Antihepatoma effect of alpha-fetoprotein antisense phosphorothioate oligodeoxyribonucleotides in vitro and in mice

AIM To evaluate antihepatoma effect ofantisense phosphorothioate oligodeo-xyribonucleotides (S-ODNs) targeted to alpha-fetoprotein (AFP) genes in vitro and in nudemice.METHODS AFP gene expression was examinedby immunocytochemical method or enzyme-linked immunosorbent assay. Effect of S-ODNson SMMC-7721 human hepatoma cell growth invitro was determined using microculturetetrazolium assay. In vivo antitumor activitiesof S-ODNs were monitored by measuring tumorweight differences in treated and control micebearing SMMC-7721 xenografts. Induction of cellapoptosis was evaluated by fluorescence-activated cell sorter (FACS) analysis.RESULTS Antisense S-ODN treatment led toreduced AFP gene expression. Specificantisense S-ODNs, but not control S-ODNs,inhibited the growth of heaptoma cells in vitro.In vivo. only antisense S-ODNs exhibitedobvious antitumor activities. FACS analysisrevealed that the growth inhibition by antisenseS. ODNs was associated with their cell apoptosisinduction.CONCLUSION Antisense S-ODNs targeted toAFP genes inhibit the growth of human hepatomacells and solid hepatoma, which is related totheir cell apoptosis induction.

Effects of antisense oligonucleotides targeting VEGF on radio sensitivity of uterine cervix cancer Hela cells

决定反的影响的目的察觉到在子宫的宫颈癌症 Hela 细胞的放射敏感度上指向脉管的内皮生长因素(VEGF ) 的 oligonucleotides。方法 VEGF 反感觉 oligodeoxynucleotides (ASODN ) 是进由调停 liposome 的方法的 Hela 房间的 transfected。有 oligodeoxynuclecotide 和 saline 的房间 transfected 被用作控制组。房间被 6 MV X 光线分别地在 0 Gy， 2 Gy， 4 Gy 和 6 Gy 的剂量照耀。VEGF mRNA 的表示被 RT-PCR 决定。Apoptosis 用 FCM 被评估。克隆效率由菌落形成试金是坚定的。结果 VEGF mRNA 的表示被 ASODN 禁止(P 【 0.01 ) 在 Hela 房间。被放射影响的禁止的激活导致了增加 apoptosis (P 【 0.01 ) 并且禁止平皿接种效率(P 【 0.01 ) 。VEGF 的表示在 Hela 房间由 X 照耀导致了的结论能被 VEGF ASODN 堵住。有 VEGF 的治疗可能在 HeLa 房间增加 apoptosis 并且提高放射敏感度。

趋化因子受体CXCR4在鼻咽癌细胞中的表达

背景与目的:研究表明,趋化因子受体CXCR4及其配体SDF-1(stromalcell-derivedfactor1)与肿瘤的增殖、分化和转移等恶性表现密切相关。本研究通过观察分化程度和增殖能力不同的鼻咽癌细胞中CXCR4的表达,初步了解CXCR4与鼻咽癌细胞恶性表现的关系。方法:分别以全反式维甲酸(all-trans-retinoicacid,RA)和端粒酶反义核酸处理鼻咽癌CNE1(高分化)和CNE2Z(低分化)细胞,原位杂交技术检测CXCR4mRNA表达,免疫组化法检测CXCR4蛋白表达,流式细胞仪检测细胞周期分布,MTT法检测细胞增殖能力。结果:CXCR4mRNA和CXCR4蛋白在鼻咽癌CNE1和CNE2Z细胞均呈强阳性表达,且CNE2Z细胞表达强度显著高于CNE1细胞。经1×10-5mol/L和1×10-4mol/LRA作用后,与对照组比较,CNE1细胞G1期细胞明显增多,CNE2Z细胞S期细胞明显增多,同时两者的CXCR4mRNA表达水平均显著低于对照组(P<0.01),其中1×10-4mol/LRA作用较1×10-5mol/LRA作用强(P<0.01)。经端粒酶反义核酸作用后,CNE1和CNE2Z细胞增殖均明显受抑制,CXCR4蛋白表达水平均显著低于对照组(P<0.01)。结论:CXCR4在鼻咽癌细胞高表达,其表达水平与鼻咽癌细胞的分化程度和增殖能力有关。

