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ApoE4转基因小鼠在阿尔茨海默病研究中的应用进展 被引量:1
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作者 贺云 赵宏伟 +2 位作者 齐冬梅 程肖蕊 刘西建 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期1128-1140,共13页
载脂蛋白E(apolipoprotein E,ApoE)在脑中参与胆固醇和脂质代谢,将胆固醇输送到神经元,并清除脂质碎片以促进髓鞘修复。ApoE4是ApoE三种亚型之一,为散发型阿尔茨海默病(sporadic Alzheimer’s disease,SAD)最主要的遗传危险因素。其发... 载脂蛋白E(apolipoprotein E,ApoE)在脑中参与胆固醇和脂质代谢,将胆固醇输送到神经元,并清除脂质碎片以促进髓鞘修复。ApoE4是ApoE三种亚型之一,为散发型阿尔茨海默病(sporadic Alzheimer’s disease,SAD)最主要的遗传危险因素。其发病机制可能涉及增加脑内β-淀粉样蛋白(β-amyloid,Aβ)沉积并减少其清除率、Tau蛋白过度磷酸化、脂质代谢异常和血脑屏障损伤。ApoE4转基因小鼠最早在2~4月龄出现Aβ相关病理表型,4月龄时海马总Tau蛋白和磷酸化Tau蛋白含量增加,且发生神经元丢失、树突损坏及突触减少,9月龄空间学习记忆能力下降。ApoE4转基因小鼠广泛用于AD防治药物的研究,如胆碱酯酶抑制剂利斯的明、谷氨酰胺酶拮抗剂JHU-083、GABA能神经元受体增强剂戊巴比妥、改善脑血管功能障碍的表皮生长因子、二十二碳六烯酸、菊粉和姜黄素等。本综述可为ApoE4转基因小鼠在AD研究中的应用提供参考与借鉴作用。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 载脂蛋白E apoe4转基因小鼠 学习记忆 脂质代谢
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apoE_4近交系转基因鼠的高脂血症表现和自发变换行为损害 被引量:6
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作者 薛越强 屠亚军 +3 位作者 杨鹏 蒋效松 廖峥嵘 琦祖和 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期772-775,共4页
建立相关疾病的动物模型 ,研究apoE4在脂质代谢和早老性痴呆等疾病中的作用 .通过显微注射法建立人apoE4近交系转基因鼠 .经Southern和Northern印迹杂交 ,鉴定apoE4基因的整合与表达 .98只新生鼠中鉴定出 2只首建鼠 ,定名为TgN(apoE4) 1... 建立相关疾病的动物模型 ,研究apoE4在脂质代谢和早老性痴呆等疾病中的作用 .通过显微注射法建立人apoE4近交系转基因鼠 .经Southern和Northern印迹杂交 ,鉴定apoE4基因的整合与表达 .98只新生鼠中鉴定出 2只首建鼠 ,定名为TgN(apoE4) 1QiL和TgN(apoE4) 2QiL .外源基因整合的拷贝数分别为 1和 2 .F1代杂合鼠的脑 ,肾脏 ,心脏和肝脏中均有人apoE4基因的表达 .血清脂质水平通过酶法检测 ,自发变换行为经Y迷宫试验检测 .转基因鼠的血清胆固醇和甘油三酯明显升高 ,自发变换行为受到损害 .结果表明 ,近交系转基因鼠过量表达人apoE4基因可导致血清脂质升高 ,并对其空间记忆能力造成损害 . 展开更多
关键词 apoe4 近交系转基因 高脂血症 自发变换行为损害
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人ApoE转基因小鼠与TGE_(7-2) TGE_(7-3)转基因鼠系的建立 被引量:1
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作者 江天 孙明增 +2 位作者 琦祖和 杜淼 李光三 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 1996年第2期65-70,共6页
用含小鼠金属硫蛋白(MT-1)基因启动子与突变的人ApoE7基因的6.0KbDNA片段作为目的基因制备转基因小鼠,利用显微注射法将目的基因导入441枚受精卵,移植于20只假孕鼠,其中15只受孕,共产仔鼠80只,经a-... 用含小鼠金属硫蛋白(MT-1)基因启动子与突变的人ApoE7基因的6.0KbDNA片段作为目的基因制备转基因小鼠,利用显微注射法将目的基因导入441枚受精卵,移植于20只假孕鼠,其中15只受孕,共产仔鼠80只,经a-32P斑点杂交与Southern杂交法鉴定出两只整合有人ApoE基因的转基因雌鼠,其拷贝数分别为2和5。将两只首建鼠(雌性Fo代)与正常雄鼠交配,建立F1代转基因鼠系TGE7-2和TGE7-3,为进一步从整体上研究ApoE在脂质代谢中的作用以及ApoE与动脉粥样硬化和Alzheimer’s病的关系创造条件。 展开更多
