安胃汤含药血清对胃黏膜肠上皮化生模型细胞自噬及凋亡的影响

目的探讨安胃汤(半夏、黄连、干姜、乌药、百合等)含药血清对胃黏膜肠上皮化生(Gastric intestinalmetaplasia,GIM)模型细胞自噬及凋亡的影响。方法采用鹅去氧胆酸(CDCA)诱导人胃黏膜上皮细胞GES-1,制备GIM细胞模型。实验分为正常组(正常胃黏膜上皮细胞GES-1常规培养)、模型组(经CDCA复制成GIM模型后常规培养)、空白对照组(GIM模型细胞以等量空白血清培养)、安胃汤组(GIM模型细胞+7%安胃汤含药血清),各组细胞干预24 h后检测。采用流式细胞术(Annexin V-PE/7-AAD双染法)检测细胞凋亡;免疫荧光双标法检测肠上皮化生相关蛋白SOX2、CDX2的表达情况;透射电镜观察细胞超微结构及自噬情况;qRT-PCR法检测细胞LC3、Bax mRNA表达情况;Western Blot法检测细胞MUC2、KLF4、LC3、Bax蛋白表达情况。结果与正常组比较,模型组细胞的MUC2、KLF4蛋白表达显著上调(P<0.01),细胞的凋亡率明显降低(P<0.05);SOX2荧光强度明显降低(P<0.05),CDX2荧光强度显著增高(P<0.01);细胞结构紊乱,细胞核萎缩畸形,内质网和线粒体等细胞器肿胀破裂及空泡化严重,自噬小体及自噬溶酶体明显增多;Bax mRNA及蛋白表达明显下调(P<0.05),LC3 mRNA表达显著上调(P<0.01),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达比值显著升高(P<0.01)。与空白对照组比较,安胃汤组细胞的凋亡率显著增高(P<0.01);SOX2荧光强度显著增高(P<0.01),CDX2荧光强度明显降低(P<0.05);细胞结构较完整,镜下可见自噬小体和自噬溶酶体略有减少;Bax mRNA及蛋白表达显著上调(P<0.01),LC3 mRNA表达显著下调(P<0.01),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达比值显著降低(P<0.01)。结论安胃汤可能通过调节GIM模型细胞自噬,并促进其凋亡,从而改善胃黏膜上皮细胞的肠上皮化生情况。

安胃汤含药血清通过调节PI3K/Akt信号通路促进MC细胞凋亡的研究

目的：探讨安胃汤含药血清对MC细胞（MNNG诱导人胃黏膜上皮细胞系（GES-1）恶性转化）PI3K/Akt信号通路相关因子及细胞凋亡影响。方法：根据中药复方血清药理学实验方法,以MC细胞为研究对象,设立空白组（A组）、安胃汤组（B组）、安胃汤＋阻断剂组（C组）、阻断剂组（D组）。含药血清处理12、24、48 h后的各组细胞采用流式细胞术检测细胞凋亡率;Western Blot和Real-time PCR检测PI3Kα、AKT、XIAP蛋白及mRNA的表达。结果：A组细胞凋亡率比较低,B、C、D组细胞凋亡率有所增加,C组细胞凋亡率增加最为明显;与A组相比,B、C、D 3组细胞内PI3Kα、AKT、XIAP基因及蛋白表达有所降低（P〈0.01或P〈0.05）。结论：安胃汤能促进MC细胞细胞凋亡,可能与其通过调控PI3K/Akt通路,下调XIAP基因及蛋白有关。

安胃汤对胃溃疡大鼠溃疡修复及表皮生长因子的影响

目的探讨安胃汤对实验性乙酸大鼠胃溃疡模型的作用机制。方法采用放射免疫方法和免疫组织化学方法观察安胃汤对实验性乙酸大鼠胃溃疡模型愈合时血清EGF和胃黏膜EGF表达的影响,对后者进行图像分析及统计学处理。结果与模型组相比,安胃汤治疗组和雷尼替丁组可提高血清表皮生长因子,差异具有统计学意义(P<0.01),安胃汤大剂量组与雷尼替丁组相比差异有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,安胃汤治疗组和雷尼替丁组可显著增强胃黏膜EGF,差异具有统计学意义(P<0.01),安胃汤大剂量组强于雷尼替丁组,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论安胃汤可能通过提高血清EGF和增强胃黏膜EGF表达,而促进溃疡愈合、提高溃疡愈合的质量。

Effect of Jianpi Huoxue Decoction(健脾活血方)-containing Serum on Tumor Necrosis Factor-α Secretion and Gene Expression of Endotoxin Receptors in RAW264.7 Cells Induced by Lipopolysaccharide

Objective:To evaluate the effect of Jianpi Huoxue decoction(健脾活血方,JHD)-containing serum on tumor necrosis factor-α(TNF-α) secretion and endotoxin receptor gene expression in RAW264.7 cells induced by lipopolysaccharide(LPS).Methods:The cytotoxicity of blank-control serum and JHD-containing serum at different concentrations were evaluated through the lactate dehydrogenase(LDH) assay in RAW264.7 cells.RAW264.7 cells were divided into six groups:5%blank-control serum group(C1,n=3),5%blank-control serum plus LP...

安胃汤含药血清调节Fas/FasL信号通路促进MC细胞凋亡的影响

目的探讨安胃汤含药血清对MC细胞[MNNG诱导人胃黏膜上皮细胞系(GES-1)恶性转化]Fas/FasL信号通路相关因子及细胞凋亡影响。方法根据中药复方血清药理学实验方法,以MC细胞为研究对象,设立空白组(A组)、安胃汤组(B组)、安胃汤+阻断剂组(C组)、阻断剂组(D组)。含药血清处理12 h、24 h、48 h后的各组细胞采用流式细胞术检测细胞凋亡率;ELISA检测细胞培养液上清FasL的含量;Western blot和Real-time PCR检测Fas、Bcl-2、Bax蛋白及mRNA的表达。结果A组细胞凋亡率比较低,B、C、D组细胞凋亡率有所增加;24h和48h时,与A组比较,B、C、D三组细胞培养液上清中FasL的含量均有所增加(P<0.01);与A组相比,B、C、D三组细胞内Fas、Bax基因及蛋白表达有所升高(P<0.01或P<0.05),Bcl-2基因及蛋白表达有所降低(P<0.01或P<0.05)。结论安胃汤能促进MC细胞细胞凋亡,可能与其通过调控Fas/FasL通路,调控Bcl-2、Bax mRNA及蛋白有关。