脂质体介导bcl-x_L反义寡核苷酸对鼻咽癌CNE-2Z细胞株凋亡的影响

背景与目的:实验证明bcl-xL在鼻咽癌CNE-2Z细胞中存在高表达,它可能在鼻咽癌的发生发展中发挥着重要的作用。本研究以脂质体(lipofectin)为载体,将人工合成的bcl-xL反义寡核苷酸(antisenseoligodeoxynucleotide,ASODN)片段导入CNE-2Z细胞,拟探讨ASODN对CNE-2Z细胞的影响。方法:以bcl-xL的编码区为靶点,人工合成20个碱基全硫代修饰的反义寡核苷酸,脂质体转染反义寡核苷酸进入CNE-2Z细胞后,用MTT法检测细胞成活率;用琼脂糖凝胶电泳、荧光染色、流式细胞术等方法检测细胞凋亡。结果:MTT结果发现,ASODN在Lip介导下即可显著抑制CNE-2Z细胞株细胞增殖(P<0.01),ASODN对细胞增殖的抑制作用随其浓度增加而增强;ASODN作用细胞36h后,经Hoechst33258/PI双染在荧光显微镜下可见细胞缩小、染色质固缩、核断裂;流式细胞仪分析发现在G1峰前出现一个亚二倍体峰即凋亡峰;琼脂糖凝胶电泳分析可见ASODN/Lip处理组出现明显的“梯状”外观等凋亡特征性改变。结论:ASODN脂质体转染CNE-2Z细胞后可促进CNE-2Z的细胞凋亡;在肿瘤研究中,bcl-xL可作为一个有用的靶基因,为开发鼻咽癌基因治疗药物提供实验依据。

一个新的靶向HER-2 mRNA的反义寡核苷酸,HA824,对HER-2表达的影响(英文)

目的 观察HA82 4 ,这种新合成的靶向HER 2mRNA的反义寡核苷酸对SK BR 3乳癌细胞株mRNA和蛋白表达的特异性作用。方法 以HA4为阳性对照 ,随机序列为随机对照检测了HA82 4对SK BR 3细胞生长的抑制作用与IC50 值 ;采用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)、流式细胞技术、免疫组织化学法检测了对SK BR 3细胞mRNA与蛋白表达的影响。结果 结果表明HA82 4对SK BR 3乳癌细胞的生长有剂量依赖性的抑制作用〔IC50 (nmol·L- 1) :HA82 4 ,(47± 2 6 ) ;HA4 ,(97± 4 1) ;随机序列 ,(2 5 1± 86 )。HA82 4vsHA4 ,P <0 .0 5〕。HA82 4还显著抑制了HER 2mRNA与蛋白的表达 (免疫组化结果 :HA82 4 ,1+染色 ;HA4 ,2 +染色 ;随机序列 ,3+染色 ;流式细胞技术检测结果 ,荧光强度分别为 :HA82 4 ,338.6 ;HA4 ,35 5 .5 ;随机序列 ,5 32 .4 )。结论HA82 4对SK BR 3乳癌细胞生长的抑制作用与特异性的抑制HER