关键词 转基因小鼠 转基因 E7基因 正常 受孕 apoe基因 目的基因 雌性 DNA片段
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搜风祛痰法对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化不稳定斑块HO-1和TLR4表达的影响 被引量:5
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作者 魏伟超 宫丽鸿 安毅 《中国中医急症》 2014年第7期1218-1221,共4页
目的观察搜风祛痰中药复方稳斑汤对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化(AS)不稳定斑块动物模型的影响。方法 6~8周龄ApoE基因敲除小鼠制备AS不稳定斑块模型,分别给予阿托伐他汀以及不同剂量稳斑汤干预1个月,正常组采用生理盐水灌胃1个月。... 目的观察搜风祛痰中药复方稳斑汤对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化(AS)不稳定斑块动物模型的影响。方法 6~8周龄ApoE基因敲除小鼠制备AS不稳定斑块模型,分别给予阿托伐他汀以及不同剂量稳斑汤干预1个月,正常组采用生理盐水灌胃1个月。取小鼠主动脉组织HE染色进行病理学观察,并采用免疫组化和RT-PCR技术检测HO-1和TLR4的表达水平。结果各组小鼠腹主动脉组织中HO-1的表达水平治疗组明显高于对照组(P<0.01),各组小鼠腹主动脉组织中TLR4的表达水平治疗组明显低于对照组(P<0.01)。结论 Apo E基因敲除小鼠AS不稳定斑块的形成与炎症因子密切相关,搜风祛痰中药复方稳斑汤可能通过调节HO-1和TLR4的表达而干预AS斑块形成及破裂。 展开更多
关键词 痰风理论论治 apoe基因敲除小鼠 AS 不稳定斑块 HO-1 TLR4
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灵芝多糖对ApoE^(-/-)动脉粥样硬化小鼠TLR4/NF-κB信号通路的影响 被引量:13
5
作者 杨燕燕 谢金东 +4 位作者 周建华 俞春英 林玮 刘德强 王训立 《中国中医基础医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期56-59,67,共5页
目的:探讨GLPs对AS疾病TLR4信号通路调控机制的影响。方法:50只ApoE^(-/-)小鼠按随机数字表法分为模型组、GLPs低、中、高剂量组及辛伐他汀组,10只C57BL/6J小鼠作为正常组。高脂喂养12周建立AS模型,后4周各治疗组以高脂饮食结合药物方... 目的:探讨GLPs对AS疾病TLR4信号通路调控机制的影响。方法:50只ApoE^(-/-)小鼠按随机数字表法分为模型组、GLPs低、中、高剂量组及辛伐他汀组,10只C57BL/6J小鼠作为正常组。高脂喂养12周建立AS模型,后4周各治疗组以高脂饮食结合药物方式干预,分别采用RT-PCR和western blot方法检测各组小鼠主动脉TLR4、NF-κB、My D88、TRAF-6、TRAM及TRIF等mRNA和蛋白的相对表达。结果:与正常组比较,模型组TLR4、NF-κB、My D88及TRAF-6 mRNA及蛋白表达均显著升高,GLPs干预后各指标均呈下降趋势;与模型组比较,高剂量组TLR4 mRNA和蛋白比较差异有统计学意义,低、高剂量组NF-κB mRNA及中、高剂量组NF-κB蛋白差异有统计学意义,中、高剂量组My D88 mRNA和蛋白差异有统计学意义,同时低、中、高剂量组TRAF-6mRNA及蛋白均具极显著性差异。与正常组比较,模型组TRAM、TRIF mRNA及蛋白表达均明显升高,GLPs干预后有所降低,但差异无统计学意义。结论:推测GLPs对于AS的影响可能经由TLR4通路中抑制其下游My D88依赖性信号通路起作用。 展开更多
关键词 apoe基因敲除小鼠 动脉粥样硬化 Toll样受体4 髓样分化因子88 核因子-κB
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皮肤组织特异性表达hCTLA4-Ig转基因小鼠品系的建立 被引量:3
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作者 王勇 王峰超 +3 位作者 魏泓 倪勇 吴军 高翔 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第9期916-922,共7页
