水芹提取物对HBV-DNA克隆转染2215人肝细胞分泌HBsAg和HBeAg的抑制作用

目的 观察水芹提取物在乙型肝炎病毒 (HBV)基因转染的人肝癌细胞系 2 2 15细胞培养中 ,对细胞的毒性及其分泌的表面抗原 (HBsAg)和e抗原 (HBeAg)的抑制作用。方法 (1)药物对细胞的毒性实验 ,在接种 2 2 15细胞后 2 4h ,加 2倍稀释的 6个稀释度药液 12 .0 0、8.0 0、4.0 0、2 .0 0、1.0 0、0 .5 0mg·ml-1,4d换一次药液 ,维持 12d ,用显微镜观察细胞病变 ;(2 )药效学实验 ,在无毒浓度 (4.0 0mg·ml-1)下 ,以 2倍稀释药液稀释为 4.0 0、2 .0 0、1.0 0、0 .5 0mg·ml-14个浓度 ,37℃ 5 %CO2 培养 ,每 4d收取培养液 ,换原浓度药液培养 ,并于第 12d时收集培养液 ,同时测定HBsAg和HBeAg。结果 (1)细胞毒实验结果表明 ,水芹提取物对细胞的半数细胞毒浓度 (TC50 )为 8.6 6 2± 0 .2 9mg·ml-1,最大无毒浓度 (TC0 )为 4.0 0mg·ml-1。 (2 )药效学试验 ,在最大无毒浓度4.0 0mg·ml-1对细胞分泌的HBsAg抑制率为 (6 9.1± 6 .6 ) % ,半数有效剂量 (IC50 )为 2 .15mg·ml-1;对细胞分泌的HBeAg的抑制率为 (78.9± 1.2 ) % ,IC50 为 1.0 4mg·ml-1。与细胞对照组比较均有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。结论 水芹提取物在 2 2 15细胞中培养 12d ,无毒浓度对 2 2

水芹乙酸乙酯提取物在2215细胞培养内对乙型肝炎病毒表面抗原和E抗原的抑制作用

目的：观察水芹乙酸乙酯提取物（简称水芹提取物）在乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）基因转染的人肝癌细胞系（ＨｅｐＧ２）２２１５细胞培养中，对细胞的毒性及对ＨＢＶ表面抗原（ＨＢｓＡｇ）和ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）的抑制效果。方法：水芹提取物用培养液稀释成２０００、１０００、５００、２５０、１２５μｇ·ｍｌ－１浓度，分别加入２２１５细胞内培养１２ｄ，观察药物对细胞的毒性。在无毒浓度下的水芹提取物，以培养液稀释１０００、５００、２５０μｇ·ｍｌ－１３浓度，分别加入２２１５细胞内培养，于第６、９ｄ收集的培养液，用固相放射免疫法测定ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ，γ－计数器测定每孔药液ｃｐｍ值。结果：对细胞的半数中毒浓度（ＴＣ５０）平均为２２８４．７３±１２７．３５μｇ·ｍｌ－１，最大无毒浓度为１０００μｇ·ｍｌ－１。大、中剂量（１０００、５００μｇ·ｍｌ－１）对２２１５细胞分泌的ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ的活性于试验的第６、９ｄ均有明显的抑制作用（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．００１），并有一定转阴作用。结论：水芹提取物在２２１５细胞中培养６～９ｄ，最大无毒浓度可明显抑制ＨＢｅＡｇ和ＨＢｓＡｇ的分泌。

甘草提取物(Gc34)对HepG-2细胞侵袭、增殖能力的影响

目的通过体外实验研究甘草提取物(Gc34)对人肝癌细胞Hep G-2侵袭、增殖生物学行为的影响及其可能的分子机制。方法将人Hep G-2细胞分为对照组、Gc34组。常规培养细胞。对照组用酒精干预,使其终浓度为0.5%;Gc34组用Gc34干预,使其终浓度为12.5、25.0、50.0 mg/L。细胞侵袭实验测定Hep G-2细胞侵袭力。四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测Hep G-2细胞的增殖活性。酶联免疫吸附实验(ELISA)测定细胞培养上清基质金属蛋白酶(MMP)2、9的含量。比色法测定细胞培养上清还原性谷胱甘肽/谷胱甘肽(GSH/GSSG)、超氧化物岐化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量。结果 HE染色光学显微镜下Hep G-2细胞核浆比例增大,核深染、大小、形态和染色不一,核分裂像增多并可见病理性核分裂像:巨核、双核、多核。24 h及以上的同时间,Gc34 25.0、50.0 mg/L组Hep G-2细胞增殖活性显著低于对照组(P均<0.01)。Gc34组Hep G-2细胞侵袭数、MMP-2、MMP-9、GSH/GSSG、SOD分别为45±7、(40.3±6.2)mg/L、(42.7±5.6)mg/L、4.2±0.8、(67.2±7.9)U/(mg·L),均显著低于对照组(P均<0.01)。Gc34组Hep G-2细胞培养上清MDA含量为(45.4±8.5)mmol/g,显著高于对照组(P<0.01)。Hep G-2细胞侵袭力与MMP-2、MMP-9正相关(r分别为0.65、0.72,P均<0.01)。Hep G-2细胞增殖活性与GSH/GSSG、SOD正相关(r分别为0.55、0.64,P均<0.01),与MDA负相关(r=-0.58,P<0.01)。结论甘草提取物(Gc34)下调MMP-2、MMP-9表达,抑制Hep G-2细胞侵袭能力;下调GSH/GSSG、SOD表达,上调MDA表达,抑制Hep G-2细胞增殖活性。