^(99)Tc^m-EC-ASODN反义探针的合成和标记

报道反义探针99Tcm-EC-ASODN的合成和标记。将次乙酰双半胱氨酸(L,L-ethylenedicysteine,EC)与反义寡脱氧核苷酸(Antisenseoligodeoxynucleotides,ASODN)进行偶联,形成复合物EC-ASODN,通过核磁共振图谱(1H-NMR)、红外图谱(IR)、紫外(A260)吸收和电泳,鉴定EC-ASODN复合物的结构。用锝(99Tcm)标记EC-ASODN,通过薄层层析评价99Tcm-EC-ASODN的标记率、放化纯和稳定性。结果显示,1H-NMR、IR谱图、紫外吸收和电泳都证实EC与ASODN联结形成EC-ASODN,99Tcm-EC-ASODN的标记率为77.28%,放化纯为97.52%,Rf=0.95—1,4h内具有很好的稳定性。结论:EC与ASODN能形成稳定的复合物EC-ASODN,用99Tcm标记,方法简便,能得到标记率高和稳定性好的反义探针。

反义寡核苷酸抑制survivin基因表达及肝癌细胞生长的研究

目的:采用反义寡核苷酸抑制肝癌细胞中survivin基因的表达,研究其对肝癌细胞生长的作用。方法:采用脂质 体介导survivin反义寡核苷酸转染人肝癌细胞株SMMC-7721细胞,Western blot及原位杂交方法检测survivin蛋白及mRNA表 达,流式细胞仪检测凋亡细胞比率,检测转染前后细胞贴壁率变化,并绘制细胞生长曲线。结果:survivin反义寡核苷酸转染 后,肝癌细胞survivin蛋白及mRNA表达均显著降低,细胞贴壁率显著降低,细胞增殖活性明显受抑,细胞凋亡率显著增加。 结论:survivin反义寡核苷酸转染可以有效降低细胞内survivin基因的表达,诱导细胞发生凋亡,抑制肝癌细胞生长。

反义核酸与疾病治疗研究进展

反义寡核苷酸是根据碱基互补原理,用人工或生物合成的特定互补的DNA或RNA序列,导入靶细胞,形成mRNA-DNA或mRNA-RNA杂交双链,从而抑制或封闭目的基因的表达,使其丧失活性,达到基因控制和治疗的目的。反义寡核苷酸药物的发展开拓了基因药理学的一个新领域。本文综述了反义寡核苷酸的分类核作用机制及其在病毒感染、肿瘤和心血管等疾病治疗中的应用,并提出这一领域中存在的一些问题。

c-myc反义基因对人高转移肺癌细胞增殖和黏附活性的抑制作用

目的 :观察c myc反义基因抑制人高转移性肺癌PG细胞增殖 ,下调侵袭黏附性的作用和机制。方法 :合成c myc反义寡核苷酸 ,经脂质体包裹 ,转导入c myc高表达的PG细胞中。RT PCR方法检测c mycmRNA表达水平的变化 ,流式细胞术检测c myc蛋白的表达。MTT法检测细胞增殖活性 ,黏附实验检测PG细胞的黏附性。结果 :c myc反义基因 (>0 .6 2 5μmol/L)对PG细胞c mycmRNA、蛋白表达和细胞增殖活性具有明显的抑制作用 ,其处理PG细胞 72h后 ,2 0～ 80min不同时间的细胞黏附百分率 ,从 5 0 .0 %,81.2 7%和 90 .0 %分别显著下降到 31.5 %,37.5 %和 30 .0 %(P <0 .0 5 ) ,下降呈时间依赖效应。结论 :c myc反义基因抑制PG细胞c mycmRNA和蛋白表达水平 ,同时下调增殖活性和侵袭黏附性。