为研究皮肤特异性高效表达hCTLA4-Ig分子对移植皮肤存活及受体免疫功能的影响,充分实现hCTLA4-Ig分子在皮肤移植中的免疫调控功能,利用K14(角蛋白14)基因启动子,构建了hCTLA4-Ig分子皮肤组织特异性表达载体,并通过受精卵原核显微注射技... 为研究皮肤特异性高效表达hCTLA4-Ig分子对移植皮肤存活及受体免疫功能的影响,充分实现hCTLA4-Ig分子在皮肤移植中的免疫调控功能,利用K14(角蛋白14)基因启动子,构建了hCTLA4-Ig分子皮肤组织特异性表达载体,并通过受精卵原核显微注射技术制备了K14/hCTLA4-Ig转基因小鼠并建立了品系。通过RT-PCR和Northernblot分析表明,hCTLA4-Ig在转基因小鼠体内呈皮肤组织特异性高效表达;以GAPDH基因的表达量为内部参照分析表明,hCTLA4-Ig的表达水平在不同世代之间以及转基因个体的不同生命时相点之间保持相对恒定,说明皮肤组织特异性稳定表达hCTLA4-Ig的转基因小鼠品系已被建立。 展开更多
关键词 hCTLA4-Ig 转基因小鼠 皮肤 角蛋白14
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分泌型卷曲相关蛋白4在肌萎缩脊髓侧索硬化症转基因鼠脊髓中的表达变化 被引量:6
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作者 王珊珊 陈燕春 +2 位作者 管英俊 李晓琎 于丽 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期439-444,共6页
目的探讨分泌型卷曲相关蛋白4(sFRP4)在成年肌萎缩脊髓侧索硬化症(ALS)转基因模型鼠脊髓内的表达变化,及sFRP4在ALS发病中的作用。方法选取ALS转基因鼠和同窝野生型鼠各30只,分别于鼠95d、108d和122d取材,部分鼠经4%多聚甲醛心脏灌注固... 目的探讨分泌型卷曲相关蛋白4(sFRP4)在成年肌萎缩脊髓侧索硬化症(ALS)转基因模型鼠脊髓内的表达变化,及sFRP4在ALS发病中的作用。方法选取ALS转基因鼠和同窝野生型鼠各30只,分别于鼠95d、108d和122d取材,部分鼠经4%多聚甲醛心脏灌注固定,分离脊髓和制备冷冻切片,部分鼠分离脊髓,提取RNA和蛋白。分别应用免疫组织化学染色技术、RT-PCR和Western blotting检测sFRP4 mRNA和蛋白水平在不同时间点的变化情况。结果与同窝野生型鼠比较,ALS转基因鼠sFRP4 mRNA和蛋白表达在95d、108d和122d均升高(P<0.05)。免疫组织化学结果显示,sFRP4阳性细胞主要分布在脊髓灰质前角,白质轴突呈阳性反应,与同窝野生型鼠比较,ALS转基因鼠sFRP4阳性细胞明显增多。免疫荧光双标结果显示,sFRP4标记的阳性细胞共表达胶质纤维酸性蛋白和β-tubulinⅢ,ALS转基因鼠sFRP4/GFAP双阳性细胞增多。结论在ALS转基因鼠发病脊髓中sFRP4阳性细胞明显增多,sFRP4 mRNA和蛋白表达升高,表明sFRP4与肌萎缩脊髓侧索硬化症的发生密切相关。 展开更多
关键词 肌萎缩脊髓侧索硬化症 sFRP4 WNT信号通路 免疫组织化学 反转录.聚合酶链式反应 免疫印迹 转基因
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HH方治疗HBV转基因小鼠抗病毒作用及其对TLR3/TLR4的影响 被引量:3
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作者 张传涛 郭尹玲 +5 位作者 黄群 吴疆 刘业方 杨鸿 辜海英 张莉敏 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第23期3841-3844,共4页
目的:观察HH方治疗乙肝病毒(HBV)转基因小鼠抗HBV的疗效及其作用机制。方法:HBV转基因小鼠随机分4组,模型组小鼠给予同体积生理盐水,苦参素组小鼠给予同体积含0.15 g/(kg·d)苦参素混悬液,高、低剂量HH方组小鼠分别给予同体积含7、2... 目的:观察HH方治疗乙肝病毒(HBV)转基因小鼠抗HBV的疗效及其作用机制。方法:HBV转基因小鼠随机分4组,模型组小鼠给予同体积生理盐水,苦参素组小鼠给予同体积含0.15 g/(kg·d)苦参素混悬液,高、低剂量HH方组小鼠分别给予同体积含7、2 g/(kg·d)HH混悬液。5周后,ELISA法检测血清及肝组织乙型肝炎病毒表面抗原(HBs Ag),常规HE染色观察肝组织病理变化,定量PCR法检测血清中乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBVDNA)及肝组织中HBVDNA、Toll样受体(TLR)3/4 mRNA,Western blot法检测TLR3/4蛋白表达。