Apelin/APJ信号系统对脑缺血后血管内皮细胞修复及机制的研究

目的探讨Apelin/APJ信号系统对脑缺血损伤的血管内皮细胞的修复作用.方法采用电凝烧灼法制备局灶性大脑皮质梗死模型,通过侧脑室注射腺病毒Ad-Apelin或对照病毒Ad-RFP.实验动物随机分为4组,分别为假手术(sham)组、脑梗死组(MCAO)、Ad-Apelin+脑梗死组(Ad-Apelin)组、Ad-RFP+脑梗死组(Ad-RFP)组.使用神经功能mNSS评分、Western blot、免疫组织化学、qPCR等技术检测Apelin过表达对小鼠神经功能、血-脑脊液屏障、血管新生及血管内皮细胞Notch、VEGF、Ang-Ⅰ/Ⅱ信号通路的影响.结果与Ad-RFP组相比,Ad-Apelin组小鼠mNSS评分明显降低,脑组织含水量明显降低,脑组织伊文思兰渗出明显减少.与Ad-RFP组相比,Ad-Apelin组新生血管内皮细胞特异标志物CD105表达上调,血管内皮细胞DLL4、VEGF、VEGFRⅡ、Notch1、AngⅠ、AngⅡ蛋白表达量明显升高.结论Apelin过表达后可通过上调Notch、VEGF、Ang-Ⅰ/Ⅱ信号通路促进脑血管内皮细胞修复及血管新生.

Apelin/APJ信号系统对脑卒中后血管内皮细胞的影响

目的探讨Apelin/APJ信号系统对脑卒中后血管内皮细胞是否具有保护作用。方法采用电凝烧灼法制备局灶性大脑皮质梗死模型,通过侧脑室注射腺病毒,使小鼠脑组织稳定过表达Apelin蛋白,评估神经功能缺损、血-脑脊液屏障破坏以及脑血管内皮细胞炎症反应、氧化应激、细胞凋亡情况。结果小鼠脑梗死后脑组织Apelin表达下调,Ad-Apelin干预可使小鼠脑组织稳定过表达Apelin蛋白。小鼠脑梗死后mNSS评分升高,脑组织含水量升高,梗死区可见明显的伊文思兰溢出;脑组织occludin、ZO-1、JAM、claudin5蛋白表达降低;脑血管内皮细胞ROS、Superoxide、NF-kB(p65)表达上调(P<0.05),出现NF-kB(p65)核聚集,TRL表达无明显变化(P>0.05),细胞凋亡增加(P<0.05)。Ad-Apelin干预小鼠脑梗死后较对照组mNSS评分降低,脑组织含水量降低,梗死区伊文思兰溢出减少;脑组织occludin、ZO-1、JAM、claudin5蛋白表达上调;脑血管内皮细胞ROS、Superoxide、NF-kB(p65)表达下调(P<0.05),NF-kB(p65)核聚集减少,细胞凋亡减轻(P<0.05),TRL表达无明显变化(P>0.05)。结论Apelin参与脑梗死病理过程。Apelin干预可改善脑缺血损伤导致的神经功能缺损,减轻血-脑脊液屏障破坏,减轻血管内皮细胞氧化应激、凋亡及炎症反应,从而保护血管内皮细胞。

右美托咪定调控Apelin/APJ信号系统减轻小鼠脑出血损伤的机制研究

目的 通过研究右美托咪定(Dex)对脑出血(ICH)小鼠脑损伤后血管紧张素受体AT1相关受体蛋白(Apelin)/孤儿G蛋白偶联受体(APJ)信号系统的影响,探究其在脑出血后减轻脑损伤的可能作用机制。方法选取健康雄性C57BL/6J小鼠120只,应用胶原酶法制作小鼠ICH模型,采用随机数字表法将小鼠分为三组:假手术组(sham组)、脑出血组(ICH组)、脑出血+右美托咪定组(ICH+Dex组),每组40只。ICH+Dex组于造模成功后,30min内通过腹腔注射右美托咪定[25μg/(kg·d)],连续给药3天,sham组和ICH组于相应时间点给予等量的生理盐水。在ICH第1、3天分别进行神经功能损伤评分(mNSS score)以评价小鼠神经功能障碍;在ICH第3天,利用干湿重法评估脑水肿程度、通过蛋白印迹分析测定脑组织紧密连接蛋白ZO-1及claudin-5的表达水平、采用ELISA法测定脑组织Apelin及APJ的表达变化、采用TUNEL法检测神经元凋亡情况。结果 与sham组比较,ICH组小鼠神经功能评分、脑组织含水量、神经元凋亡数均升高(P<0.05),而ZO-1、claudin-5及Apelin、APJ表达降低(P<0.05);与ICH组相比,ICH+Dex组小鼠神经功能评分及脑组织含水量及神经元凋亡细胞数均降低(P<0.05),而ZO-1、claudin-5及Apelin、APJ表达升高(P<0.05)。结论 右美托咪定对脑出血小鼠具有脑保护作用,该作用可能是通过调控Apelin/APJ信号系统从而保护血脑屏障完整性,减轻脑水肿、减少神经元细胞凋亡,从而改善神经功能障碍。