反义寡核苷酸对丙型肝炎病毒调控基因表达的体外抑制活性研究

为探讨反义寡核苷酸（ Ａ Ｓ Ｏ Ｄ Ｎｓ） 对丙型肝炎病毒（ Ｈ Ｃ Ｖ） 的抑制活性，研究和开发新型抗 Ｈ Ｃ Ｖ 药物。采用 Ｈ Ｃ Ｖ ５′ Ｎ Ｃ Ｒ 调控荧光素酶基因的稳定表达细胞株 Ｈｅｐ Ｇ２９７０６ ，评价了３ 条针对 Ｈ Ｃ Ｖ 调控基因的 Ａ Ｓ Ｏ Ｄ Ｎ，即 Ｈ Ｃ Ｖ３６３ 、 Ｈ Ｃ Ｖ３４９ 及 Ｈ Ｃ Ｖ２７９ 。将 Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ 包封的 Ａ Ｓ Ｏ Ｄ Ｎ 与 Ｈｅｐ Ｇ２９７０６ 细胞株每天作用５ 小时，连续３ 天后检测荧光素酶活性。结果提示，在 Ｈｅｐ Ｇ２９７０６细胞中，三种 Ａ Ｓ Ｏ Ｄ Ｎｓ 均具有特异性的剂量依赖性抑制活性。浓度在０５μｍｏｌ／ Ｌ 时， Ｈ Ｃ Ｖ３６３ 、 Ｈ Ｃ Ｖ３４９ 及 Ｈ Ｃ Ｖ２７９ 对 Ｈ Ｃ Ｖ５′ Ｎ Ｃ Ｒ 调控荧光素酶表达抑制率分别为６１ ％ 、５５ ％ 及４８ ％ 。 Ｈ Ｃ Ｖ３６３ 连续作用８ 天，其抑制率可达８１ ％ 。上述资料论证了 Ｈ Ｃ Ｖ３６３ 、 Ｈ Ｃ Ｖ３４９ 及 Ｈ Ｃ Ｖ２７９ 在 Ｈ Ｃ Ｖ５′ Ｎ Ｃ Ｒ 调控荧光素酶基因的稳定表达细胞中对 Ｈ Ｃ Ｖ 调控基因具有明显的抑制活性。

寡核苷酸转化变形链球菌方法的筛选

目的:筛选一种适合变形链球菌的寡核苷酸转运方法,为利用反义寡核苷酸抑制变形链球菌基因表达打下基础。方法:分别采用阳离子聚合体So-fastTM,及阳离子脂质体为载体,以FITC标记的寡核苷酸转化变形链球菌,流式细胞术检测摄取率,并与自然转化和电穿孔转化法的摄取率进行比较。利用生长曲线和琼脂平皿记数法,观察转化试剂和(或)转化方法对细菌增殖能力的影响。结果:So-fastTM转化组的摄取率最高,近80%,其次为电穿孔组(70.5%)和脂质体转化组(17.3%),自然转化组的摄取率最低,约4%。So-fastTM组和对照组的菌落计数和生长曲线均无明显差别(P>0.05),电穿孔组与未穿孔组的菌落计数差别明显(P<0.01)。结论:So-fastTM有明显的促转化作用,并且不影响受试菌的增殖,可做为寡核苷酸转化变形链球菌的载体。

c-myc反义寡核苷酸对肿瘤细胞表面抗原和对CD_3AK杀伤敏感性的调节作用

目的 :观察c myc反义寡核苷酸上调人高转移性肺巨细胞腺癌PG细胞表面抗原分子的表达水平 ,提高免疫效应细胞杀伤敏感性的作用和机制。方法 :RT PCR方法检测c mycmRNA表达水平的变化。MTT法检测细胞增殖活性和CD3AK杀伤活性的变化。流式细胞术检测细胞表面抗原表达的变化以及c myc蛋白表达水平的变化。结果 :c myc反义寡核苷酸(1 μmol L) 明显地抑制PG细胞c mycmRNA和蛋白表达水平 ,显著提高细胞表面HLA ABC、ICAM 1分子的表达 ,其表达率分别从 68 44%、38 40 %增高到 83 1 6 %和 42 0 9% (P <0 0 1 )。CD3AK对反义寡核苷酸处理的PG细胞的不同效靶比杀伤活性 ,分别从 40 0 %、65 0 %、74 0 %增高到 52 0 %、74 0 %、91 0 % (P <0 0 1 )。结论 :c myc反义寡核苷酸通过抑制PG细胞c mycmR NA和蛋白表达 ,上调PG细胞表面HLA ABC、ICAM 1分子的表达水平 。