结果 :高剂量HH方[7 g/(kg·d)]可以减轻肝细胞轻度脂肪变性、肝细胞轻度水肿及Kuffer细胞增生等病理改变,对肝组织炎细胞浸润未见明显缓解。高剂量HH方可以显著降低HBV转基因小鼠肝脏和血清中的HBs Ag、HBVDNA水平,差异具有统计学意义(P<0.05),与苦参素组比较差异无统计学意义(P>0.05)。高剂量HH方可以显著增强肝组织TLR3、TLR4的mRNA及蛋白表达,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:高剂量HH方有一定抗HBV作用,推测与增强TLR3、TLR4表达进而影响干扰素分泌有关。 展开更多
关键词 HH方 HBV转基因小鼠 抗病毒作用 TOLL样受体3 TOLL样受体4
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加味小柴胡汤对乙肝病毒转基因小鼠白介素-12、白介素-4、干扰素-γ mRNA表达的影响 被引量:6
9
作者 刘中景 王者令 +2 位作者 孙晓慧 柳盛 顾义海 《中西医结合肝病杂志》 CAS 2010年第5期289-290,共2页
目的:通过实验研究观察加味小柴胡汤对HBV转基因小鼠IL-12、IL-4、IFN-γmRNA表达的影响。方法:36只经筛选HBV DNA阳性的转基因小鼠随机分为3组,每组12只,中药组给予加味小柴胡汤水煎剂、西药组给予拉米夫定、空白对照组(简称盐水组)给... 目的:通过实验研究观察加味小柴胡汤对HBV转基因小鼠IL-12、IL-4、IFN-γmRNA表达的影响。方法:36只经筛选HBV DNA阳性的转基因小鼠随机分为3组,每组12只,中药组给予加味小柴胡汤水煎剂、西药组给予拉米夫定、空白对照组(简称盐水组)给予生理盐水,观察各组实验动物血清IL-12、IL-4和肝组织中IFN-γmR-NA活性的变化情况。结果:对IL-12、IL-4活性的影响,与盐水组和西药组比较,给药后中药组小鼠血清IL-12明显升高,而IL-4显著降低,差异有显著性意义(P<0.01,P<0.05);而对小鼠肝组织IFN-γmRNA的表达,中药组与盐水组和西药组比较,差异均有显著性意义(P<0.01)。结论:加味小柴胡汤有明显的调节和改善HBV转基因小鼠IL-12、IL-4、IFN-γmRNA活性的作用。 展开更多
关键词 加味小柴胡汤/药效学 乙肝病毒转基因小鼠 白细胞介素-12 白细胞介素-4 干扰素-Γ mRNA
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远志对双侧海马注射ApoE4致大鼠学习记忆障碍的影响 被引量:9
10
作者 李新毅 郭锋 +1 位作者 崔丽霞 穆俊霞 《山西中医学院学报》 2008年第2期20-21,共2页
目的:探讨远志对双侧海马注射apoE4致大鼠学习记忆障碍的影响。方法:24只大鼠随机分为对照组,apoE4组和远志组。采用腹腔注射D-半乳糖并联合使用apoE4双侧注射海马复制阿尔茨海默病(AD)模型。各组动物以定位航行试验、空间探索试验为学... 目的:探讨远志对双侧海马注射apoE4致大鼠学习记忆障碍的影响。方法:24只大鼠随机分为对照组,apoE4组和远志组。采用腹腔注射D-半乳糖并联合使用apoE4双侧注射海马复制阿尔茨海默病(AD)模型。各组动物以定位航行试验、空间探索试验为学习记忆能力评价指标。结果:ApoE4组和远志组较对照组逃避潜伏期明显延长,跨台次数明显减少(P<0.01);远志组与apoE4组比较,大鼠逃避潜伏期明显缩短、跨台次数明显增多(P<0.01)。结论:远志能改善腹腔注射D-半乳糖并联合使用apoE4双侧注射海马AD模型大鼠的学习记忆功能。 展开更多
关键词 远志 apoe4 阿尔茨海默病 学习记忆
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电针治疗转基因鼠类风湿性关节炎的HLA-DR_4β_1基因调控机制 被引量:3
11
作者 赵征宇 邓军卫 +3 位作者 陆长富 梁繁荣 刘雨星 黄迪君 《成都中医药大学学报》 2005年第2期29-32,共4页
目的以转基因鼠为研究对象,运用现代生物技术,从免疫学,遗传学等角度深入系统地探讨电针对类风湿性关节炎易感基因调控机制。方法采用人类HLA-DR4β1基因转基因小鼠,转基因阴性小鼠和非转基因小鼠胶原性关节炎为疾病模型,以电针为主要... 目的以转基因鼠为研究对象,运用现代生物技术,从免疫学,遗传学等角度深入系统地探讨电针对类风湿性关节炎易感基因调控机制。方法采用人类HLA-DR4β1基因转基因小鼠,转基因阴性小鼠和非转基因小鼠胶原性关节炎为疾病模型,以电针为主要治疗方法,将大于5周龄的小鼠随机分成电针治疗组、甲氨喋呤对照组和模型对照组,运用分子生物学、遗传学、免疫学等多种手段和技术,从动物细胞、分子水平,研究电针治疗RA的特点和环节,并阐明其作用机理。结果①电针可以抑制T淋巴细胞的活化;②电针在调控类风湿性关节炎易感基因的表达中有一定的作用。结论电针通过调控类风湿性关节炎易感基因的表达,影响MHCⅡ类分子的抗原递呈功能达到对CIA小鼠的治疗目的。 展开更多
