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人可溶性APO2L/TRAIL基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达
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作者 郑晓勇 官孝群 +1 位作者 林芷英 宋后燕 《上海医科大学学报》 CSCD 2000年第4期277-279,共3页
目的 利用基因工程技术原核表达人可溶性APO2L并复性纯化成具生物活性形式。方法 用PCR方法扩增APO2LcDNA(密码子 1 1 4~ 2 81 )并克隆至表达载体 ,重组体转化大肠杆菌JF1 1 2 5摇瓶发酵 ,筛选高表达克隆于发酵罐经温度诱导表达。经... 目的 利用基因工程技术原核表达人可溶性APO2L并复性纯化成具生物活性形式。方法 用PCR方法扩增APO2LcDNA(密码子 1 1 4~ 2 81 )并克隆至表达载体 ,重组体转化大肠杆菌JF1 1 2 5摇瓶发酵 ,筛选高表达克隆于发酵罐经温度诱导表达。经盐酸胍溶解 ,空气氧化法稀释复性 ,超滤 ,Q SepharoseFF阴离子交换柱层析等方法纯化人可溶性APO2L。利用流式细胞术检测产物对细胞的诱导凋亡活性。结果 表达产物约占菌体总蛋白质的 2 0 %并在菌体内形成了包涵体 ,SDS PAGE鉴定表达产物相对分子质量约 2 1 0 0 0。经上述纯化蛋白质纯度达 90 %以上 ,蛋白质可溶性好。观察到人可溶性APO2L诱导人宫颈癌HeLa细胞发生明显的凋亡。 展开更多
关键词 apo2K/TRAIL 克隆 大肠杆菌 细胞凋亡 宫颈癌
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Role of Apo2L/TRAIL in immunity: Applications to rheumatoid arthritis
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作者 Luis Martinez-Lostao Alberto Anel 《World Journal of Rheumatology》 2012年第1期1-11,共11页
Rheumatoid arthritis(RA)is the most common inflammatory disease of the musculoskeletal system primarily affecting the joints.It is characterized by massive synovial hyperplasia and subsequent destruction of articular ... Rheumatoid arthritis(RA)is the most common inflammatory disease of the musculoskeletal system primarily affecting the joints.It is characterized by massive synovial hyperplasia and subsequent destruction of articular cartilage and bone.Although various aspects in the pathogenesis of RA remain unclear,genetic,environmental and of course immunological factors have been involved.Defects in apoptosis seem to play a role in both initiation and perpetuation of RA.Apo2 ligand/tumor necrosis factor(TNF)related apoptosis-inducing ligand(Apo2L/TRAIL)is a cytokine that belongs to the TNF superfamily capable of inducing apoptosis on tumor cells through activation of the extrinsic pathway.Besides this function,like other members of the TNF superfamily,Apo2L/TRAIL has been shown to exert important functions