靶向HER-2 mRNA反义寡核苷酸对SK-BR-3乳腺癌细胞Caspase-3蛋白表达的影响

目的 检测HER 2特异性的反义寡核苷酸HA82 4对SK BR 3乳腺癌细胞Caspase 3蛋白表达的影响。 方法 选用HER 2高表达的SK BR 3乳腺癌细胞株作为试验的细胞株。HA82 4合成如前所述 ,HA4为已报道的阳性序列 ,Scramble设定为随机对照序列。上述药物分别以浓度为 2 0 0nmol·L-1孵育SK BR 3细胞 8h和 36h ,之后采用逆转录PCR法与免疫细胞化学技术检测SK BR 3细胞HER 2mR NA及Caspase 3蛋白表达水平。 结果 与Scramble对照序列相比 ,HA82 4、HA4能抑制HER 2mRNA的表达 ,HA82 4作用更强 ;与Scramble相比 ,HA82 4、HA4对Caspase 3蛋白表达水平则无影响。结论 HA82 4、HA4这两种靶向HER 2mRNA反义药物对SK BR 3乳腺癌细胞株增殖的抑制作用可能与激活Caspase 3蛋白无关。

IGF-IR反义硫代磷酸型寡核苷酸诱导胶质瘤细胞凋亡的病理学研究

目的 :探讨IGF IR基因的反义硫代磷酸型寡核苷酸对胶质瘤细胞的形态学影响。方法 :根据IGF IRcDNA序列设计正义、反义寡核苷酸片段 ,并对其部分碱基进行硫代磷酸修饰。体外培养的胶质瘤细胞分别经正义寡核苷酸和反义寡核苷酸处理 ,应用倒置显微镜活细胞观察、HE染色光镜观察、透射电镜及DNA琼脂糖凝胶电泳等方法研究IGF IR反义硫代磷酸型寡核苷酸诱导胶质瘤细胞凋亡作用。结果 :经反义寡核苷酸转染的胶质瘤细胞中 ,呈现典型的凋亡形态学改变。凋亡细胞最早期表现为细胞体积、容量减少 ,染色质凝聚 ,继之染色质集聚于核膜下成新月状或块状 ;细胞核内染色质可完全固缩成团呈“黑洞”样或萎缩的核破裂形成一些较小的膜包绕的球体位于胞质内 ,最后出泡形成凋亡小体。DNA琼脂糖凝胶电泳分析经反义寡核苷酸处理的胶质瘤细胞DNA降解片段 ,可见有明显的小分子量DNA梯状条带 ,而野生型和正义寡核苷酸处理的胶质瘤细胞未见DNA梯状条带。结论 :IGF IR所介导的分泌环路IGF I/IGF IR ,在胶质瘤细胞增殖和维持恶性表型中起重要作用 ;IGF IR反义硫代磷酸型寡核苷酸能诱导胶质瘤细胞凋亡。

