束对A549的细胞生存率为细胞摄取实验剂量设置提供依据;取荷瘤裸鼠分别尾静脉注射去甲斑蝥素和载药胶束,并观察裸鼠的饮食,精神状态,每周用游标卡尺测量肿瘤的大小,绘制肿瘤生长曲线。结果:制备的碳酸酐酶Ⅸ抗体修饰的去甲斑蝥素纳米胶束呈圆球状,载药量为(1.26±0.03)%,包封率为(80.93±1.01)%,粒径和Zeta电位分别为146.5±48.9nm,-(14.79±0.67)mv;去甲斑蝥素及载药胶束对肿瘤细胞的抑制作用呈剂量和时间依赖性,载药胶束对肿瘤细胞的抑制作用明显优于游离药物,且anti-CA IX NCTD nano-micelle对A549的抑制率优于NCTD nano-micelle。结论:去甲斑蝥素纳米胶束经碳酸酐酶Ⅸ抗体修饰后能达到主动靶向的效果,同时能与去甲斑蝥素协同抑瘤,起到一举多得的目的。

重症肌无力血清中碳酸酐酶Ⅲ及其抗体的检测

目的:检测重症肌无力(MG)患者血清中碳酸酐酶Ⅲ(CAⅢ)及其抗体水平,探讨MG骨骼肌减少的CAⅢ是否参与MG的免疫发病。方法:用Western blot检测18例MG患者、16例其他神经肌肉疾病(ONMD)患者和15名健康人血清中CAⅢ水平;用Western blot与酶联免疫吸附测定(ELISA)检测上述血清中抗CAⅢ的抗体水平。结果:Western blot显示,正常人、MG和ONMD患者血清中都存在CAⅢ,但该蛋白的谱带密度在3组人的血清中差异无统计学意义(P>0.05);Western blot与ELISA表明,上述血清中不存在抗CAⅢ的抗体。结论:正常人、MG和ONMD患者血清中均存在CAⅢ蛋白,但不存在抗该蛋白的抗体,说明MG骨骼肌减少的CAⅢ蛋白可能没有直接参与MG的免疫发病。