Apelin/APJ信号在心血管系统的生理和病理生理作用

Apelin是G蛋白耦联受体APJ的内源性配体,在心血管系统高度表达。Apelin/APJ信号具有增强心肌收缩力、降低血压、促进新生血管形成、保护心肌缺血及再灌注损伤、调控脂肪-胰岛素轴等作用。在治疗心力衰竭、高血压、缺血性心血管疾病、心肌缺血-再灌注损伤等方面具有很大潜力。

葛根素对低氧高二氧化碳性肺动脉高压大鼠右心室Apelin/APJ系统的影响

目的探讨葛根素防治慢性低氧高二氧化碳性肺动脉高压大鼠右心室肥大的效应是否与新的小分子活性肽Apelin及其受体(APJ)有关。方法清洁级SD雄性大鼠30只,随机分为对照组、低氧高二氧化碳模型组和葛根素组。放免法测定血浆与右心室组织匀浆的Apelin-36水平,RT-PCR检测右心室组织Apelin与APJ mRNA表达。结果右心室与左心室加室间隔的质量比[RV/(LV+S)]:模型组明显高于对照组(P<0.01),而葛根素组明显低于模型组(P<0.01);平均肺动脉压(mPAP):模型组明显高于对照组(P<0.01),而葛根素组明显低于模型组(P<0.05),平均颈动脉压(mCAP)各组间比较无显著统计学意义(P>0.05)。血浆Apelin-36水平:模型组明显高于对照组(P<0.01).葛根素组又高于模型组(P<0.05)。右心室肌匀浆Apelin-36水平:模型组明显高于对照组(P<0.05),葛根素组又明显比模型组高(P<0.01)。右心室肌Apelin mRNA水平:模型组明显低于对照组(P<0.05),而葛根素组显著高于模型组(P<0.01)。右心室肌APJ mRNA:模型组低于对照组(P<0.05),而葛根素组高于模型组(P<0.05)。结论葛根素防治低氧高二氧化碳性肺动脉高压大鼠右心室肥大的机制可能部分与调节Apelin/APJ系统有关。

Apelin/APJ系统在脂多糖诱导大鼠肺微血管内皮细胞损伤中的变化及其作用研究

目的 探讨Apelin/APJ系统在脂多糖诱导大鼠肺微血管内皮细胞（PMVECs）损伤中的变化,并研究Apelin的作用及机制。方法 采用植块法培养大鼠PMVECs,Ⅷ因子相关抗原免疫细胞化学染色进行鉴定。噻唑蓝（MTT）比色法测定PMVECs活力;RT-PCR法检测Apelin、APJmRNA表达的变化;Westernblot法检测大鼠PASMCs中PCNA蛋白表达及Akt的磷酸化水平。结果 LPS在短时间内能够使Apelin、APJmRNA表达水平呈代偿性上升（P〈0.01）,但随着作用时间延长,基因表达受到明显抑制,低于对照组（P〈0.05或P〈0.01）,提示Apelin/APJ系统可能参与了LPS诱导的大鼠PMVECs损伤。MTT结果表明,10-9~10-6mol·L-1的Apelin明显促进了大鼠PMVECs增殖（P〈0.05或P〈0.01）,且具有一定的浓度和时间依赖性。而且,Apelin还不同程度地改善了LPS诱导的PMVECs细胞损伤（P〈0.05或P〈0.01）。另外,Westernblot结果显示,Apelin还明显逆转了LPS诱导的PCNA蛋白表达和Akt磷酸化水平的降低（P〈0.05或P〈0.01）。结论 Apelin/APJ系统参与了LPS诱导的大鼠PMVECs损伤。Apelin对于维护肺微血管内皮细胞功能,干预LPS诱导的PMVECs损伤起着重要作用,可能与其激活Akt磷酸化通路有关。