Survivin反义寡核苷酸对卵巢癌耐药细胞COC_1/DDP抑制的实验研究

背景与目的Survivin是近年发现的一种细胞凋亡抑制基因,它与卵巢癌细胞的生长及耐药性密切相关,本研究探讨经脂质体介导的survivin反义寡核苷酸(Lip-ASODN)对人卵巢癌耐药细胞COC1/DDP生长、凋亡及细胞周期的影响。方法将脂质体介导的survivin-ASODN转染COC1/DDP细胞;细胞动力学检测、MTT法观察细胞生长情况;RT-PCR检测survivinmRNA的表达;通过Western杂交检测caspase-3蛋白及活性;流式细胞仪分析细胞凋亡率及细胞周期变化。结果与空脂质体及SODN组相比,经survivin-ASODN作用后的COC1/DDP细胞的生长受到明显抑制,72h的细胞生长抑制率可达(68.3±6.2)%(P<0.05)。SurvivinmRNA的表达明显下降,而caspase-3的活性增加,并呈时间依赖性。ASODN组细胞周期发生了明显变化,细胞被阻滞于G0/G1期,占79.21%,G2/M及S期分别为4.92%、15.87%,均明显下降;细胞凋亡率为33.18%,明显高于SODN组及空脂质体组(P<0.05)。结论SurvivinASODN能抑制人卵巢癌耐药细胞COC1/DDP生长,降低survivinmRNA的表达并诱导COC1/DDP细胞凋亡。

重组反义c-myc腺病毒抑制K562细胞生长、诱导凋亡的作用

目的研究重组反义c-myc腺病毒(Ad-AS-c-myc)对人慢性粒细胞K562细胞系抑制生长,诱导凋亡作用及分子机制,探讨Ad-AS-c-myc用于慢性粒细胞白血病基因治疗的可能性。方法采用重组腺病毒Lac-Z(Ad-LacZ)及Ad-AS-c-myc联合多聚季胺转染K562细胞,X-gal染色判断转染效率。采用形态学、MTT试验、RT-PCR、DNA凝胶电泳、流式细胞仪及免疫细胞化学等方法进行研究。结果多聚阳离子可提高腺病毒载体对K562细胞的转染,Ad-LacZ+多聚季胺转染率达86%。Ad-AS-c-myc能抑制K562细胞c-myc基因在转录水平的表达,K562细胞生长受抑(抑制率38%);Ad-AS-c-myc可使K562细胞G1、G2期阻滞,增殖相关基因PCNA表达降低,Apo2.7蛋白阳性细胞率增高,DNA电泳出现DNA梯形条带。结论Ad-AS-c-myc对K562细胞具有抑制生长及诱导凋亡作用,其生物学作用与K562细胞c-myc及PCNA的表达降低有关。Ad-AS-c-myc在慢性粒细胞白血病基因治疗中具有潜在的临床价值。

乙酰肝素酶反义寡核苷酸对人肝癌细胞株乙酰肝素酶表达的影响

目的:探讨乙酰肝素酶(Hpa)反义寡脱氧核苷酸对人肝癌细胞株Hpa mRNA和蛋白表达的影响。方法:设计合成互补于Hpa mRNA起始密码区的硫代反义寡脱氧核苷酸AS-ODN及相应的无义对照寡脱氧核苷酸NS-ODN,以阳离子脂质体Oligofectamine^(TM) Reagent包埋后转染SMMC-7721、BEL-7402细胞,以RT-PCR和Western-blot检测转染前后细胞Hpa mRNA以及蛋白表达的变化。结果:与正常对照组和NS-ODN相应浓度组相比,转染AS-ODN组肝癌细胞Hp amRNA和蛋白的表达均下降。结论:Hpa反义寡脱氧核苷酸下调Hpa mRNA和蛋白的表达,可能抑制肝癌的侵袭转移。

反义寡核苷酸逆转卵巢癌细胞对拓扑替康耐药性的研究

背景与目的:研究表明乳腺癌耐药蛋白(breastcancerresistanceprotein,BCRP)在卵巢癌拓扑替康(topotecan,TPT)耐药株A2780/TPT中存在高表达,它可能在卵巢癌耐药中起着重要的作用。本研究拟探讨BCRP反义寡核苷酸(antisenseoligonucleotide,ASODN)片段对A2780/TPT细胞耐药的逆转作用。方法:人工合成包含BCRPmRNA翻译起始位点的ASODN片段,并合成相应的正义寡核苷酸(senseoligonucleotide,SODN)片段作为对照。用脂质体Lipofect-2000将ASODN及SODN分别转染进A2780/TPT细胞,分别用RT-PCR法、流式细胞仪及MTT法检测A2780/TPT细胞经体外转染后,BCRPmRNA的表达、胞内罗丹明荧光强度及对TPT耐药指数的改变。结果:将ASODN/Lipofect-2000转染进A2780/TPT耐药细胞后,细胞内BCRPmRNA的表达较未转染细胞下降了59.42%(P<0.05),胞内罗丹明荧光强度由转染前的5.42增加到16.63(P<0.05),耐药指数由25降到5。而转染SODN/Lipofect-2000的A2780/TPT细胞中,上述指标无显著性变化。结论:转染ASODN/Lipofect-2000可部分逆转BCRP介导的卵巢癌细胞耐药。