关键词 电针 HLA-DR4β1基因 显微注射 转基因小鼠 基因表达 T细胞 抗原递呈
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Tet-on和Cre/loxP系统双重调控表达丙型肝炎病毒NS3/4A蛋白酶三转基因小鼠的建立 被引量:2
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作者 兰海云 孙梦宁 +9 位作者 马玉 赵亚 吕欣 杨敬 雷迎峰 姚敏 黄小军 张建敏 康健 尹文 《生物技术通讯》 CAS 2012年第3期342-346,共5页
目的:建立Tet-On调控系统和Cre/loxP基因剔除系统双重调控表达丙型肝炎病毒(HCV)NS3/4A丝氨酸蛋白酶三转基因小鼠。方法:选择适龄并经鉴定的在Tet-on系统调控下肝脏特异性表达Cre重组酶的双转基因小鼠Lap/LC-1与在Tet-on系统调控下肝脏... 目的:建立Tet-On调控系统和Cre/loxP基因剔除系统双重调控表达丙型肝炎病毒(HCV)NS3/4A丝氨酸蛋白酶三转基因小鼠。方法:选择适龄并经鉴定的在Tet-on系统调控下肝脏特异性表达Cre重组酶的双转基因小鼠Lap/LC-1与在Tet-on系统调控下肝脏特异性表达萤光素酶(Luc)的双转基因小鼠Lap/NS3/4A交配,子代小鼠经PCR检测、筛选基因组中NS3/4A、Lap、LC-1等3个转基因片段均阳性的小鼠。三阳性的NS3/4A/Lap/LC-1小鼠经多西环素(Dox)诱导1周后,以在体生物发光成像系统(BLI)检测报告基因Luc的表达,免疫组化检测小鼠体内Cre重组酶、HCV NS3/4A丝氨酸蛋白酶的表达状况。结果:NS3/4A/Lap/LC-1小鼠经Dox诱导后,BLI结果显示仅在小鼠肝脏部位有强烈的发光信号,表明这些小鼠肝细胞内报告基因Luc特异高效表达;免疫组化结果证实Cre重组酶、NS3/4A蛋白酶仅在经诱导后的小鼠肝细胞中特异性表达。结论:建立了Tet-On调控系统和Cre/loxP基因剔除系统双重调控下表达HCV NS3/4A丝氨酸蛋白酶的三转基因小鼠模型,为进一步研究HCV NS3/4A丝氨酸蛋白酶在HCV感染后与宿主相互作用的机制,以及抗NS3/4A丝氨酸蛋白酶特异性抑制剂的筛选奠定了基础。 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 NS3/4A丝氨酸蛋白酶 转基因小鼠
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自噬相关基因4B在肌萎缩侧索硬化症转基因鼠动物模型及细胞模型中的表达 被引量:1
13
作者 陈燕春 刘焕彩 +5 位作者 周风华 王巧真 丁昊宇 接琳琳 杜红梅 赵春艳 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期520-520,封2,共5页
目的:检测自噬相关基因(Atg) 4B在肌萎缩侧索硬化症(ALS)转基因鼠动物模型、神经母细胞瘤与脊髓杂交细胞系34(NSC-34)运动神经元细胞模型中的表达变化,探讨Atg4B调节的自噬与ALS发病的关系.方法:通过RT-PCR、免疫印迹和免疫组织化学检测... 目的:检测自噬相关基因(Atg) 4B在肌萎缩侧索硬化症(ALS)转基因鼠动物模型、神经母细胞瘤与脊髓杂交细胞系34(NSC-34)运动神经元细胞模型中的表达变化,探讨Atg4B调节的自噬与ALS发病的关系.方法:通过RT-PCR、免疫印迹和免疫组织化学检测Atg4B在ALS转基因鼠发病不同时间点脊髓中的表达变化;应用pEGFP-G93A-SOD1和pEGFP-wt-SOD1转染NSC-34细胞,通过RT-PCR、免疫印迹和免疫荧光显色检测转染后24、48 h和72 h Atg4B在细胞模型中的表达变化.结果:与野生型鼠相比较,ALS鼠脊髓中Atg4B mRNA及蛋白在发病早期变化不明显,发病中期和晚期均下调;与转染pEGFP-wt-SOD1的NSC-34细胞相比,转染pEGFP-G93 A-SOD1的NSC-34细胞在转染后24 h Atg4B mRNA及蛋白无明显变化,转染后48 h和72 h均下调.结论:自噬基因Atg4B表达下调与ALS发病密切相关. 展开更多
关键词 肌萎缩侧索硬化症 自噬 自噬相关基因4B 转基因 神经母细胞瘤与脊髓杂交细胞系-34