Apelin/APJ系统与器官纤维化关系的研究进展

Apelin是Gi蛋白偶联受体——APJ的内源性配体。Apelin/APJ系统广泛分布在人体的各个组织器官中,参与炎症反应、氧化应激、血管形成、调节激素分泌、维持血管张力和心肌收缩力等多种病理生理过程。Apelin/APJ系统在器官纤维化的发生和发展中也起着重要的作用,由于不同器官的结构和功能不同,其所产生的效应各异。本文就Apelin/APJ系统与几种常见的器官纤维化之间的关系及相关机制做一综述。

健心颗粒通过调控Apelin通路对心力衰竭大鼠心室-动脉偶联的影响

目的探讨健心颗粒对心力衰竭大鼠主动脉结构与功能、心室-动脉偶联(VAC)、胸主动脉Apelin、APJ蛋白表达的影响。方法大鼠随机分为模型组、健心颗粒组(3.2 g/kg)、Apelin组(200μg/kg[Pyr^(1)]-Apelin-13)、健心颗粒+F13A组(3.2 g/kg+200μg/kg),另设假手术组,前降支结扎建立心力衰竭模型。给药干预12周后,检测左室血流动力学,超声测量脉搏波传导速度(PWV),压力-容积曲线分析VAC,动脉环压力分析胸主动脉舒缩功能,Masson染色和Verhoeff染色观察主动脉胶原和弹力纤维构建,Western blot法检测主动脉Apelin、APJ蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组PWV、心脏指数、VAC指数、胸主动脉胶原含量升高(P<0.05),主动脉Apelin、APJ蛋白表达降低(P<0.05);与模型组比较,健心颗粒组大鼠左室功能改善,VAC指数、PWV、胸主动脉胶原含量降低(P<0.05),Apelin、APJ蛋白表达升高(P<0.05)。健心颗粒与外源性补充Apelin作用类似,APJ拮抗剂能部分逆转健心颗粒的抗心力衰竭作用。结论健心颗粒通过增加Apelin、APJ表达,调节大动脉结构与功能,改进VAC关系,从而改善心功能,可为治疗心力衰竭提供依据。

麝香保心丸通过调节apelin/APJ信号转导通路减轻大鼠心肌缺血/再灌注损伤后心功能异常的实验研究

目的探讨麝香保心丸对大鼠心肌缺血/再灌注损伤后心功能保护作用及相关机制。方法将36只Wistar大鼠分为正常对照组、模型组、麝香保心丸组,每组12只。麝香保心丸组给予麝香保心丸50mg/(kg·d),共30d,正常对照组及缺血再灌注组给予同等剂量的生理盐水,在最后一天制备心肌缺血/再灌注模型。在实验结束后24h后,检测大鼠心功能、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、血浆及心肌apelin水平。应用western-blot检测心肌apelin及APJ蛋白的表达。结果与模型组比较,麝香保心丸预处理可明显提高大鼠心肌缺血/再灌注损伤后心功能。病理学结果提示麝香保心丸可显著减轻心肌损伤后导致的肌纤维坏死及炎症细胞的浸润。与模型组比较,麝香保心丸组的CK-MB与LDH明显降低,同时麝香保心丸可使心肌及血浆apelin含量明显升高。模型组apelin和APJ的蛋白表达较正常对照组明显降低,然而麝香保心丸治疗可以逆转这一改变。结论麝香保心丸预处理可以保护大鼠心肌缺血/再灌注损伤后心功能减低,这一保护作用可能是通过调节apelin/APJ信号转导通路表达来实现的。

Apelin/APJ系统与血管发生

Apelin/APJ系统是一种新型G蛋白偶联受体系统,在人与动物的多种组织中广泛表达。Apelin/APJ系统可影响哺乳动物的许多生物学特性,包括神经内分泌系统、心血管系统等。血管发生是指在已有血管的基础上依赖于内皮细胞,以出芽方式增殖、迁移并相互联结形成血管内膜腔,最终形成新血管的过程。血管发生在血管生理和病理条件下发挥着重要的作用,文章就近年来Apelin在血管发生研究方面所取得的进展做一综述。