in the regulation of the immune system.Concerning pathological conditions,the Apo2L/TRAIL signaling pathway plays an important role in the response to infections,in immune surveillance against tumors and in autoimmune diseases such as RA.Furthermore,its implication in suppression of autoimmu-nity suggests that Apo2L/TRAIL has potential as therapeutic agent not only in cancer but also in autoimmune diseases.In fact,Apo2L/TRAIL-based therapies have been shown effective in various animal models of RA.This review summarizes the current knowledge on the biology of Apo2L/TRAIL and its role in RA. 展开更多
关键词 apo2 LIGAND Tumor NECROSIS factor related apoptosis-inducing LIGAND Apoptosis RHEUMATOID ARTHRITIS AUTOIMMUNITY Immune response
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慢性乙型肝炎活检组织HBcAg含量与肝细胞凋亡率、Apo2.7因子表达的相关性 被引量:3
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作者 闫玉萍 阚晓 +2 位作者 常树珍 朱彤宇 郭超英 《上海免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2003年第1期47-49,共3页
为探讨慢性乙型肝炎活检组织HBcAg定量检测与细胞凋亡率及凋亡因子Apo2 7表达的相关性。文章将 37例慢性乙型肝炎患者肝活检组织制备成单细胞悬液 ,用小鼠抗人HBcAg单克隆抗体标记后 ,用AnnexinV FITC/PI双染法分辨凋亡细胞及坏死细胞 ... 为探讨慢性乙型肝炎活检组织HBcAg定量检测与细胞凋亡率及凋亡因子Apo2 7表达的相关性。文章将 37例慢性乙型肝炎患者肝活检组织制备成单细胞悬液 ,用小鼠抗人HBcAg单克隆抗体标记后 ,用AnnexinV FITC/PI双染法分辨凋亡细胞及坏死细胞 ,并以凋亡因子Apo2 7标记上述细胞 ,均应用流式细胞术进行了定性定量检测。结果是慢性乙型肝炎患者肝活检组织细胞中 ,存在着不同程度和比例的坏死细胞和凋亡细胞 ,重度慢性乙型肝炎坏死细胞和凋亡细胞比例显著多于轻度慢性乙型肝炎者 (P <0 0 1)。慢性乙型肝炎活检组织HBcAg含量与肝细胞凋亡率、Apo2 7因子表达呈显著相关性 ,Apo2 7表达水平随病损程度的加重而增加 ,有统计学差异。文章提示慢性乙型肝炎活检组织HBcAg含量与肝细胞凋亡率、Apo2 7因子表达呈显著相关性 ,有助于判断病损程度和观察疗效 。 展开更多
关键词 慢性乙型肝炎 细胞凋亡 肝穿刺 单克隆抗体 apo2.7
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Apo2L和足叶乙甙、阿糖胞苷体外协同抑制白血病细胞增殖 被引量:1
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作者 王玲玲 张茂宏 徐从高 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期593-595,共3页
