Apium graveolens L. accelerating differentiation of neural stem cells in vitro

To evaluate the action of Apium graveolens L. on the growth and differentiation of neural stem cells （NSCs）, cells culture and animal experiment were performed. NSCs were isolated from the striatum of SD rat embryo were cultured in the medium containing aqueous extract from Apium graveolens L（AAG）.and/or the serum derived from mice treated with Apium graveolens L （SAG）. The results show that AAG promoted the survival and growth of NSCs in low concentration. Apium graveolens L. leaves aqueous extract promoted the proliferation of NSCs in relatively high concentration. SAG significantly accelerated the differentiation of NSCs.

基于高效液相色谱法的芹菜11种酚类化合物分析及应用

以10种芹菜(Apium graveolens L.)为试材,采用Venusil XBP Cl8(L)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以0.2%乙酸溶液-甲醇为流动相,梯度洗脱,流速为0.5 mL/min;采用PDA检测器,检测波长为240 nm。建立了基于高效液相色谱(HPLC)同时测定芹菜中11种酚类化合物的方法,并对色谱柱的选择、流动相条件和梯度洗脱条件等进行优化。结果表明,11种酚类物质在0.5~10.0μg/mL范围内线性关系良好,相关系数均≥0.990。在芹菜样品中进行加标水平为0.2、0.4、1.0 mg/kg的回收试验,回收率为71.90%~134.00%,相对标准偏差(RSD)为0.30%~4.00%。检出限(LOD)与定量限(LOQ)分别为0.07~0.29 mg/kg、0.20~0.84 mg/kg。各活性成分在24 h内稳定性良好,相对标准偏差均小于3.00%。该方法成功应用于10种芹菜中11种酚类化合物含量的测定,结合聚类分析发现不同品种的芹菜酚类组分存在相似性,但其含量存在品种间差异。该方法灵敏度高、精密度好,可为芹菜中11种酚类化合物含量的分析提供技术支持。

芹菜光响应转录因子AgHY5的克隆及不同光质下表达模式分析

HY5(elongated hypocotyl 5)转录因子能促进植物光形态建成和次生代谢产物黄酮类化合物的合成。为深入研究AgHY5在紫色芹菜(Apium graveolens)光形态建成、花青素生物合成中的作用,本文通过克隆得到AgHY5的CDS序列并进行生物信息学分析,同时分析AgHY5的组织表达特异性及不同光质下的表达规律。结果表明,AgHY5完整CDS序列共474 bp,编码氨基酸157 aa,蛋白分子量为17.33 kDa,等电点(pI)为10.47,有1个bZIP-HY5-like保守域,属于亲水性蛋白。进化上,芹菜AgHY5与胡萝卜DcHY5蛋白进化关系最近。不同光质下,复合光红:蓝=3:1(3R1B)条件下芹菜株高、单株重最大,2R2B处理的芹菜茎最粗;单色蓝光(B)条件下紫色芹菜叶柄的花青素含量最高。荧光定量PCR结果表明,AgHY5在紫色芹菜叶柄中的表达量最高,叶片中最低;在不同光质条件下,AgHY5在单色蓝光下表达水平最高,且花青素含量与基因表达量的相关系数为0.358。本研究结果为提升紫色芹菜品质、探究AgHY5转录因子在芹菜中的功能以及对花青素合成及调控机制提供研究基础。

利用SSR标记鉴定芹菜新品种‘HBN-01’和‘HBN-02’的种子纯度

为了快速鉴定两个杂交芹菜品种‘HBN-01’以及‘HBN-02’种子纯度情况,本研究以杂交F1代及其父母本为材料,采用CTAB(Cetyltrimethylammonium bromide)快速提取法提取DNA,基于SSR(Simple sequence repeat)分子标记技术筛选出合适引物,对芹菜杂交品种进行种子纯度鉴定。结果发现,从候选78对引物中,共筛选出2组引物(celerySSR-25和celerySSR-61),可以使芹菜品种‘HBN-01’和‘HBN-02’及其亲本的带型具有互补多态性。两组特异性引物可相互验证两个杂交品种的种子纯度情况。应用该方法对芹菜品种‘HBN-01’和‘HBN-02’种子纯度检测结果显示,‘HBN-01’品种纯度为93.33%;‘HBN-02’品种纯度为99.00%。因此通过SSR分子标记技术,可在室内快速准确鉴定出芹菜杂交品种‘HBN-01’和‘HBN-02’的种子纯合情况,为今后芹菜品种纯度的鉴定以及芹菜的育种筛选提供便利以及技术支持。