Apelin/APJ系统在心血管系统中的作用

Apelin是孤儿受体APJ的天然配体,apelin/APJ系统对心血管系统的作用主要为:可以通过拮抗血管紧张素Ⅱ的作用而舒张血管降低血压;可以作用于心肌引起强烈的正性肌力作用;在心力衰竭早期表达增加而心力衰竭晚期表达降低,因此,推测apelin/APJ系统可能是防止心力衰竭发生的有效的代偿方式。Apelin/APJ系统还可能参与调节胰腺对胰岛素的分泌,并且该系统还可以促进视网膜毛细血管的增生。Apelin/APJ系统在心血管系统的这些作用提示该系统可能在高血压、糖尿病血管病变、心力衰竭中发挥了一定的作用。

Apelin-APJ系统在心肌肥厚发生发展过程中作用的研究进展

心肌肥厚是心脏对过度负荷所产生的一种适应性反应。在压力或容量负荷过度性疾病中(如高血压、瓣膜性心脏病以及冠心病)的发生、发展过程中,都可以出现心肌肥厚,并最终导致心律失常、心力衰竭甚至猝死。心肌肥厚是心血管死亡率升高的一个独立危险因素。Apelin是一种生物活性肽,是G蛋白偶联受体APJ的内源性配体。Aplien-APJ系统在体内广泛存在,目前研究表明Apelin通过其受体APJ,具有强心、利尿、扩血管等维持心血管稳态的作用,对于改善心力衰竭患者的血液动力学状态具有良好的作用。此外,近年来有研究表明,Apelin在心肌肥厚的发生、发展中起着重要的作用。Apelin可通过多种不同的信号通路来预防、抑制以及逆转多种因素所致的心肌肥厚;而其受体APJ除了介导Apelin对心肌肥厚的抑制作用外,还可通过独立于Apelin的信号通路介导对机械牵张及静水压诱导的心肌肥厚反应。本文就Apelin-APJ系统在心肌肥厚发生、发展过程中的作用及其潜在机制进行综述。

Apelin-APJ系统研究进展

Apelins是由同一基因编码的具有不同分子结构的一组内源性活性肽,该类肽通过作用于7次跨膜的G蛋白偶联受体APJ而参与心血管功能、体液平衡、神经系统功能、胰岛素敏感性、摄食与饮水行为控制等多种生理与病理状态的调节,apelin-APJ系统有望成为心衰、高血压等心血管疾病以及肥胖相关疾病的治疗靶点。

Apelin/APJ系统及其基因多态性与心脑血管疾病的相关性

Apelin作为一种脂肪因子,已被鉴定为孤儿G蛋白偶联受体APJ的内源性配体,它们共同组成了apelin/APJ系统。Apelin和APJ在多种组织,尤其是心脏和血管中表达。越来越多的证据表明,apelin/APJ系统作为心脑血管稳态的重要调节者,参与许多心脑血管疾病的病理生理过程,包括心脏病、脑血管病、高血压等疾病。靶向apelin/APJ作用轴或许可以产生对抗这些心脑血管疾病的保护作用。本文就apelin/APJ系统及其基因多态性与心脑血管疾病相关性进行综述。进一步了解apelin/APJ系统在心脑血管中的作用将有助于开发新的治疗干预措施。

Apelin/APJ系统的神经保护作用及其机制

Apelin/APJ系统在人与动物组织中广泛分布,不仅参与维持生理稳态,也参与多种疾病的病理生理过程。越来越多的证据表明,apelin/APJ系统具有神经保护作用,能对抗兴奋性毒性损伤、氧化应激损伤以及损伤诱导的神经元凋亡。本文现就apelin/APJ系统神经保护作用及其机制的相关研究进展作一综述。