目的 研究化疗药足叶乙甙 (Vp16 )或阿糖胞苷 (Ara C)上调HL 6 0细胞DR5基因表达 ,并增强凋亡素 2配体 (Apo2L)诱导HL 6 0细胞凋亡的作用。方法 通过AnnexinⅤ /PI染色 ,流式细胞仪检测HL 6 0细胞的凋亡率 ;通过MTT试验检测Apo2L对白... 目的 研究化疗药足叶乙甙 (Vp16 )或阿糖胞苷 (Ara C)上调HL 6 0细胞DR5基因表达 ,并增强凋亡素 2配体 (Apo2L)诱导HL 6 0细胞凋亡的作用。方法 通过AnnexinⅤ /PI染色 ,流式细胞仪检测HL 6 0细胞的凋亡率 ;通过MTT试验检测Apo2L对白血病原代细胞的生长抑制率 ;利用半定量RT PCR检测HL 6 0细胞DR5基因表达的变化。结果 ①Apo2L能诱导HL 6 0细胞凋亡 ,存在剂量 效应关系 ;②Apo2L能抑制白血病原代细胞生长 ,但不同类型原代细胞敏感性存在明显差异 ;③Vp16或Ara C能上调HL 6 0细胞DR5基因表达 ,Vp16或Ara C可和Apo2L协同诱导HL 6 0细胞凋亡。结论 Apo2L能诱导HL 6 0细胞凋亡 ,抑制白血病原代细胞生长 ;化疗药Vp16或Ara C能上调HL 6 0细胞DR5基因表达 ,并增强Apo2L的诱导细胞凋亡作用 ;Apo2L有可能成为一种新型抗肿瘤制剂。 展开更多
关键词 apo2L 足叶乙甙 阿糖胞苷 白血病 细胞增殖 化疗药
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WtCosmc质粒转染对Tn^+肿瘤细胞恶性行为的影响 被引量:1
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作者 杜镇镇 刘栋 +4 位作者 孙旭红 于晓锋 石传芹 徐雪 胡涛 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期262-267,共6页
目的:以Tn+肿瘤细胞为靶标,研究野生型Cosmc(WtCosmc)质粒转染对其恶性行为的影响,以期为肿瘤的诊断及治疗提供新思路.方法:流式细胞术检测肿瘤细胞表面Tn抗原阳性率,免疫磁珠分选Tn+与Tn-肿瘤细胞;分选后的Tn+肿瘤细胞经Fugene ... 目的:以Tn+肿瘤细胞为靶标,研究野生型Cosmc(WtCosmc)质粒转染对其恶性行为的影响,以期为肿瘤的诊断及治疗提供新思路.方法:流式细胞术检测肿瘤细胞表面Tn抗原阳性率,免疫磁珠分选Tn+与Tn-肿瘤细胞;分选后的Tn+肿瘤细胞经Fugene 6转染WtCosmc质粒,并用免疫荧光检测细胞表面Tn抗原表达状况.分别采用荧光法、CCK-8和Transwell检测转染前后Tn+肿瘤细胞的T-synthase活性、细胞增殖、迁移能力及对Apo2L/TRAIL的敏感性.结果:与Tn-细胞相比,Tn+肿瘤细胞T-synthase活性及对Apo2L/TRAIL诱导凋亡的敏感性较低;细胞增殖、迁移能力较强.经WtCosmc质粒转染后,Tn+细胞T-synthase活性及其对Apo2L/TRAIL诱导凋亡的敏感性明显增高;Tn抗原表达受抑;细胞增殖及迁移能力明显下降.结论:转染WtCosmc可恢复Tn+细胞T-synthse活性,抑制Tn抗原的表达,进而增强其对Apo2L/TRAIL诱导凋亡的敏感性,降低细胞增殖、迁移能力,有效抑制Tn+肿瘤细胞的恶性行为. 展开更多
关键词 WtCosmc Tn抗原 细胞增殖 细胞凋亡 apo2L/TRAIL
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血管性痴呆相关基因研究进展 被引量:2
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作者 张雪朝 孙国杰 《湖北中医学院学报》 2002年第2期51-52,共2页
关键词 血管性痴呆 基因 VD 病理学 ASA-PD基因 ApoE4基因 ApoE2基因 NOTCH3基因
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脑梗塞早期治疗者血浆血小板膜Fas、Bcl-2阳性表达研究 被引量:1
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作者 张丽 李良 《中外医疗》 2014年第10期59-60,共2页
目的分析研究脑梗塞早期治疗者血浆血小板膜Fas、Bcl-2阳性表达。方法选择2012年3—8月在该院进行治疗的早期脑梗塞患者46例作为治疗组,选择同期进行治疗的普通脑梗塞患者35例作为对照组,应用药物治疗以后采用流失细胞仪对两组患者血浆... 目的分析研究脑梗塞早期治疗者血浆血小板膜Fas、Bcl-2阳性表达。方法选择2012年3—8月在该院进行治疗的早期脑梗塞患者46例作为治疗组,选择同期进行治疗的普通脑梗塞患者35例作为对照组,应用药物治疗以后采用流失细胞仪对两组患者血浆进行检测,对两组预后进行比较。分析血小板膜Fas、Bcl-2阳性表达率。结果 Fas在脑梗塞病理机制中起到一定的作用,Bcl-2可减缓脑缺血后细胞出现掉凋亡过程。结论对早期脑梗塞患者进行治疗不仅可以从最大程度上减低脑部受到损伤的程度,还可将能够促使促细胞以及抑细胞出现凋亡的基因与位于血小板生物膜上的受体相结合的水平,有利于预后。 展开更多