C-erbB-2与c-raf-1基因反义寡核苷酸联合对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的治疗作用

背景与目的:针对c-erbB-2与c-raf-1单基因的反义寡脱氧核苷酸(antisenseoligodexynucleotide,ASODN)治疗肿瘤的研究报道很多,这些研究往往局限于单个基因或细胞水平,从肿瘤发生的多基因学说上讲是不恰当的。本研究旨在探讨c-erbB-2与c-raf-1基因联合ASODN对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的治疗作用。方法:在BALB/c裸鼠上建立卵巢上皮癌模型,然后随机分成阴性对照组和6个实验组(分别为脂质体c-erbB-2SODN组、脂质体c-raf-1SODN组、脂质体c-erbB-2ASODN组、脂质体c-raf-1ASODN组、全剂量联合反义给药组、半剂量联合反义给药组)。检测裸鼠体重及肿瘤体积变化,计算抑瘤率及肿瘤缩小率。结果:给药后,全剂量联合反义给药组与半剂量联合反义给药组的肿瘤体积抑瘤率分别为72.5%和78.4%,肿瘤重量抑瘤率分别为70.7%和75.3%,肿瘤缩小率分别为29.7%和41.6%。在给药后,各组裸鼠体重变化无明显统计学差别。结论:C-erbB-2与c-raf-1基因联合ASODN在体内能明显地抑制肿瘤生长。

半乳糖受体介导的c-myc反义寡核苷酸对人肝癌细胞的靶向投递作用

背景与目的:c-myc反义寡核苷酸(antisenseoligodeoxynucleotide,ASODN)能抑制肝癌细胞的增殖,脂质体和腺病毒介导的c-mycASODN投递虽能显著抑制肝癌细胞的增殖,抑制荷肝癌小鼠肿瘤的生长,但这种投递缺乏靶向性;受体介导的药物投递具有高效性和靶向性的特点,已被用于基因及ASODN的靶向投递。本实验以半乳糖(galactose,Gal)-聚乙烯亚胺(polyethyleneimine,PEI)作为载体,介导c-mycASODN作用于人肝癌细胞Bel-7402,探讨c-mycASODN对Bel-7402细胞的靶向投递作用。方法:用流式细胞仪检测Bel-7402、U937细胞对荧光标记的Gal-PEI-c-myc-ASODN(简称Gal-PEI-ASODN)的摄取率及细胞内平均荧光强度;相差/荧光显微镜观察荧光标记的Gal-PEI-ASODN及c-myc-ASODN进入Bel-7402、U937、Raji细胞的形态;台盼蓝拒染法检测不同浓度Gal-PEI-ASODN对这三种细胞增殖的影响。结果:荧光标记的Gal-PEI-ASODN或ASODN与相应细胞孵育10min到4h,Gal-PEI-ASODN-Bel-7402细胞的荧光摄取率为88.25%～98.66%,细胞内平均荧光强度为38.64%～111.90%,与单纯c-mycASODN-Bel-7402细胞组、Gal-PEI-ASODN-U937细胞组相比,所有时间点的细胞荧光摄取率、胞内平均荧光强度均显著增高,经Poission分布检验,均有显著性差异(P<0.01)。相差/荧光显微镜观察到?