Apelin/APJ系统在肢体缺血再灌注所致肺损伤中的保护作用

目的探讨Apelin/APJ系统在肢体缺血再灌注(LIR)所致肺损伤中的保护作用及其可能机制。方法将24只成年SD大鼠按照随机数字表法分为假手术组(CON组)、肢体缺血再灌注组(IR组)、Apelin处理组(APL组)、Apelin+APJ拮抗剂组(APLF组),每组6只。除CON组外,其余各组大鼠采用腹主动脉夹闭3 h再灌注3 h制备LIR模型。CON组分离但不夹闭腹主动脉;IR组缺血及再灌注前分别给予0.9%氯化钠注射液0.75 ml/kg;APL组缺血前给予0.75 ml/kg 0.9%氯化钠注射液,再灌注前给予150μg/kg[Pyr1]-Apelin-13;APLF组缺血前给予150μg/kg APJ拮抗剂F13A,再灌注前给予150μg/kg[Pyr1]-Apelin-13。分别于平衡末及再灌注期末进行血气分析,实验终点取动脉血标本和肺组织,检测血浆炎症指标IL-6、TNF-α及氧化应激指标丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD);检测肺组织炎症指标髓过氧化物酶(MPO)及氧化应激指标(MDA、SOD);计算各组肺组织湿干重比(W/D);采用HE染色法观察肺组织病理结果;采用Western blot法检测肺组织解偶联蛋白2(UCP2)蛋白表达及RT-PCR法检测UCP2 mRNA表达。结果和IR组和APLF组比较,APL组pH值及PaO2值显著升高(均P<0.05),PaCO2值显著降低(P<0.01),肺组织W/D显著降低(均P<0.05),肺泡结构显著改善,血浆IL-6、TNF-α、MDA均显著降低,SOD显著升高(均P<0.01),肺组织MDA、MPO显著降低,SOD显著升高(均P<0.05),同时肺组织UCP2蛋白及mRNA表达显著升高(P<0.05)。结论Apelin/APJ系统可减轻大鼠LIR引起的肺损伤,其机制可能与减轻炎症反应和氧化应激相关,通过上调线粒体UCP2蛋白发挥作用。

Apelin/APJ系统与糖尿病关系的研究进展

1993年,O′Dowd等[1]发现一种新的G蛋白耦联受体,因其氨基酸序列与血管紧张素Ⅱ同源性高达54%,又被称为血管紧张素样蛋白质J（angiotensin receptor-like protein J receptor,APJ）受体。直到1998年,孤儿受体APJ的内源性配体Apelin,才被日本学者Tatemoto等[2]利用＂反向药理学＂方法首次在牛胃的分泌物中提取。

apelin-APJ系统基因单核苷酸多态性与糖尿病视网膜病变的关系

目的研究apelin-APJ系统基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)与糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)的关系。方法横断面研究。自2017年7月至2018年7月纳入2型糖尿病患者885例,参照DR国际临床分型标准对患者进行分组,其中DR组346例,非DR(non-DR,NDR)组539例。两组均行眼部检查,计算体质量指数,测量血压,检测空腹血糖,并进行血液生化指标及血脂等实验室检查。采用定量PCR方法获得apelin基因rs3115757、rs56204867、rs3761581和APJ基因rs7119375、rs9943582共5个位点的基因分型,比较不同性别两组间各基因型分布的差异,采用Logistic回归分析apelin和APJ基因5个SNP与DR的关系。结果无论男性还是女性,DR组糖尿病病程均显著长于NDR组(均为P=0.000)。男性apelin基因的3个SNP位点突变等位基因频率在DR组与NDR组间分布差异均有统计学意义(均为P<0.05),APJ基因2个SNP突变位点等位基因频率在DR组与NDR组间分布差异均无统计学意义(均为P>0.05)。女性的5个SNP突变位点等位基因频率在DR组与NDR组间分布差异均无统计学意义(均为P>0.05)。调整年龄、体质量指数、空腹血糖后,Logistic回归分析结果显示,无论男性还是女性,携带rs3115757-C、rs56204867-C、rs3761581-A突变等位基因者患DR的风险均明显高于携带相应野生等位基因者(均为P<0.05)。结论 apelin基因的3个SNP rs3115757、rs56204867、rs3761581与DR的发生有关。

Apelin/APJ系统和心血管疾病的关系

Apelin/APJ系统广泛分布于各种组织器官,特别是心血管系统,如心脏、肾脏、血管等。越来越多的研究表明,Apelin/APJ系统具有调节心血管功能的作用,其在动脉粥样硬化、冠心病、心力衰竭（心衰）、高血压、