关键词 脑梗塞 早期治疗 血小板 apo2 7
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pEGFP-N1-APOE ε2重组质粒的构建与鉴定
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作者 王健 王玉洁 +1 位作者 辛岳 姜新 《中国神经免疫学和神经病学杂志》 CAS 2015年第4期237-240,共4页
目的构建pEGFP-N1-APOEε2真核表达重组质粒。方法应用基因定点突变手段,根据载脂蛋白E(apolipoprotein E,ApoE)基因cDNA克隆基因序列和表达载体增强绿色荧光蛋白真核表达载体(pEGFP-N1)质粒上的多克隆位点设计引物,对质粒APOE基因cDNA... 目的构建pEGFP-N1-APOEε2真核表达重组质粒。方法应用基因定点突变手段,根据载脂蛋白E(apolipoprotein E,ApoE)基因cDNA克隆基因序列和表达载体增强绿色荧光蛋白真核表达载体(pEGFP-N1)质粒上的多克隆位点设计引物,对质粒APOE基因cDNA克隆(pMD18-T-APOE3)进行基因定点突变,得到含有APOE2基因的目的片段,将此目的片段插入载体启动子下游,与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的基因融合。重组质粒经菌液PCR、限制性内切酶酶切和测序,鉴定目的基因是否成功插入pEGFP-N1质粒。结果对所得pEGFP-N1-APOEε2质粒插入部分测序结果显示,pEGFP-N1-APOEε2质粒的方向及序列正确,阅读框正确无误,表明APOEε2基因定点突变正确,重组pEGFP-N1-APOEε2质粒构建成功。结论成功构建了pEGFP-N1-APOEε2真核表达重组质粒。 展开更多
关键词 APOEε2基因 真核表达质粒 基因重组 绿色荧光蛋白
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载脂蛋白E4水平与阿尔采默病关系的分析 被引量:1
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作者 许瑚 《中国现代医药杂志》 2011年第10期99-99,共1页
载脂蛋白E(Apolipoprotein E,ApoE)为一种多形态载脂蛋白.表现三种主要异构型:ApoE2,E3,E4。它们在单一基因位点上分别有三种等位基因82,83及84编码。这三种异构型的不同组合构成六种不同表型(3种纯合子-E狐2,E3/E3,E4/E4... 载脂蛋白E(Apolipoprotein E,ApoE)为一种多形态载脂蛋白.表现三种主要异构型:ApoE2,E3,E4。它们在单一基因位点上分别有三种等位基因82,83及84编码。这三种异构型的不同组合构成六种不同表型(3种纯合子-E狐2,E3/E3,E4/E4和三种杂合子-E2/E3,E3/E4,E2/E4)。 展开更多
关键词 载脂蛋白E4 阿尔采默病 ApoE2 等位基因 基因位点 异构型 纯合子
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载脂蛋白Eε等位基因与癫痫患者认知功能的关系
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作者 韩雨薇 王晨辰 +2 位作者 袁冠前 梁国标 李晓明 《中国实用神经疾病杂志》 2022年第11期1331-1335,共5页
目的探讨载脂蛋白E(APOE)ε等位基因对癫痫患者认知功能的影响。方法收集2021-01—2022-07在中国人民解放军北部战区总医院神经外科就诊的72例癫痫患者,应用基因芯片杂交方法检测外周血中APOE的基因分型,应用Addenbrooke认知评估量表评... 目的探讨载脂蛋白E(APOE)ε等位基因对癫痫患者认知功能的影响。方法收集2021-01—2022-07在中国人民解放军北部战区总医院神经外科就诊的72例癫痫患者,应用基因芯片杂交方法检测外周血中APOE的基因分型,应用Addenbrooke认知评估量表评估患者的认知功能,分析APOE*ε等位基因对癫痫患者认知功能的影响。结果携带APOE*ε4等位基因的癫痫患者认知功能评分[(78.24±12.25)分]低于APOE*ε4等位基因非携带的癫痫患者[(86.51±12.07)分],差异有统计学意义(P<0.05)。APOE*ε2和ε3等位基因对癫痫患者认知功能评分无显著影响(P>0.05)。3种等位基因中,携带APOE*ε4等位基因的癫痫患者认知功能评分最低[(78.24±12.25)分]。结论APOE*ε4等位基因对癫痫患者认知功能有显著影响,而APOE*ε2和ε3等位基因对癫痫患者认知功能无影响。 展开更多