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人突变Ap0E4基因对转基因鼠血脂代谢的影响
14
作者 雷宇华 赵娟 +3 位作者 韩华 吕雨虹 王忠海 廖峥嵘 《河北医科大学学报》 CAS 2010年第8期893-895,共3页
目的探讨人突变载脂蛋白E4(apolipoprotein E4,ApoF4)基因表达对转基因鼠血脂代谢的影响。方法应用显微注射法建立人突变ApoE4基因的转基因鼠,分子杂交鉴定。酶法测定人突变ApoE在F1代小鼠染色体上的整合与在血中的表达。酶法测定小鼠... 目的探讨人突变载脂蛋白E4(apolipoprotein E4,ApoF4)基因表达对转基因鼠血脂代谢的影响。方法应用显微注射法建立人突变ApoE4基因的转基因鼠,分子杂交鉴定。酶法测定人突变ApoE在F1代小鼠染色体上的整合与在血中的表达。酶法测定小鼠血清三酰甘油(triglyceride,TG)和血清胆固醇(cholesterol,TC)水平。结果人突变ApoE4基因稳定地整和于F1代小鼠染色体上并高效表达于血清中。12月龄转基因鼠血脂代谢[血清TG水平(2.89±0.31)mmol/L,血清TC水平(3.02±0.14)mmol/L]与同龄对照组鼠[血清TG水平(2.05±0.12)mmol/L,血清TC水平(2.11±0.01)mmol/L]比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论人突变ApoE4基因的异常表达影响到了小鼠的血脂代谢。 展开更多
关键词 apoe4基因 小鼠 转基因 胆固醇
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IL-4T和IFNγR%转基因小鼠的遗传监测研究
15
作者 王胜 韦克 +2 位作者 赖国旗 何明忠 潘永全 《四川动物》 CSCD 2003年第2期118-120,共3页
引进了IL 4T和IFNγR %两个品系的转基因小鼠 ,在普通环境下饲养得到子代。采用PCR及Southern杂交方法对其进行了遗传监测 ,以检验转基因小鼠遗传特性 ,防止传代过程中基因的丢失。PCR方法可快速检测出小鼠的基因类型 ,但还有假阴性的... 引进了IL 4T和IFNγR %两个品系的转基因小鼠 ,在普通环境下饲养得到子代。采用PCR及Southern杂交方法对其进行了遗传监测 ,以检验转基因小鼠遗传特性 ,防止传代过程中基因的丢失。PCR方法可快速检测出小鼠的基因类型 ,但还有假阴性的结果出现。通过Southern杂交可对结果进行辅助检测 ,得到更确实的结果。 展开更多
关键词 IL-4T IFNγR% 转基因小鼠 遗传
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双转基因小鼠模型中microRNA-153对RTN4的表达调控
16
作者 梁春联 朱华 +5 位作者 黄澜 许艳峰 邓巍 马春梅 刘颖 秦川 《中国比较医学杂志》 CAS 2011年第5期32-36,83,共6页
目的探讨mir-153在阿尔茨海默病发病机制中的作用。方法通过microRNA芯片及Real-timePCR检测APPswe/PSΔE9双转基因小鼠脑内mir-153的表达;构建高表达mir-153的稳转细胞系,通过western-blot检测稳转细胞系内RTN4的蛋白表达;构建野生型... 目的探讨mir-153在阿尔茨海默病发病机制中的作用。方法通过microRNA芯片及Real-timePCR检测APPswe/PSΔE9双转基因小鼠脑内mir-153的表达;构建高表达mir-153的稳转细胞系,通过western-blot检测稳转细胞系内RTN4的蛋白表达;构建野生型及突变型RTN4的3’UTR荧光素酶报告载体,分别将其与mir-153表达载体或microRNA阴性对照载体共转染入293T细胞内,检测海肾荧光素酶的相对活性以验证mir-153对RTN4 mRNA的作用靶点。结果 microRNA芯片及Real-time PCR检测均证实3月龄APPswe/PSΔE9双转基因小鼠脑内mir-153的表达较同龄野生对照显著降低;在高表达mir-153的稳转细胞系内RTN4的蛋白水平明显降低;共转染野生型RTN4的3’UTR/mir-153表达载体可使海肾荧光素酶相对活性较共转染野生型RTN4的3’UTR/miRNA阴性对照质粒组显著降低(P<0.05),而共转染突变型RTN4的3’UTR/mir-153表达载体组则较之无明显差异。结论在3月龄APPswe/PSΔE9双转基因小鼠脑内存在mir-153的异常表达;mir-153可调控RTN4的蛋白表达;mir-153对RTN4的表达调控是通过结合RTN4 3’UTR 839-845碱基处的作用位点而实现的。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 转基因小鼠 MICRORNA Reticulon4