关键词 癫痫 认知功能 载脂蛋白E 等位基因 APOE*ε2 APOE*ε3 APOE*ε4
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百岁老人与胆固醇“稳定”基因——apoE2基因
11
作者 张红军 杨芳 《日本医学介绍》 2003年第3期140-141,共2页
关键词 百岁老人 胆固醇 apoE2 “稳定基因”
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Apos2:活力多彩的办公空间
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作者 杨婧 《流行色》 2015年第2期66-73,共8页
也许有一天,为了容纳更多的工作人员或者拓展业务,办公室需要扩大空间。譬如像泰国设计公司Apostrophys这样多部门的企业,他们的新办公地点"Apos2"就是一个富有创意的设计精品。鉴于总部所在的地产项目名为"Town Home市区的家","Ap... 也许有一天,为了容纳更多的工作人员或者拓展业务,办公室需要扩大空间。譬如像泰国设计公司Apostrophys这样多部门的企业,他们的新办公地点"Apos2"就是一个富有创意的设计精品。鉴于总部所在的地产项目名为"Town Home市区的家","Apos2"也融合了居家与办公的双重功能,这里包含了3层条状空间和周围有限的占地,也就是说它已经不可能在现有的条件下扩大面积。 展开更多
关键词 办公空间 设计精品 Apos2 高地价 展宏图 种子发芽 就这样 建筑材料 创造性成果 宽敞舒适
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选择性杀癌细胞物:TRAIL/Apo-2L
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作者 郑晓勇 《国外医学(分子生物学分册)》 CSCD 1999年第1期43-45,共3页
研究发现了一种能选择性诱导癌细胞发生自杀的蛋白-TRAIL,肿瘤细胞对它比正常细胞敏感得多,且其作用独立于P53。关于其选择性杀伤作用机制的研究,近期取得了突破性进展。现将其蛋白、基因及其受体的结构、分布及作用机制进行综述。
关键词 TRAIL apo2L 细胞凋亡 受体 基因治疗 肿瘤杀伤
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载脂蛋白E基因多态性对血脂的影响 被引量:26
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作者 肖志杰 赵水平 +3 位作者 聂赛 谭利民 蒋波 吴军 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期533-536,共4页
目的探讨载脂蛋白E(ApoE)基因多态性对血脂水平的影响.方法1452例受试者,其中心脑血管疾病患者1101例(脑梗死379例、脑出血313例、冠心病257例、其他类型152例)及对照组351例.采用聚合酶链反应-限制性片段多态性方法检测ApoE基因多态性... 目的探讨载脂蛋白E(ApoE)基因多态性对血脂水平的影响.方法1452例受试者,其中心脑血管疾病患者1101例(脑梗死379例、脑出血313例、冠心病257例、其他类型152例)及对照组351例.采用聚合酶链反应-限制性片段多态性方法检测ApoE基因多态性.结果调整年龄、性别和体重指数,ApoE4携带者的血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇和ApoB水平显著高于ApoE3/3和ApoE2携带者(P<0.05),这种作用在不同性别和不同年龄段中相似;ApoE4携带者的甘油三酯(TG)水平和E3/3型差异有统计学意义(P<0.05),ApoE2携带者的高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平显著高于ApoE4携带者(P<0.05).ApoE2携带者的HDL-C水平随年龄增大而升高(β=0.178,P=0.015),且在65~74岁年龄段中HDL-C水平明显高于E3/3和E4携带者(P<0.05);ApoE4携带者的TC和TG水平随年龄增大而下降(β=-0.179,P=0.009;β=-0.147,P=0.032).结论ApoE基因多态性影响血脂的代谢水平,这种作用在不同性别和年龄段存在;ApoE2和ApoE4携带者对血脂的作用程度与年龄相关. 展开更多
关键词 载脂蛋白E基因多态性 低密度脂蛋白胆固醇 高密度脂蛋白胆固醇 APOE基因多态性 APOE4 ApoE2 心脑血管疾病患者 限制性片段多态性 甘油三酯(TG) HDL-C 聚合酶链反应 血清总胆固醇 APOB水平 携带者 不同性别 年龄增大 不同年龄段
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维吾尔族人群代谢性疾病与ApoEε2等位基因 被引量:2
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作者 孙玉萍 李清 +4 位作者 王秋云 胡静 古丽巴哈.阿不都热合曼 妥玲 姚华 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期417-418,共2页
目的探讨维吾尔族代谢性疾病与载脂蛋白Eε2等位基因(ApoEε2)的关系。方法收集2006年1月-2006年12月在新疆医科大学附属中医医院和宝科达医院健康体检的386名维吾尔族人,采集血液标本,检测血液生化指标以及ApoE基因型。结果新疆维吾尔... 目的探讨维吾尔族代谢性疾病与载脂蛋白Eε2等位基因(ApoEε2)的关系。方法收集2006年1月-2006年12月在新疆医科大学附属中医医院和宝科达医院健康体检的386名维吾尔族人,采集血液标本,检测血液生化指标以及ApoE基因型。结果新疆维吾尔族ApoEε2等位基因的携带率为31.9%(123/386);与非携带组比较,除了高密度脂蛋白-胆固醇升高外,ApoEε2等位基因携带组的其余指标均有下降趋势,其中收缩压、舒张压及低密度脂蛋白差异有统计学意义(P<0.05);与非携带组比较,携带者代谢性疾病检出率降低,尤其是对高胆固醇血症和高血压影响较大,其中高血压检出率差异,P=0.058。结论ApoEε2等位基因携带者血脂水平及代谢性疾病的检出率降低,是代谢性疾病的保护因素。 展开更多
关键词 载脂蛋白Eε2等位基因(ApoEε2) 聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(RFLP-PCR) 等位基因频率
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载脂蛋白E与Aβ脑内沉积相关疾病的研究进展 被引量:1
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作者 张楚楚 徐俊 《中华临床医师杂志(电子版)》 CAS 2013年第2期150-151,共2页
人类载脂蛋白E(ApoE)是ApoE基因编码由299个氨基酸组成的多态性蛋白。ApoE存在三种异构体ApoE2、ApoE3和ApoE4,这些结构上的差异影响了ApoE在脂质代谢中的功能。近年来对ApoE基因多态性与阿尔茨海默病、脑淀粉样血管病(cerebralamyl... 人类载脂蛋白E(ApoE)是ApoE基因编码由299个氨基酸组成的多态性蛋白。ApoE存在三种异构体ApoE2、ApoE3和ApoE4,这些结构上的差异影响了ApoE在脂质代谢中的功能。近年来对ApoE基因多态性与阿尔茨海默病、脑淀粉样血管病(cerebralamyloidangiopathy)等β-淀粉样蛋白(β-amyloidpeptide,Aβ)脑内沉积相关疾病的研究众多,现综述如下。 展开更多
关键词 载脂蛋白E 相关疾病 APOE基因多态性 沉积 脑内 ApoE2 Β-淀粉样蛋白
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ApoE基因多态性与2型糖尿病并发症的研究进展 被引量:3
17
作者 谢毅强 《现代生物医学进展》 CAS 2010年第5期978-981,共4页
2型糖尿病(T2DM)及其并发症的发生与发展与ApoE基因的多态性存在密切关系。本文从ApoE基因与脂代谢、ApoE基因与T2DM、ApoE基因T2DM并发症的关系讨论了ApoE基因多态性在T2DM及其并发症在发病方面的机制,为临床治疗T2DM及其并发症提供了... 2型糖尿病(T2DM)及其并发症的发生与发展与ApoE基因的多态性存在密切关系。本文从ApoE基因与脂代谢、ApoE基因与T2DM、ApoE基因T2DM并发症的关系讨论了ApoE基因多态性在T2DM及其并发症在发病方面的机制,为临床治疗T2DM及其并发症提供了理论基础。 展开更多
关键词 2型糖尿病并发症ApoE基因多态性 关系
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