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脂肪细胞因子 CTRP4转基因鼠的构建与鉴定 被引量:2
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作者 那达翔 马壮 +8 位作者 罗阳 李琦 谭伟峰 王兰兰 张国英 尹昂 黄河 吴晓彤 王露 《中国比较医学杂志》 CAS 2014年第7期1-6,I0001,共7页
目的建立人CTRP4基因的转基因小鼠,为脂肪细胞因子CTRP4的体内功能研究奠定基础。方法首先构建人CTRP4的转基因小鼠线性化表达载体,再利用显微注射的方法将载体注射入小鼠受精卵,从而构建人CTRP4的首建鼠(Founder)并与野生型小鼠交配繁... 目的建立人CTRP4基因的转基因小鼠,为脂肪细胞因子CTRP4的体内功能研究奠定基础。方法首先构建人CTRP4的转基因小鼠线性化表达载体,再利用显微注射的方法将载体注射入小鼠受精卵,从而构建人CTRP4的首建鼠(Founder)并与野生型小鼠交配繁殖得到F1代阳性小鼠,再通过近亲繁殖与测交的方法,得到CTRP4转基因纯合子小鼠,并通过PCR和western blot的方法对纯合子小鼠进行鉴定。结果得到人CTRP4转基因小鼠纯合子小鼠两个品系,western blot鉴定该转基因小鼠心脏,肝脏,脑,肾脏等多种组织中均呈现CTRP4高表达。结论成功构建了人CTRP4转基因小鼠纯合子小鼠。 展开更多
关键词 CTRP4 转基因 脂肪细胞因子
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脑内过表达胰岛素样生长因子结合蛋白-4转基因小鼠的建立 被引量:2
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作者 勾荣彬 江小华 +3 位作者 巨荣凯 牛含虚 段德义 徐群渊 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2015年第2期262-269,共8页
目的构建脑内过表达胰岛素样生长因子结合蛋白-4(insulin-like growth factor binding protein-4,IGFBP-4)的转基因小鼠,以研究IGFBP-4对脑发育的作用。方法构建神经元特异性启动子血小板源性生长因子β链(platelet derived growth fac... 目的构建脑内过表达胰岛素样生长因子结合蛋白-4(insulin-like growth factor binding protein-4,IGFBP-4)的转基因小鼠,以研究IGFBP-4对脑发育的作用。方法构建神经元特异性启动子血小板源性生长因子β链(platelet derived growth factorβchain,PDGF-β)驱动的IGFBP-4表达载体,通过显微注射构建转基因小鼠。用PCR法检测小鼠子代基因组IGFBP-4 c DNA的整合情况,Western blotting法和免疫组织化学法观察IGFBP-4在脑内的表达丰度和分布,比较野生型和转基因小鼠的体质量和脑质量的改变。结果外源IGFBP-4 c DNA稳定整合于转基因小鼠基因组,IGFBP-4蛋白在成年小鼠脑内表达水平升高了267%,脑区IGFBP-4蛋白分布符合PDGF-β启动子驱动的蛋白表达特征,与野生型小鼠IGFBP-4部位相似。转基因小鼠体质量未见明显改变,整脑质量增加了8.4%(P<0.05),其中脑干增加了16.5%(P<0.05),其余脑区改变不明显。结论外源IGFBP-4转基因在小鼠基因组中得到整合并能稳定遗传和表达,并影响了部分脑区的发育,为脑发育研究提供了有价值的动物模型。 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子结合蛋白-4 转基因小鼠 神经发育
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HBV转基因小鼠与正常小鼠CD4^+ CD25^+调节性T细胞数量和功能的比较 被引量:1
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作者 曾波 孙航 +1 位作者 刘杞 陶鹏 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第14期1499-1503,共5页
目的比较HBV转基因小鼠和正常同种小鼠CD4+ CD25+调节性T细胞数量和功能的差异及其意义。方法用流式细胞术对18只HBV转基因小鼠和18只正常同种小鼠外周血CD4+ CD25+调节性T细胞的频率进行分析;磁珠分选小鼠脾CD4+ CD25- T细胞和CD4+ CD2... 目的比较HBV转基因小鼠和正常同种小鼠CD4+ CD25+调节性T细胞数量和功能的差异及其意义。方法用流式细胞术对18只HBV转基因小鼠和18只正常同种小鼠外周血CD4+ CD25+调节性T细胞的频率进行分析;磁珠分选小鼠脾CD4+ CD25- T细胞和CD4+ CD25+ T细胞,分为HBsAg刺激组和非HBsAg刺激组体外单独和混合培养,分别以流式细胞术、淋巴细胞增殖实验和ELISA检测分泌TGF-β的CD4+ CD25+ T细胞频率,评价CD4+ CD25+调节性T细胞对CD4+ CD25- T细胞增殖的抑制作用,以及诱生的细胞因子IFN-γ、IL-6水平;免疫组化检测肝脏叉状头/翅膀状螺旋转录因子(Forkhead/winged helix transcription factor,Foxp3)蛋白的表达水平。结果与正常同种鼠比较,HBV转基因小鼠外周血CD4+ CD25+调节性T细胞数量无明显差异(P>0.05),肝脏淋巴细胞Foxp3表达也无明显差异(P>0.05)。HBsAg刺激组,HBV转基因小鼠CD4+ CD25- T细胞的增殖能力、诱生的细胞因子IFN-γ、IL-6水平显著低于正常同种鼠(P<0.01);非HBsAg刺激组,HBV转基因小鼠分泌TGF-β的CD4+ CD25+ T细胞数量、CD4+ CD25- T细胞的增殖能力、诱生的细胞因子IFN-γ、IL-6水平与正常同种鼠相比则无明显差异(P>0.05);无论在HBsAg刺激组还是非HBsAg刺激组,两组小鼠的CD4+ CD25- T细胞单独培养时CD4+ CD25- T细胞增殖能力、诱生的细胞因子IFN-γ、IL-6的水平均显著高于混合培养(P<0.01)。结论与正常同种鼠比较,HBV转基因小鼠CD4+ CD25+调节性T细胞数量和功能无明显差异,但在T细胞水平对HBV存在特异性免疫耐受。CD4+ CD25+调节性T细胞可非特异地抑制自身活化的CD4+ T细胞。 展开更多
关键词 HBV转基因小鼠 CD4^+ CD25^+调节性T细胞 慢性乙型肝炎 免疫耐受
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胰岛素样生长因子结合蛋白4转基因小鼠脑内细胞分化的研究 被引量:3
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作者 张贺 勾荣彬 +3 位作者 牛含虚 孙晓红 徐群渊 段德义 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2018年第6期910-916,共7页
目的研究神经元特异性启动子血小板源性生长因子-β(platelet derived growth factor-β,PDGF-β)介导的胰岛素样生长因子结合蛋白4(insulin-like growth factor binding protein 4,IGFBP4)转基因小鼠脑内神经元和神经胶质细胞分化情况... 目的研究神经元特异性启动子血小板源性生长因子-β(platelet derived growth factor-β,PDGF-β)介导的胰岛素样生长因子结合蛋白4(insulin-like growth factor binding protein 4,IGFBP4)转基因小鼠脑内神经元和神经胶质细胞分化情况。方法PCR扩增并测序鉴定PDGF-β启动子和IGFBP4 c DNA表达框的整合,Isotropic Fractionator细胞计数法分析海马少突胶质前体细胞比例,Western blotting法分析生后28 d小鼠海马等部位神经元和神经胶质细胞的分化、胰岛素样生长因子-1(insulin-like factor-1,IGF-1)受体通路激活以及细胞存活相关分子表达,Rotarod实验观察小鼠运动能力。结果 IGFBP4 c DNA稳定整合于小鼠基因组,转基因小鼠海马少突胶质前体细胞数目和成熟细胞髓磷脂碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)均明显增多,神经元和星形胶质细胞标志物Neu N和胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)表达改变不明显; Erk1,2和Akt磷酸化升高,p38的激活不明显; Caspase-3表达下调,β-catenin和Bcl-2表达无明显改变,12月龄小鼠Rotarod运动能力明显增强,其小脑和皮质Neu N表达增多。结论神经元过表达IGFBP4促进小鼠脑少突胶质细胞和神经元的分化。 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子结合蛋白-4 神经分化 胰岛素样生长因子-Ⅰ型受体信号通路 转基因小鼠
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